日本同仁化学Cellstain- PI solution试剂货号：P378 CAS号：25535-16-4- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

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3,8-二氨基-5-[3-(二乙基家氨基)丙基]-6-苯基啡啶二碘，水溶液（3,8-Diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenylphenanthridinium diiodide,aqueous solution）

CAS号：25535-16-4

商品信息

储存条件：-20度保存，避光

运输条件：室温

分子式：

C₂₇H₃₄I₂N₄

分子量：

668.39

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Cellstain- PI solution试剂货号：P378 CAS号：25535-16-4

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日本同仁化学Cellstain- PI试剂货号：P346 CAS号：25535-16-4- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

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Cellstain- PI试剂货号：P346

3,8-二氨基-5-[3-(二乙基家氨基)丙基]-6-苯基啡啶二碘（3,8-Diamino-5-[3-(diethylmethylammonio)propyl]-6-phenylphenanthridinium diiodide）

CAS号：25535-16-4

商品信息

储存条件：0-5度保存，避光

运输条件：室温

分子式：

C₂₇H₃₄I₂N₄

分子量：

668.39

特点：

● 与死细胞DNA结合

● 常用于细胞凋亡检测

● 可与Calcein-AM或者FDA等荧光探针一起使用

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荧光特性

操作说明

文献

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规格性状

规格

特性：该产品为红棕色粉末或固体，易溶于水和稀盐酸。

水溶性：试验成功

NMR光谱：试验成功

产品概述

荧光染料PI（碘化丙啶）是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测，英文全称是Propidium Iodide。它是一种溴化乙啶的类似物，在嵌入双链DNA后释放红色荧光。尽管PI不能通过活细胞膜，但却能穿过破损的细胞膜而对核染色。PI经常被用来与Calcein-AM或者FDA等荧光探针一起使用，能同时对活细胞和死细胞染色。PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535nm和615nm。

Cellstain- PI试剂货号：P346 CAS号：25535-16-4

荧光特性

λex=530 nm, λem=620 nm

操作说明

1.用PBS或适当的缓冲液制备10-50μMPI溶液。^a）

2.在细胞培养基中加入体积为细胞培养基1/10的PI溶液。^b）

3.将细胞在37^oC下孵育10-20分钟。

4.用PBS或适当的缓冲液清洗细胞两次。

5.在带有535 nm激发光和615 nm发射滤光片的荧光显微镜下观察细胞。

a）由于PI可能致癌，因此在处理过程中必须格外小心。

b）或者您可以用1/10浓度的PI缓冲溶液代替培养基。

文献

1) I. W. Taylor and B. K. Milthorpe, “An Evaluation of DNA Fluochromes, Staining Techniques, and Analysis for Flow Cytometry. I. Unperturebed Cellpopulations”, J. Histochem. Cytochem., 1980, 28(11), 1224.

2) W. M. J. Vuist, F. V. Buitenen, M. A. De Rie, A. Hekman, P. Ruemke and C. J. M. Melief, “Potentiation by Interleukin 2 of Burkitt’s Lymphoma Therapy with Anti-Pan B (Anti-CD19) Monoclonal Antibodies in a Mouse Xenotransplantation Model”, Cancer Res., 1989, 49, 3783.

3) A. K. El-Naggar, J. G. Batsakis, K. Teague, L. Garnsey and B. Barlogie, “Single- and Double-stranded RNA Measurements by Flow Cytometry in Solid Neoplasms”, Cytometry, 1991, 12, 330.

4) C. Souchier, M. Ffrench, M. Benchaib, R. Catallo and P. A. Bryon, “Methods for Cell Proloferation Analysis by Fluorescent Image Cytometry”, Cytometry, 1995, 20, 203.

5) T. Irino, T. Kitoh, K. Koami, T. Kashima, K. Mukai, E. Takeuchi, T. Hongo, T. Nakahata, S. M. Schuster and M. Osaka, “Establishment of Real-Time Polymerase Chain Reaction Method for Quantitative Analysis of Asparagine Synthetase Expression”, Mol. Diagn., 2004, 6, 217.

常见问题Q&A

Q1:核染色中所用染料的特征和区别是什么？

A1：

这里引入的染料具有通过与核酸相互作用而发出荧光或增加荧光强度的特性。

除荧光波长以外的差异如下。

[EB]

它没有碱基特异性，可与所有DNA和RNA结合。

它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。

[PI]

像EB一样，它没有基础特异性。它是一种更广泛使用的染料，因为插入时它的荧光强度比EB高。

它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。

[DAPI]

与双链小槽结合。它与腺嘌呤-胸苷簇具有高度结合。

它没有活细胞的膜通透性，并且可以染色死细胞。

[AO]

通过利用插入双链时和与单链磷酸结合时荧光波长不同的事实，可以在双链和单链之间进行区分。

它渗透到活细胞的细胞膜上。

[Hoechst33342，33258]

它与DNA的腺嘌呤胸苷部分特异性结合。

它是一种颜料，可以渗透到活细胞的细胞膜上并染色活细胞的DNA。

Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。

A2：

Cellstain- PI试剂货号：P346 CAS号：25535-16-4

Q3:如何使用PI进行核染色？

A3:一个例子如下所示。根据细胞类型和观察条件，考虑细胞固定和试剂浓度。

[使用示例①]

Vollenweider等人进行了PI染色，并在荧光素激活的杀伤（LAK）细胞增殖试验中使用了荧光板读数器进行了测量。

此时的浓度为0.5 mg / mL PBS（-）。所用浓度为5μg/ mL柠檬酸钠溶液，每孔100μL用于荧光染色。

·I.Vollenweider，P.Groscurth，J.Immunol.Methods，149，133（1992）。

[用法示例（2）]

（1）对于包含实体瘤或团块的样品，请用0.02％tripsin EDTA处理。

在37°C下孵育30分钟后，以1500 rpm进行5分钟，然后弃去上清液。

（2）在-20℃用50％甲醇固定后，以1500rpm进行5分钟，并弃去上清液。

（3）在-20℃下用30％甲醇洗涤后，以1500rpm进行5分钟，弃去上清液。

（4）用0.2 mol / L磷酸盐缓冲液（pH 7.2）洗涤后，以1500 rpm进行5分钟，并弃去上清液。

（5）每106个细胞RNase 0.2 mol / L磷酸盐缓冲液（pH 7.2）溶液（1 mg / mL）

加入0.2 mL，并在37°C下孵育30分钟。

（6）用0.2 mol / L磷酸盐洗涤后，以1500 rpm进行5分钟，并弃去上清液。

（7）加入10 mL PI溶液（50μg/ mL），在黑暗中于4°C染色2小时。

・医学院出版《流式细胞仪入门》

日本同仁化学细胞周期检测试剂盒-PI/RNase Staining货号：C543- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

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细胞周期检测试剂盒-PI/RNase Staining货号：C543

细胞周期检测试剂盒

Cell Cycle Assay Kit – PI/RNase Staining

商品信息

储存条件：0-5度保存，避光

运输条件：室温

特点：

·日本原装进口试剂盒

·固定和不固定都可使用

选择规格：

50tests

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DAPI/PI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit – DAPI/PI 同仁化学研究所

发表于2024年3月17日由whatman中国官网

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–Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – DAPI/PI

06 細菌研究用試薬

–Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – DAPI/PI

細菌研究用試薬

DAPI/PI で菌を二重染色

蛍光二重染色に最適化した試薬を添加するだけのプロトコル
複数の指標で薬剤効果や菌の状態を評価できる
培養法と比較して評価にかかる時間を大幅に短縮できる

製品コード

BS08　 –Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – DAPI/PI

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 set	￥21,400	341-09721

＜使用回数の目安＞ 1 set あたり、約 100 検体分

キット内容

1 set	DAPI Solution PI Solution	25 μl × 4 25 μl × 4

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マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

技術情報

蛍光染色例

–Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – DAPI/PI、CTC/DAPI、CFDA/PI を用いて、S. aureus（グラム陽性菌）ならびに E. coli（グラム陰性菌）をイメージングしました。

S. aureus（グラム陽性菌）の染色例

E. coli（グラム陰性菌）の染色例

よくある質問

Q Bacterial Viability Detection Kitで使用している染色試薬の蛍光特性を教えてください。

蛍光特性とその性質は以下の表をご参照ください。

なお、小社では共焦点蛍光顕微鏡と落射蛍光顕微鏡で観察した実績があります。

色素名	極大励起波長/極大蛍光波長	励起フィルター（推奨）	備考
DAPI	360 nm / 460 nm	UV 励起	膜損傷の有無に関わらず細胞内に透過し、核酸を染色する。
PI	530 nm / 620 nm	G 励起	膜損傷を有する細胞内にのみ透過し、核酸を染色する。
CTC	430, 480 nm / 630 nm	Bもしくは G 励起	呼吸活性により還元され赤色蛍光色素 (CTC formazan) を生成する。
CFDA	493 nm / 515 nm	B 励起	エステラーゼにより加水分解され緑色蛍光色素 (carboxy-fluorescin) を生成する。

Q グラム陽性菌やグラム陰性菌で染色に違いはありますか？

各色素の特徴として、以下が挙げられます。

DAPI：	グラム陰性菌では染まりにくい場合があります。
CTC：	グラム陽性、陰性に関わらず、CTCのみでは染まりにくい傾向がありますが、-Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CTC/DAPI（BS09）に付属するEnhancing Reagentを使用することで染色能が向上します。
CFDA：	一般的にグラム陰性菌では染まりにくい傾向がございますが、本製品のプロトコルに記載しています、0.1mol/lリン酸バッファーを使用することで染色能が向上します。

Q 染色前に細菌を洗浄する必要はありますか？: A

細菌は染色前に洗浄する必要があります。

細菌を洗浄しない場合、DAPIやPIでは菌体外に存在する核酸を染色したり、CTCやCFDAでは培地成分の影響で蛍光を示すことでバックグラウンド上昇の原因となる可能性があります。

Q 細胞懸濁液や染色後の洗浄には何を使用すれば良いですか？: A

滅菌したPBSや生理食塩水が使用できます。

Q 蛍光が弱い場合の対処方法を教えてください。: A

試薬の添加量を増やすか（試薬濃度を上げる）、インキュベート時間を長くすることをご検討ください。

Q 二重染色後に菌を固定化することはできますか？: A

可能です。小社では二重染色後に終濃度4％のホルムアルデヒドで菌を固定化した実績があります。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光

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CFDA/PI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit – CFDA/PI 同仁化学研究所

发表于2024年3月17日由whatman中国官网

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–Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CFDA/PI

06 細菌研究用試薬

–Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CFDA/PI

細菌研究用試薬

CFDA/PI で菌を二重染色

蛍光二重染色に最適化した試薬を添加するだけのプロトコル
複数の指標で薬剤効果や菌の状態を評価できる
培養法と比較して評価にかかる時間を大幅に短縮できる

製品コード

BS10　 –Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CFDA/PI

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 set	￥38,500	345-09741

キット内容

1 set	CFDA Solution PI Solution	375 μl × 4 25 μl × 4

試験成績書

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