Whatman Partisil™ 高效液相色谱柱™ 填料

Whatman Partisil™ 高效液相色谱柱™ 填料

简要描述:

Whatman Partisil™ 高效液相色谱柱™ 填料是一种高质量的中性硅胶,表面积大,可供二种大小的颗粒(5um/10um)的预装柱或柱填料,不同的结合相适用于反相和离子交换层析。

订 货 信 息

介质  颗粒大小 包装大小 目录号
Partisil 5 Silica 5um 10g 4115-010
Partisil 10 Silica 5um 10g 4138-010
Partisil 10 ODS3 10um 10g 4116-010
Partisil 10 ODS2 10um 10g 4128-010
Partisil 10 ODS 10um 10g 4124-010
Partisil 10 SAX 10um 10g 4126-010
Partisil 10 SCX 10um 10g 4127-010

 

SuperSignal™化学发光持久性底物 分子生物试剂34076

SuperSignal™化学发光持久性底物 分子生物试剂

  • 产品型号:  34076
  • 简单描述
  • SuperSignal™化学发光持久性底物Thermo Scientific SuperSignal West Dura 持久性底物是一种基于鲁米诺的增强型化学发光 (ECL) 辣根过氧化物酶 (HRP) 底物,非常适合定量 Western 印迹,具有稳定光输出,适用于 Western 印迹分析的中等飞克级检测。
详细介绍

SuperSignal™化学发光持久性底物

Thermo Scientific SuperSignal West Dura 持久性底物是一种基于鲁米诺的增强型化学发光 (ECL) 辣根过氧化物酶 (HRP) 底物,非常适合定量 Western 印迹,具有稳定光输出,适用于 Western 印迹分析的中等飞克级检测。

SuperSignal West Dura 持久性化学发光底物的特性包括:
灵敏度:中飞克级
• 稳定性:工作溶液稳定性为24小时;试剂盒在室温下稳定性为1年
兼容性:硝酸纤维素和 PVDF 膜
信号持续时间:24小时
• 推荐的一抗浓度:1:1,000–1:50,000 稀释 (0.02–1.0 µg/mL)
• 推荐的二抗浓度:1:50,000–1:250,000 稀释 (4–20 ng/mL)

比较并查看所有 Western 印迹化学发光底物 ›

适用于 HRP 的 SuperSignal West Dura 持久性底物针对高灵敏度和长信号持续时间进行优化,非常适用于基于冷却 CCD 相机的检测系统。与信号在 30–60 分钟之内下降到几乎无法检测水平的底物不同,SuperSignal West Dura 化学发光底物产生的信号可稳定24小时,从而实现胶片或相机的多次曝光。

SuperSignal™化学发光持久性底物


规格

产品类型
底物
检测方法
化学发光
形式
液体
适用于(应用)
蛋白免疫印迹
Membrane Compatibility
硝酸纤维素、PVDF
产品线
SuperSignal™
数量
200 mL
Substrate
辣根过氧化物酶
建议抗体浓度
2°: 1:50-250K (4-20ng/mL), 1°: 1:5K (0.02- 1µg/mL)
灵敏度
中飞克水平
信号持续时间
24 小时
足够用于
25 次小型凝胶印迹,2000 平方厘米膜
套装内容
鲁米诺/增强剂,100 mL, 稳定过氧化物缓冲液,100 mL

内容与储存

足够用于:25 次微型凝胶印迹;2000 cm2 膜
• 鲁米诺/增强剂,100 mL
• 稳定过氧化物缓冲液,100 mL

在室温下储存。


Restore™ PLUS Western 印迹剥离缓冲液 分子生物试剂46430

Restore™ PLUS Western 印迹剥离缓冲液 分子生物试剂

  • 产品型号:  46430
  • 简单描述
  • Restore™ PLUS Western 印迹剥离缓冲液Thermo Scientific Restore PLUS Western Blot抗体剥离缓冲液是用于去除膜上结合的一抗和二抗的增强型配方,方便用户使用化学发光底物再次检测膜。
详细介绍

Restore™ PLUS Western 印迹剥离缓冲液

Thermo Scientific Restore PLUS Western Blot抗体剥离缓冲液是用于去除膜上结合的一抗和二抗的增强型配方,方便用户使用化学发光底物再次检测膜。

Restore PLUS Western Blot抗体剥离缓冲液的特点:

即用型,操作简单—无需稀释;无令人不快的气味;室温储存
兼容性—可在湿润或干燥的硝化纤维素膜和PVDF膜上使用;可与任何封闭缓冲液、酶偶联物和化学发光底物配合使用
高性价比—节省宝贵的时间和样本;首ci使用可有效剥离
强大而温和—有效保留转印蛋白,对印迹可进行五次抗体剥离操作
灵活—用于剥离和重新检测抗体以优化抗体浓度,或使用不同抗体检测新的抗原

Retore PLUS抗体剥离缓冲液是Thermo Scientific Restore Western Blot抗体剥离缓冲液经典版本的替代配方。Retore PLUS抗体剥离缓冲液配方温和,专为免疫印迹实验中难以去除、需要更长孵育时间或孵育温度在22°C以上的抗体而设计。本产品可在室温条件下快速高效地去除高亲和力抗体,而不会对转印蛋白造成影响,从而实现靶标蛋白的多次检测。

实验方案概要:
•漂洗印迹以去除化学发光底物。
•室温条件下,在Restore Western Blot抗体剥离缓冲液中孵育印迹5至15分钟
(或在37°C条件下孵育高亲和力抗体)
•取出印迹膜并在洗涤缓冲液中进行清洗
•封闭印迹膜
•测试抗体是否已充分移除。
•进行下一次免疫印迹实验。

相关产品:
Restore Western Blot抗体剥离缓冲液—经典温和配方
Restore Fluorescent Western Blot抗体剥离缓冲液—针对PVDF膜上的荧光免疫印迹应用而配制
封闭缓冲液—选择含蛋白和不含蛋白的封闭缓冲液
化学发光底物—比较底物,选择zui符合应用要求的产品
CL-XPosure胶片—用于化学发光检测的射线胶片
用于胶片的背景去除试剂—清除胶片上的多余信号,令结果更清晰



Restore™ PLUS Western 印迹剥离缓冲液


规格

产品类型
Western 印迹剥离缓冲液
检测方法
化学发光
形式
液体
适用于(应用)
蛋白免疫印迹
Membrane Compatibility
硝酸纤维素、PVDF
产品线
Restore™
数量
500 mL

内容与储存

接收后,在室温下储存。产品在环境温度下运输。


Restore™ Western 印迹剥离缓冲液 分子生物试剂21059

Restore™ Western 印迹剥离缓冲液 分子生物试剂

  • 产品型号:  21059
  • 简单描述
  • Restore™ Western 印迹剥离缓冲液Thermo Scientific Restore Western Blot抗体剥离缓冲液能够安全高效地从硝化纤维膜和PVDF膜上清去除一抗和二抗,从而再次检测化学发光的蛋白质免疫印迹。
详细介绍

Restore™ Western 印迹剥离缓冲液

Thermo Scientific Restore Western Blot抗体剥离缓冲液能够安全高效地从硝化纤维膜和PVDF膜上清去除一抗和二抗,从而再次检测化学发光的蛋白质免疫印迹。

estore Western Blot抗体剥离缓冲液的特性:

•省时—不需重新制胶电泳
•节省珍贵样品—在同一张膜上使用相同的样品重新检测
•高效—专li配方,去除效果好远优于自制缓冲液
•温和配方—在抗体剥离及重新检测时不会对靶蛋白造成伤害
•无气味—不含硫醇,无刺鼻气味
•价格经济—比其他竞争厂商的剥离缓冲液价格更低

产品细节
进行凝胶电泳并使用平行双样免疫印迹分析来检测新的一抗或抗体浓度非常耗费时间和金钱,而Restore Western Blot抗体剥离缓冲液可以消除使用化学发光免疫印迹底物检测免疫印迹过程中的浪费。Restore 抗体剥离缓冲液可以从免疫印迹中彻di、高效地从去除一抗和二抗,而不会去除或破坏已固定抗原,从而使得印迹可以被清除,而抗原可以重新检测,结果依然可靠。


使用Thermo Scientific SuperSignal辣根过氧化物酶底物进行化学发光免疫印迹检测,是当前见、zui灵敏的方法。由于这些底物不会沉淀并与膜表面永jiu结合,因此化学发光法检测到的免疫蛋白印迹可使用该试剂来剥离,从而移除亲和结合的一抗和二抗。为了达到良好的效果,抗体剥离缓冲液需要具有足够的强度来分离已结合的抗体,还需要足够温和使已转移的标靶蛋白仍保留在硝化纤维膜或PVDF膜上。Restore Western Blot 抗体剥离正具有这些特点。

通过剥离和重新检测,我们无需为了对不同标靶进行检测而进行多次凝胶电泳,避免浪费稀少或昂贵的样品。一次凝胶电泳产生的一张膜可通过使用Restore Western Blot抗体剥离缓冲液来去除一抗从而消除印迹。印迹剥离仅需花费15到30分钟,具体时间因一抗的亲和能力而不同。在去除印迹后,可使用新的一抗重新结合并检测。另外,印迹剥离之后还可以使用调整后的抗体浓度来进行重新结合,以便在初次结果不佳的情况下进一步优化实验条件。

应用
•可重复使用使用硝化纤维膜或PVDF膜,通过不同的一抗检测不同标靶
•可重新检测印迹,改正或优化初次实验中无效的抗体浓度

实验方案概要
•漂洗印迹以去除化学发光底物。
•37°C(对于某些抗体室温即可)条件下,在Restore Western Blot抗体剥离缓冲液中孵育印迹5至15分钟。
•移除免疫印迹并在洗涤缓冲液(TBS-T或PBS-T)中进行清洗。
•测试抗体是否已充分移除。
•进行下一次免疫印迹实验。



Restore™ Western 印迹剥离缓冲液


规格

产品类型
Western 印迹剥离缓冲液
检测方法
化学发光
形式
液体
适用于(应用)
蛋白免疫印迹
Membrane Compatibility
硝酸纤维素、PVDF
产品线
Restore™
数量
500 mL

内容与储存

储存:接收后在室温或 4°C 下储存。产品在环境温度下运输。


SuperSignal™ West Femto 较灵敏底物 分子生物试剂34096

SuperSignal™ West Femto 较灵敏底物 分子生物试剂

  • 产品型号:  34096
  • 简单描述
  • SuperSignal™ West Femto 较灵敏底物Thermo Scientific SuperSignal West Femto 超敏底物是一种超灵敏增强型化学发光 (ECL) 底物,与辣根过氧化物酶 (HRP) 配合使用,通过 Western 印迹分析检测低飞克级蛋白水平。
详细介绍

SuperSignal™ West Femto 较灵敏底物

Thermo Scientific SuperSignal West Femto 超敏底物是一种超灵敏增强型化学发光 (ECL) 底物,与辣根过氧化物酶 (HRP) 配合使用,通过 Western 印迹分析检测低飞克级蛋白水平。

SuperSignal West Femto 超敏底物的特性包括:
灵敏度:低飞克级(中-仄普托摩尔)
• 稳定性:4°C 下,工作溶液可保持稳定 8 h,试剂盒可保持稳定 1 年
兼容性:硝酸纤维素和 PVDF 膜
信号持续时间:长达 8 小时
推荐的一抗浓度:1:5,000–1:100,000 稀释度 (10–200 ng/mL)
推荐的二抗浓度:1:100,000–1:500,000 稀释度 (2–10 ng/mL)

SuperSignal West Femto 超敏底物设计用于通过 Western 免疫印迹分析进行低飞克水平的检测。当与优化的抗体浓度和封闭缓冲液结合使用时,SuperSignal West Femto 底物能够检测到低丰度目标蛋白,即使目标蛋白丰度太低而无法用入门级 ECL 底物观察到。



SuperSignal™ West Femto 较灵敏底物


规格

产品类型
底物
检测方法
化学发光
形式
液体
适用于(应用)
蛋白免疫印迹
Membrane Compatibility
硝酸纤维素、PVDF
产品线
SuperSignal™
数量
200 mL
偶联物
HRP(辣根过氧化物酶)
Substrate
辣根过氧化物酶
建议抗体浓度
2°:1:100-500K (2-10 ng/mL),1°:1:5K (10-200 ng/mL)
灵敏度
低飞克水平
信号持续时间
6 至 8 h
足够用于
25 次小型凝胶印迹,2000 平方厘米膜
套装内容
稳定过氧化物缓冲液,100 mL, 鲁米诺/增强剂,100 mL

内容与储存

足够用于:25 次微型凝胶印迹;2000 cm2 膜
• 鲁米诺/增强剂,100 mL
• 稳定过氧化物缓冲液,100 mL

试剂在 4°C 下储存。


Signal™ West Pico PLUS 化学发光底物 分子生物试剂34577

Signal™ West Pico PLUS 化学发光底物 分子生物试剂

  • 产品型号:  34577
  • 简单描述
  • Signal™ West Pico PLUS 化学发光底物Thermo Scientific SuperSignal West Pico PLUS 化学发光底物是一种增强型化学发光 (ECL) 辣根过氧化物酶 (HRP) 底物,可通过Western 印迹分析检测皮克至高飞克水平的蛋白。
详细介绍

Signal™ West Pico PLUS 化学发光底物

Thermo Scientific SuperSignal West Pico PLUS 化学发光底物是一种增强型化学发光 (ECL) 辣根过氧化物酶 (HRP) 底物,可通过Western 印迹分析检测皮克至高飞克水平的蛋白。

SuperSignal West Pico PLUS 化学发光底物的特性包括:
灵敏度:皮克至飞克水平灵敏度
• 稳定性:室温下,工作溶液可保持稳定 8 小时;试剂盒可保持稳定 1 年
兼容性:硝酸纤维素和 PVDF 膜
信号持续时间:6-24 小时
• 推荐的一抗浓度:1:1,000–1:5,000 稀释度 (0.2–1.0 µg/mL)
• 推荐的二抗浓度:1:20,000–100,000 稀释 (10–50 ng/mL)


SuperSignal West Pico PLUS 底物旨在提供卓yue的信号强度和灵敏度,以用于对 HRP 偶联物进行 Western 印迹分析。发光强度与出色的持续时间相结合,可实现多次曝光,更轻松获得发表级别的印迹图像。SuperSignal West Pico PLUS 底物与不同的膜、封闭试剂和各种抗体稀释液兼容,是大多数蛋白质印迹应用的理想选择。



Signal™ West Pico PLUS 化学发光底物


规格

产品类型
底物
检测方法
化学发光
形式
液体
适用于(应用)
蛋白免疫印迹
Membrane Compatibility
硝酸纤维素、PVDF
产品线
SuperSignal™
数量
200 mL
偶联物
HRP(辣根过氧化物酶)
Substrate
辣根过氧化物酶
建议抗体浓度
2°: 1:20-100K (10-50ng/mL), 1°: 1:1K (0.2- 1µg/mL)
灵敏度
皮克至高飞克水平
信号持续时间
6-24 小时
足够用于
25 次小型凝胶印迹,2000 平方厘米膜
套装内容
SuperSignal West Pico PLUS 鲁米诺/增强剂,100 mL, SuperSignal West Pico PLUS 稳定过氧化物,100 mL
运输条件
室温

内容与储存

足够用于 25 微型凝胶印迹;2000 cm2 膜
• SuperSignal West Pico PLUS 鲁米诺/增强剂,100 mL
• SuperSignal West Pico PLUS 稳定过氧化物,100 mL

在室温下储存。


Thermo Pierce™ BCA 蛋白定量试剂盒 分子生物试剂23225

Thermo Pierce™ BCA 蛋白定量试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  23225
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ BCA 蛋白定量试剂盒Pierce BCA 蛋白定量试剂盒是一种双组分、高精度、兼容去垢剂的蛋白定量试剂,可准确测定蛋白浓度。
详细介绍

Thermo Pierce™ BCA 蛋白定量试剂盒

Pierce BCA 蛋白定量试剂盒是一种双组分、高精度、兼容去垢剂的蛋白定量试剂,可准确测定蛋白浓度。对于蛋白研究中的常见样品类型,Pierce BCA 试剂均可准确测定蛋白浓度。Pierce BCA 试剂可用于评估全细胞裂解物、亲和柱分离组分和蛋白样品纯化的产量,还可在工业应用中用于蛋白污染的监测。与大多数染料结合法相比,BCA蛋白定量法受蛋白质氨基酸组成差异的影响更小,因此有更高的蛋白间定量一致性。

比较所有的 BCA 蛋白定量试剂 ›

BCA 蛋白定量试剂盒的特点包括:
比色法测量—可以目测评估,也可使用标准分光光度计或酶标仪 (562 nm) 进行测量
高度一致性—与染料结合法 (Bradford) 相比,BCA定量法的蛋白间差异更小
兼容性强—在大多数离子型和非离子型去污剂的常见浓度下,性能不受影响
定量时间—30 分钟孵育;与传统 Lowry 法相比,操作更简单,且检测速度快 4 倍
检测范围—BSA 的线性工作范围为 20 至 2000 µg/mL
高灵敏度—使用增强方案,可检测浓度低至 5 µg/mL 的样品

测定工作原理
BCA 蛋白测定法是在碱性环境下,通过蛋白将 Cu2+ 还原为 Cu1+ ,再通过二辛可宁酸 (BCA) 来检测亚铜阳离子 (Cu1+) 。步是铜与碱性环境中的蛋白质螯合,形成浅蓝色复合物,这一过程被称为双缩脲反应。在该反应(双缩脲反应)中,由三个或更多氨基酸残基的肽在含酒石酸钠钾的碱性环境中与铜离子形成有色螯合复合物。

在显色反应的第二步中,BCA 与步形成的还原型(亚铜)阳离子发生反应。两分子 BCA 与一个亚铜离子螯合,产生深紫色反应产物。BCA/铜复合物是水溶性的,在 562 nm 处具有强线性吸收,且吸收度随蛋白质浓度增加而升高。该复合物的灵敏度(检测下限)大约是个反应中淡蓝色的 100 倍。

反应很大程度上受到蛋白氨基酸序列中四个氨基酸残基(半胱an酸、胱an酸、酪an酸和色an酸)的影响。然而,不同于考马斯染料结合法,肽链也有助于颜色形成,因此可将不同蛋白间的测量差异降至zui低



Thermo Pierce™ BCA 蛋白定量试剂盒


规格

描述
Pierce BCA 蛋白检测试剂盒
检测
BCA 蛋白定量:
检测方法
比色法
产品线
Pierce™
产品类型
蛋白定量检测
特异性
无靶标特异性
足够用于
500 次试管检测或 5000 次微孔板检测
适用于(应用)
基于溶液的检测、吸光度
适用于(设备)
分光光度计、酶标仪
数量
1 L 试剂盒

内容与储存

足够用于:500 次试管分析或 5000 孔微孔板分析
• BCA 试剂 A,2 x 500 mL
• BCA 试剂 B,25 mL
• 蛋白标准品安瓿瓶,2 mg/mL,10 x 1 mL

室温下储存


Thermo Pierce™ BCA 蛋白检测试剂盒 分子生物试剂23227

Thermo Pierce™ BCA 蛋白检测试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  23227
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ BCA 蛋白检测试剂盒Pierce BCA 蛋白定量试剂盒是一种双组分、高精度、兼容去垢剂的蛋白定量试剂,可准确测定蛋白浓度。
详细介绍

Thermo Pierce™ BCA 蛋白检测试剂盒

Pierce BCA 蛋白定量试剂盒是一种双组分、高精度、兼容去垢剂的蛋白定量试剂,可准确测定蛋白浓度。对于蛋白研究中的常见样品类型,Pierce BCA 试剂均可准确测定蛋白浓度。Pierce BCA 试剂可用于评估全细胞裂解物、亲和柱分离组分和蛋白样品纯化的产量,还可在工业应用中用于蛋白污染的监测。与大多数染料结合法相比,BCA蛋白定量法受蛋白质氨基酸组成差异的影响更小,因此有更高的蛋白间定量一致性。

比较所有的 BCA 蛋白定量试剂 ›

BCA 蛋白定量试剂盒的特点包括:
比色法测量—可以目测评估,也可使用标准分光光度计或酶标仪 (562 nm) 进行测量
• 高度一致性—与染料结合法 (Bradford) 相比,BCA定量法的蛋白间差异更小
• 兼容性强—在大多数离子型和非离子型去污剂的常见浓度下,性能不受影响
• 定量时间—30 分钟孵育;与传统 Lowry 法相比,操作更简单,且检测速度快 4 倍
• 检测范围—BSA 的线性工作范围为 20 至 2000 µg/mL
• 高灵敏度—使用增强方案,可检测浓度低至 5 µg/mL 的样品

测定工作原理
BCA 蛋白测定法是在碱性环境下,通过蛋白将 Cu2+ 还原为 Cu1+ ,再通过二辛可宁酸 (BCA) 来检测亚铜阳离子 (Cu1+) 。步是铜与碱性环境中的蛋白质螯合,形成浅蓝色复合物,这一过程被称为双缩脲反应。在该反应(双缩脲反应)中,由三个或更多氨基酸残基的肽在含酒石酸钠钾的碱性环境中与铜离子形成有色螯合复合物。

在显色反应的第二步中,BCA 与步形成的还原型(亚铜)阳离子发生反应。两分子 BCA 与一个亚铜离子螯合,产生深紫色反应产物。BCA/铜复合物是水溶性的,在 562 nm 处具有强线性吸收,且吸收度随蛋白质浓度增加而升高。该复合物的灵敏度(检测下限)大约是个反应中淡蓝色的 100 倍。

反应很大程度上受到蛋白氨基酸序列中四个氨基酸残基(半胱an酸、胱an酸、酪an酸和色an酸)的影响。然而,不同于考马斯染料结合法,肽链也有助于颜色形成,因此可将不同蛋白间的测量差异降至zui低.



Thermo Pierce™ BCA 蛋白检测试剂盒


规格

描述
Pierce BCA 蛋白检测试剂盒
检测
BCA 蛋白定量:
检测方法
比色法
产品线
Pierce™
产品类型
蛋白定量检测
特异性
无靶标特异性
足够用于
250 次试管检测或 2500 次微孔板检测
适用于(应用)
基于溶液的检测、吸光度
适用于(设备)
分光光度计、酶标仪
数量
500 mL 试剂盒

内容与储存

足够用于:250 次试管检测或 2500 次微孔板检测
• BCA 试剂 A,500 mL
• BCA 试剂 B,25 mL
• 白蛋白标准安瓿,2 mg/mL,10 x 1 mL

在室温下储存


Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒 分子生物试剂A53225

Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  A53225
  • 简单描述
  • Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒Pierce Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒是一种快速、双组分、高精度、去污剂兼容的测定法,经优化用于测定总蛋白质浓度。
详细介绍

Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒

Pierce Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒是一种快速、双组分、高精度、去污剂兼容的测定法,经优化用于测定总蛋白质浓度。其采用与传统 Pierce BCA 蛋白测定法相同的铜螯合技术,具有可比的准确度,但仅在室温下孵育5分钟并在 480 nm 处测量。使用这种改良方法,无需等待或将样品暴露于高温以快速获得结果。

与所有可用的 BCA 蛋白测定法具有可比性›

Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒的特点包括:
吸光度 — 比色法,480 nm 处具有吸光度
均匀性 — 蛋白间差异与传统 BCA 蛋白测定法相似且小于染料结合蛋白测定法 (Bradford)
兼容性 — 不受大多数离子和非离子去污剂典型浓度的影响
测定时间 — 5分钟室温反应
测定范围 — BSA 的线性工作范围为 20-2000 µg/mL

传统 BCA 蛋白测定法是广泛使用和可接受的蛋白测定法,因其高度准确的蛋白浓度测定和与蛋白研究中遇到的大多数样品类型兼容而受到信赖。然而,使用这种传统方案处理样品时,必须在 37°C 下加热反应30分钟或室温下孵育两小时。快速 Gold BCA 蛋白定量试剂盒既保留了经典 BCA 的关键特点,又缩短了室温孵育时间,孵育要求(时间和温度)与染料结合法相同。快速Gold BCA 蛋白定量试剂盒可用于评估全细胞裂解物、亲和纯化柱分离组分的产率,以及监测工业应用中的蛋白质污染。与大多数染料结合法相比并且与传统 BCA 测定法相似,Rapid Gold BCA 测定法受蛋白质组成差异的影响更小,蛋白间差异较小。

Rapid Gold BCA 蛋白测定法如何检测蛋白
Rapid Gold BCA 蛋白测定法采用与传统 BCA 蛋白测定法相同的铜还原法和独te的铜螯合物。该测定法将在碱性介质中通过蛋白将 Cu2+ 还原为 Cu1+ 与通过专有螯合物高灵敏度和选择性的比色检测亚铜阳离子 (Cu1+) 相结合。步是铜与碱性环境中的蛋白质螯合,形成浅绿色复合物,这一过程被称为双缩脲反应。在该反应(称为双缩脲反应)中,含有三个或更多氨基酸残基的肽在含酒石酸钠钾的碱性环境中与铜离子形成有色螯合复合物。

在显色反应的第二步中,Rapid Gold BCA 螯合物与步形成的还原型(亚铜)阳离子反应。两分子 BCA 与一个亚铜离子螯合,产生深金橙色反应产物。BCA/铜复合物是水溶性的,在 480 nm 处具有强线性吸光度,吸光度随蛋白浓度增加而升高。该复合物的灵敏度(检测下限)大约是个反应中淡绿色的100倍。

显色反应受到蛋白氨基酸序列中四个氨基酸残基(半胱an酸、胱an酸、酪an酸和色an酸)的强烈影响。但是,与考马斯染料结合法不同,一般的肽基质也会影响显色,BCA 法有助于将蛋白质组成差异造成的变异性降至zui低。

快速 Gold BCA 蛋白测定的兼容性
一些已知可干扰快速 Gold BCA 蛋白测定的物质包括潜在还原剂、螯合剂以及强酸或强碱。由于这些物质在微量浓度下就能够干扰蛋白质浓度估算,因此,应避免使用以下物质作为样品缓冲液的组分:
•抗坏血酸
• EGTA
• 铁
• 不纯蔗糖
• 儿茶酚胺
• 不纯甘油
• 脂质
• 色an酸
• 肌酐
• 过氧化氢
• 密二糖
• 酪an酸
• 半胱an酸
• 酰肼类
• 酚红
• 尿酸



Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒


规格

测定范围
20-2000 μg/mL
检测
Rapid Gold BCA 检测试剂盒
检测方法
比色法
产品线
Pierce™
产品类型
蛋白定量检测
特异性
无靶标特异性
适用于(应用)
基于溶液的检测、吸光度
适用于(设备)
分光光度计、酶标仪
数量
500 mL
运输条件
湿冰

内容与储存

储存在冰箱 (2–8°C) 中。


Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒 分子生物试剂A53226

Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  A53226
  • 简单描述
  • Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒Pierce Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒是一种快速、双组分、高精度、去污剂兼容的测定法,经优化用于测定总蛋白质浓度。
详细介绍

Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒

Pierce Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒是一种快速、双组分、高精度、去污剂兼容的测定法,经优化用于测定总蛋白质浓度。其采用与传统 Pierce BCA 蛋白测定法相同的铜螯合技术,具有可比的准确度,但仅在室温下孵育5分钟并在 480 nm 处测量。使用这种改良方法,无需等待或将样品暴露于高温以快速获得结果。

与所有可用的 BCA 蛋白测定法具有可比性›

Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒的特点包括:
吸光度 — 比色法,480 nm 处具有吸光度
均匀性 — 蛋白间差异与传统 BCA 蛋白测定法相似且小于染料结合蛋白测定法 (Bradford)
兼容性 — 不受大多数离子和非离子去污剂典型浓度的影响
测定时间 — 5分钟室温反应
测定范围 — BSA 的线性工作范围为 20-2000 µg/mL

传统 BCA 蛋白测定法是广泛使用和可接受的蛋白测定法,因其高度准确的蛋白浓度测定和与蛋白研究中遇到的大多数样品类型兼容而受到信赖。然而,使用这种传统方案处理样品时,必须在 37°C 下加热反应30分钟或室温下孵育两小时。快速 Gold BCA 蛋白定量试剂盒既保留了经典 BCA 的关键特点,又缩短了室温孵育时间,孵育要求(时间和温度)与染料结合法相同。快速Gold BCA 蛋白定量试剂盒可用于评估全细胞裂解物、亲和纯化柱分离组分的产率,以及监测工业应用中的蛋白质污染。与大多数染料结合法相比并且与传统 BCA 测定法相似,Rapid Gold BCA 测定法受蛋白质组成差异的影响更小,蛋白间差异较小。

Rapid Gold BCA 蛋白测定法如何检测蛋白
Rapid Gold BCA 蛋白测定法采用与传统 BCA 蛋白测定法相同的铜还原法和独te的铜螯合物。该测定法将在碱性介质中通过蛋白将 Cu2+ 还原为 Cu1+ 与通过专有螯合物高灵敏度和选择性的比色检测亚铜阳离子 (Cu1+) 相结合。步是铜与碱性环境中的蛋白质螯合,形成浅绿色复合物,这一过程被称为双缩脲反应。在该反应(称为双缩脲反应)中,含有三个或更多氨基酸残基的肽在含酒石酸钠钾的碱性环境中与铜离子形成有色螯合复合物。

在显色反应的第二步中,Rapid Gold BCA 螯合物与步形成的还原型(亚铜)阳离子反应。两分子 BCA 与一个亚铜离子螯合,产生深金橙色反应产物。BCA/铜复合物是水溶性的,在 480 nm 处具有强线性吸光度,吸光度随蛋白浓度增加而升高。该复合物的灵敏度(检测下限)大约是个反应中淡绿色的100倍。

显色反应受到蛋白氨基酸序列中四个氨基酸残基(半胱an酸、胱an酸、酪an酸和色an酸)的强烈影响。但是,与考马斯染料结合法不同,一般的肽基质也会影响显色,BCA 法有助于将蛋白质组成差异造成的变异性降至zui低。

快速 Gold BCA 蛋白测定的兼容性
一些已知可干扰快速 Gold BCA 蛋白测定的物质包括潜在还原剂、螯合剂以及强酸或强碱。由于这些物质在微量浓度下就能够干扰蛋白质浓度估算,因此,应避免使用以下物质作为样品缓冲液的组分:
•抗坏血酸
• EGTA
• 铁
• 不纯蔗糖
• 儿茶酚胺
• 不纯甘油
• 脂质
• 色an酸
• 肌酐
• 过氧化氢
• 密二糖
• 酪an酸
• 半胱an酸
• 酰肼类
• 酚红
• 尿酸



Pierce™ Rapid Gold BCA 蛋白测定试剂盒


规格

测定范围
20-2000 μg/mL
检测
Rapid Gold BCA 检测试剂盒
检测方法
比色法
产品线
Pierce™
产品类型
蛋白定量检测
特异性
无靶标特异性
适用于(应用)
基于溶液的检测、吸光度
适用于(设备)
分光光度计、酶标仪
数量
250 mL
运输条件
湿冰

内容与储存

储存在冰箱 (2–8°C) 中。


LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒 分子生物试剂20148

LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  20148
  • 简单描述
  • LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒Thermo Scientific LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒是一种非常可靠、灵敏的电泳迁移率变动实验 (EMSA) 系统,用于鉴定和表征蛋白-DNA 结合相互作用。
详细介绍

LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒

Thermo Scientific LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒是一种非常可靠、灵敏的电泳迁移率变动实验 (EMSA) 系统,用于鉴定和表征蛋白-DNA 结合相互作用。该试剂盒包括用于设置和定制 DNA 结合反应的试剂、用于检测试剂盒系统的一组 DNA 和蛋白提取物、用于生物su标记 DNA 靶标的稳定链霉su亲和素-HRP 偶联物以及用于检测的一种极其灵敏的化学发光底物模块。

LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒的特点:

•非常适合检测细胞核提取物中的低丰度蛋白
• 灵敏度超过放射性和di高辛方法
• 与先前为常用 DNA-蛋白相互作用建立的结合条件兼容
• 包括 EBNA 控制系统以帮助新用户开发工作检测方法并了解用于确认结合相互作用特异性的方法

LightShift EMSA 检测的原理类似于 Western 印迹。生物su末端标记的双螺旋 DNA 与细胞核提取物或纯化因子一起孵育并在天然凝胶上电泳。然后快速(30 分钟)将 DNA 转印到阳性尼龙膜上,进行紫外交联,用链霉su亲和素-HRP 偶联物进行探测,并与底物一起孵育。可在一天内完成从标记到得出结果。

蛋白与 DNA 的相互作用是控制许多细胞过程的关键,包括 DNA 复制、重组和修复、转录和病毒组装。研究基因调控和确定蛋白:DNA 相互作用的核心技术是电泳迁移率实验 (EMSA)。

EMSA 技术基于以下观察结果:在进行非变性聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳时,蛋白:DNA 复合物的迁移速度比无 DNA 分子慢。因为 DNA 迁移率会根据蛋白结合率发生偏移或速度减慢,因此,该实验也被称为凝胶偏移或凝胶延迟实验。直至 EMSA 蛋白:DNA 相互作用主要通过硝酸纤维素过滤柱结合试验进行研究。

进行试验所需的全部是纯化的 DNA 靶标,该靶标已用生物su、待测蛋白提取物、尼龙膜和碱性电泳设备进行末端标记。DNA 靶标可以在合成时加上 5' 或 3' 生物su标记,或者在合成后使用 Thermo Scientific 生物su 3' 末端 DNA 标记试剂盒(产品编号 89818)进行标记。细胞核、细胞溶质或全细胞蛋白提取物可以通过多种方法获得,包括 Thermo Scientific NE-PER 核和细胞质提取试剂盒(产品编号 78833)。



LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒


规格

检测
EMSA 测定
反应次数
100
产品线
LightShift™
产品类型
Protein-DNA binding Interaction Assay Kit
数量
100 Reactions
靶标特异性
无靶标特异性
技术
增强的化学发光、膜印迹、凝胶迁移
检测方法
化学发光
产品规格
Kit


Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠 分子生物试剂26162

Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠 分子生物试剂

  • 产品型号:  26162
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠包被磁石和蛋白的聚合物微珠悬浮在叠氮hua钠水溶液中,浓度为 10 mg/mL。足够用于:用于约 250 次典型 ChIP 检测
详细介绍

Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠

包被磁石和蛋白的聚合物微珠悬浮在叠氮hua钠水溶液中,浓度为 10 mg/mL。足够用于:用于约 250 次典型 ChIP 检测

Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠

规格

描述
Pierce ChIP 级蛋白 A/G 磁珠
产品线
Pierce™
Target
抗体
类型
磁珠
配基类型
蛋白 A/G
足够用于
约 250 次检测

内容与储存

储存在原容器中,置于干燥、阴凉且通风良好的区域内,避免阳光直照。

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒 分子生物试剂26157

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  26157
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 试剂盒提供了一种通过免疫沉淀(染色质 IP)高效分离染色质结合 DNA 的便利方法,用于随后通过 PCR 进行定量分析。
详细介绍

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒

Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 试剂盒提供了一种通过免疫沉淀(染色质 IP)高效分离染色质结合 DNA 的便利方法,用于随后通过 PCR 进行定量分析。

磁性 ChIP 试剂盒的特点:

快速— 可在约 8 小时内获得适于进行定量 PCR 的纯化 DNA
高效且可重现—微球菌核酸酶酶切过程和细胞核裂解过程均经高度优化
灵敏—只需 10,000 个细胞 (1 x 10^4) 即可获得结果
低背景—Pierce 蛋白 A/G 磁珠已在不含 DNA 的试剂中进行封闭,可极大限度地降低背景
全面—包括优化的阳性对照试剂:RNA 聚合酶 II 抗体和 GAPDH 启动子 PCR 引物

Pierce 磁性染色质免疫沉淀分析 (ChIP) 试剂盒含有足够的试剂,可使用优化的方案采用适当对照品进行 30 次 ChIP 检测。试剂盒中包含的试剂可用于裂解细胞、捕获蛋白-DNA 复合物,逆转交联以及分离 DNA。封闭 Pierce 蛋白 A/G 磁珠具有ji高的结合容量和较低的非特异性背景,可与很多种抗体一起使用。这些微珠可与磁力架或自动化平台(例如,Thermo Scientific KingFisher 仪器)一起用于手动工作流程。还提供经验证适用于 ChIP 且具备质量保证的抗体,与 Pierce 磁性 ChIP 试剂盒配合使用。

包括:
试剂盒含有用于染色质制备、IP 以及 DNA 纯化的试剂,同时也包含阳性对照品(抗体和引物)

需要:
体内交联剂(如甲醛)、微量吸头超声波仪(如 Misonix™ 超声波仪 3000)、符合 ChIP 要求的首xuan抗体、目标 DNA 序列的 PCR 引物、PCR 预混液(如果需要 qPCR,则含有一种染料,如 SYBR™ Green)和 qPCR 仪器

应用:
• 通过 PCR 或 ChIP-Seq 确定基因组 DNA 上特异性蛋白-DNA 相互作用的位点
• 监测组蛋白修饰或化学制剂对 DNA 结合的影响

要想成功进行 ChIP 检测,需要在检测靶标基因组 DNA 之前执行多个关键步骤(交联、染色质制备、免疫沉淀)。单独来讲,ChIP 实验方案中的每一步在优化时都很费时间。Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 试剂盒简化了 ChIP 流程,可获得准确且可重现的结果。

蛋白-DNA 复合物首先在体内与甲醛交联。试剂盒含有的试剂可以裂解细胞,并可提取和溶解交联复合物。然后,将复合物和特异性抗体放在一起进行孵育,最后用 Pierce 蛋白 A/G 磁珠进行分离。在逆转交联和酶切蛋白后,纯化所得 DNA 片段,然后准备进行标准或定量 PCR。



Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒


规格

容量(公制)
4×10^6 个细胞/反应
描述
Pierce 磁性 ChIP 试剂盒
形式
试剂盒
产品线
Pierce™
数量
1 个试剂盒
类型
磁珠 ChIP 试剂盒
足够用于
30 次反应
产品规格
试剂盒

内容与储存

• 甘an酸溶液 (10X),15 mL;在室温下储存
• PBS (20X),15 mL;在 4°C 下储存
• Halt™ 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物,无 EDTA (100X),1 mL;在 4°C 下储存
• 膜提取缓冲液,10 mL;在 4°C 下储存
• MNase 酶切缓冲液,10 mL;在 4°C 下储存
• DTT (7.7 mg),冻干,2 个样品瓶;在室温或 4°C 下储存
• MNase 终止液,1 mL;在 4°C 下储存
• ChIP 级蛋白 A/G 磁珠,0.7 mL;在 4°C 下储存
• IP 稀释/洗涤缓冲液 (5X),40 mL,在 4°C 下储存
• 氯化钠 (5M),6 mL;在 4°C 下储存
• IP 洗脱缓冲液 (2X),4.5 mL;在 4°C 下储存
• 微量离心管,1.5 mL,75 个管;在室温或 4°C 下储存
• DNA 纯化柱和试剂,40 次纯化;在室温或 4°C 下储存
• DNA 纯化柱,40 个柱
• DNA 柱结合溶液,30 mL
• DNA 柱洗涤液,6 mL
• pH 指示剂,0.8 mL
• DNA 柱洗脱液,5 mL
• 微球菌核酸酶(ChIP 级)(10 U/µL),50 µL;在-20°C 下储存
• 抗 RNA 聚合酶 II 抗体,25 µL;在-20°C 下储存
• 正常兔 IgG (1 mg/mL),10 µL;在-20°C 下储存
• 蛋白酶 K (20 mg/mL),0.25 mL;在-20°C 下储存
• ChIP 阳性对照引物(GAPDH 启动子,人特异性),100 µL;在 -20°C 下储存


ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒 分子生物试剂26149

ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  26149
  • 简单描述
  • ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒Thermo Scientific Pierce 免疫共沉淀试剂盒提供共价抗体固定化以及进行适当控制的 co-IP 实验所需的所有组分,成品中无抗体干扰。
详细介绍

ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒

Thermo Scientific Pierce 免疫共沉淀试剂盒提供共价抗体固定化以及进行适当控制的 co-IP 实验所需的所有组分,成品中无抗体干扰。

Co-IP 是研究蛋白:蛋白相互作用的常用方法,其使用抗体对抗原(诱饵蛋白)进行免疫沉淀,对任何相互作用蛋白(猎物蛋白)进行免疫共沉淀。使用蛋白 A 或 G 的传统 co-IP 方法可导致抗体重链和轻链的共洗脱,而这些重链和轻链可能与相关条带共迁移,掩盖了重要的结果。Pierce Co-IP 试剂盒通过将抗体共价偶联至胺反应性树脂上,解决了该问题。该试剂盒包含用于蛋白结合和回收的优化缓冲液、进行对照实验所需的试剂以及高效离心柱和收集管,可缩短方案并尽量减少操作和混合。

免疫共沉淀试剂盒的特点:

适用于任何纯化抗体—使用任何纯化抗体进行 co-IP 实验,无论物种或 Ig 类别(鸡 IgY、人 IgE、小鼠 IgG1、IgM 等)如何;不依赖蛋白 A 和蛋白 G 的亲和结合
• 无抗体干扰—共价结合方法和非还原洗脱系统可以产生纯 co-IP 产品,该产品不会被 IP 抗体污染
• 可重复使用的抗体微珠—共价抗体固定化允许重复使用制备的 IP 树脂,并可能节省昂贵抗体
• 全套试剂盒—所有用于抗体固定和许多 IP 实验的试剂,包括结合和洗涤缓冲液、洗脱缓冲液和便利的微量离心柱,使树脂操作更加简单和高效。
随附对照微珠—提供未衍生化琼脂糖微珠,用作非特异性结合的阴性对照
• 通用—co-IP 方法与任何生理(非变性)蛋白样品缓冲液兼容,缓冲液与特异性抗体抗原和蛋白相互作用复合物兼容。

免疫共沉淀 (Co-IP) 是一种用于发现蛋白相互作用的常用体外方法。Pierce 免疫共沉淀试剂盒经过配置,是有效进行 Co-IP 实验的基本工具,能够产生不含棘手的 IP 抗体的纯 IP 和 co-IP 产物。通过使用可直接且永偶联纯 IP 抗体的 AminoLink Plus 树脂替代蛋白 A/G 琼脂糖微珠,对传统 co-IP 技术实现这种改善。温和(非还原、非变性)洗脱缓冲液可实现在保留琼脂糖微珠上固定化抗体的同时解离 IP 靶标。结果是获得一种可通过 Western 印迹(或甚至测序)进行分析的纯产物,无抗体干扰。

除消除 IP 抗体污染外,构成 Pierce Co-IP 试剂盒的抗体偶联方法还可避免传统蛋白 A 和蛋白 G 方法产生的非特异性结合相互作用和浸出污染。尽管偶联方法要求起始抗体包含在不含 BSA、明胶和其他贮藏蛋白稳定剂的无胺缓冲液中,但其不依赖于蛋白 A 或蛋白 G 这一事实意味着任何抗体种类或类别均可用于 IP(例如,IgM 和鸡 IgY)。实际上,任何纯化的蛋白都可以固定化用于结合配偶体的亲和纯化。



ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒


规格

检测
亲和纯化
适用于(设备)
微型离心机
形式
试剂盒
产品线
Pierce™
数量
1 个试剂盒
适用于(应用)
免疫沉淀(IP)
Target
无靶标特异性
类型
免疫沉淀试剂盒
足够用于
50 次反应
产品规格
试剂盒

内容与储存

足够用于:准备并进行 50 次 co-IP 反应,每次使用 25 µL 树脂
• AminoLink Plus 偶联树脂,2 mL
• 偶联缓冲液 (20X),25 mL
• 氰基peng氢化钠溶液 (5M),0.5 mL
• 淬灭缓冲液,50 mL
• 洗涤液,60 mL
• IP 裂解/洗涤缓冲液,2 x 50 mL
• 改良 Dulbecco PBS (20X),25 mL
• 调节缓冲液 (100X),5 mL
• 洗脱缓冲液,50 mL
• 泳道标志物样品缓冲液 (5X),5 mL
• Pierce 离心柱,螺旋盖,50 根柱
• 微量离心机收集管,2 mL,100 支管
• 微量离心机收集管,1.5 mL,50 支管
• Pierce 对照琼脂糖树脂,2 mL

储存在 4°C 下。


Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒 分子生物试剂88805

Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  88805
  • 简单描述
  • Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒Thermo Scientific Pierce 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒使用交联化学方法将 IP 抗体共价固定在优质蛋白 A/G 磁珠上,以实现有效的免疫沉淀和免疫共沉淀
详细介绍

Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒

Thermo Scientific Pierce 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒使用交联化学方法将 IP 抗体共价固定在优质蛋白 A/G 磁珠上,以实现有效的免疫沉淀和免疫共沉淀。

因为该磁性 IP 程序涉及用于免疫沉淀的特异性抗体的共价结合,所以可在不使用抗体片段的情况下洗脱和分析靶蛋白或 co-IP 蛋白复合物,原因是该抗体仍黏附在微珠上。该试剂盒包含优化的方案以及使用与蛋白 A/G 结合的抗体和手动或自动磁性分离工具用于获得高得率 IP 或 co-IP 所必需的所有缓冲液和试剂。

交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒的特点:

无抗体 IP—抗体与磁珠不可逆地连接,使得完整抗体或含有纯化抗原的重链和轻链的共洗脱可忽略不计
便利—IP/co-IP 试剂盒包含磁珠以及所有用于理想免疫沉淀所必需的缓冲液
快速—可在 3 小时内完成交联和免疫沉淀
高效—与其他磁珠相比,使用一半推荐体积的磁粒子进行免疫沉淀
兼容—与蛋白 A/G 重组蛋白偶联的磁珠可确保与大多数一抗(无论来自小鼠还是兔)兼容
可扩展—仅需使用少量抗体即可进行单次 IP 实验或制备更大数量的抗体交联磁珠进行多次实验

Pierce 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒的方案为使 IP 抗体与蛋白 A/G 磁性微珠结合,然后使用辛二酸二琥珀酰亚胺酯 (DSS) 将抗体共价交联至微珠。然后将抗体交联微珠与含有目标蛋白抗原的细胞裂解物或组织提取物一起孵育,使得抗原:抗体复合物可以形成。洗涤微珠以去除未结合的材料,并使用低 pH 值洗脱缓冲液从抗体-交联微珠分离结合的抗原。包括中和缓冲液,以防止分离抗原沉淀,并确保下游应用中的蛋白活性。包含用于制备 SDS-PAGE 分析样品的泳道标志物样品缓冲液。该方案针对 2 至 10 µg IP 抗体进行了优化。为获得较佳 co-IP 得率,使用 5 至 10 µg 抗体。使用磁力架手动从溶液中取出磁珠或者使用 Thermo Scientific KingFisher Flex 仪器等仪器通过自动化操作从溶液中取出磁珠。

传统 IP(无共价抗体连接)的抗原得率通常高于使用交联的 IP 方案。这是因为交联过程不可避免地会引起一些功能性抗体结合位点的损失。为了克服交联方法的这一限制,在交联 IP 方法中需要使用的 IP 抗体量可能多于等效传统 IP 程序。当然,交联免疫沉淀程序的优势在于 Western 印迹无干扰抗体条带。

方案总结
1:用 1X 偶联缓冲液预洗微珠。
2:使抗体与蛋白 A/G 磁珠结合 15 分钟。
3:用 1X 偶联缓冲液洗涤微珠三次。
4:使用 DSS 将抗体交联至微珠,持续 30 分钟。
5:用洗脱缓冲液洗涤微珠三次,然后用 IP 裂解/洗涤缓冲液洗涤两次。
6:将细胞裂解物与制备的微珠在室温下孵育 1-2 小时或在 4°C 下过夜孵育。
7:用 IP 裂解/洗涤缓冲液洗涤微珠两次,然后用纯化水洗涤一次。
8:洗脱结合抗原。



Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒


规格

检测
亲和纯化
适用于(设备)
KingFisher™ Flex 磁颗粒物处理器、磁力架
形式
试剂盒
产品线
Pierce™
数量
1 个试剂盒
适用于(应用)
免疫沉淀(IP)
Target
无靶标特异性
类型
IP/Co-IP 试剂盒
足够用于
40 次反应
产品规格
试剂盒

内容与储存

足够用于:进行 40 次 IP 反应(使用 25 µL 微珠)
•Pierce 蛋白 A/G 磁珠,1 mL
• IP 裂解/洗涤缓冲液,2 x 50 mL
• 偶联缓冲液 (20X),25 mL
• DSS 交联剂,8 x 2 mg
• 泳道标志物样品缓冲液 (5X),5 mL
• 洗脱缓冲液,25 mL
• 中和缓冲液,1 mL
• 泳道标志物样品缓冲液 (5X),5 mL

在 4°C 下储存。在 4°C 下干燥储存 DSS。


Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠 分子生物试剂88831

Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠 分子生物试剂

  • 产品型号:  88831
  • 简单描述
  • Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠Thermo Scientific HisPur Ni-NTA 磁珠为高容量镍-IMAC 微珠,用于亲和纯化 His 标签融合蛋白(手动或自动模式)。
详细介绍

Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA 磁珠为高容量镍-IMAC 微珠,用于亲和纯化 His 标签融合蛋白(手动或自动模式)。

HisPur Ni-NTA 磁珠的特点:

高容量— 结合容量与其他供应商的 Ni-NTA 磁珠相当或高于后者
低非特异性结合— 对微珠表面进行预封闭,方案提供经优化的缓冲液用于纯化
快速— 方案可在 1 小时内完成
可扩展— 可处理微升至毫升级的样品体积
通用— 可在天然或变性条件下纯化蛋白
试剂兼容— 可与常见细胞裂解试剂和各种缓冲液添加剂配合使用
多种规格— 微珠偶联蛋白和下游应用可通过手动方式或在自动化平台(例如,Thermo Scientific KingFisher 仪器)上进行

封闭磁珠表面使用次氮基三乙酸 (NTA) 螯合基团进行衍生化,并带有二价镍离子 (Ni2+)。固定化金属亲和色谱 (IMAC) 微珠可提供高结合容量和极低的背景。HisPur Ni-NTA 磁珠可与磁力架配合用于手动操作,亦可用于自动化平台,如 Thermo Scientific KingFisher 仪器,以适应高通量需求。

HisPur Ni-NTA 用于重组 His 标签蛋白的小规模亲和纯化和高通量筛选。多聚组an酸标签是极为常用的亲和标签,通常由 6 个连续组an酸残基 (6xHis) 组成。这些标签蛋白在许多不同系统(极常见于细菌)中过表达,纯化自细胞裂解物(如使用 B-PER 细菌蛋白提取试剂所制备的细胞裂解物)。采用带有镍离子的 NTA 螯合物(与组an酸侧链相匹配)对 His 标签蛋白进行纯化。NTA 螯合物含有四个金属结合位点,可提供低金属离子浸出率和高结合容量。HisPur Ni-NTA 磁珠的实验方案已经过优化,以提供高纯度分离的 His 标签蛋白。性能与其他供应商所提供的 Ni-NTA 磁珠相当或高于后者。

Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠


规格

形式
液体
产品线
HisPur™
数量
2 mL
蛋白质形式
重组
Target
His
类型
磁珠
配基类型
镍-NTA

内容与储存

在 4°C 下储存


Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂 分子生物试剂88221

Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂 分子生物试剂

  • 产品型号:  88221
  • 简单描述
  • Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂Thermo Scientific HisPur Ni-NTA 树脂是高容量、高性能镍-IMAC 树脂,用于常规亲和纯化 His 标签融合蛋白。
详细介绍

Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA 树脂是高容量、高性能镍-IMAC 树脂,用于常规亲和纯化 His 标签融合蛋白。

HisPur Ni-NTA 树脂的特点:

高容量—每毫升树脂可结合高达 60 mg 的 6xHis-标签蛋白
• 通用—可在天然或变性条件下纯化蛋白
• 兼容—与 Thermo Scientific 细胞裂解试剂和各种缓冲液添加剂配合使用
• 高性价比—一批树脂可重复使用至少五次
• 易于使用—试剂盒规格提供预配制缓冲液
• 灵活—具有多种形式,包括散装树脂、离心柱、色谱纯化柱和 96 孔过滤板

特殊制备的支持物含有微珠状琼脂糖,使用次氮基三乙酸 (NTA) 螯合部分进行衍生化,并带有螯合二价镍离子 (Ni2+)。固定化金属亲和色谱 (IMAC) 树脂拥有用于重组 His 标签蛋白纯化的绝jia结合容量和性能。

重组蛋白的表达和纯化对于蛋白调节、结构和功能研究至关重要。大部分的重组蛋白都以短亲和标记的融合表达,zui流行的是聚组an酸(6xHis)标记。用于纯化重组 His 标签蛋白的方法是固定化金属亲和色谱 (IMAC),由带镍或钴离子的螯合树脂组成,镍或钴离子与组an酸侧链配位。

HisPur Ni-NTA 树脂能从细菌裂解物(如使用 Thermo Scientific B-PER 细菌蛋白提取试剂获得的裂解物)中有效纯化高水平过表达 His 标签融合蛋白。该树脂在各种容量的批连结和离心柱程序中表现很好。性能等同于或超过来自其他供应商的各种常用镍-NTA树脂。HisPur镍-NTA树脂是一种高品质、稳定而有弹性的亲和载体。各种试验证实在至少五次重复使用后,其性能不会降低。这些数据显示在正常使用中,该树脂能高度抵抗结构降解或镍离子浸出。

HisPur Ni-NTA 树脂和 HisPur 钴树脂是 IMAC 的替代形式,前者使用镍,后者使用钴作为负责 His-标签结合的螯合金属离子。由于其在螯合上的四个能高蛋白连结和低金属离子滤去的金属连结点,镍-NTA树脂已经成为6xHis标记蛋白纯化zui常用的IMAC树脂选择。钴连结不太强健,因此更有区分性,使其在 His 标签蛋白纯化中有更高的纯度但常常更低的得率。

可用形式:
树脂浆—交联 6% 微珠状琼脂糖;10 mL、100 mL、500 mL 瓶
离心柱— 0.2 mL(微量离心机)、1 mL 和 3 mL 离心柱
纯化试剂盒—所有三种柱规格的全套试剂盒



Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂


规格

容量(公制)
结合多达 60 mg 6xHis 标签蛋白/mL 树脂
描述
HisPur 镍-NTA树脂
形式
悬浮液
色谱柱类型
亲和,琼脂糖树脂
产品线
HisPur™
数量
10 mL
Target
His 标签蛋白
类型
树脂
固定相
二价镍、金属螯合物
产品规格
瓶装

内容与储存

在4°C条件下储存


Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖 分子生物试剂20421

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖 分子生物试剂

  • 产品型号:  20421
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖该 Thermo Scientific NAb 蛋白 A/G 离心试剂盒便于对各种样品类型中的抗体进行快速、小规模亲和纯化。每个试剂盒都包括足够用于纯化至少 2 份抗体样品的 NAb 蛋白 A/G 离心柱、收集管、缓冲液和简化方案
详细介绍

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖

该 Thermo Scientific NAb 蛋白 A/G 离心试剂盒便于对各种样品类型中的抗体进行快速、小规模亲和纯化。每个试剂盒都包括足够用于纯化至少 2 份抗体样品的 NAb 蛋白 A/G 离心柱、收集管、缓冲液和简化方案。

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖的特点:

蛋白 A/G – 蛋白 A 和蛋白 G 的抗体结合结构域的固定化重组融合蛋白可对几乎任何哺乳动物物种进行多克隆 IgG 纯化
• 琼脂糖树脂 – 支持物为交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B),这是蛋白亲和纯化方法的较常用树脂
• 惰性且稳定 – 优越的生产方法通过不带电荷的抗浸出性共价键固定蛋白 A/G,因此非特异性结合较低且能够多次使用而不降低得率
• 标准容量 – Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖包含正常上样量的固定化蛋白 A/G,提供大于 7 mg 人 IgG/mL 树脂的结合容量

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖包含已共价固定至高质量交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 上的纯化蛋白 A/G 重组融合蛋白。该特殊种类的树脂可提供通用的色谱特点组合,用于从哺乳动物血清样品中获得高得率的全 IgG 和对全 IgG 进行高纯度纯化。琼脂糖微珠的物理和化学特性适用于许多亲和纯化系统。

蛋白 A/G 是一种基因工程化蛋白,结合了蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 结合结构域。该融合蛋白在大肠杆菌中表达。蛋白A/G含有蛋白A的四个Fc结合结构域和蛋白G的两个Fc结合结构域,最终分子量为50,460道尔顿(SDS-PAGE中测得为40至45kDa)。蛋白 A/G 的 pH 值依赖性低于单独的蛋白 A,但具备蛋白 A 和 G 的累加特性。

蛋白 A/G 可与所有的人 IgG 亚类结合,因此是用于纯化尚未确定亚类的多克隆或单克隆 IgG 抗体的理想选择。此外,它还可结合IgA、IgE、IgM和IgD(后者结合力较弱)。蛋白A/G还可与小鼠所有IgG亚类结合,但不结合小鼠IgA、IgM或血清白蛋白。因此,蛋白A/G是纯化和检测小鼠IgG各亚类单克隆抗体的选择,避免了IgA、IgM和小鼠血清白蛋白的干扰。小鼠单克隆的个别亚类与嵌合蛋白 A/G 的亲和力很可能强于与蛋白 A 或蛋白 G 的亲和力。


Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶联化学法制备,该方法与传统配体固定方法相比具有多项优势。AminoLink 固定后,琼脂糖珠的糖单体与蛋白 A 上的天然赖氨酸残基通过简单的酰胺键结合。与典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化学基团,从而避免了可能导致的非特异性结合,并且形成基本不可逆的稳定结合。所得的高结合能力树脂在多轮抗体纯化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 A/G。

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖可结合血清、腹水、细胞培养上清液和其他抗体样品中几乎所有同种型和哺乳动物物种的 IgG,从而实现高效抗体纯化。由于固定化蛋白 A/G 结合了蛋白 A 和蛋白 G 的免疫球蛋白结合结构域,该树脂可有效进行多种哺乳动物宿主物种中 IgG 抗体的亲和纯化。

交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 的特性:
•支持 pH 值稳定性:2 至 14(短期);3 至 13(长期)
• 平均粒径:45 至 165 微米
• 排阻极限:10,000至4,000,000 道尔顿
•体积流速:约1 mL/分钟(对于1 cm 直径柱)
•线性速度:30 cm/h
• 压力:低于 25psi (1.5 bar);定义为树脂可承受的跨色谱柱压降(注:液相色谱装置的指示表压可能测量的是总系统压力,而不是跨色谱柱压降。)


Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖


规格

描述
Pierce蛋白A/G琼脂糖
纯化目标
IgG 抗体
数量
3 mL
色谱柱类型
琼脂糖树脂,亲和
产品规格
瓶装
产品线
Pierce™
产品类型
琼脂糖
固定相
蛋白 A/G

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存产品。产品使用湿冰袋运输。


Thermo Pierce™ 链酶亲和素包被磁珠 88816

Thermo Pierce™ 链酶亲和素包被磁珠

  • 产品型号:  88816
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ 链酶亲和素包被磁珠Thermo Scientific Pierce链霉亲和素磁珠可提高生物su化分子的自动化磁性纯化效率。
详细介绍

Thermo Pierce™ 链酶亲和素包被磁珠

Thermo Scientific Pierce链霉亲和素磁珠可提高生物su化分子的自动化磁性纯化效率。

链霉亲和素磁珠的特点:

• 高性能—无聚集、预封闭的超顺磁氧化铁微粒可为自动化高通量处理和手动操作提供超乎寻常的一致性
• 稳定的交联技术—通过抗漏交联技术对链霉亲和素进行固化处理
• 高结合能力—具有高结合能力,可对复杂样品中的生物分子快速进行高效纯化
• 低非特异性结合—稳定的预封闭磁珠,可获得高纯度的产物(例如IP实验中使用生物su化抗体洗脱的抗原),适用于质谱分析和其他下游分析应用
• 优异性能—结合能力是其他品牌磁珠产品的三倍左右,单次实验用量更低

应用:
• 使用生物su化抗体对多种来源的抗原进行免疫沉淀
• 使用生物su化抗体对互作复合物进行免疫沉淀
• 使用生物su化“诱饵”蛋白在Pull-Down实验中捕获蛋白互作物
• 从细胞或组织提取物中分离生物su标记的DNA-蛋白质复合物
• 捕获单链生物su化DNA寡核苷酸
• 分离生物su化PCR产物

Pierce链霉亲和素磁珠经过验证及优化,可用于高通量磁性平台,例如Thermo Scientific KingFisher 96及KingFisher Flex仪器等,另外还可使用合适的磁力架为简单的实验室手动操作提供更出色的性能。这种超顺磁氧化铁微粒比其他品牌的磁珠性能更出色(高结合能力及低非特异性结合)。

Pierce链霉亲和素磁珠使用了一种重组链霉亲和素,质量为53kDa,等电点(pI)接近中性。蛋白质是一种拥有4个生物su结合位点的四聚物。与亲和素不同,链霉亲和素不含糖基,因此,非特异性结合率非常低。链霉亲和素与生物su之间的高亲和结合只有在非常严苛的条件下才会被破坏,例如在SDS-PAGE上样缓冲液中,或者pH 1.5的8M的胍·HCl中煮沸。因此,通常在洗脱互作复合物中的捕获蛋白时,不会同时洗脱生物su化诱饵蛋白。


Thermo Pierce™ 链酶亲和素包被磁珠


规格

形式
液体
产品线
Pierce™
数量
1 mL
蛋白质形式
重组
Target
生物su
类型
磁珠
配基类型
链霉亲和素

内容与储存

接收后,储存在 4°C 下。产品置于冰袋上运输。


Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 磁珠 88802

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 磁珠

  • 产品型号:  88802
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 磁珠Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠是一种高性能亲和微粒,可用于抗体纯化和免疫沉淀方法(使用手动或自动磁性分离器)
详细介绍

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 磁珠

Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠是一种高性能亲和微粒,可用于抗体纯化和免疫沉淀方法(使用手动或自动磁性分离器)。

蛋白 A/G 磁珠的特点:

高容量— 结合容量几乎是其他供应商的典型磁珠的 4 倍,每次实验的样品用量更少
低非特异性结合— 稳定的预封闭磁珠可提供洁净的纯化产物(例如,抗体 IP 中洗脱的抗原中不含来自复合物 IP 基质的污染性蛋白)
灵活性— 一个磁珠上同时含有蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 结合结构域,非常便利
兼容性— 磁珠兼容手动和自动化应用(例如,Thermo Scientific KingFisher 仪器)
检测一致性— 磁珠可消除树脂损耗,与仅使用微量离心管的传统 IP 方法相比,分离效率更高

这些磁珠包被经基因工程改造的 Pierce 蛋白 A/G,这是一种同时含有蛋白 A 及蛋白 G 的 IgG 结合结构域的重组融合蛋白,与单独使用蛋白 A 或者蛋白 G 相比,可从更广泛的物种和同种型范围中捕获抗体。使用我们的化学交联剂,您可以将抗体固定到磁粒子上,避免免疫沉淀样品受到 IgG 污染。这些微珠可与磁力架配合用于手工操作,亦可用于自动化平台(如 Thermo Scientific KingFisher 仪器)。

应用:
• IP 和 Co-IP 实验(参见全套试剂盒)
•用于非还原条件下分析的免疫沉淀
• 抗体纯化

Pierce 磁珠上固定的重组蛋白 A/G 由蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 结合结构域相融合而成。蛋白 A/G 包含蛋白 A 的四个 Fc 结合结构域及蛋白 G 的两个 Fc 结合结构域,使其成为研究及纯化免疫球蛋白的便利工具。因此,Pierce 磁粒子并不是简单地将蛋白 A 及蛋白 G 多肽进行混合后固定,更不是蛋白 A 磁珠与蛋白 G 磁珠的混合物。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 磁珠


规格

形式
液体
产品线
Pierce™
数量
1 mL
蛋白质形式
重组
Target
抗体
类型
磁珠
配基类型
蛋白 A/G

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存。产品在冰袋上运输。