沃特曼Grade 2V定性滤纸320mm直径1202-320

沃特曼Grade 2V定性滤纸320mm直径

简要描述:

沃特曼Grade 2V定性滤纸320mm直径,Grade 2V:8µm广泛用于多种目的的过滤。非常良好的颗粒保留、过滤速度及载量。平整型号为Grade 2

沃特曼Grade 2V定性滤纸320mm直径 1202-320

GE Whatman沃特曼折叠定性滤纸Grade 2V折叠滤纸

预折叠的Whatman定性滤纸为使用提供了方便,节省了时间,相对普通平整滤纸,它的优点是:

·对于重复性或者多重分析,预折叠滤纸节省了折叠成合适形状的时间
·由于更多表面的暴露,可以减少整个过滤时间。一般,过滤速度的下降是由于颗粒堆积产生。
·更多过滤面积是的整体载量也有所上升
·折叠后,自我支撑能力的上升,减少同漏斗接触有利于维持流速
·预折叠并不会显著影响技术参数,数值同相应的平整滤纸一样。

Grade 2V:8µm
广泛用于多种目的的过滤。非常良好的颗粒保留、过滤速度及载量。平整型号为Grade 2

沃特曼Grade 2V定性滤纸320mm直径 1202-320

沃特曼Grade 2V定性滤纸320mm直径1202-320

WHATMAN 2V折叠滤纸1202-1251202-125

WHATMAN 2V折叠滤纸1202-125

简要描述:

WHATMAN 2V折叠滤纸1202-125Grade 2V折叠型定性滤纸 (预折叠)对于重复性或者多重分析,预折叠滤纸节省了折叠成适合形状的时间。由于更多表面的暴露,可以减少整个过滤时间。一般,过滤速度的下降是由于颗粒堆积而产生。更多过滤面积使得整体载量也有所上升。折叠后,自我支撑能力的上升,减少同漏斗接触有利于维持流速。预折叠并不会显著影响技术参数,数值同相应的平整滤纸。

WHATMAN 2V折叠滤纸1202-125

Grade 2V折叠型定性滤纸 (预折叠)

对于重复性或者多重分析,预折叠滤纸节省了折叠成适合形状的时间。
由于更多表面的暴露,可以减少整个过滤时间。一般,过滤速度的下降是由于颗粒堆积而产生。
更多过滤面积使得整体载量也有所上升。
折叠后,自我支撑能力的上升,减少同漏斗接触有利于维持流速。
预折叠并不会显著影响技术参数,数值同相应的平整滤纸。
Whatman定性滤纸为使用方便提供预折叠滤纸,节省了时间,其相对普通平整滤纸具有很多优点。
WHATMAN 2V折叠滤纸1202-125Grade 2V: 8μm

广泛用于多种目的的过滤。具有非常良好的颗粒保留能力、过滤速度及载量。平整型号为Grade 2

 

产品详情

 

整包数量

100

等级

Grade 2V 1)

等级类型

折叠型(预折叠)

液体中zui大颗粒保留

8μm 2)

常规厚度

190μm

基本重量

103 g/m2

过滤速度(Herzberg)

240 s

材质

纤维素

zui低α-纤维素含量

0.98

属性特点

中等流速

1)所示数据基于Whatman所示数据基于Whatman历史记录。

2)颗粒保留率为98%

 

                                                                                         

 

 

Grade 2V定性滤纸规格详情

 

产品名称

货号

整包数量

尺寸

Grade 2V定性滤纸,圆片,125 mm

1202-125

100

125mm

Grade 2V定性滤纸,圆片,150 mm

1202-150

100

150 mm

Grade 2V定性滤纸,圆片,185 mm

1202-185

100

185mm

Grade 2V定性滤纸,圆片,240 mm

1202-240

100

240mm

Grade 2V定性滤纸,圆片,270 mm

1202-270

100

270mm

Grade 2V定性滤纸,圆片,320 mm

1202-320

100

320mm

Grade 2V定性滤纸,圆片,385 mm

1202-385

100

385mm

Grade 2V定性滤纸,圆片,400 mm

1202-400

100

400mm

Grade 2V定性滤纸,圆片,500 mm

1202-550

100

500mm

 

TaqI-v2 货 号 R0149L NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 限制性内切酶 – 限制性内切酶

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#R0149L
20,000 units
2,899.00

#R0149M
(高浓度5X)20,000 units
2,899.00

#R0149S
4,000 units
699.00

#R0149T
(高浓度5X)4,000 units
699.00

#R0149V
2,000 units
369.00

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识别位点

TaqI-v2                    货   号                  R0149L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 50%
NEBuffer 2.1: 75%
NEBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,65℃。
热失活:80℃ 20 分钟。

浓度

20,000 和 100,000 units/ml。

37℃ 时活性

10%。

甲基化敏感性

dam 甲基化敏感。

16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS酶试剂盒Takara


16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R161A 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns ¥6,508 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS
Takara R161B (A × 2) 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 50 Rxns × 2 ¥12,517 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS 16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS
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■ 制品内容 (Code No.: R161A)(50次量)
2×Gflex PCR Buffer (Mg2+, dNTP plus) 1.25 ml
Tks Gflex DNA Polymerase(1.25 units/μl) 62.5 U(50μl)
16S V3-V4 Primer Mix(10×) 125 μl
H2O 1 ml
 
 
 
■ 制品说明
本制品是使用Illumina公司MiSeq对细菌丛16S rRNA进行解析时使用的PCR扩增试剂盒。以细菌16S rRNA基因的V3-V4区域为对象,使用对多样序列能有效扩增的PCR酶Tks Gflex DNA Polymerase进行扩增。
引物是采用设计在常用的高效扩增区域(V3-V4)上的341F、806R(见图1),在引物的5’端连有Illumina MiSeq用的overhang序列。使用本试剂盒扩增得到PCR产物后,利用Nextera XT Index Kit (Illumina公司)制备MiSeq用文库。Nextera XT Index Kit中的引物能够在待测文库的两端接入测序用adaptor和用于区分各个被检测样品的Index序列(见图2)。
16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS
 
16S (V3-V4) Metagenomic Library Construction Kit for NGS
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒以外需要准备的其他试剂、仪器等(主要用品)
· 核酸提取Kit
【粪便样品】
NucleoSpin DNA Stool (Code No. 740472.10/.50)等
【土壤样品】
NucleoSpin Soil (Code No. 740780.10/.50/.250)等
· PCR产物的纯化
Agencourt AMPure XP(Beckman Coulter公司,Code No. A63880/A63881/A63882)
0.2 ml磁力架:Magnetic Separator-PCR Strip(Code No. 635011)等
新配的80% 乙醇
溶出液(10 mM Tris-HCl, pH8.5)
· 测序adaptor与Index序列的添加
Nextera XT Index Kit(Illumina Code No. FC-131-1001/FC-131-1002)
Nextera XT Index Kit v2 set A-D(Illumina Code No. FC-131-2001~2004)
· PCR仪
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Touch(Code No. TP350)
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient(Code No. TP600)等
· 凝胶电泳装置
Mupid-2plus(Code No. M-2P)
Mupid-exU(Code No. EXU-1)等
· 凝胶
Agarose L03「TAKARA」(Code No. 5003/5003B)
PrimeGel Agarose PCR-Sieve(Code No. 5810A)等
· 微量高速离心机
· 微量移液器及Tip
 
 
 

页面更新:2020-04-08 13:26:38

BtsI-v2 货 号 R0667L NEB酶试剂 New England Biolabs

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2,500 units
3,389.00

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500 units
839.00

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BtsI-v2                    货   号                  R0667L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

在不同反应缓冲液的活性

NEBuffer 1.1: 100%
NEBuffer 2.1: 100%
NEBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%

特性

CutSmart、重组酶、省时酶。

反应条件

CutSmart 缓冲液,55℃。

浓度

10,000 units/ml。

37℃ 时活性

75%。

甲基化敏感性

dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

如下条件可能出现星号活性:延时酶切、高酶浓度或甘油浓度 > 5%。

AleI-v2 货 号 R0685L NEB酶试剂 New England Biolabs

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货 号
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#R0685L
2500 units
3,499.00

#R0685S
500 units
869.00

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识别位点

AleI-v2                    货   号                  R0685L

  • isoschizomers     |
  • compatible ends     | 
  • single letter code

反应条件

 CutSmart 缓冲液,37℃。

热失活:65℃ 20 分钟。
 

浓度

 10,000 units/ml

甲基化敏感性

 CpG 重叠后部分阻断

BsmBI-v2 货 号 R0739L NEB酶试剂 New England Biolabs

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#R0739L
1,000 units
3,629.00

#R0739S
200 units
839.00

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BsmBI-v2                     货   号                  R0739L

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  • compatible ends     | 
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通知

 请注意:该酶是BsmBI(R0580)的升级替代产品。

描述

 BsmBI-v2(R0739) 是一款 IIS 型限制性内切酶,其为 Esp3I 的同裂酶。BsmBI-v2 为 BsmBI(R0580)的升级替代产品,该酶被改造以在Golden Gate组装(无缝克隆)实验中具有更佳性能。NEB 使用 “v2”或“HF”来命名人工改造过的酶。

特性

省时酶,5-15分钟完成酶切

应用于 Golden Gate 组装
IIS 型内切酶,识别非对称序列,在识别序列之外切割 DNA
随酶提供紫色凝胶上样染料(NEB #B7024)
 

浓度

 10,000 units/ml。

在不同反应液中的活性

CutSmart® Buffer: 25%

NEBuffer™ 1.1: <10%
NEBuffer™ 2.1: 50%
NEBuffer™ 3.1: 100%
 

反应条件

1X  NEBuffer™ 3.1 缓冲液,55°C。

热失活:80°C,20 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 50 µl 反应体系中,55℃ 温育 1 小时,消化 1 µg λDNA 所需的酶量。

甲基化敏感性

 对哺乳动物 CpG 甲基化敏感。

注意事项

 37℃ 时活性:10%

PsiI-v2 货 号 R0744L NEB酶试剂 New England Biolabs

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400 units
1,459.00

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PsiI-v2                    货   号                  R0744L

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描述

 PsiI-v2 PsiI 的升级替代产品

在不同反应液中的活性

CutSmart Buffer: 100%

NEBuffer 1.1: 25%

NEBuffer 2.1: 50%

NEBuffer 3.1: 10%

特性

 CutSmart、重组酶。

反应条件

 1X  CutSmart 缓冲液,37℃。

热失活:65 20 分钟。

浓度

 10000 units/ml

甲基化敏感性

  damdcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

注意事项

 甘油浓度 > 5% 条件下可能出现星号活性。

基因敲入用长单链DNA制备 v2酶试剂盒Takara


基因敲入用长单链DNA制备 v2
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632666 Guide-it Long ssDNA Production System v2 50 Rxns ¥6,647 基因敲入用长单链DNA制备 v2 基因敲入用长单链DNA制备 v2 基因敲入用长单链DNA制备 v2
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Guide-it Long ssDNA Production System v2可以让您根据需求,制备长至5,000 nt的长单链DNA(ssDNA),作为修复模板用于多种基因组编辑技术的基因敲入实验。该试剂盒提供了一种简单且快速的方法,通过选择性消化正义链(sense strand)或者反义链(antisense strand),可以将任何序列的dsDNA PCR产物转化成为ssDNA。每个试剂盒可制备50条ssDNA模板。
尽管在利用同源定向修复(HDR)进行准确基因组编辑的应用中,单链DNA(ssDNA)修复模板展示出了优于双链DNA(dsDNA)模板的众多优势(Roth et al., 2018)。但由于制备难度和制备成本的原因,长单链DNA(long ssDNA)的应用受到了限制。Guide-it Long ssDNA Production System v2提供了一种高效经济的方法,可以根据自己的实验需求制备ssDNA,让所有研究人员都可以体验ssDNA模板的优势。
 
与dsDNA相比,使用ssDNA作为模板的优势:
· 显著减少了随机整合和脱靶整合,从而提高了基因编辑效率,降低了出现实验伪像的可能性
· 细胞毒性更低,让您收获到更多的编辑细胞
· 由于来自非整合模板的转基因表达微乎其微,因此更容易识别出正确编辑克隆
 
与原版本产品Guide-it Long ssDNA Production System(Code No. 632644)相比,优化了反应体系,进一步提高了链消化酶(Strandase)处理效率,即便是以往制备困难具有挑战性的dsDNA模板,也可以高效制备ssDNA。
 
■ 产品特点
· 根据需求制备500–5,000 nt ssDNA供体模板,用于基因敲入实验
· 操作流程简单快速,只需几个小时即可完成
· 与dsDNA模板相比,脱靶整合显著降低
· 细胞毒性更低,编辑后的细胞群细胞活力更高
 
■ 实验操作流程图
基因敲入用长单链DNA制备 v2
图1. 用于基因敲入实验的长单链DNA(long ssDNA)供体模板制备流程。首先,使用克隆、融合PCR或者其它方法制备dsDNA模板,dsDNA模板除了包含目的基因之外,还需要包含长度为300-600 bp的同源臂,该同源臂与目的插入位点左右两侧的相邻序列相同源。接着,只在一端使用磷酸化引物进行PCR扩增,制备两种不同的dsDNA PCR产物(分别作为正义链ssDNA和反义链ssDNA制备模板)。添加链消化酶A(Strandase Mix A),开始消化降解正义链或反义链。由于链消化酶A只消化降解5’端被磷酸化的DNA链,所以可以有选择性地降解正义链或反义链。然后,添加链消化酶B(Strandase Mix B)完成消化反应获得ssDNA。最后,纯化反应液,准备适用于后续基因敲入实验的ssDNA供体。请注意,如果正向引物被磷酸化,则生成的ssDNA将是反义链;反之,如果反向引物被磷酸化,最终产物将是正义链。建议制备正义链和反义链两种ssDNA,分别进行基因敲入实验。
 
■ 实验例
基因敲入用长单链DNA制备 v2
图2. Guide-it Long ssDNA Production System v2提升了挑战性模板的处理能力和长至5,000 nt单链DNA的制备能力。Guide-it Long ssDNA Production System v2可成功制备长度为500 nt至5,000 nt的ssDNA。凝胶图显示了不同长度的dsDNA底物(泳道1),经过酶消化和纯化后相对应的正义(SS)和反义(AS)ssDNA产物(泳道2)。每个ssDNA HDR模板均设计为靶向CCR5基因。
 
基因敲入用长单链DNA制备 v2
图3. Guide-it Long ssDNA Production System v2优化了ssDNA制备效率,可更有效处理具有挑战性的dsDNA模板。凝胶图显示了几种HDR模板的dsDNA起始材料(Lane 1)和正义(SS)或反义(AS)ssDNA产物,这些ssDNA分别使用了Guide-it Long ssDNA Production System原版本产品(v1)或升级版本产品(v2)进行制备( Lane 2和Lane 3)。对于v1 Guide-it试剂盒,本实验例所包含的dsDNA模板,已被鉴定为具有挑战性的ssDNA制备底物,很难制备出高纯度ssDNA。以溴化乙锭为染色剂,采用琼脂糖凝胶电泳法分析dsDNA和ssDNA。ssDNA产物的分子量要比相应dsDNA底物的分子量小。在所有情况下,Guide-it Long ssDNA Production System v2制备的ssDNA条带比v1版本更清晰,表明消化更完全、更均匀。
 
■ 产品组份
Guide-it Long ssDNA Production System v2(Code No. 632666)
· Guide-it Long ssDNA Strandase Kit v2(Code No. 632667)*
  PrimeSTAR Max Premix (2X) 625 μl × 4
  Strandase Mix A 250 μl
  Strandase A/B Buffer (10X) 250 μl
  Strandase Mix B 50 μl
  Digestion Enhancer (5X) 500 μl
  RNase Free Water 1 ml × 5
  2-kb Control Template (2 ng/μl) 50 μl
  Control Primer Mix (16 μM) 50 μl
· NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up kit (Code No. 740609.50) 50次 × 2
· Buffer NTC(Code No. 740654.100) 125 ml
 
* 本产品不单独出售。
 
■ 保存条件
Guide-it Long ssDNA Strandase Kit v2 (Code No. 632667) -20℃
NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up (Code No. 740690.50) 室温
Buffer NTC(Code No. 740654.100) 室温
 
■ 关联资料
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基因敲入用长单链DNA制备 v2
 
 
 
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Western BLoT Rapid Detect v2.0酶试剂盒Takara


Western BLoT Rapid Detect v2.0
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara T7122A Western BLoT Rapid Detect v2.0 50 Rxns ¥4,243 Western BLoT Rapid Detect v2.0 Western BLoT Rapid Detect v2.0 Western BLoT Rapid Detect v2.0
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■ 制品内容 Western BLoT Rapid Detect v2.0
1.IgG Detector Solution v2 (HRP labeled) 250 μl
2.10×Dilution Buffer v2 60 ml
3.Enhancer for Mouse IgG v2 250 μl
4.Marker Detection Reagent v2 50 μl
 
■ 制品说明
本制品是以HRP-labeled IgG Detector替代标记的二抗, 用于Western印迹实验中检测一抗。本制品的主要组份是IgG Detector,一个粒子表面固定约100个蛋白分子, 能与抗体的Fc片断相结合,并已标记上了约50个HRP分子。本制品具有快速、灵敏度高、信号较强、能同时检测多种一抗的特点。另外,试剂盒中自带的Dilution Buffer含有封闭组份,具有使用方便和灵敏度高的优点。
本制品与Western BLot HRP Substrate Series产品(化学发光底物)配套使用,可高灵敏度和快速地进行Western印迹检测。
 
■ 保存
-20℃
注意 : IgG Detector Solution v2 (HRP labeled)请一直在-20℃保存,使用前再取出,使用完后立即放回-20℃。不要在4℃或室温条件下保存。
 
■ 关联资料
Western Blotting实验操作指南:
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Western BLoT Rapid Detect v2.0
 
 

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SMART-Seq v4 3’DE Kit酶试剂盒Takara


SMART-Seq v4 3’DE Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns ¥48,565 SMART-Seq v4 3’DE Kit SMART-Seq v4 3’DE Kit SMART-Seq v4 3’DE Kit
Clontech 635041 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 192 Rxns ¥90,089 SMART-Seq v4 3’DE Kit SMART-Seq v4 3’DE Kit SMART-Seq v4 3’DE Kit
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SMART-Seq v4 3’DE Kit—简便的高性能单细胞差异表达分析
· 升级的SMART技术—带有LNA修饰的SMART-Seq v4 oligo 加升级的配方带来更好的性能
   (灵敏度高,更好重复性,更多的GC-rich基因)
· 末端捕获流程—大部分reads集中于3’端,同时维持出色的灵敏度,缩减了差异表达分析需要
   的reads数
· 高达12个样品pool—内嵌的indexes作为细胞barcode,可以实现在每个测序lane中高达12个样品
   的pool,进一步缩短时间,降低成本
 
单细胞转录组研究对于研究细胞群内不同单细胞表达情况非常重要。Takara Clontech 研发了单细胞mRNA转录本末端捕获技术,该技术侧重于3’端的末端捕获,使您可以用更少的测序reads获得高品质测序数据。本试剂同样采用了领先的SMART-Seq v4 技术,结合了SMART (Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template) 技术和LNA (Locked Nucleic Acid) 技术。
本试剂除了侧重于mRNA转录本3’端外,还包含了内嵌的indexes作为Read2的细胞barcode,可以实现在每个测序lane中高达12个样品的pool,进一步缩减了时间和研究成本。本试剂可以1–10.5 μl体系起始,依赖于Illumina Nextera® XT DNA Library Preparation Kit。本试剂设计并经验证可以用于以下测序平台的cDNA文库和测序文库制备:HiSeq®,NextSeq®,MiSeq®和MiniSeq®
 
SMART-Seq v4 3’DE Kit
图1. 末端捕获方法简介
 
SMART-Seq v4 3’DE Kit
表1. K562单细胞pool文库主要测序数据
 
SMART-Seq v4 3’DE Kit
图2. 从K562单细胞中检测到的基因数
 
Technote:
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SMART-Seq v4 3’DE Kit
 
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VorTemp56摇床 /VorTemp 1550™摇床 美国Labnet 货号:S2056A-230V/S2050-230V

名称:VorTemp56摇床 /VorTemp 1550™摇床

品牌:美国Labnet

订货号:S2056A-230V/S2050-230V

VorTemp56摇床 /VorTemp 1550™摇床                                                        美国Labnet                                                        货号:S2056A-230V/S2050-230V

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产品介绍

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特为同时加热和混合小剂量样品而设计, VorTemp 56有适用微量管(56×1.5ml)和微量板两种可互换的托架。VorTemp 1550 也有两种锥形管托盘(8×50ml18×15ml)。

    可调温度范围广,可在多方面的运用,包括管和细菌培养板。机械对流能使环境温度保持稳定。可在冷藏室和培养箱内使用。摇动速度和加速率可调整。有三个不同加速选择,可保护易碎样品。 

    微处理器控制所有的参数,包括温度和计时。有自测功能,当检测到温度和摇动速度有误时,会提示错误。加热及摇动只受被设定的参数控制,负荷量或电压不影响其运行。即使在高速摇动期也能保持稳定。保温且噪音小。

l         可在培养样品时振荡

l         托盘可换,适用于微量管和板

l         较宽的温度和速度范围

l         智能控制,带数字LCD显示

 

规格参数                VorTemp 56                           VorTemp 1550                           

温度范围:             5 < ?xml:namespace prefix = "st1" />99                      +5 99

温度精度:             ±0.5                              ±0.5

转速:                     200-1,300rpm                      200-900rpm

定时:                     0-99min                             0-99min

转动方式/轨道尺寸:往复,3mm                往复,3mm

容积:56×1.5/2.0ml4个标准或2个深孔板       18*15mL8*50mL

重量:                       11kg                                    12kg

尺寸 (W x D x H)     23x 31x 23 cm                  26x 31x 31 cm

电源:                        230V/50Hz                      230V/50Hz

 

订货信息

货号                  说                                               

S2050-230V               美国Labnet VorTemp 1550TM气浴摇床  

S2056A-230V               美国Labnet  VorTemp 56TM气浴摇床 

S2056-R                   试管托盘

C1205                       0.5/0.6ml适配器,一包6

C1206                       0.4ml适配器,一包6

C1222                      0.2ml适配器,一包6

VorTemp56摇床 /VorTemp 1550™摇床                                                        美国Labnet                                                        货号:S2056A-230V/S2050-230VVorTemp56摇床 /VorTemp 1550™摇床                                                        美国Labnet                                                        货号:S2056A-230V/S2050-230V

V8蛋白酶

V8蛋白酶
V8 Protease

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V8蛋白酶V8蛋白酶



别名:Endoproteinase Glu C,Staphylococcal Protease Protease V8

CAS NO:66676-43-5

EC NO:3.4.21.19

分子量:约27000

外观:白色的结晶或结晶性粉末

 


摘要

(蛋白质工程学试剂)(氨基酸序列分析试剂)(序列分析酶)

在温和条件下进行蛋白多肽链的切断,不会引起氨基酸残基侧链的修饰(氧化、卤化、脱酰胺等)。而且,被修饰残基(糖链、类脂体、磷酸、硫酸等的结合部位)的肽一般以完整形态被回收,而且具有良好的回收率。如果采用同样的消化条件可以实现高再现性的分段。使用底物特异性高的酶进行蛋白质的结构分析,可预测氨基酸组成的大体片段数和平均大小,并且重要的是可以避免由于部分切断(非特异性切断),导致分离的复杂化。

本品由Drapeau系列的Staphylococcus aureus(V8菌株)分离而成,是特异性切断谷酰胺产的羧基侧链的酶。分别切断磷酸系列缓冲液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基侧链、氨系列缓冲液中包含谷氨酸羧基侧链的肽结合酯结合。因为其高底物特异性,本品被用于各种蛋白质序列分析时的肽分段。


特异性


切断氨缓冲液中包含谷氨酸羧基侧链的肽结合和酯结合。切断磷酸缓冲液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基侧链的肽结合和酯结合。 

活性:20units/mg以上

单位的定义:以2-Phe-Leu-Glu-4-NA为底物,在pH7.8,25℃情况下,1分钟生产1μmol 4-硝基苯胺所需酶的量为1unit。

反应:特异性切断谷氨酸的羧基侧链。

 

使用方法


仅切断谷氨酸羧基

在0.01~0.1mol/L碳酸氢铵(pH7.8)或者在0.01~0.1mol/L醋酸铵(pH4.0)中,酵素:底物(mol/mol)=1:30~100,在30~37℃情况下,分解2~24小时。

同时切断天冬氨酸羧基

在0.01~0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.8)中,以同样条件分解。


用途:各种蛋白质的序列分析的肽分段。

pH情况:

最佳pH:在pH3.5~9.5范围有蛋白酶活性。pH4.0及pH7.8时,活性极大(血红蛋白基质)。

抑制情况:主要抑制剂:DFP

 

使用上应注意


稳定性

pH值为4~10时,物质稳定。冷冻干燥或冷冻,保存时间较长。在0.2%的SDS中,具有100%活性:在4mol/L尿素中,具有50%活性。

V8蛋白酶

164-13982说明书

参考文献

[1]Drapeau, G. R., Boily, Y. and Houmard, J.?J. Biol. Chem., 247, 6720 (1972)

[2]Drapeau, G. R.?Methods in Enzymology, 47, 189 (1977)

[3]Houmard, J. et al.Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 69, 3506 (1972)

[4]日本生化学会编:续生化学讲座2,蛋白质化学,上,p268(东京化学同仁)

[5]日本生化学会编:生化学,57,472(1985)

[6]Austen, B. M. and Smith, E. L.Biochem. Biophys. Res. Commun., 72, 411 (1976)

[7]Hitz, H., Schafer, D. and Wittmann-Liebold, B.?Eur. J. Biochem., 75, 497 (1977)

[8]L'Italien, J. J. and Laursen, R. J.J. Biol. Chem., 256, 8092 (1981)

[9]Emmens, M., Welling, G. W. and Beintema, J. J.Biochem. J., 157, 317 (1976)

[10]Ovchinnikov, Yu. A., Lipkin, V. M., Modyanov, N. N., Chertov, O. Yu. and Smirnov, Yu. V.?FEBS Lett., 76, 108 (1977)

Richardson, C., Behnke, W. D., Freisheim, J. H. and Blumenthal, K. M.Biochim.

[11]Biophys. Acta, 537, 310 (1978)

[12]Kohmoto, K., Tsunasawa, S. and Sakiyama, F.?Eur. J. Biochem., 138, 227 (1984) Evenberg, A., Meyer, H., Gaastra, W., Verheij, H. M. and deHaas, G. H.  J. Biol. Chem., 252, 1189 (1977)

[13]Dognin, M. J. and Wittmann-Liebold, B.FEBS Lett., 84, 342 (1977) Fleer, E. A. M., Verheij, H. M. and deHaas, G. H.Eur. J. Biochem., 82, 261 (1978)

14Kitagawa, Y., Tsunasawa, S., Tanaka, N., Katsube, Y., Sakiyama, F. and Asada, K.?J.

Biochem. (Tokyo), 99, 1289 (1986)

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
164-13982 V8 Protease
V8蛋白酶
2mg 生物化学
050-05941 Endoproteinase Glu-C, Sequencing Grade
胞内蛋白酶 Glu-C(测序级别)
50 μg 生物化学
056-05921  Endoproteinase Asp-N, Sequencing Grade
胞内蛋白酶 Asp-N(测序级别)
2μg 生物化学