qiagen HotStarTaq DNA Polymerase*203205

qiagen HotStarTaq DNA Polymerase*

  • 产品型号:  203205
  • 简单描述
  • qiagen HotStarTaq DNA Polymerase*不同于抗体介导的方法,HotStarTaq DNA Polymerase应用化学介导的热启动,可确保聚合酶在PCR初始加热阶段*没有活性。HotStarTaq DNA Polymerase提供*的QIAGEN PCR Buffer,将非特异性扩增产物、引物二聚体和其他污染降至Z低。一种新型的添加剂Q-Solution,
详细介绍

qiagen HotStarTaq DNA Polymerase*

出色的表现。

将50拷贝的HIV-pol基因重组体加入1 µg人基因组DNA中,扩增497 bp的片段。采用不同的热启动酶:QIAGEN的HotStarTaq DNA Polymerase(HotStarTaq);Supplier AII的热启动酶(Hot-start enzyme);Supplier L的Taq抗体混合物(Antibody-mediated);Supplier R的非热启动酶(No hot start)。特异性的PCR产物如箭头所示。取等体积的反应产物在2%的琼脂糖凝胶上分析。M:分子量标准。

qiagen HotStarTaq DNA Polymerase*

对不同引物-模板体系均有较高的特异性。

在相同的条件下,使用Supplier R的Taq DNA聚合酶 (R) 或HotStarTaq DNA Polymerase (H),对三种不同的引物-模板系统进行扩增。System 1:从人基因组DNA中扩增1.1 kb的D-IgI同系物片段。System 2:从人基因组DNA中扩增与X染色体链锁型青年型视网膜裂损症相关的296 bp的染色体区域片段。System 3:利用总RNA合成的cDNA,扩增214 bp的β-actin基因片段。M:分子量标准。

RT-PCR中高效的热启动。

利用cDNA扩增1.1 kb的人白介素1受体 (II型) 片段。使用Supplier L的Taq DNA聚合酶和缓冲液(No hot start);使用Supplier L的抗体介导的热启动酶和缓冲液(Antibody-mediated);使用QIAGEN的HotStarTaq DNA Polymerase和PCR Buffer (HotStarTaq)制备扩增反应,重复三次。M:分子量标准。

高度灵敏的单细胞PCR。

利用流式细胞术分离单细胞,并直接分选至单个PCR管内,扩增500 bp的鼠p53基因片段。使用QIAGEN的HotStarTaq DNA Polymerase和PCR Buffer(HotStarTaq)、Supplier AII的热启动酶和缓冲液(Hot-start enzyme)或Supplier L的抗体介导的热启动酶和缓冲液(Antibody-mediated)制备并行反应。M:分子量标准。

SeqAmp DNA Polymerase酶试剂盒Takara


SeqAmp DNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 638504 SeqAmp DNA Polymerase 50 Rxns ¥1,446 SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase
Clontech 638509 SeqAmp DNA Polymerase 200 Rxns ¥4,051 SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase
Clontech 638526 SeqAmp CB PCR Buffer 50 Rxns ¥361 SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase SeqAmp DNA Polymerase
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SeqAmp DNA Polymerase是hot start型高保真酶,非常适合与各种SMARTer试剂盒一起使用进行下一代测序。该PCR酶已经过优化,即使含有高GC或高AT区域的困难模板,也证实了可以进行很好的扩增。
 
 
产品详情请点击:SeqAmp DNA Polymerase
 
 

页面更新:2020-08-03 10:01:45

DNA Polymerase I (E. coli)酶试剂盒Takara


DNA Polymerase I (E. coli)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2130A DNA Polymerase I (E. coli) 500 U ¥261 DNA Polymerase I (E. coli) DNA Polymerase I (E. coli) DNA Polymerase I (E. coli)
Takara 2130B (A × 5) DNA Polymerase I (E. coli) 500 U × 5 ¥1,172 DNA Polymerase I (E. coli) DNA Polymerase I (E. coli) DNA Polymerase I (E. coli)
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■ 制品内容
DNA Polymerase I (5 U/μl) 500 U
10X E.coli DNA Polymerase I Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
DNA Polymerase I 在模板和引物 (DNA或RNA) 存在的条件下,以dNTP作底物,沿5′→3′方向合成与模板互补的DNA。本酶分子量约为109,000,具有双链特异性的5′→3′外切核酸酶活性以及单链特异性的3′→5′外切核酸酶的活性。本酶是由带有编码E.coli DNA Polymerase I基因的大肠杆菌精制而成的。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid which encodes the gene of Pol I.
 
■ 活性定义
以合成的Poly d (A-T) DNA为模板/引物,在37℃、pH7.4的条件下,30分钟内使10 nmol 的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。
 
■ 用途
1. 与DNase I (Code No. 2270A/B) 一起使用,进行切口平移 (Nick translation)。
2. 通过Okayama-Berg法合成cDNA的第二条链 (0.3 μg DNA Polymerase I 约为2.5 units)。
 
■ 使用注意
1. 本酶稀释也不失活,但剧烈搅拌会使酶失活。
2. 不含内切酶活性,单独使用不表现切口平移活性。
3. 由于同DNA有较强的亲和性,过量使用易发生凝集作用 (Aggregation),会使反应不能充分进行。
 
 

页面更新:2019-11-14 15:00:17

T4 DNA Polymerase酶试剂盒Takara


T4 DNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2040A T4 DNA Polymerase 100 U ¥261 T4 DNA Polymerase T4 DNA Polymerase T4 DNA Polymerase
Takara 2040B (A × 5) T4 DNA Polymerase 100 U × 5 ¥1,172 T4 DNA Polymerase T4 DNA Polymerase T4 DNA Polymerase
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■ 制品内容
T4 DNA Polymerase (5 U/μl) 100 U
10X T4 DNA Polymerase Buffer 1 ml
0.1% BSA* 1 ml
   
* BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
 
■ 制品说明
在模板及引物存在的条件下,催化与模板互补的脱氧核苷酸依次选择性地连接在引物的3′-OH末端上的反应。本酶还具有单链DNA特异性的3′→5′外切核酸酶活性,该活性比Klenow Fragment强100~1,000倍。本酶没有5′→3′的外切核酸酶活性。
 
■ 保存
-20℃
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid containing phage T4 DNA polymerase gene
 
■ 活性定义
以合成的Poly (dA-dT) DNA为摸板/引物,在37℃、pH8.8条件下,30分钟内使10 nmol的dATP和dTTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定义为1个活性单位 (U)。
 
■ 用途
1. 利用较强的3′→5′的外切核酸酶活性,通过置换合成从DNA片段的3’末端进行标记。
2. DNA末端的平滑化。
3. 通过引物延伸法解析mRNA转录的起始点。
 
■ 使用注意
1. 本酶的最适pH为8-9,在pH7.5及pH9.7时活性降低50%。
2. 活性的表达需要Mg2+的存在。为了获得较大活性,还需要SH基的还原剂存在。
3. 整个反应体系中的离子强度超过100 mM时活性将被抑制。
4. 本酶易受模板DNA高级结构的影响,T4 gene 32产物可以显著提高聚合酶活性,而3′→5′的外切核酸酶活性则完全被抑制。
 
 

页面更新:2019-03-07 16:03:35

T7 RNA Polymerase ver.2.0酶试剂盒Takara


T7 RNA Polymerase ver.2.0
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2541A T7 RNA Polymerase ver.2.0 20,000 U ¥2,600 T7 RNA Polymerase ver.2.0 T7 RNA Polymerase ver.2.0 T7 RNA Polymerase ver.2.0
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■ 制品内容(Code No. 2541A)
T7 RNA Polymerase ver.2.0 (200 U/μl) 20,000 U
10X T7 RNA Polymerase Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本制品以含有T7启动子序列的双链DNA为模板,以NTPs为底物,转录启动子下游区域,合成与模板互补的单链RNA。与附带的buffer一起用于体外转录 (IVT) 反应时,可以大量制备高质量的RNA。
本制品是T7 RNA Polymerase(Code No. 2540A/B)的升级产品,每个反应(20 μl体系)的RNA合成量提高约7倍(图1),性能更强!
T7 RNA Polymerase ver.2.0
图 1. 本制品与旧产品合成 FLuc RNA(约 1.9 kb)时的产量比较(20 μl 体系)
 
* 典型的 T7 启动子序列和转录起点
为 IVT 反应制备模板 DNA 的典型 T7 启动子序列如下所示。将转录起始点(+1 位置)的碱基设置为“G”对于高效的 RNA 合成很重要,但需要根据要合成的RNA序列和用于5′-cap修饰的Cap类似物的特点来设计模板,所以要根据目的准备模板DNA。
T7 RNA Polymerase ver.2.0
 
■ 保存
-20℃
 
■ 起源
Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase.
 
■ 性质
1. 分子量:约99 kDa
2. 辅因子:Mg2+
 
■ 活性定义
在 37℃,1 小时内使 1 nmol [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1. 使用 Cap 类似物合成带帽的 mRNA
2. 长链非编码 RNA 的合成
3. guide RNA 的合成
4. siRNA前体的合成
5. 用于 RT-qPCR 的 RNA 标准模板的合成
6. 高标记RNA 探针的合成
 
■ 使用注意
1. 酶不要剧烈搅拌。
2. 当 dsDNA 模板、试剂、试管或微量移液器吸头被 RNase 污染时,合成的 RNA 的产量会降低或者出现片段化。在实验过程中应采取预防措施以避免 RNase 污染,例如戴一次性手套和使用专门用于 RNA 实验的试管和微量移液器吸头。
3. 为了合成长度一致的RNA,通常使用线性dsDNA(例如线性化质粒和 PCR 产物)用于体外转录。有报道称,模板DNA末端应为5’-突出或平端,以避免出现非特异性产物。
4. 缓冲液中的亚精胺会与核酸形成复合物并可能产生沉淀,因此模板 DNA 应在加酶之前即倒数第二步再加入反应体系中。

 
■ 使用例
T7 RNA Polymerase ver.2.0
 
37℃孵育 1-2 小时。
 
 

页面更新:2022-07-04 10:45:14

T7 RNA Polymerase酶试剂盒Takara


T7 RNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2540A T7 RNA Polymerase 5,000 U ¥600 T7 RNA Polymerase T7 RNA Polymerase T7 RNA Polymerase
Takara 2540B (A × 5) T7 RNA Polymerase 5,000 U × 5 ¥2,850 T7 RNA Polymerase T7 RNA Polymerase T7 RNA Polymerase
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■ 制品内容(Code No. 2540A)
T7 RNA Polymerase (50 U/μl) 5,000 U
10X T7 RNA Polymerase Buffer 1 ml
50 mM DTT 1 ml
 
■ 制品说明
本酶是噬菌体T7 DNA编码的酶,以含有T7启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。本酶对T7启动子序列具有高度特异性,不能识别其它生物来源的启动子。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase gene.
 
■ 性质
1. 分子量:约98,000。
2. 亚单位:单一的多肽。
3. 最适pH:pH8.0。
4. 辅因子:Mg2+(最适浓度:8 mM),还原剂 (5 mM DTT)。
5. 激活剂:2 mM亚精胺 (4 mM亚精胺与DNA形成共沉淀)。
6. 抑制剂:NEM(10-4 M)、PCMB(5×10-8 M)。
 
■ 活性定义
在37℃、pH8.0的条件下,1小时内使1 nmol的 [3H] GMP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1. 合成单链RNA。
2. 合成高标记RNA探针。
3. 合成siRNA前体。
4. 制作RNA剪接反应 (RNA Splicing) 的前体。
5. 以帽类似物 (Cap analog) 为引物,制作Capped mRNA。
 
■ 使用注意
1. 为了特定区域的有效转录,建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。
2. 缓冲液中的亚精胺与核酸结合可能形成不溶物。建议最后加入模板DNA。
 
 

页面更新:2022-05-07 16:23:28

SP6 RNA Polymerase酶试剂盒Takara


SP6 RNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2520A SP6 RNA Polymerase 3,000 U ¥701 SP6 RNA Polymerase SP6 RNA Polymerase SP6 RNA Polymerase
Takara 2520B (A × 5) SP6 RNA Polymerase 3,000 U × 5 ¥3,154 SP6 RNA Polymerase SP6 RNA Polymerase SP6 RNA Polymerase
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■ 制品内容
SP6 RNA Polymerase (50 U/μl) 3,000 U
10X SP6 RNA Polymerase Buffer 1 ml
100 mM DTT 1 ml
0.1% BSA 1 ml
 
■ 制品说明
本酶是鼠伤寒沙门氏菌LT2的噬菌体SP6 DNA编码的酶,分子量为96,000。本酶以含有SP6启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA对SP6启动子序列具有高度特异性,不能识别其它生物来源的启动子。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for phage SP6 RNA polymerase gene
 
■ 活性定义
在37℃、pH7.5的条件下,1小时内使1 nmol的 [3H] GMP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1. 为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2. 制作RNA剪接反应 (RNA Splicing) 的前体。
3. 以帽类似物 (Cap analog) 为引物,制作Capped mRNA。
 
■ 使用注意
1. 最适pH为7.5,需要Mg2+和还原剂的存在,添加BSA及亚精胺可提高酶的活性。
2. 最适反应温度为40℃ (此时酶活性为37℃时的130%),当所用酶量不超过300 U/ml,模板量不超过0.1 mg/ml时与RNA的合成量呈正比例。
3. 为了特定领域的有效转录,建议在其领域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。
4. 缓冲液中所含亚精胺容易与核酸形成复合物产生不溶物,建议最后加入DNA模板。
 
 

页面更新:2019-03-13 15:20:52

Poly(A) Polymerase酶试剂盒Takara


Poly(A) Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2181 Poly(A) Polymerase 20 U ¥1,031 Poly(A) Polymerase Poly(A) Polymerase Poly(A) Polymerase
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■ 制品内容
Poly (A) Polymerase (2 U/μl) 20 U
10X Poly (A) Polymerase Buffer 1 ml
10 mM DTT 1 ml
25 mM MnCl2 1 ml
0.1% BSA* 500 μl
100 mM ATP 8 μl
   
* BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
 
■ 制品说明
本酶催化在各种多聚核糖核酸的3′末端聚合A碱基的反应。反应中使酶达到高活性所需的盐浓度为300-400 mM NaCl。能以多种单链RNA作引物,双链RNA以及合成的多聚核苷酸、短的寡聚核苷酸等不宜作引物;DNA也不能作引物。本酶因聚合AMP碱基,故只能用ATP作底物,ADP、dATP均不能作为底物。另外,UTP、CTP的掺入不足ATP的5%,而GTP也不能作为底物进行聚合。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ ATP的掺入个数和时间的关系
以1 mM ATP作底物,15 U的Poly(A) Polymerase作用于84 μg RNA所得到的结果如下:
反应时间(分钟) 0 5 10 30 60
Poly(A)碱基数 0 10 20 40 75
 
■ 起源
Escherichia coli B
 
■ 活性定义
以ATP为底物,在37℃、pH7.9的条件下,10分钟内把1 nmol的AMP聚合到引物上所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
 
■ 用途
1. 在RNA上加上Poly (A) 尾。
2. RNA的3′末端标记。
 
 

页面更新:2019-03-07 16:25:07

Pyrobest™ DNA Polymerase酶试剂盒Takara


Pyrobest DNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R005Q Pyrobest DNA Polymerase 50 U ¥195 Pyrobest™ DNA Polymerase Pyrobest™ DNA Polymerase Pyrobest™ DNA Polymerase
Takara R005A Pyrobest DNA Polymerase 125 U ¥401 Pyrobest™ DNA Polymerase Pyrobest™ DNA Polymerase Pyrobest™ DNA Polymerase
Takara R005B (A × 4) Pyrobest DNA Polymerase 125 U × 4 ¥1,442 Pyrobest™ DNA Polymerase Pyrobest™ DNA Polymerase Pyrobest™ DNA Polymerase
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■ 制品内容 (Code No.: R005A)Pyrobest™ DNA Polymerase
Pyrobest DNA Polymerase (5 U/μl) 125 U (25 μl)
10×Pyrobest Buffer II(Mg2+ plus,10 mM) 500 μl
dNTP Mixture (各2.5 mM) 400 μl
   
 
■ 制品说明
本制品是Pyrococcus Sp.由来的具有3′→5′Exonuclease (Proof reading活性) 的耐热性α型DNA聚合酶。与Pol I 型DNA聚合酶 (Taq DNA Polymerase等) 相比,α型DNA聚合酶具有PCR适用范围窄、最适反应条件难以确定等缺点。而Pyrobest DNA Polymerase所使用的Buffer已被优化,与Taq DNA聚合酶具有相同的扩增效率 (可扩增人基因组DNA约6 kb和λ DNA约12 kb大小的片段)。另外,Pyrobest DNA Polymerase具有3′→5′Exonuclease活性可以把错配的碱基除去,不仅适用于高保真性的PCR反应,还具有很高的反应性能。
目前使用的10×Pyrobest Buffer II同原来使用的10×Pyrobest Buffer相比,大大提高了PCR反应性能。
 
■ 保存
-20℃。
 
 

页面更新:2019-12-23 14:24:26

e2TAK DNA Polymerase酶试剂盒Takara


e2TAK DNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RF001A e2TAK DNA Polymerase 200 Rxns ¥491 e2TAK DNA Polymerase e2TAK DNA Polymerase e2TAK DNA Polymerase
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■ 制品内容 (50 μl 反应 × 200 次)
e2TAK DNA Polymerase 100 μl
5×e2TAK Buffer (Mg2+ plus) 1 ml×2
dNTP Mixture (2.5 mM each) 800 μl
   
 
■ 制品说明
e2TAK是一种用于PCR扩增的多用途DNA聚合酶。e2TAK具有比Taq DNA聚合酶更高的扩增效率,并含有3’-5’核酸外切酶活性。它适用于各种标准的PCR应用。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 纯度
以超螺旋pBR322 DNA、λDNA或λ-Hind III酶切DNA为底物,未检测到缺口、内切酶和外切酶活性。
 
■ 用途
PCR法扩增DNA
 
■ PCR产物
使用e2TAK DNA Polymerase获得的PCR扩增产物多数为平滑末端。因此,可直接克隆到平滑末端载体中 (如有需要,克隆前进行磷酸化反应)。
 
■ PCR反应性能
1. 以λDNA为模板,可很好地扩增10 kb的DNA片段。
2. 以人基因组DNA为模板,可很好地扩增单拷贝基因约4 kb的DNA片段。
 
 

页面更新:2021-09-28 08:31:52

MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3酶试剂盒Takara


MightyAmp DNA Polymerase Ver.3
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R076A MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 250 U ¥1,102
¥937
MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3
Takara R076B(A×4) MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 1,000 U ¥3,955 MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3 MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3
 
 
■ 制品内容(50 μl反应,200 次量)
MightyAmp DNA Polymerase Ver.3(1.25 U/μl)
200 μl
2×MightyAmp Buffer Ver.3(Mg2+,dNTP plus)* 1 ml × 5
10×Additive for High Specificity 500 μl × 2
 
*:Mg2+浓度是4 mM (2×),dNTP浓度是各600 μM (2×)。
 
Limited Use Label License: [M90]
 
■ 制品说明
MightyAmp DNA Polymerase是追求高反应性能开发的PCR酶,由于本酶具有很强的扩增性能,对于使用普通PCR酶难以扩增的样品,也显示出很好的扩增能力,如含有大量PCR阻害物的生体粗提样品。
MightyAmp DNA Polymerase Ver.3是对MightyAmp DNA Polymerase进行了改良,与Ver.2相比,这种改良后的PCR酶和Buffer组合使用,可进一步增强对PCR阻害物的抵抗性。此外,也提高了血液、动植物组织等生物体样品直接加入到反应液中的Direct PCR的反应性能。
无论是PCR阻害物含量较多的粗提样品,还是GC Rich、AT Rich的模板均可在宽广的模板范围内进行有效扩增,并根据需要将试剂盒中附带的10×Additive for High Specificity添加到PCR反应液中可提高PCR扩增的特异性和检测灵敏度。
本酶是使用单克隆抗体的Hot Start型PCR扩增用DNA聚合酶,98℃高温加热前,抗体与酶结合,有效抑制聚合酶活性。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 注意事项:
1. 先使用不含10×Additive for High Specificity的反应体系进行PCR扩增。想进一步提高扩增特异性和检测灵敏度时再添加10×Additive for High Specificity进行PCR扩增。
2. 动物组织进行Direct PCR的扩增产物电泳时,建议在Loading Buffer中添加Proteinase K。
 
■ 关联资料:
MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3   MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.3
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页面更新:2019-06-10 14:56:31