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PNGase F from Elizabethkingia miricolasigmaG5166

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PNGase F from Elizabethkingia miricola

  • 产品型号：  sigmaG5166
  • 简单描述
  • PNGase F from Elizabethkingia miricolabuffered aqueous solution
详细介绍

PNGase F from Elizabethkingia miricola

Application

Used to deglycosylate protein.

Biochem/physiol Actions

Cleaves an entire glycan from a glycoprotein provided the glycosylated asparagine moiety is substituted on its amino and carboxyl terminus with a polypeptide chain.

PNGase F from Elizabethkingia miricola

Unit Definition

One unit will catalyze the release of N-linked oligosaccharides from 1 nanomole of denatured ribonuclease B in one minute at 37°C at pH 7.5 monitored by SDS-PAGE. One Sigma unit of PNGase F activity is equal to 1 IUB milliunit.

Physical form

Solution in 20 mM Tris HCl, pH 7.5, 50 mM NaCl and 1 mM EDTA

 

PNGase F 货 号 #P0704LNEB酶试剂 New England Biolabs

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PNGase F 货 号 #P0704L PNGase F 货 号 #P0704L

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75,000 units
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15,000 units
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Endoglycosidase Reaction Buffer Pack

识别位点

PNGase F 货 号 #P0704L

PNGase F 几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-连接糖 [x = H 或寡糖]。
 

特性

 去除糖蛋白的 N-连接糖

 更多详细结构特异性请翻阅目录 257 页 

概述

PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖，切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。

来源

NEB #P0704 和 NEB #P0705 是从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
 
NEB #P0708 和 NEB #P0709 克隆自和平空间站伊丽莎菌（Elizabethkingia miricola，formerly Flavobacteriummeningosepticum）并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活：75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40

分子量

36,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 ,1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量。

浓度

500,000 units/ml。

注意事项

已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。
 
要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

PNGase F ( 无甘油 ) 货 号 #P0705LNEB酶试剂 New England Biolabs

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PNGase F ( 无甘油 ) 货 号 #P0705L PNGase F ( 无甘油 ) 货 号 #P0705L

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PNGase F, 重组酶

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RNase B（对照底物）

Endoglycosidase Reaction Buffer Pack

识别位点

PNGase F ( 无甘油 ) 货 号 #P0705L

PNGase F 几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-连接糖 [x = H 或寡糖]。

特性

 去除糖蛋白的 N-连接糖
 更多详细结构特异性请翻阅目录257页

概述

PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖，切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。

来源

NEB #P0704 和 NEB #P0705 是从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
 
NEB #P0708 和 NEB #P0709 克隆自和平空间站伊丽莎菌（Elizabethkingia miricola，formerly Flavobacteriummeningosepticum）并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活：75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40

分子量

36,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（65 NEB units = 1 IUB milliunit）。

浓度

500,000 units/ml。

注意事项

已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。
 
要使非变性糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

Remove-iT PNGase F 货 号 #P0706LNEB酶试剂 New England Biolabs

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Remove-iT PNGase F 货 号 #P0706L Remove-iT PNGase F 货 号 #P0706L

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几丁质磁珠

6 孔磁性分离架

12 孔磁性分离架

识别位点

Remove-iT PNGase F 货 号 #P0706L

Remove-iT PNGase F 水解糖肽/蛋白上所有类型的 N-糖链 [x = H 或者寡糖]。

特性

 从糖蛋白上切除 N-连接糖链
 更多详细结构特异性请翻阅目录 257页

概述

Remove-iT PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖，切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间（1）。Remove-iT PNGase F 携带有几丁质结合域（CBD）标签，易于从反应中去除。以不含甘油的形式提供，便于在 HPLC 和 MS 分析中取得最佳效果。

来源

从脑膜败血性杆菌（Flavobacterium meningo-septicum）中提取纯化。

反应条件

将糖蛋白于 1X DTT（40 mM）中 55℃ 温育 10 分钟使其变性。1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中 37℃ 温育 1 小时。热失活：75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X DTT
10X GlycoBuffer 2 反应缓冲液

分子量

41,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶F1、F2 或 F3 活性，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时从 5 μg DTT 变性的 RNase B 中移除超过95% 的碳水化合物所需要的酶量。

浓度

225,000 units/ml。

注意事项

当使用包含 SDS 和 DTT 的 NEB 糖蛋白变性缓冲液对 RNase B 进行变性时，需要 500,000U/ml 高浓度 Remove-iT PNGase F。
 
当 Remove-iT PNGase F 在变性条件下使用时，需要在反应混合物中加入 NP-40，因为 SDS 抑制Remove-iT PNGase F 活性。目前还不清楚非离子变性剂抵消 SDS 对 Remove-iT PNGase F 抑制的机理。
 
去糖基化反应完成后，可以用几丁质磁珠去除Remove-iT PNGase F，且几丁质磁珠的用量与去除Remove-iT PNGase F 成正比线性关系。

参考文献

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PNGase A 货 号 #P0707LNEB酶试剂 New England Biolabs

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PNGase A 货 号 #P0707L PNGase A 货 号 #P0707L

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识别位点

 PNGase A 货 号 #P0707L

PNGase A 可以从糖蛋白/糖肽链上水解 N-糖链，无论是否有木糖还是岩藻糖的存在。[x = H 或甘露糖或 N-乙酰葡糖胺]

特性

 从糖蛋白上切除 N-连接糖链

描述

PNGase A 是一种重组酰胺酶，切割糖蛋白和糖肽链上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和短复合寡糖，常见于植物和昆虫细胞中的 N-糖部分。
切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。
PNGase A 与PNGase F 的不同点在于，无论 N-连接糖链的核心结构上是否连接有 α(1,3)-岩藻糖，前者都能切割。

来源

PNGase A 的基因克隆自稻（Oryza sativa，rice）并在毕赤酵母（Pichia Pastoris）中表达。

反应条件

将 1 μg 重组抗生物素蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40 mM DTT）中 100℃ 煮沸10 分钟使其变性，再加入 NP-40、1X GlycoBuffer 3缓冲液和 2 倍稀释的 PNGase A，37℃ 反应 1 小时。

热失活：65℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液

10X GlycoBuffer 3 反应缓冲液
10% NP-40

分子量

63,800 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶F1、F2 和 F3 活性，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃条件下，1 小时从 1 μg 变性的重组抗生素蛋白中（在玉米表达），除去超过 95% 的碳水化合物所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。

注意事项

PNGase A 在糖蛋白和糖肽链中都有活性。
PNGase A 不能切割长的 N-连接糖链如：胎球蛋白、纤维蛋白原、IgG、乳铁蛋白和转铁蛋白。
PNGase A 能够切割高甘露糖型的 N-连接糖，甘露糖数量从 3 个到 9 个。

参考文献

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PNGase F, 重组酶 货 号 #P0708LNEB酶试剂 New England Biolabs

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PNGase F, 重组酶 货 号 #P0708L PNGase F, 重组酶 货 号 #P0708L

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PNGase F ( 无甘油 )

PNGase F, 重组酶

PNGase F (无甘油), 重组酶

RNase B（对照底物）

Endoglycosidase Reaction Buffer Pack

识别位点

PNGase F, 重组酶 货 号 #P0708L

PNGase F 几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-连接糖 [x = H 或寡糖]。

特性

 去除糖蛋白的 N-连接糖
 更多详细结构特异性请翻阅目录257页

概述

PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖，切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。。

来源

NEB #P0704 和 NEB #P0705 是从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
 
NEB #P0708 和 NEB #P0709 克隆自和平空间站伊丽莎菌（Elizabethkingia miricola，formerly Flavobacteriummeningosepticum）并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活：75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40

分子量

36,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（65 NEB units = 1 IUB milliunit）。

浓度

500,000 units/ml。

注意事项

已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

PNGase F (无甘油), 重组酶 货 号 #P0709LNEB酶试剂 New England Biolabs

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PNGase F (无甘油), 重组酶 货 号 #P0709L PNGase F (无甘油), 重组酶 货 号 #P0709L

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Endoglycosidase Reaction Buffer Pack

 

 

识别位点

PNGase F (无甘油), 重组酶 货 号 #P0709L

PNGase F 几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-连接糖 [x = H 或寡糖]。

特性

 去除糖蛋白的 N-连接糖
 更多详细结构特异性请翻阅目录257页

概述

PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖，切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。

来源

NEB #P0704 和 NEB #P0705 是从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
 
NEB #P0708 和 NEB #P0709 克隆自和平空间站伊丽莎菌（Elizabethkingia miricola，formerly Flavobacteriummeningosepticum）并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活：75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40

分子量

36,000 daltons。

质量保证

无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（65 NEB units = 1 IUB milliunit）。

浓度

500,000 units/ml。

注意事项

由于 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。
 
要使非变性糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

参考文献

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快速 PNGase F 货 号 #P0710SNEB酶试剂 New England Biolabs

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快速 PNGase F 货 号 #P0710S 快速 PNGase F 货 号 #P0710S 快速 PNGase F 货 号 #P0710S 快速 PNGase F 货 号 #P0710S

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相关产品

 

 

快速PNGase F抗体标准

识别位点

 快速 PNGase F 货 号 #P0710S

特性

 几分钟之内将抗体及融合蛋白完全去糖基化
 迅速且无偏嗜性地去除全部 N-糖苷
 贮存条件得当，可保证 12 个月的最佳活性
 经 SDS-PAGE 检测产品纯度可达到 95% 以上均一性

概述

快速 PNGase F 是经过优化的试剂，能够在几分钟之内迅速地将抗体和融合蛋白完全去糖基化。此酶能够迅速无偏嗜性地去除所有的 N-糖苷，并可直接进行下游的层析或质谱分析。快速PNGase F 简化了实验流程，可保证灵敏度和重复性的前提下减少实验时间。针对蛋白质组学的应用而开发的快速 PNGase F（非还原剂型），在完全去除糖基化的同时保留了蛋白质的二硫键，适用于高通量蛋白质组学的应用以及利用质谱进行抗体表征析。快速PNGase F（非还原剂型）综合了快速 PNGase F（反应速度快）的优点，同时保留了蛋白质四级结构中的非还原性状态。

 
快速 PNGase F 货 号 #P0710S

热失活

75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

快速 PNGase F
快速 PNGase F 缓冲液（5X）
快速 PNGase F（非还原剂型）
快速 PNGase F （非还原剂型）缓冲液（5X）

特异性

快速 PNGase F 可以从抗体及其相关蛋白上去除所有复合型、杂合型及高甘露糖型糖链。如果核心结构上有α1-3 岩藻糖（经常出现于植物及昆虫细胞中表达的免疫球蛋白上），PNGase F及快速 PNGase F 就都不能切割。

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无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶F1、F2 和 F3 活性，无蛋白水解活性。

参考文献

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快速 PNGase F （非还原剂型） 货 号 #P0711SNEB酶试剂 New England Biolabs

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快速 PNGase F （非还原剂型） 货 号 #P0711S 快速 PNGase F （非还原剂型） 货 号 #P0711S 快速 PNGase F （非还原剂型） 货 号 #P0711S 快速 PNGase F （非还原剂型） 货 号 #P0711S

货 号
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相关产品

快速PNGase F抗体标准

识别位点

快速 PNGase F （非还原剂型） 货 号 #P0711S 

特性

 几分钟之内将抗体及融合蛋白完全去糖基化

 迅速且无偏嗜性地去除全部 N-糖苷
 贮存条件得当，可保证 12 个月的最佳活性
 经 SDS-PAGE 检测产品纯度可达到 95% 以上均一性

概述

快速 PNGase F 是经过优化的试剂，能够在几分钟之内迅速地将抗体和融合蛋白完全去糖基化。此酶能够迅速无偏嗜性地去除所有的 N-糖苷，并可直接进行下游的层析或质谱分析。快速PNGase F 简化了实验流程，可在保证灵敏度和重复性的前提下减少实验时间。针对蛋白质组学的应用而开发的快速 PNGase F（非还原剂型），在完全去除糖基化的同时保留了蛋白质的二硫键，适用于高通量蛋白质组学的应用以及利用质谱进行抗体表征分析。快速PNGase F（非还原剂型）综合了快速 PNGase F（反应速度快）的优点，同时保留了蛋白质四级结构中的非还原性状态。

 

快速 PNGase F （非还原剂型） 货 号 #P0711S              

热失活

75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

快速 PNGase F
快速 PNGase F 缓冲液（5X）
快速 PNGase F（非还原剂型）
快速 PNGase F （非还原剂型）缓冲液（5X）

特异性

快速 PNGase F 可以从抗体及其相关蛋白上去除所有复合型、杂合型及高甘露糖型糖链。如果核心结构上有α1-3 岩藻糖（经常出现于植物及昆虫细胞中表达的免疫球蛋白上），PNGase F及快速 PNGase F 就都不能切割。

质量保证

 无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶F1、F2 和 F3 活性，无蛋白水解活性。

参考文献

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快速PNGase F抗体标准 货 号 #P6043SNEB酶试剂 New England Biolabs

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#P6043S
250 μg
4,029.00
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Description

Rapid PNGase F Antibody Standard is a murine anti-MBP monoclonal antibody, isotype IgG2a. This antibody standard can be used as a positive control for Rapid PNGase F.

Supplied in
10 mM sodium phosphate (pH 7.0), 100 mM NaCl 

Apparent Molecular Weight
IgG2a is comprised of two heavy chains which are each approximately 49 KDa, as well as two light chains which are each approximately 24.4 KDa. 

Properties and Usage

Isotype

Mouse Isotype IgG2a

Source Species

murine

Storage Temperature

-20°C 

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