RNAiso for Small RNA酶试剂盒Takara


RNAiso for Small RNA
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RNAiso for Small RNA  
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 9753A)RNAiso for Small RNA
RNAiso for Small RNA* 100 ml
* 含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
 
■ 制品说明
RNAiso for Small RNA是广谱型Small RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。
本制品可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中直接提取Small RNA (20-200 nt):包括tRNA、5S rRNA、5.8S rRNA、microRNA (miRNA) 和 siRNA。样品在RNAiso for Small RNA中能够被充分裂解,在加入氯仿离心后,溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层),只有Small RNA分布在上清层中,收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到 Small RNA。
RNAiso for Small RNA具有以下特性:
1. 广谱性强。可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取Small RNA。
2. 纯度佳。经本制品提取的Small RNA纯度高,基本可以除去28S和18S大片段RNA、蛋白质及基因组DNA。提取的Small RNA适用于Northern blot analysis、Quantitative、Real Time RT-PCR、Microarray analysis等分子生物学实验。
3. 快速简便。实验操作快速方便,整个操作在一小时内便可完成。
4. 颜色鲜明。加入氯仿离心后,会形成无色的上清层和鲜红色的下层 (有机层)。
 
■ 保存
1. 可以在室温下保存,建议在2-8℃下避光保存,效果更佳。
2. 可以在常温下运输。
 
■ Small RNA提取操作流程简图
RNAiso for Small RNA
 
 

页面更新:2020-08-07 13:29:17

Small RNA Cloning Kit酶试剂盒Takara


Small RNA Cloning Kit
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Takara RR065 Small RNA Cloning Kit 10 Rxns ¥3,655 Small RNA Cloning Kit Small RNA Cloning Kit Small RNA Cloning Kit
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Small RNA Cloning Kit  
 
 
■ 制品内容 (10 次量)
□ Package1 (-20℃保存)  
RNase Inhibitor (40 U/μl) 50 μl
10X BAP Buffer 200 μl
Alkaline Phosphatase (BAP) (0.4 U/μl) 20 μl
0.1%BSA 60 μl
3’Adaptor*1*2 10 μl
T4 RNA Ligation Buffer 600 μl
T4 RNA Ligase (40 U/μl) 20 μl
5X T4 PNK Buffer 100 μl
T4 Polynucleotide Kinase (T4 PNK) (10 U/μl) 10 μl
5’Adaptor*1 10 μl
5X RT Buffer 40 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each) 90 μl
PCR-R & RT-Primer (50 pmol/μl)*1*3 20 μl
RTase (RNaseH free) (200 U/μl) 10 μl
2X PCR Buffer 250 μl
PCR Primer F (50 pmol/μl)*1 10 μl
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) 10 μl
Control RNA (5 pmol/μl)*4 10 μl
□ Package2 (4℃保存)  
3M Sodium Acetate (pH 5.2) 200 μl
Dr.GenTLE Precipitation Carrier*5 80 μl
2X B/W Buffer 2.7 ml
Magnosphere MS300/Streptavidin 100 μl
RNase free dH2O 10 ml
 
*1 3’Adaptor、5’Adaptor、PCR Primer F及PCR-R、RT-Primer上都带有Sse8387Ⅰ酶切位点,使用Sse8387Ⅰ酶切后的PCR产物可以与Pst I酶切的载体进行连接克隆。本试剂盒中不备有限制酶和克隆用载体,请另外准备。
*2 3’Adaptor已用生物素标记。
*3 PCR用的Reverse Primer,也可以作为反转录引物使用。
*4 Control RNA是一条21mer、5’端磷酸化的RNA。
*5 Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094)。
 
 
■ 制品说明
近几年的研究表明,在细胞内发现的RNA中有许多是非编码RNA,它们有着重要的功能,这些RNA被称为功能性RNA,其中倍受关注的是18-26 个碱基的低分子RNA,这些低分子RNA的功能有:
① mRNA水平抑制基因表达。
② 翻译水平抑制基因表达。
克隆是分析小RNA的有效方法之一。由于小RNA与mRNA不同,它不具有PolyA tail,因此,在克隆时,需在小RNA的5’端和3’端分别加上RNA接头或者RNA/DNA杂合形式的接头,经RT-PCR后进行PCR。
本试剂盒主要用于cDNA的合成和小RNA的克隆。
试剂盒通过简单的磁珠吸附操作即可纯化小RNA反转录得到的cDNA,省去了在接头连接之后切胶回收等复杂操作步骤。扩增得到的cDNA可以直接用于TA克隆,或者利用接头中带有的酶切位点进行克隆。
使用本试剂盒对小RNA (Small RNA) 进行克隆时的操作流程见图1。起始的Small RNA是由总RNA 经过电泳及切胶回收得到的。详细步骤如下:
1. 将Small RNA进行BAP处理,5’端去磷酸化。
2. 将带有生物素标记的RNA/DNA杂合形式的接头与BAP处理后的Small RNA的3’端进行连接。
3. 用标记Streptoavidin的磁珠,回收带有生物素标记接头的Small RNA,然后进行5’端磷酸化反应。
4. 将5’端连接上RNA/DNA嵌合的接头后,使用RT Primer和反转录酶进行反转录反应。
5. 从磁珠上回收合成的cDNA后,进行PCR反应。
6. PCR片段克隆。
 
■ 各种引物及Control RNA的碱基序列
名 称 切 点 酶 例
PCR-R & RT-Primer
    5’-GTCTCTAG CCTGCAGG ATCGATG-3’
反转录反应及PCR反应的Reverse引物,含有Sse8387Ⅰ的识别序列 (阴影部分)。
PCR-Primer F
5’-AAAGAT CCTGCAGG TGCGTCA-3’
PCR反应的Forward引物,含有Sse8387Ⅰ的识别序列 (阴影部分)。
Control RNA     5’p-AGAUGACGGCAACUACAAGAC-3’ 用于Control反应。
    
small RNA克隆流程图
Small RNA Cloning Kit
 
 

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NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1 货 号 #E7300LNEB酶试剂 New England Biolabs

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NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 2

NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 (检索引物 1-48)
NEBNext Small RNA 单样本文库制备试剂盒(与多样本兼容)

概述

Small RNA 建库流程经过创新性优化,在保证制备高产量和多样性的文库的同时,能够最大限度的减少
接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中,并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
包含检索引物,且兼容自备检索引物。
 
除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供,从而减少了试剂盒里面的管数,也减少了移液操作的步骤。
 
NEBNext Small RNA 多样本文库制备试剂盒 1            货   号                  #E7300L

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概述

Small RNA 建库流程经过创新性优化,在保证制备高产量和多样性的文库的同时,能够最大限度的减少
接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中,并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
包含检索引物,且兼容自备检索引物。
 
除了每种组份都经过严格的质量监控以外,NEBNext Small RNA 试剂盒还都经过构建 Small RNA 文库,再在 Illumina 测序平台测序进行验证。NEBNext 试剂盒里面,各个组份的批号也都被保留下来。大多数的组份都以预混液的形式提供,从而减少了试剂盒里面的管数,也减少了移液操作的步骤。
 
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多样本文库制备试剂盒 1
#E7300S 24 次反应 . . ¥17,649
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概述

试剂盒中不提供的试剂及材料 :

3 M 乙酸钠, pH 5.5
100% 乙醇
80%乙醇
Corning®, Costar®, Spin-X® Centrifuge Tube Filters (Cellulose Acetate Filters) (Sigma Aldrich #CLS8162)
  
NEBNext® Small RNA 多样本文库制备试剂盒 – Illumina® (检索引物 1-48) 中包含接头,引物,酶及缓冲液,可将 small RNAs 转化为可用于 Illumina 测序平台的包含 index 序列的二代测序文库。新颖的工作流程经过优化,能够最大程度上减少接头二聚体的形成,所制备的文库产量高,多样性好。
每个建库试剂盒的组分必须通过严格的质控标准,每组试剂都通过构建含 index 的 small RNA 文库并在 Illumina 平台测序进行功能验证。
NEBNext® Small RNA 多样本文库制备试剂盒 – Illumina® (检索引物1-48)

 

性能及使用

片段筛选所需试剂及材料:
 
通过切胶进行片段筛选:
6% Novex® TBE PAGE gel 1.0 mM
10-well (Life Technologies, Inc. #EC6265BOX)
SYBR® Gold Nucleic Acid Gel Stain (Life Technologies, Inc. #S-11494)
RNase-free Disposable Pellet Pestles® (Kimble Kontes Asset Management, Inc. #749521-1590)
干冰/甲醇冰浴或 –80°C 冰箱
 
通过磁珠进行片段筛选:
Agencourt® AMPure® XP Beads (Beckman Coulter, Inc. #A63881)
通过 Pippin Prep™进行片段筛选:
3% Agarose Dye Free Gel (Sage Science #CDF 3010)
QIAquick® PCR Purification Kit (Qiagen® #28104)
Bioanalyzer® (Agilent® Technologies, Inc

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接头二聚体的形成。接头和引物都包含在试剂盒中,并且可以实现多样本的建库。多样本建库试剂盒
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1. 广谱性强。可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取Small RNA。
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3. 快速简便。实验操作快速方便,整个操作在一小时内便可完成。
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德国Greiner格瑞纳384孔 Small VolumeTM HiBase微孔, Small VolumeTM,Solid底 货号: 784101葛来娜

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N464 AGAROSE SMALL FRAGMENT SAMPLE KIT AMRESCO 货号:N464-KIT

名称:N464 AGAROSE SMALL FRAGMENT SAMPLE KIT

品牌:AMRESCO

订货号:N464-KIT

N464 AGAROSE SMALL FRAGMENT SAMPLE KIT                                                        AMRESCO                                                        货号:N464-KIT

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产品介绍

N464
AGAROSE SMALL FRAGMENT SAMPLE KIT

Grade:

Storage Condition:
ROOM TEMPERATURE

AMRESCO agaroses are available in easy-to-use trial kits that provide convenient options for testing a variety of agaroses for specific applications. Each kit contains 3g of samples of Agarose 3:1 HRB, Agarose I and Agarose SFR.  Kit is also supplied with 5X Loading Buffer, TBE Buffer Disodium, 10X Ready-Pack and TAE Buffer, 10X Ready-Pack.