◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的仪器 Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) ◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的仪器 Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific) ◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的仪器 Thermal Cycler Dice Real Time System系列 LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics) CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
■ 制品说明
本制品是采用探针法进行1 Step Real Time RT-PCR的专用premix试剂。本制品将反转录酶和PCR酶及反应用buffer预先配制成premix形式，由于RT-PCR反应在单个反应管中连续进行，因而，操作更简便，同时降低了污染的风险。反转录酶采用了耐热性高的PrimeScript III RTase，且即使在反应阻害物存在的情况下也能够有效合成cDNA。此外，使用该试剂，也可以实现多个反应同时进行的多重qPCR。为防止PCR反应时的【carryover contamination】，可以使用添加有UNG的One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG (Code No. RR601A/B)。通过使用该制品，能够更简便、准确地实现RNA/DNA病毒的快速检出及mRNA的表达分析。
本制品适用于Takara公司Thermal Cycler Dice Real Time System仪器，已确认以下Real Time PCR仪器都适用。 · Thermal Cycler Dice Real Time System III（Code No. TP950/TP970/TP980/TP990） · Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific） · LightCycler 96 System（Roche Diagnostics） · CFX96 Real-Time PCR Detection System（Bio-Rad）等
注：采用嵌合荧光法（TB Green）进行1 Step Real Time RT-PCR时， 请使用：One Step TB Green PrimeScript PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time)（Code No. RR096A） 或：One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)（Code No. RR086A）。
One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
品牌
Code No.
产品名称
包装量
价格（元）
说明书
数量
Takara
RR064A
One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
100 Rxns
￥2,399 ￥1,200
Takara
RR064B (A × 5)
One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
100 Rxns × 5
￥10,797 ￥5,399
*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日
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■ 制品内容 (Code No.: RR064A: 50 μl反应×100次)
2X One Step RT-PCR Buffer Ⅲ*1
840 μl × 3 支
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/ μl)
100 μl
PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ*2
100 μl
RNase Free dH2O
1.25 m l × 2 支
ROX Reference Dye (50X)*3
100 μl
ROX Reference Dye II (50X)*3
100 μl
*1 内含dNTP Mixture，Mg2+等。 *2 内含RNase Inhibitor。 *3 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye（50X），7500 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II（50X），Thermal Cycler Dice Real Time System和Smart Cycler System、LightCycler等Real Time PCR扩增仪不必使用。
■ 制品说明
本制品是采用探针法进行Real Time One Step RT-PCR的专用试剂。使用本制品进行Real Time RT-PCR反应可在同一反应管内连续进行，操作简单，并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时监测，大大提高了检测灵敏度，并省略了PCR反应后的电泳步骤，非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。 本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase和具有高扩增效率和高扩增特异性的TaKaRa Ex Taq HS，能进行稳定高效的Real Time One Step RT-PCR反应。
■ 保存
-20℃。
■ 试剂盒特长
1. 通过Real Time One Step RT-PCR反应，可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA 进行分析。 2. PCR用DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS，可以进行Hot Start法PCR 反应，再与Takara特别开发的Buffer系统相结合，具有高扩增效率，高扩增灵敏度，高扩增特异性之特点。 3. One Step RT-PCR Buffer III是一种2X浓度的Premix Type试剂，操作简单，能有效避免污染。
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step RT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、各种酶等)，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。 2. 使用TaKaRa Ex Taq HS、PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ时，应轻轻混匀，避免起泡；分取之前要小心地离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。 3. 2X One Step RT-PCR Buffer Ⅲ 融解后如有不溶物请充分混合。配制Real Time One Step RT-PCR反应液时应避免强光照射。 4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等，尽量避免污染。 5. 本制品只能使用特异性反转录引物，不能使用Random Primer 和Oligo dT Primer 等进行反转录反应。
