Synthetic siRNA Quantitation Core Kit酶试剂盒Takara

发表于2024年2月25日由whatman中国官网

Synthetic siRNA Quantitation Core Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6142	Synthetic siRNA Quantitation Core Kit	30 Rxns	￥4,963

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*■ 制品内容 (30次量)^1**
1. Terminal Transferase Buffer	390 μl
2. Terminal Transferase	30 μl
3. dATP	150 μl
4. Recombinant RNase Inhibitor	30 μl
5. Oligo dT Primer^*2	150 μl
6. RT Buffer	270 μl
7. RT Enzyme Mix	30 μl
8. Universal Primer (10 μM)	120 μl
9. EASY Dilution (for Real Time PCR)	1 ml
10. Control siRNA (20 nM)	10 μl
11. Control Primer (10 μM)	20 μl
1 含 poly dA 加尾反应及反转录反应 30 次反应量、Real Time PCR用Universal Primer 120 次反应量。 2 本制品专用Oligo dT Primer。

■ 保存

-20℃。

■ 制品说明

在动物或细胞中siRNA对特定基因敲除效果的验证，在医药领域被广泛应用。
本制品是对合成siRNA进行定量的试剂盒，通过Real Time PCR解析方法，对细胞、组织、血液等提取的Total RNA样品中siRNA的残余量进行测定。
siRNA化学合成时一般在3’末端带有两个脱氧胸腺嘧啶(dT)碱基。本试剂盒在3’末端(dT)加上poly(A)尾，再利用特别设计的Oligo dT Primer进行反转录反应，即使在Total RNA存在的条件下也能制备与siRNA互补的cDNA。以合成的cDNA为模板，利用TB Green^® Premix Ex Taq Ⅱ (Tli RNaseH Plus)等试剂盒中的嵌合法进行Real Time PCR，对合成的siRNA进行高灵敏度的定量。
注意：1. 本试剂盒应用于3’末端带有脱氧胸腺嘧啶d(TT)的siRNA的定量。
2. 合成的siRNA 3’末端两个(dT)碱基以外带有DNA序列时，可以通过更改Oligo dT Primer序列，使用本试剂盒。
3. 合成的siRNA 3’末端没有添加(dT)碱基或者3’末端为RNA时，不能使用本试剂盒。

■ 实验例

小鼠血液中合成siRNA的定量模拟实验

【方法】

在50 μl小鼠全血(柠檬酸钠抗凝剂)中分别添加10 amol、1 fmol、100 fmol的Control siRNA后，使用RNAiso Plus(Code No.: 9108)及Dr. GenTLE Precipitation Carrier(Code No.: 9094)制备Total RNA(50 μl)。
使用本制品和TB Green Premix Ex Taq II (Perfect Real Time) 进行Real Time PCR反应，对Control siRNA进行定量检测。

【结果】

使用本制品，通过Real Time PCR解析方法，对于添加到小鼠血液中的siRNA进行了定量。

图. 小鼠血液样品中掺入的Control siRNA定量结果

页面更新：2022-02-17 14:50:59

siRNA Ladder Marker酶试剂盒Takara

发表于2024年2月25日由whatman中国官网

siRNA Ladder Marker
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3430	siRNA Ladder Marker	约25 次	￥391

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■ 制品内容

siRNA Ladder Marker	25 μg
6X Loading Buffer	1 ml

■ 浓度

200 ng/μl

■ 制品说明

siRNA Ladder Marker由长度20 bp至1,000 bp间的10条dsRNA片段组成，20 bp至50 bp间隔10 bp、100 bp至500 bp间隔100 bp，此外，还有一条1,000 bp dsRNA片段。其中100 bp的双链 RNA片段为增强带，显示亮带，可作为参照。

■ 保存

-20℃。
6X Loading Buffer开封后应于室温保存。

■ 15%的PAGE电泳图像示意图

■ 用途

该Marker主要应用于制备siRNA时标记凝胶电泳中dsRNA分子大小。

■ 使用注意

1. 开封后建议分装保存使用，避免反复冻融。
2. 不要保存已加入Loading Buffer的siRNA Ladder Maker，否则电泳条带可能不清晰。
3. 使用后立即于-20℃保存。
4. 采取必要措施避免RNase污染，如佩戴洁净的一次性手套，使用RNA实验专用的tubes和micropipette chips等。不要在同一区域进行使用RNase的实验。
5. 不要用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。否则会导致条带重叠，不能正确分离。
6. 由于dsRNA样品序列不同，显示的片段长度会略有差异。当使用的siRNA样品中含有DNA时，片段大小会略有差异。

页面更新：2020-08-07 15:04:57