qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)204145

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

  • 产品型号:  204145
  • 简单描述
  • qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通过两步法real-time RT-PCR对cDNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和*的实时定量PCR缓冲液确保了对cDNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP,
详细介绍

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

使用SYBR Green I进行两步法RT-PCR,用于基因表达分析

  • 整合热启动,PCR特异性高
  • 可靠定量检测低丰度转录本
  • 准确定量检测各种起始量样本
  • 提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)两种包装
  • 无需优化反应和循环条件

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)

  • Real-Time PCR酶与试剂盒
  • qPCR16
  • 一步法RT-PCR20
  • 两步法RT-PCR29

QuantiTect SYBR® Green PCR Kits

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 qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)204145

使用SYBR Green I进行两步法RT-PCR,用于基因表达分析

  • 整合热启动,PCR特异性高
  • 可靠定量检测低丰度转录本
  • 准确定量检测各种起始量样本
  • 提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)两种包装
  • 无需优化反应和循环条件

QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通过两步法real-time RT-PCR对cDNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和*的实时定量PCR缓冲液确保了对cDNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP,可选择性进行UNG处理。为便于使用,预混液可储存在2–8°C。

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qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)204145

qiagen QuantiTect SYBR Green PCR Kit(1000*50ul)204145

特异性定量检测。

在Rotor-Gene 3000上使用针对人BAX的QuantiTect Primer Assay和的试剂盒分析稀释的人白细胞cDNA。熔解曲线分析中出现单峰,NTC反应呈平直曲线,说明使用QuantiTect Kit和Assay可实现高特异性定量。NTC:无模板对照。Norm. Fluoro.:标准化的荧光。

Performance

QuantiTect SYBR Green PCR Kit在宽泛的范围内符合线性规律,可实现特异性定量检测(参见”Specific quantification over a wide linear range”)。与其他聚合酶相比,HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动,进一步提高了PCR反应的特异性。*的PCR缓冲液和HotStarTaq DNA Polymerase,确保低丰度转录本的定量检测,低至5个拷贝的目标序列也可被准确检测(参见”Highly specific amplification”)。QuantiTect SYBR Green PCR Kit与QuantiTect Reverse Transcription Kit和QuantiTect Primer Assays配合使用,可获得灵敏、可靠的结果(参见”Specific and sensitive quantification”)。

QuantiTect SYBR Green PCR +UNG Kit中经特别优化的UNG溶液配合经验证的PCR预混液可有效避免PCR产物中的残留污染,并对靶序列进行可靠的定量检测(参见”High specificity in real-time PCR”)。

Principle

QuantiTect SYBR Green PCR Kit含有优化的即用型预混液,可使用SYBR Green I对cDNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。预混液中的荧光染料SYBR Green I可对很多不同的靶序列进行分析,无需合成靶标特异性标记引物。*的PCR缓冲液含有K+和NH4+,能促使特异性引物退火,获得高PCR特异性和灵敏度(参见”Specific primer annealing”)。此外,HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动,可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect SYBR Green PCR预混液含有dUTP,可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 (UNG)预处理,保证之前反应残留的PCR产物会影响后续的PCR反应。

2x QuantiTect SYBR Green PCR Kit的组份
组份 特点 优势
HotStarTaq DNA Polymerase 95ºC孵育15分钟即可活化 室温下即可构建qPCR反应体系
QuantiTect SYBR Green PCR Buffer NH4+和K+的平衡组合 特异性引物退火确保PCR结果可靠
dNTP mix 含有dUTP,会部分替代dTTP,可进行UNG处理 可选择进行UNG处理,以消除之前反应残留的PCR产物
SYBR Green I dye DNA双链结合时,生成强烈的荧光信号 高度灵敏的定量检测
ROX dye 在Applied Biosystems或Agilent的PCR仪上进行荧光信号校准 可在需要ROX染料的PCR仪上进行准确的定量检测。不会干扰其他real-time PCR仪
 

Procedure

QuantiTect SYBR Green PCR Kit无需进行繁琐耗时的反应条件优化。只需简单地将引物、探针和cDNA模板加入到即用型PCR预混液中,即可开始反应(参见”Two-step RT-PCR”)。使用操作手册中的实验方案可在任何real-time PCR仪上得到快速、可靠的结果。如果需要,反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)预处理,以去除之前反应残留的PCR产物。

为在两步法real-time RT-PCR中获得理想结果,我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。此试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA,并可去除基因组DNA污染。

QuantiTect SYBR Green PCR Kit配合QuantiTect Primer Assays可在基因表达分析中获得高度特异性的结果。基因组范围、生物信息学验证的引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe上方便地订购。

凯杰QuantiTect RevTranscription Kit 分子生物试剂205311

凯杰QuantiTect RevTranscription Kit 分子生物试剂

  • 产品型号:  205311
  • 简单描述
  • 凯杰QuantiTect RevTranscription Kit快速合成cDNA,用于两步法real-time RT-PCRcDNA合成和gDNA去除仅用20分钟完成有效去除基因组DNA,无需设计RNA特异性引物或探针高特异性,即便是低丰度的转录本也能获得高产量的cDNA转录本的5′ 和3′ 端区域都可以进行cDNA 合成
详细介绍

凯杰QuantiTect RevTranscription Kit

快速合成cDNA,用于两步法real-time RT-PCR
cDNA合成和gDNA去除仅用20分钟完成
有效去除基因组DNA,无需设计RNA特异性引物或探针
高特异性,即便是低丰度的转录本也能获得高产量的cDNA
转录本的5' 和3' 端区域都可以进行cDNA 合成
为获得准确的real-time RT-PCR基因表达分析结果,很重要的是仅扩增和检测cDNA。基因组DNA的干扰可通过设计横跨外显子/外显子边界的引物或探针避免。尽管如此,在某些特殊情况下(如:cDNA来自一个单外显子基因),起始RNA样品必须无基因组DNA。
使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,基因组DNA污染物可使用的gDNA去除缓冲液迅速有效的去除(见图:“高效去除基因组DNA,确保精确的Real-Time RT-PCR”)。因为纯化RNA样品后无需另外采用DNA酶消化,从而可节省时间和费用。并且也无需设计RNA特异性引物和探针。
低丰度转录本获得更高产量的cDNA 

凯杰QuantiTect RevTranscription Kit

操作流程
使用QuantiTect逆转录试剂盒可在20分钟内去除基因组DNA和合成cDNA(见流程图)。由于两个反应均在同一孵育温度并使用预混液构建反应,因此操作过程快速且方便。相反,供应商I提供的试剂盒操作需更多移液步骤且经常需要调整孵育温度,因此需要更长时间和更多手动操作。
应用
QuantiTect Reverse Transcription Kit可从各种类型的起始样品中合成cDNA以实现高效和高灵敏度的real-time RT-PCR,包括激光显微切割样品和活组织切片样品。与其他供应商提供的试剂相比,QuantiTect Reverse Transcription Kit在检测低丰度基因时具有更高的灵敏度(见图:“Real-Time,两步法RT-PCR精确度更高”)。
为获得高特异性和高灵敏度的real-time RT-PCR结果,又避免耗时的反应步骤优化过程,我们推荐QuantiTect Reverse Transcription Kit和其他QuantiTect产品联合使用。包括经优化的PCR反应预混液和即用型引物,使用SYBR Green染料法或序列特异性探针法进行 real-time RT-PCR。

保存条件: RT