pMD™18-T Vector Cloning Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6011	pMD™ 18-T Vector Cloning Kit	20 Rxns	￥530 买一送一

→ → → →

■ 制品内容

pMD 18-T Vector (50 ng/μl) 20 μl × 1 支 Control Insert (50 ng/μl) 10 μl × 1 支 Solution I* 75 μl × 2 支     * 使用时请于冰中融解。

■ 制品说明

pMD 18-T Vector是一种高效克隆PCR产物 (TA Cloning) 的专用载体。本载体由pUC18载体改建而成，在pUC18载体的多克隆位点处的Xba I 和Sal I 识别位点之间插入了EcoR V 识别位点，用EcoR V 进行酶切反应后，再在两侧的3′端添加 “T” 而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3′末端添加一个 “A” 的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。 由于本载体以pUC18载体为基础构建而成，所以它具有同pUC18载体相同的功能。此外，本制品中的高效连接液Solution I 可以在短时间内 (约30分钟) 完成连接反应，其连接液可以直接用于细菌转化，大大方便了实验操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 还可以用于Control反应。   ■ 保存 -20℃。   ■ 纯度 Control Insert经克隆后的白色菌落中，有90%以上含有Insert DNA片段。   ■ 用途 1. 进行TA克隆，克隆PCR产物。 2. 对克隆后的PCR产物使用BcaBEST Sequencing Primers、M13 Primers进行DNA测序。

■ pMD 18-T Vector的结构

■ 注意事项

1. Solution I 请于冰中融解。 2. 克隆时使用的Insert DNA片段 (PCR产物) 建议进行切胶回收纯化，否则PCR产物中的短片段DNA (甚至是电泳也无法确认的非特异性小片段)、残存引物等杂质都会影响TA克隆效率。 3. 按照本实验操作进行连接后，直接进行转化时的连接液不要超过20 μl。当要转化的DNA量较大或准备进行电转化时，需对连接液进行乙醇沉淀，纯化DNA后再进行转化。进行乙醇沉淀时使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。 4. 连接反应请在25℃以下进行，温度升高 (>26℃) 较难形成环状DNA。连接效率偏低时，可适当延长连接反应时间至数小时。 5. 本制品来源于pUC18载体，因此，适合pUC18载体的感受态细胞都可以使用，如：JM109等。

页面更新：2019-10-12 14:14:02

pMD™19-T Vector Cloning Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6013	pMD™ 19-T Vector Cloning Kit	20 Rxns	￥530 买一送一

→ → → →

■ 制品内容

pMD 19-T Vector (50 ng/μl) 20 μl × 1 支 Control Insert (50 ng/μl) 10 μl × 1 支 Solution I* 75 μl × 2 支     * 使用时请于冰中融解。

■ 制品说明

pMD 19-T Vector是一种高效克隆PCR产物 (TA Cloning) 的专用载体。本载体由pUC19载体改建而成，在pUC19载体的多克隆位点处的Xba I 和Sal I 识别位点之间插入了EcoR V 识别位点，用EcoR V 进行酶切反应后，再在两侧的3′端添加 “T” 而成。因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3′末端添加一个 “A” 的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。 由于本载体以pUC19载体为基础构建而成，所以它具有同pUC19载体相同的功能。此外，本制品中的高效连接液Solution I 可以在短时间内 (约30分钟) 完成连接反应，其连接液可以直接用于细菌转化，大大方便了实验操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 还可以用于Control反应。 本载体与pMD 18-T Vector 相比，本制品的β-半乳糖苷酶的表达活性更高，菌落显示蓝色的时间缩短，菌落显示的蓝色更深。因此，克隆后更容易进行克隆体的蓝白筛选。   ■ 保存 -20℃。   ■ 纯度 Control Insert经克隆后的白色菌落中，有90%以上含有Insert DNA片段。   ■ 用途 1. 进行TA克隆，克隆PCR产物。 2. 对克隆后的PCR产物使用BcaBEST Sequencing Primers、M13 Primers进行DNA测序。

■ pMD 19-T Vector的结构

■ 注意事项

1. Solution I 请于冰中融解。 2. 克隆时使用的Insert DNA片段 (PCR产物) 建议进行切胶回收纯化，否则PCR产物中的短片段DNA (甚至是电泳也无法确认的非特异性小片段)、残存引物等杂质都会影响TA克隆效率。 3. 按照本实验操作进行连接后，直接进行转化时的连接液不要超过20 μl。当要转化的DNA量较大或准备进行电转化时，需对连接液进行乙醇沉淀，纯化DNA后再进行转化。进行乙醇沉淀时使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。 4. 连接反应请在25℃以下进行，温度升高 (>26℃) 较难形成环状DNA。连接效率偏低时，可适当延长连接反应时间至数小时。 5. 本制品来源于pUC19载体，因此，适合pUC19载体的感受态细胞都可以使用，如：JM109等。

页面更新：2019-10-12 14:15:04

T-Vector pMD™20
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3270	T-Vector pMD™ 20	1.0 μg	￥721

→ → → →
■ 制品内容
T-Vector pMD20 (50 ng/μl) 20 μl Control Insert (50 ng/μl) 10 μl
■ 制品说明
T-Vector pMD20是两侧的3’端添加了“T”的线性化载体，因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’末端添加一个“A”的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。本载体在pUC19载体的基础上对LacZ基因的编码序列进行了改造，大大降低了假阳性率，增强了蓝色菌落在含有X-Gal、IPTG、Amp的L-琼脂平板培养基上的显色效果，提高了阳性克隆的筛选成功率。由于在LacZ基因编码区上游插入了SP6 Promoter，因此可以通过SP6 RNA Polymerase (Code No. 2520)对插入DNA片段直接进行体外转录实验。本制品中的Control Insert (500 bp) 还可以用于Control反应。   ■ 保存 -20℃。
■ T-Vector pMD20的结构
■ 技术资料
点击下载序列信息：

页面更新：2022-03-15 08:48:49