PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix酶试剂盒Takara


PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6215A PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix 50 Rxns ¥1,500
¥1,050
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
Takara 6215B (A × 4) PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix 50 Rxns x 4 ¥5,400
¥3,780
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
 
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix  
PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
 
 
■ 制品内容 (20 μl 反应×50次量)PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
5×PrimeScript IV cDNA Synthesis Mix*1 200 μl
Random 6 mers (50 μM)*2 100 μl
RNase Free H2O 1 ml × 2
*1:含有PrimeScript IV RTase、RNase Inhibitor、Oligo dT Primer、dNTP Mixture及反应Buffer
    (含Mg+2)。
*2:不含polyA的 RNA起始cDNA的合成及Real Time PCR用的cDNA的合成,RNA全部区域cDNA的
    均匀合成等情况下添加至反应液中。
 
■ 制品说明
PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix是从total RNA或polyA+ RNA起始合成1st strand cDNA的试剂盒。合成1st strand cDNA所需的反转录酶PrimeScript IV RTase、RNase Inhibitor、 Oligo dT Primer、dNTP Mixture及反应Buffer已预混成premix型试剂,反应时,只需要添加模板RNA及水即可简单快速开始反应。
本制品通过添加辅助蛋白质改良了Buffer的组成,省去了以往进行反转录反应前的RNA变性操作。此外,PrimeScript IV RTase相比于以往制品,能在更短时间内合成cDNA。
通过提高耐热性使反转录反应可以在高温下进行,在使用Gene Specific Primer合成cDNA的效率和特异性的提升上发挥了重要作用。
本制品合成的1st strand cDNA适用于2nd strand cDNA合成、杂交、PCR法扩增,全长cDNA文库的制备等需要高品质全长cDNA的应用。另外,通过试剂盒中附带的Random 6 mers,可以从不含有polyA+ 的RNA起始合成cDNA,同时也适用于利用Real Time PCR方法进行基因表达分析的cDNA合成。
 
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-20℃。
 
■ 关联资料
6215资料: 点击图片下载 PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
 
 

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PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara


PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6210A PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns ¥1,372
¥823
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Takara 6210B (A × 4) PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns x 4 ¥4,937
¥2,962
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

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PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit  
PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量)PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
PrimeScript II RTase (200 U/μl) 50 μl
5×PrimeScript II Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (50 μM) 100 μl
RNase Free H2O 1 ml
 
■ 制品说明
本制品是使用PrimeScript II RTase从Total RNA或Poly (A)+ RNA合成1st Strand cDNA的试剂盒。含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。
以结构复杂的RNA或长链RNA为模板进行cDNA合成时,cDNA合成受到抑制的主要原因是RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。并且,由于反转录酶的错配引起的非特异性延伸,对RT-PCR或全长cDNA的合成非常不利。PrimeScript II RTase是对PrimeScript RTase进行进一步改良的反转录酶,本反转录酶可以很好地抑制RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。
本制品使用了PrimeScript II RTase,利用Oligo dT从PolyA开始进行延伸反应,使用标准反转录温度42℃,不仅能维持PrimeScript RTase原有的卓越的cDNA合成效率和cDNA合成速度,同时可以合成本底低、纯度高、完整性好的cDNA。另外,反转录反应液配制时所产生的非特异性延伸是抑制cDNA合成的主要原因,本制品能有效控制这一现象。反应液配制后,冰上放置直至反转录反应开始,不会发生抑制cDNA合成的现象。
合成的1st Strand cDNA可广泛应用于2nd Strand cDNA合成、杂交、PCR法扩增等。特别适用于全长cDNA文库制作、高纯度全长cDNA合成等。
 
■ 保存
-20℃。
 
 

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PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara


PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6110A PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns ¥1,261
¥757
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Takara 6110B (A × 4) PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns x 4 ¥4,546
¥2,728
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit

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PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit  
PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量)
PrimeScript RTase (200 U/ μl) 50 μl
5X PrimeScript Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (50 μM) 100 μl
RNase free dH2O 1 ml
 
■ 制品说明
本制品是使用PrimeScript RTase从Total RNA或PolyA+RNA合成1st Strand cDNA的试剂盒,含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。 PrimeScript Reverse Transcriptase是一种MMLV (Moloney Murine Leukemia virus) 由来的新型反转录酶。本酶能够有效合成长达12 kb的1st Strand cDNA,即使对富含GC的片段或者具有复杂二级结构的RNA,在常规的反转录温度42℃条件下也能得到良好的反转录效果,无需进行高温反转录反应 (高温反转录反应会导致RNA的降解)。合成的1st Strand cDNA 可广泛应用于2nd Strand合成、杂交、PCR扩增、Real Time PCR反应等。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 引物序列
       Random 6 mers        pd(N)6
       Oligo dT Primer        Takara特别开发的dT区域的序列*
* 该序列和TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver.3.0 (Code No. RR019A/B) 的Oligo dT Adaptor Primer不同,不含有M13 Primer M4的序列。
 
■ 保存
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页面更新:2019-10-12 11:49:14

PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara


PrimeScript Double Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6111A PrimeScript Double Strand cDNA Synthesis Kit 10 Rxns ¥1,582 PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
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■ 制品内容 (10 次量)
PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl
Oligo(dT)18 Primer (1 μg/μl) 20 μl
Random Primer (9mer) (0.3 μg/μl) 20 μl
5 × 1st Strand Synthesis Buffer 40 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 40 μl
E. coli RNase H/E. coli DNA Ligase Mixture 20 μl
E. coli DNA Polymerase I (20 U/μl) 20 μl
5 × 2nd Strand Synthesis Buffer 300 μl
T4 DNA Polymerase (1 U/μl) 40 μl
RNase free dH2O 600 μl × 2
Control RNA (1 μg/μl)* 5 μl
 
*【Control RNA】
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。Control RNA (约1.4 kb) 是带有30个A碱基的具有poly (A)+尾的RNA。以这种RNA为模板合成的双链cDNA插入到适当的质粒载体中,如果确实为全长的cDNA,那这种质粒便可获得四环素抗性。
 
■ 制品说明
以原核细胞或者真核细胞的mRNA为模板合成cDNA后再进行cDNA的克隆,是分子生物学研究中的一种重要手段。利用这一技术可以容易地进行基因的构造解析和目的蛋白质的表达研究等。
一般来说,cDNA的合成以及cDNA文库的利用方法是:在合成与目的mRNA互补的双链cDNA后,将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组,再将重组体导入细菌或真核细胞内进行复制、扩增cDNA,然后再对cDNA进行解析,或者再进一步进行体外转录或体外翻译等。
本试剂盒主要以来自植物和动物的poly (A)+RNA合成双链DNA 。
本试剂盒主要是以Gubler-Hoffman法为基础构建的,其原理见图1、图2,简要说明如下:
1. 在PrimeScript RTase的作用下,利用Oligo(dT)18 Primer或者Random Primer合成cDNA的第一条链 。
2. 使用E. coli RNase H使DNA-RNA杂合体中的RNA链形成单链切口 (Nick) 。在E. coli DNA Polymerase I 与E. coli DNA Ligase的作用下,RNA链被DNA链置换,合成cDNA的第二条链。
3. 使用T4 DNA Polymerase使双链cDNA片段末端平滑。
 
■ cDNA合成原理图
 
PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
图1 使用Oligo(dT)18 Primer时的cDNA合成
 
 
PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
图2 使用Random Primer时的cDNA合成
 
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-20℃。
 
■ Troubleshooting
如果实验不能正常进行,请按照说明书内容确认实验操作,检验以下几点:
1. Control RNA的使用
本试剂盒中的Control RNA (pSP Tet3 Poly(A)+ mRNA) 可以用于对照实验,并确认1st Strand cDNA或2nd Strand cDNA的合成反应是否顺利进行。
2. mRNA的纯度检测
为了能够获得更高的cDNA合成效率,尽可能使用完整的mRNA是非常重要的。在进行cDNA合成反应前,可以通过测定260 nm和280 nm的吸光度 (A260/A280在1.8~2.1是理想值) ,或使用琼脂糖凝胶电泳法对RNA的纯度进行检测。
3. RNase的污染
实验时要注意一定不能在mRNA的样品中混入RNase。实验用的器具、试剂等应尽可能进行高温灭菌处理。操作过程要佩戴手套。
 
 

页面更新:2019-03-08 10:35:16

3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase酶试剂盒Takara


3’-Full RACE Core Set with PrimeScript RTase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6106 3′-Full RACE Core Set with PrimeScript RTase 20 Rxns ¥1,893 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase
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■ 制品内容 (20 次量)
制品内容1~9项为用于3’RACE实验的反转录用试剂,可用于20次反转录反应 (约100次3’RACE PCR反应);10~12为Control实验用试剂,可进行5次Control实验。
1. PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl
2. RNase Inhibitor(40 U/μl) 10 μl
3. 5 × PrimeScript Buffer 40 μl
4. dNTP Mixture (10 mM each) 20 μl
5. 3’RACE Adaptor (5 μM) 20 μl
6. RNase Free dH2O 1 ml
7. 1 × cDNA Dilution Buffer II 1 ml
8. 3’RACE Outer Primer (10 μM ) 200 μl
9. 3’RACE Inner Primer (10 μM ) 200 μl
10. Control HL60 Total RNA (500 ng/μl)* 10 μl
11. 3’RACE Control Outer Primer (10 μM)* 10 μl
12. 3’RACE Control Inner Primer (10 μM)* 10 μl
   
* 用于扩增Human Prohibitin (PHB) 基因。
 
■ 制品说明
本试剂盒是高灵敏度、高特异性扩增cDNA 3’末端全长的试剂盒。对RNA结构进行分析时,一般先通过RT-PCR反应扩增目的区域,然后再对扩增出的目的DNA片段进行克隆、序列分析等。一般的RT-PCR反应很难得到全长的cDNA片段,然而在基因工程研究中,分析遗传基因的全长cDNA序列又是十分重要的。RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 法能有效地解决这一问题。3’-Full RACE Core Set with PrimeScript RTase能够通过已知的cDNA序列,高灵敏度、高特异性地扩增cDNA的3’末端的全长序列。
本试剂盒中含有完成3’-RACE操作的主要试剂。试剂盒中使用的PrimeScript Reverse Transcriptase经过了本公司的特殊改良,反转录性能良好,无RNase H活性,大大增加了反转录性能。结合使用TaKaRa LA Taq (Code No.: RR002A) 进行PCR扩增时,其3’RACE的扩增性能大大优于其他同类产品。 本试剂盒应用了套式PCR原理,增加了PCR扩增的特异性与灵敏度,可以对少量样品或低丰度的基因进行3’RACE实验,并且对长片段的3’RACE扩增具有明显优势,我们曾经使用本试剂盒成功扩增了8 kb的3’RACE DNA片段。使用TaKaRa LA Taq 扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A” 碱基,其产物可直接克隆于T-Vector中。反转录引物3’RACE Adaptor Primer含有由Takara特别设计的dT区域,反转录效率高。3’RACE Inner Primer中含有BamH I酶切位点,为克隆实验提供了方便。制品中的Control RNA及Control Primer可以用于Control实验。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 引物序列 (5→3)
   3’RACE Adaptor    含有由Takara特别设计的dT区域及Adaptor Primer部分
   3’RACE Outer Primer    TACCGTCGTTCCACTAGTGATTT
   3’RACE Inner Primer    CGCGGATCCTCCACTAGTGATTTCACTATAGG
   3’RACE Control Outer Primer    GAGTGCAGGACATTGTGGTAGGG
   3’RACE Control Inner Primer    ATCTTTGACTGCCGTTCTCGACC
 
 
■ 试剂盒原理
进行3’RACE 实验时,首先由PrimeScript Reverse Transcriptase将Poly(A)+RNA反转录成cDNA,然后再使用TaKaRa LA Taq (Code No.: RR002A),以反转录的cDNA为模板,进行套式PCR反应。3’RACE Adaptor Primer作为反转录引物用于cDNA合成 (具体原理见图1)。
 
3’-Full RACE Core Set with PrimeScript™ RTase
图1. 3’-Full RACE Core Set with PrimeScript RTase的实验原理图
 
1. 以Total RNA为模板,使用3’RACE Adaptor引物进行反转录反应,合成1st Strand cDNA。
2. 使用上游外侧特异性引物 (GSP1) 和3’RACE Outer Primer进行1st PCR反应。如果1st PCR反应未能得到目的产物,再使用上游内侧特异性引物 (GSP2) 和3’RACE Inner Primer进行2nd PCR反应。
3. PCR产物可以直接进行DNA测序或TA克隆。如果使用含有BamH I酶切位点的上游内侧特异性引物进行2nd PCR扩增时,可以使用限制酶 (BamH I) 对PCR产物进行酶切反应,然后克隆至相关的载体中。
 
■ 注意事项
1. 同时需要进行数次反转录反应或PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、dNTP Mixture等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor等酶类时,应轻轻混匀,避免起泡,分取之前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放回-20℃中保存。
4. 为了防止Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室建议保存于-70℃至-80℃。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 

页面更新:2017-04-07 10:39:54

PrimeScript™ II Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara


PrimeScript II Reverse Transcriptase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2690S PrimeScript II Reverse Transcriptase 2,000 U ¥300 PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690A PrimeScript II Reverse Transcriptase 10,000 U ¥1,282
¥769
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690B (A × 4) PrimeScript II Reverse Transcriptase 10,000 U × 4 ¥4,617
¥2,770
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
Takara 2690C (A × 10) PrimeScript II Reverse Transcriptase 10,000 U × 10 ¥10,895
¥6,537
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase

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PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
 
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase  
PrimeScript™ II Reverse Transcriptase
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 2690A)
PrimeScript II Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U
5X PrimeScript II Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
PrimeScript II Reverse Transcriptase在42℃条件下能够有效地合成低背景、高质量的cDNA,无需进行高温反转录反应,高温的反转录反应会导致RNA的降解,且由于引物的有效使用和辅助蛋白质的添加,避免了因RNA二级结构对cDNA合成的抑制及RT引物错配引起的非特异性延伸。辅助蛋白质完全抑制了由于反转录酶冰上放置引起的非特异性延伸反应,因此,即便是反应液配制到反转录反应开始要间隔一段时间,也不会抑制长链cDNA的合成。合成的cDNA可以广泛应用于2nd-strand合成、杂交、终点PCR和定量PCR,而且本酶特别适用于全长cDNA文库构建用的高质量cDNA合成等。
 
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-20℃。
 
起源
Purified from an E. coli strain expressing a recombinant enzyme.
 
活性定义
以poly (rA) ·oligo (dT)12-18 为模板/引物,在37℃的条件下,10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
用途
1st-Strand cDNA的合成。
·cDNA Probe的制备。
·RT-PCR。
 
 

页面更新:2021-02-09 14:17:53

PrimeScript™ Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara


PrimeScript Reverse Transcriptase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2680Q PrimeScript Reverse Transcriptase 2,000 U ¥271 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680A PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U ¥1,162 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680B (A × 4) PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U × 4 ¥4,165 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680C (A × 10) PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U × 10 ¥9,833 PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
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PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase PrimeScript™ Reverse Transcriptase
 
PrimeScript™ Reverse Transcriptase
PrimeScript™ Reverse Transcriptase  
PrimeScript™ Reverse Transcriptase
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 2680A)
PrimeScript Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U
5X PrimeScript Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
PrimeScript Reverse Transcriptase是Takara公司依据M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus)来源的RTase开发的一种反转录酶。本酶具有很强的延伸能力,能够有效地合成1st-strand cDNA,即使对有复杂二级结构的RNA,在42℃条件下也能得到良好的反应效果,无需进行高温反转录反应,高温的反转录反应会导致RNA的降解。本酶适合于长链cDNA的合成及高比例的全长cDNA文库的构建等。
 
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-20℃。
 
起源
E. coli carrying the plasmid that encodes reverse transcriptase gene.
 
活性定义
以poly (rA)·oligo (dT)12-18 为模板/引物,在37℃的条件下,10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
用途
1. 1st-Strand cDNA的合成。
2. cDNA Probe的制备。
3. RT-PCR。
 
 

页面更新:2019-10-12 11:50:38

PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara


PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR047Q PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 10 Rxns ¥263 PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
Takara RR047A PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 100 Rxns ¥1,963
¥1,178
PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
Takara RR047B (A × 4) PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 100 Rxns × 4 ¥7,456
¥4,474
PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR047A: 20 μl反应×100次量)
1. gDNA Eraser 100 μl
2. 5X gDNA Eraser Buffer*1
200 μl
3. PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 100 μl
4. 5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)*3 400 μl
5. RT Primer Mix*4 400 μl
6. RNase Free dH2O 1 ml×2
7. EASY Dilution (for Real Time PCR)*5 1 ml
 
*1 5X gDNA Eraser Buffer在反转录反应前使用,请务必进行基因组DNA的除去反应。
*2 含有RNase Inhibitor。
*3 含有dNTP Mixture。
*4 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers。
*5 制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。模板cDNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时,由于受Microtube吸附作用等的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品时,即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) (Code No. 9160/9160Q) 也可以单独购买。
注意:EASY Dilution (for Real Time PCR) 请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
为了准确地进行基因表达量分析,必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件,但Total RNA中常常混有基因组DNA,并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增,因此会造成解析结果不准确。为了避免这种情况发生,通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上,使基因组DNA得不到扩增。但是,此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因,同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。在这种情况下,我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理,以除去残存的基因组DNA。而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作,同时会造成RNA的降解和损失。
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser,通过42℃,2 min即可除去基因组DNA。同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分,经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA,因此,20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA合成的全过程。
使用本制品合成的cDNA适用于嵌合法和探针法qPCR分析,可以根据实验目的,选择与TB Green® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)*、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)*、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 组合使用。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特长
1. 含有去除基因组DNA的gDNA Eraser,只需2 min即可除去基因组DNA。
2. 只需15 min即可高效合成Real Time PCR反应用模板cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
3. 反转录引物使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer混合的RT Primer Mix,可以均匀合成样品中的各种cDNA。
4. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法区别如下:
(1) 反转录反应中RT Primer Mix的用量。
(2) 反转录反应中总RNA的用量。
5. Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR) ,将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 注意事项
1.使用本制品合成的cDNA与TB Green关联制品组合使用时,建议使用:
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)
以上制品与本制品组合使用,可以得到可信度高的结果。
本制品与TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 组合使用时,有时反应性能不好,不推荐使用。
2. 当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
3. gDNA Eraser和PrimeScript RT Enzyme Mix I 在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失,而使酶量不足。
4. 5X gDNA Eraser Buffer和5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)在使用前需Vortex振荡混匀,轻轻离心后使用。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 

页面更新:2022-08-31 08:27:44

PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara


PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR036Q PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 20 Rxns ¥263 PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
Takara RR036A PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 200 Rxns ¥1,963
¥1,178
PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
Takara RR036B (A × 4) PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 200 Rxns × 4 ¥7,456
¥4,474
PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR036A: 10 μl反应×200次量) PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
5X PrimeScript RT Master Mix (for Real Time)*1 400 μl
RNase Free dH2O 1 ml ×2 支
EASY Dilution (for Real Time PCR)*2 1 ml
 
*1 含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer (含有Mg2+) 。
*2 制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时,由于受Microtube吸附作用等的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品时,即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买 (Code No.: 9160/9160Q)。
注意:EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反转录反应所需的所有试剂 (PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA和水即可迅速进行反应。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase,与制品PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A/B) 相同,可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用模板cDNA。 本制品合成的cDNA可以用于嵌合法和探针法qPCR分析,可以根据实验目的与TB Green® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)* 、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 等定量试剂配合使用,能够进行高性能的基因表达分析。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特长
1. 制品为预先混好的Premix形式,只需加入模板RNA和水便可以开始反应。
2. 可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2种反转录引物,可以合成适合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 注意事项
1. 5X PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于5X PrimeScript RT Master Mix粘度高,用移液枪慢慢反复吸打充分混匀后使用。
2. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
3. 本制品中已经加入了反转录Primer(Oligo dT Primer 和Random 6 mers),如果要使用Gene Specific Primer进行反转录反应,则不能使用本制品。
 
 
Technote:
  An efficient method for quantification of human gene expression
  levels using PrimeScript reverse transcriptase
   
 
  Monitoring siRNA knockdown: Quantifying transient knockdown of
  LEDGF/p75 in docetaxel-resistant prostate cancer PC-3-DR cells
 

页面更新:2022-08-31 08:08:19

PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara


PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR037Q PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 20 Rxns ¥263 PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara RR037A PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 200 Rxns ¥1,963
¥1,178
PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
Takara RR037B (A × 4) PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 200 Rxns × 4 ¥7,456
¥4,474
PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR037A)
5X PrimeScript Buffer (for Real Time)*1 400 μl
PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 100 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 100 μl
Random 6 mers (100 μM) 400 μl
RNase Free dH2O 1 ml
EASY Dilution (for Real Time PCR)*3 1 ml
 
*1 含有dNTP Mixture 和 Mg2+
*2 含有RNase Inhibitor。
*3 用于制作标准曲线时梯度稀释total RNA和cDNA。EASY Dilution (for Real Time PCR) 可以将其稀释至很低浓度也能够得到准确地稀释。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买(Code No. 9160/9160Q)。
注意:EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
本制品是Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA。操作简单,适合进行高通量分析。进行2 Step Real Time RT-PCR反应时,与TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)(Code No. RR820Q/A/B)*、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* , TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)* 、 或Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 试剂配合使用,能进行高性能的基因表达分析。 本制品提供了TB Green分析法和探针分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
■ 保存
-20℃
 
■ 试剂盒特长
1. 可以快速、高效合成Real Time PCR用cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
2. 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers两种反转录引物,可根据实际情况区别使用。反转录反应可以使用Random 6 mers或Oligo dT Primer,也可以Oligo dT Primer和Random 6 mers同时使用。只扩增一种目的基因时,也可以使用Specific Primer作为反转录引物。
3. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
    注意:以下是TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法进行反转录实验的区别
    ① 用于反转录实验RT Primer Mix添加量。
    ② 用于反转录实验total RNA的添加量。
4. Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 用PrimeScript RT Enzyme Mix I 时使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失。
3. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 
Technote:
  Fast reverse transcription from mouse blood samples using
  PrimeScript Reverse Transcriptase
   
 
  Fast synthesis of cDNA templates for real-time RT-PCR
 

页面更新:2022-08-31 08:21:29

One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)酶试剂盒Takara


One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (or with UNG)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR600A One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix 200 Rxns ¥2,878
¥1,439
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR600B (A × 5) One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix 200 Rxns × 5 ¥13,670
¥6,835
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR601A One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG 200 Rxns ¥3,118
¥1,559
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
Takara RR601B (A × 5) One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG 200 Rxns × 5 ¥14,810
¥7,405
One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG) One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)
 
 
· 完全premix型、操作简单、probe法One Step RT-qPCR。
· 卓越的抗反应阻碍物能力、粗提样品可以使用本产品
· 新增UNG版本,可防止假阳性产生
 
■ 制品内容
One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (Code No.: RR600A,200次,25 μl反应体系)
1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(2×)
625 μl × 4
2. RNase Free Water 1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye(50×conc.)* 100 μl
4. ROX Reference Dye II(50×conc.)* 100 μl
 
One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix with UNG (Code No.: RR601A,200次,25 μl反应体系)
1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG(2×) 625 μl × 4
2. RNase Free Water 1.25 ml × 2
3. ROX Reference Dye(50×conc.)* 100 μl
4. ROX Reference Dye II(50×conc.)* 100 μl
 
* 使用Applied Biosystems Real-Time PCR仪器等,需要进行孔与孔之间的荧光信号校正时添加该试剂。
 
◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的仪器
Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System
StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的仪器
Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的仪器
Thermal Cycler Dice Real Time System系列
LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
 
■ 制品说明
本制品是采用探针法进行1 Step Real Time RT-PCR的专用premix试剂。本制品将反转录酶和PCR酶及反应用buffer预先配制成premix形式,由于RT-PCR反应在单个反应管中连续进行,因而,操作更简便,同时降低了污染的风险。反转录酶采用了耐热性高的PrimeScript III RTase,且即使在反应阻害物存在的情况下也能够有效合成cDNA。此外,使用该试剂,也可以实现多个反应同时进行的多重qPCR。为防止PCR反应时的【carryover contamination】,可以使用添加有UNG的One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG (Code No. RR601A/B)。通过使用该制品,能够更简便、准确地实现RNA/DNA病毒的快速检出及mRNA的表达分析。
 
本制品适用于Takara公司Thermal Cycler Dice Real Time System仪器,已确认以下Real Time PCR仪器都适用。
· Thermal Cycler Dice Real Time System III(Code No. TP950/TP970/TP980/TP990)
· Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
· LightCycler 96 System(Roche Diagnostics)
· CFX96 Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad)等
 
注:采用嵌合荧光法(TB Green)进行1 Step Real Time RT-PCR时,
请使用:One Step TB Green PrimeScript PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(Code No. RR096A)
或:One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)(Code No. RR086A)
 
■ 特点
1. 通过One Step RT-qPCR可快速且准确地进行RNA病毒等的分析
2. 由于本制品对各种反应阻害物有很高的耐受性,多数情况下简易提取的粗提RNA起始也能够检出。但是,需要注意的是如果出现不能检出的情况或需要更高准确度及更稳定的分析结果时,需要使用纯度更高的RNA样品。培养细胞及组织样品起始的高纯度total RNA的制备推荐以下kit:TaKaRa MiniBEST Universal RNA Extraction Kit(Code No. 9767)、RNAiso Plus(Code No. 9108/9109)、TaKaRa MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit Ver.5.0(Code No. 9766)等
 
 

页面更新:2022-09-02 09:29:19

One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara


One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR064A One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 100 Rxns ¥2,399
¥1,200
One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
Takara RR064B (A × 5) One Step PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 100 Rxns × 5 ¥10,797
¥5,399
One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR064A: 50 μl反应×100次)
2X One Step RT-PCR Buffer Ⅲ*1 840 μl × 3 支
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/ μl) 100 μl
PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ*2 100 μl
RNase Free dH2O 1.25 m l × 2 支
ROX Reference Dye (50X)*3 100 μl
ROX Reference Dye II (50X)*3 100 μl
 
*1 内含dNTP Mixture,Mg2+等。
*2 内含RNase Inhibitor。
*3 用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye(50X),7500 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II(50X),Thermal Cycler Dice Real Time System和Smart Cycler System、LightCycler等Real Time PCR扩增仪不必使用。
 
 
■ 制品说明
本制品是采用探针法进行Real Time One Step RT-PCR的专用试剂。使用本制品进行Real Time RT-PCR反应可在同一反应管内连续进行,操作简单,并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时监测,大大提高了检测灵敏度,并省略了PCR反应后的电泳步骤,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。
本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase和具有高扩增效率和高扩增特异性的TaKaRa Ex Taq HS,能进行稳定高效的Real Time One Step RT-PCR反应。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特长
1. 通过Real Time One Step RT-PCR反应,可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA 进行分析。
2. PCR用DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以进行Hot Start法PCR 反应,再与Takara特别开发的Buffer系统相结合,具有高扩增效率,高扩增灵敏度,高扩增特异性之特点。
3. One Step RT-PCR Buffer III是一种2X浓度的Premix Type试剂,操作简单,能有效避免污染。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、各种酶等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
2. 使用TaKaRa Ex Taq HS、PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2X One Step RT-PCR Buffer Ⅲ 融解后如有不溶物请充分混合。配制Real Time One Step RT-PCR反应液时应避免强光照射。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。
5. 本制品只能使用特异性反转录引物,不能使用Random Primer 和Oligo dT Primer 等进行反转录反应。
 
 
Technote:
点击图片查看
One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)
 

页面更新:2022-09-02 09:26:27

PrimeScript™ RT-PCR Kit酶试剂盒Takara


PrimeScript RT-PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR014A PrimeScript RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,261 PrimeScript™ RT-PCR Kit PrimeScript™ RT-PCR Kit PrimeScript™ RT-PCR Kit
Takara RR014B (A × 4) PrimeScript RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥4,546 PrimeScript™ RT-PCR Kit PrimeScript™ RT-PCR Kit PrimeScript™ RT-PCR Kit
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PrimeScript™ RT-PCR Kit PrimeScript™ RT-PCR Kit PrimeScript™ RT-PCR Kit PrimeScript™ RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (Code No. RR014A ; 50 次量*1)
PrimeScript RTase (for 2 Step) 25 μl
5 × PrimeScript Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 150 μl
Oligo dT Primer (2.5 μM) 50 μl
Random 6 mers (20 μM) 50 μl
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) 25 μl
10 × PCR BufferⅡ 250 μl
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2 × 105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 1 ml
 
*1 反转录反应20 μl 、PCR反应50 μl体系时可使用50次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
 
■ 制品说明
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种使用两条引物在目的DNA序列两侧扩增特异性DNA片段的过程。它是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法,但RNA不能直接被扩增。经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript RT-PCR Kit是具有良好的延伸性能与高扩增效率的2 Step RT-PCR试剂盒。反转录反应使用了Takara Bio Inc.特别开发的M-MLV由来的新型反转录酶PrimeScript RTase;PCR反应使用了扩增性能良好的Hot Start 型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS。本试剂盒具有以下优点:
1. 进行高效的RT-PCR扩增。
2. 在标准的RNA反转录反应温度 (42℃) 下,便可使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸,可以避免RNA在高温条件下的降解。
3. 能有效抑制非特异性的PCR扩增。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需的全部试剂。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Random 6 mers
       pd (N)6
Oligo dT Primer
       Takara Bio特别设计的dT区域*
Control F-1 Primer
       5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer
       5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
* 该序列和TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver. 3.0 (Code No. : RR019A/B) 的Oligo dT Adaptor Primer不同,不含有与M13 Primer M4匹配的序列。
 
■ Positive Control RNA
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。
 
PrimeScript™ RT-PCR Kit
图1. Positive Control RNA:使用Control Primer可以扩增462 bp的DNA片段
 
■ 保存
-20℃。
 
■ RNA PCR 的原理
PrimeScript RT-PCR Kit首先用PrimeScript RTase将RNA合成cDNA,再取一部分1st strand cDNA作为模板,由TaKaRa Ex Taq HS进行PCR扩增。将RNA反转录成cDNA的引物可以使用Random 6 mers、Oligo dT Primer或特异性下游引物。
 
PrimeScript™ RT-PCR Kit
图2. PrimeScript RT-PCR Kit原理图
 
 
 
PrimeScript™ RT-PCR Kit
图3. PrimeScript RT-PCR Kit 的操作流程
 
■ 特点
RNA模板
      适用于所有RNA
扩增片段大小
      ~12 kb
反转录酶
      PrimeScript RTase (反转录反应最适温度42℃)
DNA Polymerase
      TaKaRa Ex Taq HS
RNase Inhibitor
      Kit中含有
合成第一条cDNA链的引物
      Random 6 mers、Oligo dT Primer和特异性下游引物
 
■ 反转录反应时Primer的选择
反转录引物的选择,应结合实验的具体情况,选择以下三种引物,即:Random 6 mers、Oligo dT Primer或特异性下游引物。对没有发夹结构的短链mRNA,上述三种引物都可以使用;一般情况下的反转录引物的选择请参照以下说明。
Random 6 mers
  适用于长的或具有Hairpin构造的RNA。包括rRNA、mRNA、tRNA等在内的所有RNA的反转录反应都可使用本引物。
Oligo dT Primer
  适用于具有PolyA Tail的RNA。(注意:原核生物的RNA、真核生物的rRNA、tRNA以及某些种类的真核生物的mRNA等不具有PolyA Tail)。
特异性下游引物
(PCR时的下游引物)
  必须与模板序列互补,需了解Target序列。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 用PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、TaKaRa Ex Taq HS等酶类时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放入-20℃保存。
4. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头,以防止样品间污染。
 
 

页面更新:2019-10-12 11:39:36

PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2酶试剂盒Takara


PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR055A PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 50 Rxns ¥1,472
¥1,030
PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2
Takara RR055B (A × 4) PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 50 Rxns × 4 ¥5,297
¥3,708
PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR055A)
PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 100 μl
2 × 1 Step Buffer 625 μl ×2
Control F-1 Primer (20 μM)*1 20 μl
Control R-1 Primer (20 μM)*2 20 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 625 μl ×2
 
*1 Positive Control RNA用上游引物。
*2 Positive Control RNA用下游引物。
 
 
■ 制品说明
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,RT-PCR方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
本试剂盒采用了一步 (One Step) RT-PCR法。RNA→cDNA→PCR反应操作在同一反应体系中连续进行,反应中途不需添加任何试剂,降低污染风险。反转录反应使用了Takara Bio公司特别开发的新型反转录酶PrimeScript RTase。该反转录酶对具有复杂二级结构的RNA模板也具有很强的延伸能力;PCR反应使用了扩增性能优越的Hot Start型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS,大大提高了本试剂盒的扩增性能和反应特异性。在本试剂盒中,已将PrimeScript RTase、TaKaRa Ex Taq HS、RNase Inhibitor以及One Step RT-PCR用稳定剂等配制成了Premix型的PrimeScript 1 step Enzyme Mix;同时把反应用Buffer、dNTP以及One Step Enhancer Solution配制成了Premix型的2×1 Step Buffer的形式,使实验操作时的反应液配制更为简单方便。使用本试剂盒可进行高效的RT-PCR扩增。反转录温度可以设定为50℃,能够有效抑制非特异性扩增。另外,本试剂盒可减少由于错配和引物二聚体造成的非特异性反应。
本试剂盒中含有进行One Step RT-PCR反应用的全部试剂,可以方便有效地对RNA进行扩增分析。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Control F-1 Primer
       5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer
       5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
■ 原 理
PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2可在同一反应管中连续进行由PrimeScript RTase将RNA反转录为cDNA,再由TaKaRa Ex Taq HS扩增此cDNA的RT-PCR反应。
 
PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2
图1. PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2原理图
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 注意事项
1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时,应先配制至少10次量各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript 1 Step Enzyme Mix时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2×1 Step Buffer使用前用vortex充分混匀,离心后使用。
4. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放回-20℃中保存。
5. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
6. 分装试剂时务必使用新的枪头,以防止样品间污染。
7. 使用本试剂盒进行反转录反应时必须使用特异性的反转录引物,Random Primer、Oligo dT Primer不能使用。
 
 

页面更新:2019-10-12 11:40:36

PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)酶试剂盒Takara


PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR057A PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 50 Rxns ¥1,582
¥1,107
PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
Takara RR057B (A × 4) PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 50 Rxns × 4 ¥5,697
¥3,988
PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
 
 
■ 制品内容 (50 次量)
PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 100 μl
2X 1 Step Buffer (Dye Plus) 625 μl × 2
Control F-1 Primer (20 μM)*1 20 μl
Control R-1 Primer (20 μM)*2 20 μl
Positive Control RNA (2×105 Copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 625 μl × 2
 
*1 Positive Control RNA用上游引物。
*2 Positive Control RNA用下游引物。
 
 
■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,RT-PCR方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
本试剂盒采用了一步(One Step)RT-PCR法。RNA→cDNA→PCR反应操作在同一反应体系中连续进行,反应中途不需添加任何试剂,避免污染危害。同时反应液中已含有电泳时所必需的色素试剂(蓝色和黄色色素),反应后可以直接进行电泳。反应液为鲜艳的绿色(Emerald Green),电泳时指示效果明显,容易观察样品的电泳位置。反转录反应使用了具有很强延伸能力的反转录酶PrimeScript RTase。该反转录酶对具有复杂二级结构的RNA模板也具有很强的延伸能力;PCR反应使用了扩增性能优越的Hot Start型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,大大提高了本试剂盒的扩增性能和反应特异性。反应试剂已优化,以实现与不含染料和loading buffer的传统RT-PCR系统具有相同反应效果。在本试剂盒中,已将PrimeScript RTase、TaKaRa Ex Taq HS、RNase Inhibitor以及One Step RT-PCR用稳定剂等配制成了Premix型的PrimeScript 1 Step Enzyme Mix;同时把反应用Buffer、dNTP以及One Step Enhancer Solution配制成了Premix型的2×1 Step Buffer(Dye Plus)的形式,使实验操作时的反应液配制和电泳检测更为简单方便。
本试剂盒具有以下特点:
1. 进行高效的RT-PCR扩增。
2. 反应液制备简单,可直接进行凝胶电泳。
3. 反转录温度可以设定为50℃,能够有效抑制非特异性扩增。
4. 可减少由于错配和引物二聚体造成的非特异性反应。
本试剂盒中含有进行One Step RT-PCR反应用的全部试剂,可以方便有效地对RNA进行扩增分析。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
  Control F-1 Primer        5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
  Control R-1 Primer        5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
■ Positive Control RNA
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。
 
PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
图1. Positive Control RNA:使用Control Primer可以扩增462 bp的DNA片段
 
■ 原理
PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2(Dye Plus)可在同一反应管中连续进行由PrimeScript RTase将RNA反转录为cDNA,再由TaKaRa Ex Taq HS扩增此cDNA的RT-PCR反应。
 
PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus)
图2. PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2 (Dye Plus) 原理图
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特点
       RNA模板   适用于所有RNA
       扩增片段大小   ~8 kb
  PrimeScript 1 Step Enzyme Mix   PrimeScript RTase
  DNA Polymerase (TaKaRa Ex Taq HS)
  RNase Inhibitor
  2 × 1 Step Buffer (Dye Plus)
  含有反应Buffer
  dNTP Mixture (终浓度400 μM)
  One Step Enhancer Solution
  色素、比重剂
  1st strand cDNA合成用引物   特异性下游PCR Primer (Oligo-dT Primer和 Random引物不能使用)
       操 作   在同一反应管中连续进行RT-PCR反应
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript 1 Step Enzyme Mix时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2 X 1 Step Buffer (Dye Plus) 使用前用Vortex充分混匀,离心后使用。
4. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放回-20℃中保存。
5. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
6. 分装试剂时务必使用新的枪头,以防止样品间污染。
7. 使用本试剂盒进行反转录反应时必须使用特异性的反转录引物,Random Primer、Oligo dT Primer不能使用。
 
 

页面更新:2019-10-12 11:41:05

PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit酶试剂盒Takara


PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R023A PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,472 PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
Takara R023B (A × 4) PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥5,297 PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
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PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量*1)
PrimeScript II RT Enzyme Mix 50 μl
5×PrimeScript II Buffer 200 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 100 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (20 μM) 50 μl
PrimeSTAR GXL for RT-PCR 100 μl
5×PrimeSTAR GXL Buffer 500 μl
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 1ml
   
*1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl,2 Step RT-PCR时可使用50次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
 
■ 制品说明
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种使用两种引物扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后扩增 (RT-PCR),PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit是一种对长链RNA及富含GC序列的RNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。
本试剂盒中使用的PrimeScript II反转录酶是改良型的PrimeScript RTase,可在合成长链cDNA时发挥效力,同时PCR时使用了对长链及富含GC序列的cDNA扩增时具有高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR GXL DNA Polymerase。因PrimeScript II RTase可很好地抑制由于引物错配引起的非特异性扩增,即使使用高浓度的Oligo dT Primer进行反转录反应也不会导致cDNA合成时的阻害作用,因此使用高浓度的RNA作为模板也可进行良好的反转录反应。
本试剂盒中使用PrimeScript II RTase与RNase Inhibitor的混合型PrimeScript II RT Enzyme Mix。另外,PrimeSTAR GXL DNA Polymerase克服了以往的高保真酶由于核酸浓度过高而存在的反应阻害性,在高浓度核酸存在条件下也能发挥其效力,可以在更宽广的RNA模板范围内获得cDNA扩增产物。 本试剂盒具有以下优点:
1. 能够从长链RNA及富含GC序列的RNA中获得错配率很低的cDNA扩增产物。
2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。
3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广,便于使用。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且,也可以进行1 Step RT-PCR反应。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Random 6 mers Pd (N)6
Oligo dT Primer Takara独自开发的dT区域的序列
Control F-1 Primer 5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer 5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
 
■ Positive Control RNA
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。
 
PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
图1. Control RNA:使用Control Primer时所能扩增的DNA片段
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、dNTP Mixture等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for RT-PCR等酶类产品时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放入-20℃保存。
4. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 

页面更新:2019-10-12 11:43:47

PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit酶试剂盒Takara


PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R026A PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,803 PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
Takara R026B (A × 4) PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥6,508 PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
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PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (Code No.: R026A)
PrimeScript II RT Enzyme Mix 50 μl
PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR 200 μl
2 × One Step High Fidelity Buffer 625 μl × 2
Control F-1 Primer*1 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 625 μl × 2
   
*1 Positive Control RNA用上游引物。
*2 Positive Control RNA用下游引物。
 
PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
图1. Control RNA: 使用Control Primer时扩增的DNA片段
 
■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种使用两种引物扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后扩增(RT-PCR),PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit是在一个反应管中连续进行反应的1 step RT-PCR用试剂盒。反转录酶使用延伸性能好且能够合成全长cDNA的PrimeScript II RTase,PCR使用准确性高且适于扩增长链及GC Rich cDNA的PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase,这两种酶经优化后可用于1 step RT-PCR。
本试剂盒可用于宽泛浓度RNA起始的反应,在反转录反应10分钟、PCR反应延伸时间为10秒/kb的高速条件下,能够扩增难扩增的长链及GC rich等各种目的基因,可简便快速且准确地获得cDNA产物。

本试剂盒具有以下优点:
· 使用单管反应,降低污染的风险,可准确且简便地扩增RNA起始的目的基因。
· 反转录反应只需10分钟,PCR延伸时间达10秒/kb的高速反应。
· 可扩增GC rich、长链cDNA。
· 反应中total RNA的使用量范围广,易于使用。
本试剂盒含有RNA起始合成cDNA及经PCR扩增cDNA所需的全部试剂。

 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特点
       RNA模板   适用于所有RNA
       扩增片段大小   ~8 kb
       反转录酶   PrimeScript II RTase (使用温度45℃)
       DNA Polymerase   PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR
       RNase Inhibitor   必须使用 (PrimeScript II RT Enzyme Mix 中含有)
1st strand cDNA合成用引物   使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物)
  (不可使用 Random 6 mers 及 Oligo dT Primer)
       操作   在一个反应管中连续的进行RT-PCR反应
 
■ 使用注意
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前一定认真阅读。
1. 当同时需要进行多个RT-PCR 反应时,应先配制各种试剂的混合液(Master Mix;其中包括 RNase Free dHH2O、Buffer、dNTP Mixture 等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR等酶类产品时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2 × One Step High Fidelity Buffer使用前需充分vortex后,离心备用。
4. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放入-20℃保存。
5. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融,建议将其分成小包装后冻存。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
6. 分装试剂时务必使用新的枪头(Tip),以防止样品间污染。
7. 本试剂盒的反转录反应使用基因特异性引物。不要使用Random Primer或Oligo-dT Primer。
 
 
 

页面更新:2019-10-12 11:42:21

PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit酶试剂盒Takara


PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R022A PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,351 PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
Takara R022B (A × 4) PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥4,866 PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
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PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (Code No.: R022A : 50 次量*1)
PrimeScript RTase (for 2 step) 25 μl
5×PrimeScript Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl
Oligo dT Primer (2.5 μM) 50 μl
Random 6 mers (20 μM) 50 μl
PrimeSTAR Max Premix (2×) 625 μl × 2
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 1 ml
   
*1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl,2 Step RT-PCR时可使用50次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
Limited Use Label License: [M54]  
 
■ 制品说明
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种体外扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后进行扩增 (RT-PCR),PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit是一种对Total RNA及mRNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。
本试剂盒中使用的反转录酶是Takara改良的M-MLV新型反转录酶PrimeScript RTase,PCR时使用了对cDNA扩增时具有很高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR MAX DNA Polymerase。因PrimeSTAR MAX是兼具高保真性与高扩增效率的预混型酶,模板浓度适用范围广,可用于高保真性的cDNA克隆等重要反应中。
2 Step RT-PCR作为本试剂盒的标准操作流程,2 Step RT-PCR操作流程具有以下优点:
1. 能够高效率地获得高保真性的RT-PCR扩增产物。
2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。
3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广,便于使用。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且,也可以进行1 Step RT-PCR反应。
 
■ 保存
-20℃。
注意:PrimeSTAR MAX Premix (2×) 反复冻融25次后,已确认其活性没有发生改变,但要注意尽量避免冻融次数过多。
 
■ 试剂盒特点
使用2 Step RT-PCR标准操作流程时
       RNA模板   适用于所有RNA
       扩增片段大小   6 kb产物
       反转录酶   PrimeScript RTase (反应温度在42℃)
       DNA Polymerase   PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)
       RNase Inhibitor   必须使用 (Kit中含有)
1st strand cDNA合成用引物   Random 6 mers、Oligo dT Primer、特异性下游引物可供选择
 
使用1 Step RT-PCR操作流程时
       RNA模板   适用于所有RNA
       扩增片段大小   6 kb产物
       反转录酶   PrimeScript RTase (反应温度50℃)
       DNA Polymerase   PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)
       RNase Inhibitor   必须使用 (Kit中含有)
1st strand cDNA合成用引物   使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物)
  (不可使用Random 6 mers及Oligo dT Primer)
       操 作   在同一个反应管中可连续进行RT-PCR反应
 
 

页面更新:2020-08-07 11:00:00