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3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase酶试剂盒Takara

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3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6106 3′-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase 20 Rxns ￥1,893 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase
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■ 制品内容 (20 次量)
制品内容1～9项为用于3’RACE实验的反转录用试剂，可用于20次反转录反应 (约100次3’RACE PCR反应)；10～12为Control实验用试剂，可进行5次Control实验。
1. PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl
2. RNase Inhibitor(40 U/μl) 10 μl
3. 5 × PrimeScript Buffer 40 μl
4. dNTP Mixture (10 mM each) 20 μl
5. 3’RACE Adaptor (5 μM) 20 μl
6. RNase Free dH2O 1 ml
7. 1 × cDNA Dilution Buffer II 1 ml
8. 3’RACE Outer Primer (10 μM ) 200 μl
9. 3’RACE Inner Primer (10 μM ) 200 μl
10. Control HL60 Total RNA (500 ng/μl)* 10 μl
11. 3’RACE Control Outer Primer (10 μM)* 10 μl
12. 3’RACE Control Inner Primer (10 μM)* 10 μl
   
* 用于扩增Human Prohibitin (PHB) 基因。
 
■ 制品说明
本试剂盒是高灵敏度、高特异性扩增cDNA 3’末端全长的试剂盒。对RNA结构进行分析时，一般先通过RT-PCR反应扩增目的区域，然后再对扩增出的目的DNA片段进行克隆、序列分析等。一般的RT-PCR反应很难得到全长的cDNA片段，然而在基因工程研究中，分析遗传基因的全长cDNA序列又是十分重要的。RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 法能有效地解决这一问题。3’-Full RACE Core Set with PrimeScript RTase能够通过已知的cDNA序列，高灵敏度、高特异性地扩增cDNA的3’末端的全长序列。
本试剂盒中含有完成3’-RACE操作的主要试剂。试剂盒中使用的PrimeScript Reverse Transcriptase经过了本公司的特殊改良，反转录性能良好，无RNase H活性，大大增加了反转录性能。结合使用TaKaRa LA Taq (Code No.: RR002A) 进行PCR扩增时，其3’RACE的扩增性能大大优于其他同类产品。 本试剂盒应用了套式PCR原理，增加了PCR扩增的特异性与灵敏度，可以对少量样品或低丰度的基因进行3’RACE实验，并且对长片段的3’RACE扩增具有明显优势，我们曾经使用本试剂盒成功扩增了8 kb的3’RACE DNA片段。使用TaKaRa LA Taq™ 扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A” 碱基，其产物可直接克隆于T-Vector中。反转录引物3’RACE Adaptor Primer含有由Takara特别设计的dT区域，反转录效率高。3’RACE Inner Primer中含有BamH I酶切位点，为克隆实验提供了方便。制品中的Control RNA及Control Primer可以用于Control实验。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 引物序列 (5’→3’)
   3’RACE Adaptor    含有由Takara特别设计的dT区域及Adaptor Primer部分
   3’RACE Outer Primer    TACCGTCGTTCCACTAGTGATTT
   3’RACE Inner Primer    CGCGGATCCTCCACTAGTGATTTCACTATAGG
   3’RACE Control Outer Primer    GAGTGCAGGACATTGTGGTAGGG
   3’RACE Control Inner Primer    ATCTTTGACTGCCGTTCTCGACC
 
 
■ 试剂盒原理
进行3’RACE 实验时，首先由PrimeScript Reverse Transcriptase将Poly(A)+RNA反转录成cDNA，然后再使用TaKaRa LA Taq (Code No.: RR002A)，以反转录的cDNA为模板，进行套式PCR反应。3’RACE Adaptor Primer作为反转录引物用于cDNA合成 (具体原理见图1)。
 
3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase
图1. 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript RTase的实验原理图
 
1. 以Total RNA为模板，使用3’RACE Adaptor引物进行反转录反应，合成1st Strand cDNA。
2. 使用上游外侧特异性引物 (GSP1) 和3’RACE Outer Primer进行1st PCR反应。如果1st PCR反应未能得到目的产物，再使用上游内侧特异性引物 (GSP2) 和3’RACE Inner Primer进行2nd PCR反应。
3. PCR产物可以直接进行DNA测序或TA克隆。如果使用含有BamH I酶切位点的上游内侧特异性引物进行2nd PCR扩增时，可以使用限制酶 (BamH I) 对PCR产物进行酶切反应，然后克隆至相关的载体中。
 
■ 注意事项
1. 同时需要进行数次反转录反应或PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、dNTP Mixture等)，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor等酶类时，应轻轻混匀，避免起泡，分取之前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出，使用后也应立即放回-20℃中保存。
4. 为了防止Control RNA分解，应尽量避免反复冻融。有条件的实验室建议保存于-70℃至-80℃。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip)，以防止样品间污染。
 
 

页面更新：2017-04-07 10:39:54

SMART 5’ RACE & 3’ RACE酶试剂盒Takara

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SMART 5’ RACE & 3’ RACE
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 634913 Marathon cDNA Amplification Kit 5 cDNA & 100 PCR Rxns ￥9,800 SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE
Clontech 634858 SMARTer RACE 5’/3’ Kit 10 Rxns ￥8,143
￥6,514 		SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE
Clontech 634859 SMARTer RACE 5’/3’ Kit 20 Rxns ￥15,472
￥12,378 		SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE
Clontech 634499 SMARTer RACE 5’/3’ Kit (no competent cells) 20 Rxns ￥12,331
￥9,865 		SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE
Clontech 634922 Universal Primer Mix 100 Rxns ￥1,709
￥1,367 		SMART 5’ RACE & 3’ RACE SMART 5’ RACE & 3’ RACE

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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由于产品升级，从即日起，您订购的SMARTer RACE试剂盒（634858/59）中的组分In-Fusion HD Cloning Kit (Code No. 639648)将陆续替换为性能更高的In-Fusion® Snap Assembly Master Mix (Code No. 638947)，该组分数量保持不变，请以实际收到的产品为准。如需含HD组分的旧版说明书或产品组分列表文件，请邮件联络zhukx@takarabiomed.com.cn
 
 
■ 制品说明
RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 是一种获得RNA转录本全长序列的技术。利用RACE技术可以根据转录本中的一小段已知序列获得转录本的5′端 (5′RACE-PCR) 或3′端 (3′RACE-PCR) 序列。
SMARTer RACE 5’/3′ Kit（Code No. 634858/59）是优化升级的试剂盒，具有更高的灵敏、更低的背景和更高的特异性。
采用SMART技术，以poly A+ 或总RNA为起始，合成的第一链cDNA可直接进行5′和3′RACE-PCR，不需要adaptor连接等步骤，整个流程更快、更易操作。SMART RACE 还结合了强有力的抑制性PCR，显著地减少了RACE实验中的弥散现象，是获得全长cDNA的有效方法。
SMARTer RACE 5’/3′ Kit（Code No. 634858/59）包含了除基因特异性引物外的所有组分，流程更精简。使用这一个试剂盒，即可以在8小时内完成第一链cDNA合成到克隆RACE片段的流程，并在第二天就可以挑取克隆进行分析。试剂盒包含了性能优良的SeqAmp DNA Polymerase，对于长片段或高GC含量等高难度片段的扩增也适用；NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up kit用于纯化PCR产物； 高效无缝克隆In-Fusion Snap Assembly Master Mix；高效率感受态细胞Stellar Competent Cells*。
* SMARTer® RACE 5’/3′ Kit (no competent cells) (634499)为不含感受态细胞的包装形式，便于长时间存放，组分的选择空间更大，实验搭配更灵活。另有高转化效率的感受态细胞单品Stellar化学转化感受态细胞供您选择，满足多种实验需求。
SMART RACE具有以下优势：
1. 更便捷的操作
采用SMARTer RACE 技术，可以在一管内完成两步反应。只需很少的操作RNA和新合成cDNA的步骤，整个实验只需4小时。
2. 只需10 ng总RNA
SMARTer RACE 尤其适用于起始材料有限的情况，如活体组织检查样本、组织分离术样本、针吸活检样本、胚胎组织及病变组织样本等。优化的实验操作，显著地降低了非特异性扩增，这对有限的实验材料尤为重要。
3. 富集具有完整5′端序列的cDNA
专门设计的SMARTer Oligo 优先与新合成的cDNA 的5′端结合，可以富集具有完整5′端序列的cDNA，因此，可以获得全长基因序列或上游调控序列。
4. 不需要RNA预处理
SMARTer RACE方法不需要RNA预处理。可以采用总RNA，甚至是含有基因组DNA的RNA材料进行实验。
 
■ 制品特点
1. 低背景的完整RACE试剂盒
2. SMARTer技术合成完整的5′和3′端序列
3. 合成的第一链cDNA直接用于RACE PCR，无需接头连接
4. 只需10 ng总RNA
 
产品详情请点击：SMART 5’ RACE & 3’ RACE
 
 

页面更新：2021-12-25 08:56:33

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RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 是一种获得RNA转录本全长序列的技术。利用RACE技术可以根据转录本中的一小段已知序列获得转录本的5′端 (5′RACE-PCR) 或3′端 (3′RACE-PCR) 序列。
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3. 富集具有完整5′端序列的cDNA
专门设计的SMARTer Oligo 优先与新合成的cDNA 的5′端结合，可以富集具有完整5′端序列的cDNA，因此，可以获得全长基因序列或上游调控序列。
4. 不需要RNA预处理
SMARTer RACE方法不需要RNA预处理。可以采用总RNA，甚至是含有基因组DNA的RNA材料进行实验。
 
■ 制品特点
1. 低背景的完整RACE试剂盒
2. SMARTer技术合成完整的5′和3′端序列
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SMARTer RACE方法不需要RNA预处理。可以采用总RNA，甚至是含有基因组DNA的RNA材料进行实验。
 
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