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C16H17N2NaO9S
436.37
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C18H22N3NaO8S3
527.57
关联产品
实验工具|稀释计算器|摩尔浓度计算器
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分子式：
C19H27N4NaO9S4
分子量：
606.69
关联产品
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试剂盒内含
产品概述
水溶性活性酯型生物素化试剂：使用生物素（AC5）2Sulfo-OSu用于生物素标记蛋白质游离氨基的试剂盒。它带有用于标记的LVDS3缓冲粉，用于凝胶过滤的柱和用于柱洗脱的PBS片剂，可以纯化标记的蛋白。由于是单次注射型（10毫克x4瓶），因此可以标记4种不同类型的蛋白质。可以通过改变添加的生物素-（AC5）2 Sulfo-OSu的量来控制标记率。
*标记蛋白的量为1-5 mg。
原理
操作步骤
使用注意事项:
1. 本试剂盒请在0-5 ℃储存。
2. Biotin-(AC5)2Sulfo-OSu溶液需要现配现用 (由于Biotin-(AC5)2Sulfo-OSu易水解，尽量避免在水溶液的状态保存)。
3. 标记好的蛋白质请在0-5 ℃保存 (加入0.1%的叠氮钠等防腐剂)。
使用步骤:
1. 配制溶液
1) NaHCO3缓冲液
在含有NaHCO3粉末的容器中加入10ml超纯水溶解。
2) PBS缓冲液
在100ml容量瓶中加入1片PBS，先用少量超纯水溶解后，再用超纯水补充至100ml，制成10mmol/l的PBS缓冲液。
3) 蛋白质溶液
在样品管中精确称量1.0-5.0mg蛋白质并记录称量值后，用移液器加入500μl操作步骤1)中的NaHCO3缓冲液。盖上盖子后，用漩涡振荡器等搅拌溶解蛋白质。
4) Biotin-(AC5)2Sulfo-OSu溶液
在1支含有Biotin-(AC5)2Sulfo-OSu的管子中加入适量纯水溶解。为了控制标记率，根据不同的标记对象，请参考表1调整Biotin-(AC5)2Sulfo-OSu溶液的浓度及加入量。
＊由于Biotin-(AC5)2Sulfo-OSu易水解，溶解后请尽快标记。
2. 生物素标记操作方法
1) 请参考表1在配制好的蛋白质溶液中加入合适浓度和用量的Biotin-(AC5)2Sulfo-OSu溶液。
2) 盖紧盖子充分混合后，在25 ℃水浴恒温摇床中培养2h。
表1 Biotin-(AC5)2Sulfo-OSu标记各种蛋白质的标记率
以上数据为本公司实际检测的结果，如实验条件变动，
结果有可能改变。标记率是根据HABA法测得。
a) 1mol蛋白质：生物素的摩尔数
b) 1mol蛋白质上所结合的生物素的摩尔数
3. 蛋白质标记后的凝胶过滤纯化
1) 打开层析柱上的盖子，弃去填充液。
2) 打开层析柱出口的盖子，用PBS分数次洗脱，每根层析柱收集大约10ml的洗脱液，使凝胶平衡。
3) 用移液器吸取500μl标记好的蛋白质溶液加入到层析柱中，弃去此时的流出液。
4) 在层析柱的出口处放置一个2ml的样品管，在层析柱中加入1ml PBS，收集流出的生物素标记蛋白质。
＊经过层析，生物素标记蛋白质的最终浓度为标记时的1/2。
按照下列公式计算生物素标记蛋白质的最终浓度：
A (mol/l) = (X/MWprotein) × (1,000/Y) × 0.5
X：蛋白质的重量
MWprotein：蛋白质的分子量
Y：溶解蛋白质的NaHCO3缓冲液体积
常见问题Q&A
| Q1:如何存储标记的蛋白质？ |
| A:将标记的蛋白质存放在冰箱中。另外，添加0.1％叠氮化钠作为防腐剂。 |
| Q2:生物素标记试剂在水溶液中稳定吗？ |
| A:试剂盒中使用的生物素-（AC5）2 Slufo-OSu处于水溶液中时，由于它会水解，因此无法存储在水溶液中。使用前请做好准备。另外，即使在粉末状态下，也要注意由于吸湿引起的劣化。 |
参考文献
| 1) J. Wormmeester, F. Stiekema and C. Groot, “Immunoselective Cell Separation”, Methods Enzymol., 1990, 184, 314. |
| 2) J. J. Leary and D. J. Ward, “Rapid and Sensitive Colorimetric Method for Visualizing Biotin-labeled DNA Probes Hybridized to DNA or RNA Immoilized on Nitrocelulose: Bio-blots”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1983, 80, 4045. |
| 3) W. T. Lee and D. H. Conrad, “The Murine Lymphocyte Receptor for IgE II. Characterization of the Multvalent Nature of the B Lymphocyte Receptor for IgE”, J. Exp. Med., 1984, 159, 1790. |
| 4) D. R. Gretch, M. Suter and M. F. Stinski, “The Use of Biotinylated Monoclonal Antibodies and Streptavidin Affinity Chromatography to Isolate Herpesvirus Hydorophobic Proteins or Glycoproteins”, Anal. Biochem., 1987, 163, 270. |
| 5) M. Shimkus, J. Levy and T. Herman, “A Chemically Cleavable Biotinylated Nucleotide: Usefulness in the Recovery of Protein-DNA Complexes from Avidin Affinity Columns”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1985, 82, 2593. |
| 6) W. J. LaRochelle and S. C. Froehner, “Immunodhemical Detection of Proteins Biotinylated on Nitrocellulose Replicas”, J. Immunol. Methods, 1986, 92, 65. |
| 7) P. S. Anjaneyulu and J. V. Staros,”Reactions of N-hydroxysulfosuccinimide Active Esters”, Int. J. Pept. Protein Res., 1987, 30, 117. |
| 8) H. M. Ingalls, C. M. Goodloe-Holland and E. J. Luna,”Junctional Plasma Membrane Domains Isolated from Aggregating Dictyostelium Discoideum Amebae”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1986, 83, 4779. |
| 9) J. Guesdon, T. Ternyck and S. Avrameas,”The Use of Avidin-Biotin Interaction in Immunoenzymatic Techniques”, J. Histochem. Cytochem., 1979, 27, 1131. |
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Sulfo-AC5-SPDP试剂 S359 IgG纯化分离
蛋白抗体标记
品名货号用途
| Sulfo-AC5-SPDP试剂 | S359 | IgG纯化分离 |
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Biotinylation Kit (Sulfo-OSu)
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 1 set | ￥46,900 | 346-90621 |
| サンプル量 | 1-5 mg |
|---|---|
| 所要時間 | 2時間 |
| 標識部位 | -NH2 |
| 検出方法 | 顕微鏡・FCM・ウエスタンブロット・プレートリーダー |
|
実験目的から選べる 最適な抗体標識キット
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|---|
|
詳しい操作方法は「はじめての抗体標識プロトコル」へ
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|---|
| 1 set | [4回用] ・Biotin-(AC5)2 Sulfo-OSu ・Sodium Bicarbonate Powder ・PBS Tablet ・Gel Filtration Column ・Sample Tube |
x 4 x 4 x 4 x 4 x 8 |
|---|
日本語 
English ビオチンを標識したい ・10 μL, 200 μL及び1 mLマイクロピペッター ・インキュベーター(25℃) ・ボルテックスミキサー
1) J. Wormmeester, F. Stiekema and C. Groot, "Immunoselective Cell Separation", Methods Enzymol., 1990, 184, 314.
2) J. J. Leary and D. J. Ward, "Rapid and Sensitive Colorimetric Method for Visualizing Biotin-labeled DNA Probes Hybridized to DNA or RNA Immoilized on Nitrocelulose: Bio-blots", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1983, 80, 4045.
3) W. T. Lee and D. H. Conrad, "The Murine Lymphocyte Receptor for IgE II. Characterization of the Multvalent Nature of the B Lymphocyte Receptor for IgE", J. Exp. Med., 1984, 159, 1790.
4) D. R. Gretch, M. Suter and M. F. Stinski, "The Use of Biotinylated Monoclonal Antibodies and Streptavidin Affinity Chromatography to Isolate Herpesvirus Hydorophobic Proteins or Glycoproteins", Anal. Biochem., 1987, 163, 270.
5) M. Shimkus, J. Levy and T. Herman, "A Chemically Cleavable Biotinylated Nucleotide: Usefulness in the Recovery of Protein-DNA Complexes from Avidin Affinity Columns", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1985, 82, 2593.
6) W. J. LaRochelle and S. C. Froehner, "Immunodhemical Detection of Proteins Biotinylated on Nitrocellulose Replicas", J. Immunol. Methods, 1986, 92, 65.
7) P. S. Anjaneyulu and J. V. Staros,"Reactions of N-hydroxysulfosuccinimide Active Esters", Int. J. Pept. Protein Res., 1987, 30, 117.
8) H. M. Ingalls, C. M. Goodloe-Holland and E. J. Luna,"Junctional Plasma Membrane Domains Isolated from Aggregating Dictyostelium Discoideum Amebae", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1986, 83, 4779.
9) J. Guesdon, T. Ternyck and S. Avrameas,"The Use of Avidin-Biotin Interaction in Immunoenzymatic Techniques", J. Histochem. Cytochem., 1979, 27, 1131.
ラベル化したタンパク質の保存方法を教えて下さい。
ラベル化したタンパク質は冷蔵で保存して下さい。
また、防腐剤として0.1%のアジ化ナトリウムを添加して下さい。
ビオチンラベル化剤は溶液で安定ですか？
キットに使用しておりますBiotin-(AC5)2 Slufo-OSuは水溶液中で
加水分解を起こしますので、水溶液での保存は出来ません。
用時調製を行なってご使用下さい。
また、粉末状態でも吸湿による劣化にご注意下さい。
| 保存条件: 冷蔵 |
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Sulfo-EMCS
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 50 mg | ￥38,300 | 340-06011 |
日本語 抗体に標識したい(架橋剤) タンパク質架橋剤・ラベル化剤 20 mg/mL（水）
1) J. V. Staros, "N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters:Bis(N-hydroxysulfosuccinimide) Esters of Two Dicarboxylic acids Are Hydrophilic, Membrane-impermeant, Protein Cross-linkers", Biochemistry, 1982, 21, 3950.
2) P. S. R. Anjaneyulu and James V. Staros, "Reactions of N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters", Int. J. Peptide Protein Res., 1987, 30, 117.
3) Y. Fukami, K. Sato, K. Ikeda, K. Kamisango, K. Koizumi and T. Matsuno, "Evidence for Autoinhibitory Regulation of the c-src Gene Product a Possible Interaction Between the Src Homology 2 Domain and Autophosphorylation Site", J. Biol. Chem., 1993, 268, 1132.
| 性状： | 本品は、白色～微黄桃色粉末で水に溶ける。 |
|---|---|
| 純度(HPLC)： | 90.0％ 以上 |
| 水溶状： | 試験適合 |
| IRスペクトル： | 試験適合 |
| NMRスペクトル： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷蔵 |
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Sulfo-GMBS
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 50 mg | ￥38,300 | 347-06021 |
日本語 抗体に標識したい(架橋剤) タンパク質架橋剤・ラベル化剤 20 mg/mL（水）
1) J. V. Staros, "N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters:Bis(N-hydroxysulfosuccinimide) Esters of Two Dicarboxylic acids Are Hydrophilic, Membrane-impermeant, Protein Cross-linkers", Biochemistry, 1982, 21, 3950.
2) P. S. R. Anjaneyulu and James V. Staros, "Reactions of N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters", Int. J. Peptide Protein Res., 1987, 30, 117.
3) Y. Fukami, K. Sato, K. Ikeda, K. Kamisango, K. Koizumi and T. Matsuno, "Evidence for Autoinhibitory Regulation of the c-src Gene Product a Possible Interaction Between the Src Homology 2 Domain and Autophosphorylation Site", J. Biol. Chem., 1993, 268, 1132
| 性状： | 本品は、白色～微黄桃色粉末で水に溶ける。 |
|---|---|
| 純度(HPLC)： | 90.0％ 以上 |
| 水溶状： | 試験適合 |
| IRスペクトル： | 試験適合 |
| NMRスペクトル： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷蔵 |
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Sulfo-HMCS
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 50 mg | ￥40,500 | 341-06041 |
日本語 抗体に標識したい(架橋剤) タンパク質架橋剤・ラベル化剤 20 mg/mL（水）
1) J. V. Staros, "N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters:Bis(N-hydroxysulfosuccinimide) Esters of Two Dicarboxylic acids Are Hydrophilic, Membrane-impermeant, Protein Cross-linkers", Biochemistry, 1982, 21, 3950.
2) P. S. R. Anjaneyulu and James V. Staros, "Reactions of N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters", Int. J. Peptide Protein Res., 1987, 30, 117.
3) Y. Fukami, K. Sato, K. Ikeda, K. Kamisango, K. Koizumi and T. Matsuno, "Evidence for Autoinhibitory Regulation of the c-src Gene Product a Possible Interaction Between the Src Homology 2 Domain and Autophosphorylation Site", J. Biol. Chem., 1993, 268, 1132.
| 性状： | 本品は、白色～微黄桃色粉末で水に溶ける。 |
|---|---|
| 純度(HPLC)： | 90.0％ 以上 |
| 水溶状： | 試験適合 |
| IRスペクトル： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷蔵 |
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Sulfo-KMUS
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 50 mg | ￥40,500 | 342-06211 |
日本語 抗体に標識したい(架橋剤) タンパク質架橋剤・ラベル化剤 1 mg/mL（水）
1) J. V. Staros, "N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters:Bis(N-hydroxysulfosuccinimide) Esters of Two Dicarboxylic acids Are Hydrophilic, Membrane-impermeant, Protein Cross-linkers", Biochemistry, 1982, 21, 3950.
2) P. S. R. Anjaneyulu and James V. Staros, "Reactions of N-Hydroxysulfosuccinimide Active Esters", Int. J. Peptide Protein Res., 1987, 30, 117.
3) Y. Fukami, K. Sato, K. Ikeda, K. Kamisango, K. Koizumi and T. Matsuno, "Evidence for Autoinhibitory Regulation of the c-src Gene Product a Possible Interaction Between the Src Homology 2 Domain and Autophosphorylation Site", J. Biol. Chem., 1993, 268, 1132.
| 性状： | 本品は、白色～微黄桃色粉末で水に溶ける。 |
|---|---|
| 純度(HPLC)： | 90.0％ 以上 |
| 水溶状： | 試験適合 |
| IRスペクトル： | 試験適合 |
| NMRスペクトル： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷蔵 |
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Sulfo-SMCC
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 50 mg | ￥32,300 | 349-09141 |
日本語 タンパク質架橋剤・ラベル化剤 10 mg/mL（水）
1) 酵素免疫測定法（第2版）, 石川榮治, 河合忠, 宮井潔, 医学書院, 1978
2) S. Hashida, M. Imagawa, S. Inoue, K.-H. Ruan and E. Ishikawa, "More Useful Maleimide Compounds for the Conjugation of Fab' to Horseradish Peroxidase Through Thiol Groups in the Hinge", J. Appl. Biochem., 1984, 6, 56.
3) O. Prat, E. Lopez and G. Mathis, "Europium(III) Cryptate: A Fluorescent Label for the Detection of DNA Hybrids on Solid Support", Anal. Biochem., 1991, 195(2), 283.
4) O. Siiman, A. Burshteyn, J. A. Maples and J. K. Whitesell, "Tris(3-mercaptopropyl)-N-glycylaminomethane as a New Linker to Bridge Antibody with Metal Particles for Biological Cell Separations", Bioconjugate Chem., 2000, 11(4), 549.
5) T. P. Thomas, A. K. Patri, A. Myc, M. T. Myaing, J. Y. Ye, T. B. Norris and J. R. Baker Jr., "In Vitro Targeting of Synthesized Antibody-conjugated Dendrimer Nanoparticles", Biomacromolecules, 2004, 5(6), 2269.
6) V. Gauvreau, G. Laroche, "Micropattern Printing of Adhesion, Spreading, and Migration Peptides on Poly(tetrafluoroethylene) Films to Promote Endothelialization", Bioconjugate Chem., 2005, 16(5), 1088.
| 性状： | 本品は、白色～殆ど白色粉末で水に溶ける。 |
|---|---|
| 純度(HPLC)： | 90.0％ 以上 |
| 水溶状： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷凍 , 取扱条件: 吸湿注意 |
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Sulfo-AC5-SPDP
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 50 mg | ￥77,200 | 346-09151 |
タンパク質架橋剤・ラベル化剤 95 mg/mL（水）
1) A. K. Patri, A. Myc, J. Beals, T. P. Thomas, N. H. Bander and J. R. Baker, Jr., "Synthesis and in vitro Testing of J591 Antibody-dendrimer Conjugates for Targeted Prostate Cancer Therapy", Bioconjugate Chem., 2004, 15(6), 1174.
2) N. W. S. Kam, Z. Liu and H. Dai, "Functionalization of Carbon Nanotubes via Cleavable Disulfide Bonds for Efficient Intracellular Delivery of siRNA and Potent Gene Silencing", J. Am. Chem.Soc.,2005, 127(36), 12492.
3) A. M. Derfus, A. A. Chen, D-H. Min, E. Ruoslahti and S. N. Bhatia, "Targeted Quantum Dot Conjugates for siRNA Delivery", Bioconjugate Chem., 2007, 18(5), 1391.
4) M. Ghasemi, M. Minier, M. Tatoulian and F. Arefi-Khonsari, "Determination of Amine and Aldehyde Surface Densities: Application to the Study of Aged Plasma Treated Polyethylene Films", Langmuir, 2007, 23(23), 11554.
5) C. L. Waite and C. M. Roth, "PAMAM-RGD Conjugates Enhance siRNA Delivery Through a Multicellular Spheroid Model of Malignant Glioma", Bioconjugate Chem., 2009, 20(10), 1908.
6) R. Xu, M. Fisher and R. L. Juliano, "Targeted Albumin-Based Nanoparticles for Delivery of Amphipathic Drugs",
Bioconjugate Chem., 2011, 22(5), 870.
| 性状： | 本品は、白色～殆ど白色粉末で水に溶ける。 |
|---|---|
| 純度(HPLC)： | 90.0％ 以上 |
| 水溶状： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷凍 , 取扱条件: 吸湿注意 |
