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平末端/TA 连接酶预混液 货 号 #M0367LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

平末端/TA 连接酶预混液                              收藏

平末端/TA 连接酶预混液 货 号 #M0367L 平末端/TA 连接酶预混液 货 号 #M0367L 平末端/TA 连接酶预混液 货 号 #M0367L 平末端/TA 连接酶预混液 货 号 #M0367L

货 号
规 格
价 格(元)
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上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#M0367L
250 次反应
4,839.00
有
有
有
有
无

#M0367S
50 次反应
1,219.00
有
有
有
有
有

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特性

 连接平末端
 T/A 克隆
 dsDNA 切刻修复
 构建高丰度克隆文库
 连接粘性末端 

概述

平末端/TA 连接酶预混液是一种即用型 2X 预混液，内含 T4 DNA 连接酶、专属连接增强剂和经过优化的缓冲液。该预混液是专门为提高平末端和单碱基突出末端的连接和转化效率而设计，并简化了建立反应所需步骤，优化了酶和缓冲液的最佳比例，以确保稳定、高效的连接，室温下即可快速连接所有末端类型的 DNA。因为该预混液在 -20℃ 储存时为液体状态，所以使用时无需解冻。此外，即使当 DNA 量少且浓度低时仍可进行亚克隆连接，为用户节约宝贵的 DNA 样品，且无需稀释直接转化到多种化学感受态大肠杆菌中。 

来源

纯化自重组 E. coli 菌株，含有编码 T4 DNA 连接酶的基因。 

反应条件

在 10 μl 的反应体系中加入 1X 平末端/TA 连接酶预混液和 DNA 底物，25℃ 温育。10 μl 反应体系中包含 1,800 个 T4 DNA 连接酶粘性末端单位。 

质保声明

该产品经过严格的质量控制检测，以确保最高的纯度和反应效率。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

注意事项

该预混液在 -20℃ 储存时为液体状态。-70℃ 保存时，反复冻融 20 次后，检测反应效率无明显变化。 

Mighty TA-cloning Kit酶试剂盒Takara

发表于由

Mighty TA-cloning Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6028 Mighty TA-cloning Kit 20 Rxns ￥801
￥601 		Mighty TA-cloning Kit Mighty TA-cloning Kit Mighty TA-cloning Kit

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Mighty TA-cloning Kit
Mighty TA-cloning Kit  
Mighty TA-cloning Kit
 
 
■ 制品内容 (20 次量)
pMD20-T vector (50 ng/μl) 1 μg (20 μl)
Ligation Mighty Mix*1 50 μl × 2
Positive Control Insert*2 10 μl
   
*1: Ligation Mighty Mix与DNA Ligation Kit<Mighty Mix> (Code No.: 6023) 是同一种试剂。
*2: 3’端带有“A”突出端的DNA片段 (约200 bp)。 (以E.coli 基因组DNA为模板，使用TaKaRa Ex Taq 进行PCR反应得到的扩增产物。)(10 ng/μl)
 
■ 制品说明
使用Taq DNA聚合酶进行PCR反应，扩增获得的PCR产物3’端附有一个“A” 碱基。利用3’端附有“A” 碱基的PCR产物进行克隆时，与含有3’-T末端的载体通过T-A碱基互补配对原则进行克隆，此种方法被称为T-A克隆。
Mighty TA-cloning Kit是在短时间内快速地将PCR产物进行T-A克隆的试剂盒。连接反应使用DNA Ligation Kit<Mighty Mix>，操作简便，可在短时间内高效地进行连接反应。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 使用注意事项
1. Ligation Mighty Mix在冰上融解，轻轻混合后再使用。
2. 长片段PCR产物（2 kb以上）进行DNA克隆时，连接反应时间请延长至数小时。
3. 克隆时，根据插入片段的长度和方向，有时即使插入了DNA片段也会有不出现终止密码或读码框不改变的情况发生，在蓝白选择培养基上会形成淡蓝色菌落。出现这种现象时，建议进行菌落PCR确认插入片段。
4. 进行切胶回收纯化DNA片段时要避免UV照射时间过长。长时间照射，DNA会受到损伤，影响克隆效率。
5. PCR用质粒模板与克隆载体 (pMD20-T vector；具有Ampr) 有同样的选择标记基因时，为防止出现质粒模板自身的转化菌落，将PCR反应液凝胶电泳后回收目的片段，纯化后再进行克隆。
 
 

页面更新：2022-07-27 15:04:22