NO検出関連試薬 Carboxy-PTIO | CAS 148819-93-6 同仁化学研究所

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02 酸化ストレス関連試薬

Carboxy-PTIO

NO検出関連試薬 Carboxy-PTIO | CAS 148819-93-6 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    C348  Carboxy-PTIO
  • CAS番号
    148819-93-6
  • 化学名
    2-(4-Carboxyphenyl)-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl-3-oxide, sodium salt
  • 分子式・分子量
    C14H16N2NaO4=299.28
容 量 メーカー希望
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10 mg ¥15,800 344-07011
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    NO検出関連試薬 Carboxy-PTIO | CAS 148819-93-6 同仁化学研究所

技術情報

注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

参考文献を表示する

1) E. F. Ullman, J. H. Osieki, D. G. B. Boocock and R. Darcy, "Studies of Stable Free Radicals. X. Nitronyl Nitroxide Monoradicals and Biradicals as Possible Small Molecule Spin Labels", J. Am. Chem. Soc., 197294, 7049.
2) Y. Miura, K. Nakai and M. Kinoshita, "Polymers Containing Stable Free Raficals, 5. Preparation of a Polymer Containing Imidazoline 3-Oxide 1-Oxyl Groups", Makromol. Chem., 1973172, 233.
3) K. Inoue and H. Iwamura, "Magnetic Properties of the Crystals of p-(1-Oxyl-3-Oxide-4,4,5,5-Tetramethyl-2-Imidazolin-2-Yl)Benzoic acid and Its Alkali Metal Salts", Chem. Phys. Lett., 1993207, 551.
4) T. Akaike, M. Yoshida, Y. Miyamoto, K. Sato, M. Kohno, K. Sasamoto, K. Miyazaki, S. Ueda and H. Maeda, "Antagonistic Action of Imidazolineoxyl N-Oxides Against Endothelium-Derived Relaxing Factor/NO Through a Radical Reaction", Biochemistry, 199332, 827. 
5) J. Joseph, B. Kalyanaraman and J. S. Hyde, "Trapping of Nitric Oxide by Nitronyl Nitroxides: an Electron Spin Resonance Investigation", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1993192, 926. 
6) M. Yoshida, T. Akaike, Y. Wada, K. Sato, K. Ikeda, S. Ueda and H. Maeda, "Therapeutic Effects of Imidazolineoxyl N-Oxide Against Endotoxin Shock Through Its Direct Nitric Oxide-scavenging Activity", Biochem. Biophys. Res. Commun.1994202, 923. 
7) T. Az-Ma, K. Fujii and O. Yuge, "Reaction Between Imidazolineoxil N-Oxide(Carboxy-PTIO) and Nitric Oxide Released from Cultured Endothelial Cells:Quantitative Measurement of Nitric Oxide by ESR Spectrometry", Life Sci., 199454, 185. 
8) H. Maeda, T. Akaike, M. Yoshida and M. Suga, "Multiple Functions of Nitric Oxide in Pathophysiology and Microbiology: Analysis by a New Nitric Oxide Scavenger", J. Leukoc. Biol., 199456(5), 588. 
9) T. Akaike and H. Maeda, "Quantitation of Nitric Oxide Using 2-Phenyl-4,4,5,5-Tetramethylimidazoline-1-Oxyl 3-Oxide(PTIO)", Methods Enzymol., 1996268, 211. 
10) S. Satoh, T. Kimura, M. Toda, H. Miyazaki, S. Ono, H. Narita, T. Murayama and Y. Nomura, "NO Donors Stimulate Noradrenaline Release from Rat Hippocampus in a Calmodulin-dependent Manner in the Presence of L-Cysteine", J. Cell. Physiol., 1996169, 87. 
11) V. V. Khramtsov, D. I. Utepbergenov, Ya. Yu. Woldman, L. P. Vlassenko, A. L. Markel, I. A. Kiriljuk, I. A. Grigor'ev, D. G. Mazhukin, A. Ya. Tikhonov and L. B. Volodarsky, "In vitro and in vivo Studies of Derivatives of 1,2-Diazetine and Nitronylnitroxide as Donors and Acceptors of Nitric Oxide", Biochemistry(Moscow), 1996, 61(10), 1223. 
12) D. C. Hooper, O. Bagasra, J. C. Marini, A. Zborek, S. T. Ohnishi, R. Kean, J. M. Champion, A. B. Sarker, L. Bobroski, J. L. Farber, T. Akaike, H. Maeda and H. Koprowski, "Prevention of Experimental Allergic Encephalomyelitis by Targeting Nitric Oxide and Peroxynitrite: Implications for the Treatment of Multiple Sclerosis", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1997, 94, 2528. 
13) S. Pfeiffer, E. Leopold, B. Hemmens, K. Schmidt, E. R. Werner and B. Mayer, "Interference of carboxy-PTIO with Nitric-Oxide and Peroxynitrite-Mediated Reactions", Free Radic. Biol. Med., 199722, 787. 
14) Y. Nakashima, H. Yasui and H. Sakurai, "A New Determination Method of Nitric Oxide (NO) with a NO-selective Electrode Demonstrated by the Kinetic Analysis of NO Generation and Decomposition", Chem. Lett., 200212, 1214.<

よくある質問

Q

Carboxy-PTIOの溶解方法を教えてください。

A

純水あるいはバッファー溶液(pH 6 以上)などに溶解してください。
 
<調製例>
Carboxy-PTIO 3.0 mg を量り取り、10 mmol/L PBS10 mLに溶解する(1 mmol/L Carboxy-PTIO溶液)。
希釈濃度になるように、1 mmol/L Carboxy-PTIO溶液を一定量試料に添加する。
※1 mmol/L Carboxy-PTIO溶液は保存せず、その日のうちにお使いください。

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取扱条件

規格
性状: 本品は、暗青色~黒色粉末でメチルアルコールに溶ける。
純度(TLC): 97.0% 以上
HEPES緩衝液溶状: 試験適合
Carboxy-PTI含量(ESR): 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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NO検出関連試薬 2,3-Diaminonaphthalene(for NO detection) | CAS 771-97-1 同仁化学研究所2,3-Diaminonaphthalene(for NO detection)

02 酸化ストレス関連試薬

2,3-Diaminonaphthalene(for NO detection)

NO検出関連試薬 2,3-Diaminonaphthalene(for NO detection) | CAS 771-97-1 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    D418  2,3-Diaminonaphthalene(for NO detection)
  • CAS番号
    771-97-1
  • 化学名
    2,3-Diaminonaphthalene
  • 分子式・分子量
    C10H10N2=158.2
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
10 mg ¥6,800 341-07021
  • NO検出関連試薬 2,3-Diaminonaphthalene(for NO detection) | CAS 771-97-1 同仁化学研究所
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技術情報

注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~淡黄褐色粉末で、熱水、熱アルコール及び希塩酸等に溶ける。
希塩酸溶状: 試験適合
融点: 185~200℃
NO測定適合性: 試験適合
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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関連製品

NO検出関連試薬 DTCS Na | CAS 13442-87-0 同仁化学研究所

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NO検出関連試薬 DTCS Na | CAS 13442-87-0 同仁化学研究所DTCS Na

02 酸化ストレス関連試薬

DTCS Na

NO検出関連試薬 DTCS Na | CAS 13442-87-0 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    D465  DTCS Na
  • CAS番号
    13442-87-0
  • 化学名
    N-(Dithiocarboxy)sarcosine, disodium salt, dihydrate
  • 分子式・分子量
    C4H5NNa2O2S2・2H2O=245.23
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 mg ¥13,600 349-07321
  • NO検出関連試薬 DTCS Na | CAS 13442-87-0 同仁化学研究所
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  • プロトコル NO検出関連試薬 DTCS Na | CAS 13442-87-0 同仁化学研究所 NO をin vivo ESR で検出したい
    NO検出関連試薬 DTCS Na | CAS 13442-87-0 同仁化学研究所

技術情報

溶解例

50 mg/mL(水)

参考文献

参考文献を表示する

1) 藤井敏司, "鉄2価錯体を用いた内因性NOのESRによる検出", 化学と工業, 199447(10), 1330. 
2) T. Yoshimura, S. Fujii, H. Yokoyama and H. Kamada, "In vivo Electron Paramagnetic Resonance Imaging of NO-Bound Iron Complex in a Rat Head", Chem. Lett.1995, 309. 
3) S. Fujii, G. Miyakoda, M. Chihiro, T. Yoshimura and H. Kamada, "Nitric Oxide Release from Porcine Aorta Endothelial Cells Measured by Electron Paramagnetic Resonance Spectroscopy", Chem. Lett.1996, 1055. 
4) S. Fujii, T. Yoshimura and H. Kamada, "Nitric Oxide Trapping Efficiencies of Water-soluble Iron(III) Complexes with Dithiocarbamate Derivatives", Chem. Lett.1996, 785. 
5) T. Yoshimura, H. Yokoyama, S. Fujii, F. Takayama, K. Oikawa and H. Kamada, "In vivo EPR Detection and Imaging of Endogenous Nitric Oxide in Lipopolysaccharide-treated Mice", Nature Biotechnology, 1996, 14, 992. 
6) B. Kalyanaraman, "Detectionof Nitric Oxide by Electron Spin Resonance in Chemical, Photochemical, Cellular, Physiological, and Pathophysiological Systems", Methods Enzymol.1996268(A), 168. 
7) H. Yokoyama, S. Fujii, T. Yoshimura, H. Ohya-Nishiguchi and H. Kamada, "In vivo ESR-CT Imaging of the Liver in Mice Receiving Subcutenous Injection of Nitric Oxide-Bound Iron Complex", Magn. Reson. Imaging.199715, 249.

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~微黄色粉末で水に溶ける。
水溶状: 試験適合
ナトリウム(Na): 15.0% 以上
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所

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NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~

02 酸化ストレス関連試薬

NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~

NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    NK05  NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 回用 ¥37,000 344-07991
キット内容
100 回用 ・NaNO2 標準溶液 (100 μmol/l)
・NaNO3 標準溶液 (100 μmol/l)
・緩衝溶液 (20 mmol/l、pH 7.6)
・還元酵素
・補酵素
・試薬A
・試薬B
x1
x1
x1
x1
x1
x1
x1

  • NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所
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マニュアル

  • 取扱説明書 NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所 日本語
    NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所 English
    NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所
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技術情報

キット以外に必要なもの

・マイクロプレートリーダー ・96穴マイクロプレート ・マイクロピペット ・チップ及びシリンジ

*測定試料によっては除蛋白用の装置、試薬も必要となる。

参考文献

参考文献を表示する

1) L. J. Ignarro, G. M. Buga, K. S. Wood, R. E. Byrns and G. Chaudhuri, "Endothelium-Derived Relaxing Factor Produced and Released from Artery and Vein in Nitric Oxide", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1987, 84, 9265.
2) W. R. Tracey, J. Linden, M. J. Peach and R. A. Johns, "Comparison of Spectrophotometric and Biological Assays for Nitric Oxide (NO) and Endothelium-Derived Relaxing Factor (EDRF): Nonspecificity of the Diazotization Reaction for NO and Failure to Detect EDRF", J. Pharmacol. Exp. Ther., 1990, 252(2), 922.
3) J. S. Pollock, U. Forstermann, J. A. Mitchell, T. D. Warner, H. H. H. W. Schmidt, M. Nakane and F. Murad, "Purification and Characterization of Particulate Endothelium-derived Relaxing Factor Synthesis from Cultured and Native Bovine Aortic Endothelial Cells", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88, 10480.
4) H. H. H. W. Schmidt, T. D. Warner, M. Nakane, U. Forstermann and F. Murad, "Regulation and Subcellular Location of Nitrogen Oxide Synthases in RAW264. 7 Macrophages", Mol. Pharmacol., 1992, 41, 615.
5) S. Archer, "Measurement of Nitric Oxide in Biological Models", FASEB J., 1993, 7, 349.
6) M. B. Gilliam, M. P. Sherman, J. M. Griscavage and L. J. Ignarro, "A Spectrophotometric Assay for NADPH Oxidaton by Aspergillus Nitrate Reductase", Anal. Biochem., 1993, 212, 359.
7) S. Bodis and A. Haregewoin, "Significantly Reduced Salivary Nitric Oxide Levels in Smokers", Ann. Oncol, 1994, 5, 371.
8) D. S. A. Majid, M. Godfrey, M. B. Grisham and L. G. Navar, "Relation Between Pressure Natriuresis and Urinary Excretion of Nitrate/Nitrite in Anesthetized Dogs", Hypertension, 1995, 25, 860.
9) H. Trachtman, B. Gauthier, A. Goldstein and J. Tomczak, "Increased Urinary Nitrite Excretion in Children with Minimal change Nephrotic Syndrome", J. Pediatr., 1996, 128, 173.
10) D. L. Granger, R. R. Taintor, K. S. Boockvar and J. B. Hibbs Jr., "Mesurement of Nitrate and Nitrite in Biological Samples Using Nitrate Reductase and Griess Reaction", Methods in Enzymol., 1996, 268(A), 142.
11) G. Giovannoni, J. M. Land, G. Keir, E. J. Thompson and S. J. R. Heales, "Adaptation of the Nitrate Reductase and Griess reaction Methods for the Measurement of Serum Nitrate Plus Nitrate Levels", Ann. Clin. Biochem., 1997, 34, 193.
12) I. Guevara, J. Iwanejko, A. Dembinska-Kiec, J. Pankiewicz, A. Wanat, P. Anna, I. Golabek, S. Bartus, M. Malczewska-Malec and A. Szczudik, "Determination of Nitrite/Nitrate in Human Biological Material by the Simple Griess Reaction", Clin. Chem. Acta., 1998, 274, 177.

よくある質問

Q

NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~との違いは何ですか?

A

主な違いは以下の通りです。詳細は製品情報をご確認下さい。

1.検出方法

  Kit-CⅡは吸光度測定、Kit-FXは蛍光測定です。それぞれ対応したマイクロプレートリーダー等をご利用下さい。

2.測定範囲

  Kit-CⅡは10~100 μmol/LのNO2-/NO3-濃度の測定に、Kit-FXは1~10 μmol/LのNO2/NO3濃度の測定に適しています。

3.阻害物質

  フェノールレッドを含む培地は、Kit-CⅡでは使用可能ですが、Kit-FXでは使用できません。

Q

サンプルの前処理方法を教えて下さい。

A

<血清>
除蛋白が必要です。
Amicon Ultra-4 Centrifugal Filter Unit with Ultracel-10 membrane ([UFC801008], Millipore 社) などで除タンパク(例えば7000 xg, 20 min, 4℃) して
測定試料として下さい。

トリクロロ酢酸を用いた除タンパクでも結構です。ただし、酸で除タンパクした場合は、測定前に必ずpHを中性に戻してから使用して下さい。
酵素反応が阻害をうける可能性があります。

<尿>
除蛋白が必要です。血清の除蛋白操作を参考に、除蛋白操作を行って下さい。

<細胞培養液>
遠心分離(例えば1000 xg, 15min, 室温)し、上澄みをサンプルとして下さい。
血清を添加している場合は、除蛋白を行って下さい。
血清のタンパク成分の影響で、NO2/NO3濃度が低く出る可能性があります。

<組織> (例:マウス皮膚)
マウス皮膚をホモジナイズ遠心後(例えば、7,740 xg)の上澄みをUltrafree-MC centrifuge device(UFC3; Millipore社)などで
除タンパクして測定試料としてください。

※組織前処理の参考文献:K. Nakai, et al., "Free radical production requires both inducible nitric oxide synthase and xanthine oxidase in LPS-treated skin",
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2006, 103(12), 4616-4621.

Q

以前、NO2/NO3 Assay Kit-C(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~というものが 販売されていましたが、現在のキットとどのように違うのでしょうか?

A

以前のタイプのものは、サンプルに血清や培地を使用した場合、
NO3をNO2に還元する際の酵素反応に阻害が見られました。
そのため、血清や培地を使用する際はサンプルを3~5倍に希釈するようにしていました。

現在のNO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 
は酵素・補酵素を改良することにより、血清や培地を使用する際にも希釈せず
使用できるようにしました。

反応の原理、その他の注意事項は以前と変わりません。
現在のキットでもサンプルの除蛋白は必要ですので、ご注意ください。

Q

サンプル中にZn(亜鉛)などの重金属があると測定値に影響するでしょうか? (アルカリによる除タンパクの際にZnSO4を使用します)

A

影響します。

サンプル中にZnが数百μM以上の濃度で存在するとNO3は殆ど還元されません。
Znの他に、Cuについても同様の影響が見られます。

ただしこれらの影響は微量金属に対して等量か過剰のEDTAを加えることで
影響を回避することができます。

Q

血液をサンプルとして使用する際の抗凝固剤は何がよいでしょうか?

A

EDTA類をご使用ください。

ヘパリンは必要最低限の量であれば、ほとんど影響ありませんが、

濃度が高くなると発色反応や酵素反応に影響します。

Q

培地を使用する場合、使用できない培地があるということですが、 どのような培地が使用できないのでしょうか?

A

硝酸塩が多く含まれる培地は使用出来ません(RPMI1640など)

*注:[NO2]のみの測定であれば可能ですが、[NO2/NO3]のトータルの濃度測定は出来ません。

Kit-C IIの場合、10~100 μMのNO2/NO3濃度の測定に適しています。
例えば、RPMI1640の場合、NO3が800 μM添加されていますので、測定限界をはるかに超えています。
ブランクとして差し引く場合でも、許容できるとすれば、10~20 μM程度です。

代表的な培地ですと
『MEM』大部分の種類のものが硝酸を含んでおりませんので、
    出来れば硝酸を含んでいないものをお使いください。

『DMEM』硝酸を含んでおりますが、濃度としては1 μmol/L以下程度です。
    これはほぼ無視しても良いレベルなのではないかと考えています。

いずれの培地にしろ(勿論RPMI 1640は除きますが)、やむを得ず硝酸を含んだものをお使いになり、
その影響が気になる場合は、サンプルに含まれる量と同量の培地のみで測定してブランクとして差し引いて頂くと良いです。
培地のカタログに組成表が記載してありますので、測定前にご確認ください。

Q

試料を、前処理する前に保存できますか?

A

 -20℃で保管していただければ、保存は可能です。

-20℃で保管した血清は、凍結前と2ヶ月間凍結した後で、データに差がないことを確認しております。

しかし、試料中にNOxを分解するような物質(微生物など)が含まれると安定性が確保できませんので、ご注意下さい。

Q

測定を阻害する物質は、どのようなものがありますか?

A

硝酸塩が多く含まれる培地(RPM1640など)中では、測定ができません。

詳しくは「使用できない培地は何でしょう?」のQ&Aをご参照下さい。

タンパク質や金属(Fe, Cu, Zn, Ca, Mgなど)が入っていると測定に影響が出ます。

試料は前処理の段階で、除タンパク操作を行って下さい。

金属はキレート剤(EDTAなど)を加えることで影響を回避できます。

詳しくは「金属による測定の影響」のQ&Aをご参照下さい。

NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所 NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵
危険・有害
シンボルマーク
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NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ 同仁化学研究所

関連製品

NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~

02 酸化ストレス関連試薬

NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~

NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    NK08  NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~
容 量 メーカー希望
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富士フイルム
和光純薬
200 tests ¥37,000 345-08141
キット内容
200 tests ・Buffer Solution
・NaNO2 Standard Solution (200μmol/l)
・NaNO3 Standard Solution (200μmol/l)
・NO3 Reductase
・Enzyme Cofactors
・Fluorescence Reagent (DAN) Solution
・Stop Solution 
×1
×2
×2
×2
×2
×1
×1

  • NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所
試験成績書

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マニュアル

  • 取扱説明書 NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所 日本語
    NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所 English
    NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所
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技術情報

キット以外に必要なもの

・蛍光マイクロプレートリーダー(λex=360 nm~365 nm、λem=450~465 nmのフィルターを備えたもの)
・96穴マイクロプレート ・マイクロピペット ・チップおよびシリンジ

*測定試料によっては除蛋白用の装置、試薬も必要となる。

参考文献

参考文献を表示する

1) P. Damiani, G. Burini, "Fluorometric Determination of Nitrite", Talanta, 1986, 33, 649. 
2) 向日良夫, 原久子, 谷口寛一, "2, 3-ジアミノナフタレンを用いる亜硝酸及び亜硝酸アミルの蛍光定量", 分析化学, 1991, 40, 105.
3) T. P. Misko, R. J. Schilling, D. Salvemini, W. M. Moore and M. G. Currie, "A Fluorometric Assay for the Measurement of Nitrite in Biological Samples", Anal. Biochem., 1993, 214, 11. 
4) A. H. Cross, T. P. Misko, R. F. Lin, W. F. Hickey, J. L. Trotter and R. G. Tilton, "Aminoguanidine, an Inhibitor of Inducible Nitric Oxide Synthase, Ameliorates Experimental Autoimmune Encephalomyelitis in SJL Mice", J. Clin. Invest., 1994, 93, 2684.
5) D. Salvemini, K. Seibert, J. L. Masferrer, T. P. Misko, M. G. Currie and P. Needleman, "Endogenous Nitric Oxide Enhances Prostaglandin Production in a Model of Renal Inflammation", J. Clin. Invest., 1994, 93, 1940. 
6) R. G. Tilton, K. Chang, J. A. Corbett, T. P. Misko, M. G. Currie, N. S. Bora, H. J. Kaplan and J. R. Williamson, "Endotoxin-Induced UVeitis in the Rat Is Attenuated by Inhibition of Nitric Oxide Production", Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 1994, 35, 3278.
7) A. Ishikawa, Y. Katano, M. Nakamura, K. Doi, K. Tasaki and A. Ono, "Differential Modulation of Nitric Oxide and Prostacyclin Release in Senescent Rat Heart Stimulated by Angiotensin II", Eur. J. Pharmacol., 1999, 382, 19.
8) K. Ohkusu, T. Yoshimoto, K. Takeda, T. Ogura, S. Kashiwamura, Y. Iwakura, S. Akira, H. Okumura and K. Nakanishi, "Potentiality of Interleukin-18 as a Useful Reagent for Treatment and Prevention of Leishmania major Infection", Infect. Immun., 2000, 68, 2449.
9) S. Igawa, I. Hayashi, N. Tanaka, H. Himura, M. Majima, T. Kawakami, M. Hirose, N. Masuda and H. Kobayashi, "Nitric Oxide Generated by iNOS Reduces Deformability of Lewis Lung Carcinoma Cells", Cancer Sci., 2004, 95, 342.

よくある質問

Q

NO2/NO3 Assay Kit-C Ⅱ(Colorimetric) ~Griess Reagent Kit~ との違いは何ですか?

A

主な違いは以下の通りです。詳細は製品情報をご確認下さい。
1.検出方法

  Kit-CⅡは吸光度測定、Kit-FXは蛍光測定です。それぞれ対応したマイクロプレートリーダー等をご利用下さい。

2.測定範囲

  Kit-CⅡは10~100μmol/L のNO2/NO3濃度の測定に、Kit-FXは1~10μmol/L のNO2/NO3濃度の測定に適しています。

3.阻害物質

  フェノールレッドを含む培地は、Kit-CⅡでは使用可能ですが、Kit-FXでは使用できません。

Q

サンプルの前処理方法を教えて下さい。

A

<血清>
除蛋白が必要です。
Amicon Ultra-4 Centrifugal Filter Unit with Ultracel-10 membrane ([UFC801008], Millipore 社) などで除タンパク(例えば7000 xg, 20 min, 4℃) して
測定試料として下さい。

トリクロロ酢酸を用いた除タンパクでも結構です。ただし、酸で除タンパクした場合は、測定前に必ずpHを中性に戻してから使用して下さい。
酵素反応が阻害をうける可能性があります。

<尿>
除蛋白が必要です。血清の除蛋白操作を参考に、除蛋白操作を行って下さい。

<細胞培養液>
遠心分離(例えば1000g, 15min, 室温)し、上澄みをサンプルとして下さい。
血清を添加している場合は、除蛋白を行って下さい。
血清のタンパク成分の影響で、NO2/NO3濃度が低く出る可能性があります。

<組織> (例:マウス皮膚)
マウス皮膚をホモジナイズ遠心後(例えば、7,740 x g)の上澄みをUltrafree-MC centrifuge device(UFC3; Millipore社)などで除タンパクして測定試料としてください。

※組織前処理の参考文献:K. Nakai, et al., "Free radical production requires both inducible nitric oxide synthase and xanthine oxidase in LPS-treated skin"
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2006, 103(12), 4616-4621.

Q

金属による測定への影響

A

金属によっては影響します。

Fe(2価および3価)は0.1mmol/L くらいから蛍光強度の減少が見られます。
金属に対して等量か過剰のEDTAを加えることで影響を回避することができます。

その他の金属(Cu,Zn,Mg,Ca) は1 mmol/L まで影響が見られません。

Q

使用できない培地は何でしょう?

A

硝酸塩が多く含まれる培地は使用出来ません(RPMI1640など)その他、フェノールレッド、出来れば血清も、含まない培地をご使用ください。

*注:[NO2]のみの測定であれば可能ですが、[NO2/NO3]のトータルの濃度測定は出来ません。

<硝酸塩>

 Kit-FXの場合、1~10 μmol/L のNO2/NO3濃度の測定に適しています。
 例えば、RPMI 1640の場合、NO3が800 μmol/L 添加されていますので、測定限界をはるかに超えています。

 代表的な培地ですと
 『MEM』大部分の種類のものが硝酸を含んでおりませんので、硝酸を含んでいないものをお使いください。

 いずれの培地にしろ(勿論RPMI 1640は除きますが)、やむを得ず硝酸を含んだものをお使いになり、その影響が気になる場合は、サンプルに含まれる量と同量の培地のみで測定してブランクとして差し引いてください。
 培地のカタログに組成表が記載してありますので、測定前にご確認ください。

<フェノールレッド>
 反応の最後に[Stop solution]を添加しますが、これはアルカリ性溶液になっています。(蛍光を発するため)フェノールレッドが含まれていると[Stop solution]を添加後、培地が黒くなり蛍光が測定できません。

<血清>
 血清の中には元々、NO2/NO3が含まれております。
 そのため、血清を含む培地の場合には、培地を緩衝液で『希釈』していただく必要が生じます。

Q

試料を、前処理前に保存することはできますか?

A

-20℃で保管していただければ、保存は可能です。
-20℃で保管した血清は、凍結前と2ヶ月間凍結した後で、データに差がないことを確認しております。

しかし、試料中にNOxを分解するような物質(微生物など)が含まれると安定性が確保できませんので、ご注意下さい。

Q

測定を阻害する物質は、どのようなものがありますか?

A

硝酸塩が多く含まれる培地(RPM 1640など)中では、測定ができません。
詳しくは「使用できない培地は何でしょう?」のQ&Aをご参照下さい。

タンパク質や金属(Fe, Cu, Zn, Ca, Mgなど)が入っていると測定に影響が出ます。

試料は前処理の段階で、除タンパク操作を行って下さい。

金属はキレート剤(EDTAなど)を加えることで影響を回避できます。

詳しくは「金属による測定の影響」のQ&Aをご参照下さい。

NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所 NO検出関連試薬 NO2/NO3 Assay Kit-FX(Fluorometric)~2,3-Diaminonaphthalene Kit~ 同仁化学研究所

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02 酸化ストレス関連試薬

NOC 7

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  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    N377  NOC 7
  • CAS番号
    146724-84-7
  • 化学名
    1-Hydroxy-2-oxo-3-(N-methyl-3-aminopropyl)-3-methyl-1-triazene
  • 分子式・分子量
    C5H14N4O2=162.19
容 量 メーカー希望
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10 mg ¥13,900 344-06891
50 mg ¥50,400 340-06893
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技術情報

注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

参考文献を表示する

1)J. A. Hrabie, J. R. Klose, D. A. Wink and L. K. Keefer, "New Nitric Oxide-releasing Zwitterions Derived from Polyamines.", J. Org. Chem., 1993, 58, 1472.
2) K. Hayashi, N. Noguchi and E. Niki, "Action of Nitric Oxide as a Antioxidant Against Oxidation of Soybean Phosphatidylcholine Liposomal Membrane", FEBS Lett., 1995,370, 37.(Noc 12)
3) S. Shibuta, T. Mashimo, A. Ohara, P. Zhang and I. Yoshiya, "Intracerebroventricular Administration of a Nitric Oxide-releasing Compound, NOC-18, Produces Thermal Hyperalgesia in Rats", Neurosci. Lett., 1995, 187, 103. (NOC18)
4) N. Yamanaka, O. Oda and S. Nagao, "Nitric Oxide Released from Zwitterionic Polyamine/NO Adducts Inhibits Cu2+-induced Low Density Lipoprotein Oxidation", FEBS Lett., 1996, 398 , 53.
5) D. Berendji, V. K-Bachofen, K. L. Meyer, O. Grapenthin, H. Weber, V. Wahn and K.-D Kroncke, "Nitric Oxide Mediates Intracytoplasmic and Intranuclear Zinc Release", FEBS Lett., 1997, 405, 37.
6) T. Ohnishi, T. Ishizaki, F. Sasaki, S. Ameshima, T. Nakai, S. Miyabo and S. Matsukawa, "The Effect of Cu2+ on Rat Pulmonary Arterial Rings", Eur. J. Pharmacol., 1997, 319, 49. (Noc 7)
7) Y. Adachi, K. Hashimoto, N. Ono, M. Yoshida, M. Suzuki-Kusaba, H. Hisa and S. Satoh, "Renal Effect of a Nitric Oxide Donor, NOC 7, in Anethetized Rabbits", Eur. J. Pharmacol., 1997, 324, 223. (Noc 7)
8) Y. Minamiyama, S. Takemura and M. Inoue, "Effect of Thiol Status on Nitric Oxide Metabolism in the Circulation", Arch. Biochem. Biophys., 1997, 341(1), 186.

よくある質問

Q

NOCとNORは両方ともNO発生剤として使用されますが、どう違うのですか?

A

構造的には全く異なるタイプのNOドナーです。
性能の違いとしては

【NOC】
高水溶性
水溶液での調製が容易(NaOH溶液)
NOCは高pH(アルカリ性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOC7(5min) > NOC5(25min) > NOC12(100min) > NOC18(21hrs)

【NOR】
比較的水溶性が低い
有機溶媒(DMSO)溶液の方が安定に扱える。
経口投与が可能である。
NORは低pH(酸性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOR1(1.8min) > NOR3(30min) > NOR4(60min) > NOR5(20hrs)

Q

NOC類を使用する際は、何に溶解して使用すればよいのでしょうか?

A

溶解するNOCよりも高濃度の水酸化ナトリウム水溶液などの強アルカリ水溶液に溶解してストック溶液としてください。(0.1M-NaOH等をご使用ください)

NO発生は事実上中性バッファー(サンプル溶液)に添加された時点から開始されます。
生理食塩水などの緩衝作用のないものでは、NOはきれいに放出しませんのでご注意ください。

*用時調整してください。

Q

NOC7の溶解性を教えてください。

A

NOCs、NORsの溶解性は以下の通りです。

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*注意*
NOCsは水にも溶けますが、ストック液の調整は「アルカリ性溶液」で行ってください。
アルカリ性溶液では安定ですが、中性では分解してNOの放出します。
pHが下がるに従い分解(NO放出)は早くなります。

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性状: 本品は、白色粉末でアルカリに溶ける。
純度(HPLC): 90.0% 以上
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  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    N378  NOC 12
  • CAS番号
    146724-89-2
  • 化学名
    1-Hydroxy-2-oxo-3-(N-ethyl-2-aminoethyl)-3-ethyl-1-triazene
  • 分子式・分子量
    C6H16N4O2=176.22
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・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

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1)J. A. Hrabie, J. R. Klose, D. A. Wink and L. K. Keefer, "New Nitric Oxide-releasing Zwitterions Derived from Polyamines.", J. Org. Chem.199358, 1472.
2) K. Hayashi, N. Noguchi and E. Niki, "Action of Nitric Oxide as a Antioxidant Against Oxidation of Soybean Phosphatidylcholine Liposomal Membrane", FEBS Lett.1995,370, 37.(Noc 12)
3) S. Shibuta, T. Mashimo, A. Ohara, P. Zhang and I. Yoshiya, "Intracerebroventricular Administration of a Nitric Oxide-releasing Compound, NOC-18, Produces Thermal Hyperalgesia in Rats", Neurosci. Lett., 1995187, 103. (Noc 18)
4) N. Yamanaka, O. Oda and S. Nagao, "Nitric Oxide Released from Zwitterionic Polyamine/NO Adducts Inhibits Cu2+-induced Low Density Lipoprotein Oxidation", FEBS Lett.1996398 , 53. 
5) D. Berendji, V. K-Bachofen, K. L. Meyer, O. Grapenthin, H. Weber, V. Wahn and K.-D Kroncke, "Nitric Oxide Mediates Intracytoplasmic and Intranuclear Zinc Release", FEBS Lett.1997405, 37. 
6) T. Ohnishi, T. Ishizaki, F. Sasaki, S. Ameshima, T. Nakai, S. Miyabo and S. Matsukawa, "The Effect of Cu2+ on Rat Pulmonary Arterial Rings", Eur. J. Pharmacol.1997319, 49. (Noc 7)
7) Y. Adachi, K. Hashimoto, N. Ono, M. Yoshida, M. Suzuki-Kusaba, H. Hisa and S. Satoh, "Renal Effect of a Nitric Oxide Donor, NOC 7, in Anethetized Rabbits", Eur. J. Pharmacol.1997324, 223. (Noc 7)
8) Y. Minamiyama, S. Takemura and M. Inoue, "Effect of Thiol Status on Nitric Oxide Metabolism in the Circulation", Arch. Biochem. Biophys.1997341(1), 186.

よくある質問

Q

NOCとNORは両方ともNO発生剤として使用されますが、どう違うのですか?

A

構造的には全く異なるタイプのNOドナーです。
性能の違いとしては

【NOC】
高水溶性
水溶液での調製が容易(NaOH溶液)
NOCは高pH(アルカリ性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOC7(5min) > NOC5(25min) > NOC12(100min) > NOC18(21hrs)

【NOR】
比較的水溶性が低い
有機溶媒(DMSO)溶液の方が安定に扱える。
経口投与が可能である。
NORは低pH(酸性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOR1(1.8min) > NOR3(30min) > NOR4(60min) > NOR5(20hrs)

Q

NOC類を使用する際は、何に溶解して使用すればよいのでしょうか?

A

溶解するNOCよりも高濃度の水酸化ナトリウム水溶液などの
強アルカリ水溶液に溶解してストック溶液としてください。(0.1M-NaOH等をご使用ください)

NO発生は事実上中性バッファー(サンプル溶液)に添加された時点から開始されます。
生理食塩水などの緩衝作用のないものでは、NOはきれいに放出しませんのでご注意ください。

*用時調整してください。

Q

NOC12の溶解性を教えてください。

A

NOCs、NORsの溶解性は以下の通りです。

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*注意*
NOCsは水にも溶けますが、ストック液の調整は「アルカリ性溶液」で行ってください。
アルカリ性溶液では安定ですが、中性では分解してNOの放出します。
pHが下がるに従い分解(NO放出)は早くなります。

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NO検出関連試薬 NOC 18 | CAS 146724-94-9 同仁化学研究所

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02 酸化ストレス関連試薬

NOC 18

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  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    N379  NOC 18
  • CAS番号
    146724-94-9
  • 化学名
    1-Hydroxy-2-oxo-3,3-bis(2-aminoethyl)-1-triazene
  • 分子式・分子量
    C4H13N5O2=163.18
容 量 メーカー希望
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・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

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1)J. A. Hrabie, J. R. Klose, D. A. Wink and L. K. Keefer, "New Nitric Oxide-releasing Zwitterions Derived from Polyamines.", J. Org. Chem., 1993, 58, 1472.
2) K. Hayashi, N. Noguchi and E. Niki, "Action of Nitric Oxide as a Antioxidant Against Oxidation of Soybean Phosphatidylcholine Liposomal Membrane", FEBS Lett., 1995,370, 37.(Noc 12)
3) S. Shibuta, T. Mashimo, A. Ohara, P. Zhang and I. Yoshiya, "Intracerebroventricular Administration of a Nitric Oxide-releasing Compound, NOC-18, Produces Thermal Hyperalgesia in Rats", Neurosci. Lett., 1995, 187, 103. (Noc 18)
4) N. Yamanaka, O. Oda and S. Nagao, "Nitric Oxide Released from Zwitterionic Polyamine/NO Adducts Inhibits Cu2+-induced Low Density Lipoprotein Oxidation", FEBS Lett., 1996, 398 , 53.
5) D. Berendji, V. K-Bachofen, K. L. Meyer, O. Grapenthin, H. Weber, V. Wahn and K.-D Kroncke, "Nitric Oxide Mediates Intracytoplasmic and Intranuclear Zinc Release", FEBS Lett., 1997, 405, 37.
6) T. Ohnishi, T. Ishizaki, F. Sasaki, S. Ameshima, T. Nakai, S. Miyabo and S. Matsukawa, "The Effect of Cu2+ on Rat Pulmonary Arterial Rings", Eur. J. Pharmacol., 1997, 319, 49. (Noc 7)
7) Y. Adachi, K. Hashimoto, N. Ono, M. Yoshida, M. Suzuki-Kusaba, H. Hisa and S. Satoh, "Renal Effect of a Nitric Oxide Donor, NOC 7, in Anethetized Rabbits", Eur. J. Pharmacol., 1997, 324, 223. (Noc 7)
8) Y. Minamiyama, S. Takemura and M. Inoue, "Effect of Thiol Status on Nitric Oxide Metabolism in the Circulation", Arch. Biochem. Biophys., 1997, 341(1), 186.

よくある質問

Q

NOCとNORは両方ともNO発生剤として使用されますが、どう違うのですか?

A

構造的には全く異なるタイプのNOドナーです。
性能の違いとしては

【NOC】
高水溶性
水溶液での調製が容易(NaOH溶液)
NOCは高pH(アルカリ性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOC7(5min) > NOC5(25min) > NOC12(100min) > NOC18(21hrs)

【NOR】
比較的水溶性が低い
有機溶媒(DMSO)溶液の方が安定に扱える。
経口投与が可能である。
NORは低pH(酸性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOR1(1.8min) > NOR3(30min) > NOR4(60min) > NOR5(20hrs)

Q

NOC類を使用する際は、何に溶解して使用すればよいのでしょうか?

A

溶解するNOCよりも高濃度の水酸化ナトリウム水溶液などの
強アルカリ水溶液に溶解してストック溶液としてください。(0.1M-NaOH等をご使用ください)

NO発生は事実上中性バッファー(サンプル溶液)に添加された時点から開始されます。
生理食塩水などの緩衝作用のないものでは、NOはきれいに放出しませんのでご注意ください。

*用時調整してください。

Q

NOC18の溶解性を教えてください。

A

NOCs、NORsの溶解性は以下の通りです。

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*注意*
NOCsは水にも溶けますが、ストック液の調整は「アルカリ性溶液」で行ってください。
アルカリ性溶液では安定ですが、中性では分解してNOの放出します。
pHが下がるに従い分解(NO放出)は早くなります。

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純度(HPLC): 90.0% 以上
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    1-Hydroxy-2-oxo-3-(3-aminopropyl)-3-isopropyl-1-triazene
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    C6H16N4O2=176.22
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注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

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1)J. A. Hrabie, J. R. Klose, D. A. Wink and L. K. Keefer, "New Nitric Oxide-releasing Zwitterions Derived from Polyamines.", J. Org. Chem., 1993, 58, 1472.
2) K. Hayashi, N. Noguchi and E. Niki, "Action of Nitric Oxide as a Antioxidant Against Oxidation of Soybean Phosphatidylcholine Liposomal Membrane", FEBS Lett., 1995,370, 37.(Noc 12)
3) S. Shibuta, T. Mashimo, A. Ohara, P. Zhang and I. Yoshiya, "Intracerebroventricular Administration of a Nitric Oxide-releasing Compound, NOC-18, Produces Thermal Hyperalgesia in Rats", Neurosci. Lett., 1995, 187, 103. (Noc 18)
4) N. Yamanaka, O. Oda and S. Nagao, "Nitric Oxide Released from Zwitterionic Polyamine/NO Adducts Inhibits Cu2+-induced Low Density Lipoprotein Oxidation", FEBS Lett., 1996, 398 , 53.
5) D. Berendji, V. K-Bachofen, K. L. Meyer, O. Grapenthin, H. Weber, V. Wahn and K.-D Kroncke, "Nitric Oxide Mediates Intracytoplasmic and Intranuclear Zinc Release", FEBS Lett., 1997, 405, 37.
6) T. Ohnishi, T. Ishizaki, F. Sasaki, S. Ameshima, T. Nakai, S. Miyabo and S. Matsukawa, "The Effect of Cu2+ on Rat Pulmonary Arterial Rings", Eur. J. Pharmacol., 1997, 319, 49. (Noc 7)
7) Y. Adachi, K. Hashimoto, N. Ono, M. Yoshida, M. Suzuki-Kusaba, H. Hisa and S. Satoh, "Renal Effect of a Nitric Oxide Donor, NOC 7, in Anethetized Rabbits", Eur. J. Pharmacol., 1997, 324, 223. (Noc 7)
8) Y. Minamiyama, S. Takemura and M. Inoue, "Effect of Thiol Status on Nitric Oxide Metabolism in the Circulation", Arch. Biochem. Biophys., 1997, 341(1), 186.

よくある質問

Q

NOCとNORは両方ともNO発生剤として使用されますが、どう違うのですか?

A

構造的には全く異なるタイプのNOドナーです。
性能の違いとしては

【NOC】
高水溶性
水溶液での調製が容易(NaOH溶液)
NOCは高pH(アルカリ性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOC7(5min) > NOC5(25min) > NOC12(100min) > NOC18(21hrs)

【NOR】
比較的水溶性が低い
有機溶媒(DMSO)溶液の方が安定に扱える。
経口投与が可能である。
NORは低pH(酸性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOR1(1.8min) > NOR3(30min) > NOR4(60min) > NOR5(20hrs)

Q

NOC類を使用する際は、何に溶解して使用すればよいのでしょうか?

A

溶解するNOCよりも高濃度の水酸化ナトリウム水溶液などの
強アルカリ水溶液に溶解してストック溶液としてください。(0.1 M-NaOH等をご使用ください)

NO発生は事実上中性バッファー(サンプル溶液)に添加された時点から開始されます。
生理食塩水などの緩衝作用のないものでは、NOはきれいに放出しませんのでご注意ください。

*用時調整してください。

Q

NOC5の溶解性を教えてください。

A

NOCs、NORsの溶解性は以下の通りです。

NO検出関連試薬 NOC 5 | CAS 146724-82-5 同仁化学研究所

*注意*
NOCsは水にも溶けますが、ストック液の調整は「アルカリ性溶液」で行ってください。
アルカリ性溶液では安定ですが、中性の水では溶解直後からNOの放出が始まります。
pHが下がるに従い分解(NO放出)は早くなります。

NO検出関連試薬 NOC 5 | CAS 146724-82-5 同仁化学研究所 NO検出関連試薬 NOC 5 | CAS 146724-82-5 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色粉末でアルカリに溶ける。
純度(HPLC): 90.0% 以上
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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NO検出関連試薬 NOC 5 | CAS 146724-82-5 同仁化学研究所

関連製品

NO検出関連試薬 NOR 3 | CAS 138472-01-2 同仁化学研究所

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02 酸化ストレス関連試薬

NOR 3

NO検出関連試薬 NOR 3 | CAS 138472-01-2 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    N390  NOR 3
  • CAS番号
    138472-01-2
  • 化学名
    (?)-(E)-4-Ethyl-2-[(E)-hydroxyimino]-5-nitro-3-hexenamide
  • 分子式・分子量
    C8H13N3O4=215.21
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
10 mg ¥14,100 345-06941
  • NO検出関連試薬 NOR 3 | CAS 138472-01-2 同仁化学研究所
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  • プロトコル NO検出関連試薬 NOR 3 | CAS 138472-01-2 同仁化学研究所 NO を系の中に加えたい
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技術情報

注意事項

・本製品を粉末の状態で取り出し使用する場合、性状の性質上、静電気等の要因で容器内に付着し、取り出しにくい場合があります。
・容器内に付着し、取り出せなかった粉末に関しては、使用する溶媒を容器に入れ、溶かし出して使用してください。

参考文献

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1) Y. Kita, R. Ozaki, S. Sakai, T. Sugimoto, Y. Hirasawa, M. Ohtsuka, H. Senoh, K. Yoshida and K. Maeda, "Antianginal Effects of FK409, a New Spontaneous NO Releaser", Br. J. Pharmacol., 1994, 113, 1137.
2) Y. Kita, Y. Hirasawa, K. Yoshida and K. Maeda, "Antiplatelet Activities of FK409, a New Spontaneous NO Releaser", Br. J. Pharmacol., 1994, 113, 385.
3) M. Hino, M. Iwami, M. Okamoto, K. Yoshida, H. Haruta, M. Okuhara, J. Hosoda, M. Kohsaka, H. Aoki and H. Imanaka, "FK409, a Novel Vasodilator Isolated from the Acid-treated Fermentation Broth of Streptomyces Griseosporeus I. Taxonomy, Fermentation, Isolation, and Physico-chemical and Biological Characteristics", J. Antibiot., 1989 XLII(11), 1578.
4) S. Shibata, N. Satake, N. Sato, M. Matsuo, Y. Koibuchi and R. K. Hester, "Characteristics of the Vasorelaxing Action of (3E)-4-Ethyl-2-hydroxyimino-5-nitro-3-hexamide FK409, a New Vasodilator Isolated from Microbial Sources, in Isolated Rabbit Arteries", J. Cardiovasc. Pharmacol., 1991, 17(3), 508.
5) Y. Kita, Y. Hirasawa, K. Maeda, M. Nishio and K. Yoshida, "Spontaneous Nitric Oxide Release Accounts for the Potent Pharmacological Actions of FK409", Eur. J. Pharmacol., 1994, 257, 123.
6) J.-L. Decout, B. Roy, M. Fontecave, J.-C. Muller, P. H. Williams and D. Loyaux, "Decomposition of FK409, a New Vasodilator: Identification of Nitric Oxide as Metaborite", Bioorg. Med. Chem. Lett., 1995, 5(9), 973.
7) S. Fukuyama, Y. Kita, Y. Hirasawa, T. Azuma, A. Sato, N. Morokoshi, S. Koda, T. Yasuda, S. Oka and H. Sakurai, "A New Nitric Oxide (NO) Releaser: Spontaneous NO Release from FK409", Free Rad. Res., 1995, 23(5), 443.
8) Y. Kita, K. Ohkubo, Y. Hirasawa, Y. Katayama, M. Ohno, S. Nishino, M. Kato and K. Yoshida, "FR144420, a Novel, Slow, Nitric Oxide-releasing Agent", Eur. J. Pharmacol., 1995, 275, 125.
9) M. Kato, S. Nishino, M. Ohno, S. Fukuyama, Y. Kita, Y. Hirasawa, I. Nakanishi, H. Takasugi and K. Sakane, "New Reagents for Controlled Release of Nitric Oxide. Structure-stability Relationships", Bioorg. Med. Chem. Lett., 1996, 6(1), 33.
10) Y. Kita, Y. Hirasawa, S. Fukuyama and K. Yoshida, "FK409, a Novel Spontaneous NO Releaser: Comparative Pharmacological Studies with ISDN", Cardiovasc. Rrug. Revi., 1996, 14(2), 148.
11) Y. Hirasawa, T. Sugimoto, S. Fukuyama, Y. Kato, H. Takamatu, M. Ohno, S. Nishino, M. Kato, K. Maeda, J. Seki and Y. Kita, "Antianginal Effects of FR144420, a Novel Nitric Oxide-releasing Agent", Eur. J. Pharmacol., 1996, 303, 55.
12) M. Sato and M. Kawatani, "Nitric Oxide Raises Cytosolic Concentrations of Ca2+ in Cultured Nodose Ganglion Neurons from Rabbits", Neurosci. Lett., 1996, 206, 69.
13) Y. Kita, Y. Hirasawa, S. Fukuyama, K. Ohkubo, Y. Kato, H. Takamatsu, M. Ohno, S. Nishino, M. Kato and J. Seki, "Oral Biological Activities of Spontaneous Nitric Oxide Releaser are Accounted for by their Nitric Oxide-releaseing Rates and Oral Absorption Manners", J. Pharmacol. Exp. Ther., 1996, 276(2), 421.
14) S. Fukuyama, Y. Hirasawa, Y. Kato, M. Nishino, M. Ohno, S. Nishino, K. Maeda, M. Kato and Y. Kita, "Structure-activity Relationships of Spontaneous Nitric Oxide Releasers, FK409 and its Derivatives", J. Pharmacol. Exp. Ther., 1997, 282(1), 236.
15) Y. Kita, Y. Hirasawa, Y. Kato, K. Ohkubo, M. Ohno, S. Nishino, M. Kato and S. Fukuyama, "Comparison of Hemodynamic Effects of Nitric Oxide (NO) Donors with Different NO-releasing Properties in Rats", J. Cardiovasc. Pharmacol., 1997, 30(2), 223.
16) Y. Hirasawa, Y. Kato, S. Fukuyama, M. Ohno, S. Nishino, M. Kato and Y. Kita, "Comparison of Antiplatelet Effect of two Nitric Oxide-donating Agents, FR146801 and FK409", Thrombosis Haemost., 1998, 79, 620.

よくある質問

Q

NOCとNORは両方ともNO発生剤として使用されますが、どう違うのですか?

A

構造的には全く異なるタイプのNOドナーです。
性能の違いとしては

【NOC】
高水溶性
水溶液での調製が容易(NaOH溶液)
NOCは高pH(アルカリ性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOC7(5min) > NOC5(25min) > NOC12(100min) > NOC18(21hrs)

【NOR】
比較的水溶性が低い
有機溶媒(DMSO)溶液の方が安定に扱える。
経口投与が可能である。
NORは低pH(酸性)ほどNO放出が遅くなる。

半減期は(37℃、pH7.4)
NOR1(1.8min) > NOR3(30min) > NOR4(60min) > NOR5(20hrs)

Q

NOR類を使用する際の溶解する溶媒は何がいいでしょうか?

A

 乾燥DMSOをお使いください。

乾燥DMSOに溶解してストック溶液とし、所定量を試料溶液に加えます。

ストック溶液とした場合、一両日中にご使用下さい。

NO発生は事実上中性バッファー(サンプル溶液)に添加された時点から開始されます。
生理食塩水などの緩衝作用のないものでは、NOはきれいに放出しませんのでご注意ください。

Q

NOR3の溶解性を教えてください。

A

NORs、NOCsの溶解性は以下の通りです。

NO検出関連試薬 NOR 3 | CAS 138472-01-2 同仁化学研究所

*注意*
NORsは水にも溶けますが、ストック液の調整は「DMSO」で行ってください。
中性の水では溶解直後から分解(NOの放出)が始まります。

NO検出関連試薬 NOR 3 | CAS 138472-01-2 同仁化学研究所 NO検出関連試薬 NOR 3 | CAS 138472-01-2 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は白色結晶性粉末で、ジメチルスルホキシドに溶ける。
純度(HPLC): 98.0% 以上
ジメチルスルホキシド溶状: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍
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関連製品

NO検出関連試薬 S-Nitrosoglutathione | CAS 57564-91-7 同仁化学研究所

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02 酸化ストレス関連試薬

S-Nitrosoglutathione

NO検出関連試薬 S-Nitrosoglutathione | CAS 57564-91-7 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    N415  S-Nitrosoglutathione
  • CAS番号
    57564-91-7
  • 化学名
    N-(N-L-γ-Glutamyl-S-nitroso-L-cysteinyl)glycine
  • 分子式・分子量
    C10H16N4O7S=336.32
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
25 mg ¥19,100 347-07361
100 mg ¥44,400 343-07363
  • NO検出関連試薬 S-Nitrosoglutathione | CAS 57564-91-7 同仁化学研究所
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技術情報

溶解例

25 mg/mL(水)、10 mg/mL(ジメチルスルホキシド)

参考文献

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1) A. Gibson, R. Babbedge, S. R. Brave, S. L. Hart, A. J. Hobbs, J. F. Tucker, P. Wallace and P. K. Moore, "An Investigation of Some S-Nitrosothiols, and of Hydroxy-arginine, on the Mouse Anococcygeus", Br. J. Pharmacol., 1992, 107, 715.
2) M. W. Radomski, D. D. Rees, A. Dutra and S. Moncada, "S-Nitroso-glutathione Inhibits Platelet Activation in Vitro and in Vivo", Br. J. Pharmacol., 1992, 107, 745.
3) R. M. Clancy and S. B. Abramson, "Novel Synthesis of S-Nitrosoglutathione and Degradation by Human Neutrophils", Anal. Biochem., 1992, 204, 365.
4) J.-W. Park, G. E. Billman and G. E. Means, "Transnitrosation as a Predominant Mechanism in the Hypotensive Effect of S-Nitrosoglutathione", Biochem. Mol. Biol. Int., 1993, 30(5), 885.
5) D. Barrachina, S. Calatayud, J. Esplugues, Brendan J. R. Whittle, S. Moncada and J. V. Esplugues, "Nitric Oxide Donors Preferencially Inhibit Neuronally Mediated Rat Gastric Acid Secretion", Eur. J. Pharmacol., 1994, 262, 181.
6) E. A. Konorev, M. M. Tarpey, J. Joseph, J. E. Baker and B. Kalyanaraman, "S-Nitrosoglutathione Improves Functional Recovery in the Isolated Rat Heart After Cardioplegic Ischemic Arrest-evidence for a Cardioprotective Effect of Nitric Oxide", J. Pharmacol. Exp. Ther., 1995, 274(1), 200.
7) S. C. Askew, D. J. Banett, J. McAninly and D. L. H. Williams, "Catalysis by Cu2+ of Nitric Oxide Release from S-Nitrosothiols (RSNO)", J. Chem. Soc. Perkin Trans.2, 1995, 741.
8) D. J. Banett, A. Rios and D. L. H. Williams, "NO-group Transfer(Transnitrosation) between S-Nitrosothiols and Thiols. Part 2", J. Chem. Soc. Perkin Trans.2, 1995, 1279.
9) J. G. D. Man, B. Y. De. Winter, G. E. Boeckxstaens, A. G. Herman and P. A. Pelckmans, "Effect of Cu2+ on Relaxations to the Nitrergic Neurotransmitter, NO and S-Nitrosothiols in the Rat Gastric Fundus", Br. J. Pharmacol., 1996, 119(5), 990.
10) A. P Dicks and D. L. H. Williams, "Generation of Nitric Oxide from S-Nitrosothiols Using Protein-bound Cu2+ Sources", Chem. Biol., 1996, 3, 655.
11) J. A. Cook, S. Y. Kim, D. Teague, M. Murali, C. Krishna, R. Pacelli, A. M. Miles, M. B. Grisham and D. A. Wink, "Convenient Colorimetric and Fluorometric Assays for S-Nitrosothiols", Anal. Biochem., 1996, 238, 150.
12) 赤池孝章, "ニトロソチオールの検出法", Dojin News, 1997, 84, 11.
13) S. X. L. Liu, Bo Xuan, Z. Chen, R. S. Varma and G. C. Y. Chiou, "Nitric Oxide Donors: Effects of S-Nitrosoglutathione and 4-Phenyl-3-furoxancarbonitrile on Ocular Blood Flow and Retinal Function Recovery", J. Ocul. Pharmacol. Therpeut., 1997, 13(2), 105.
14) C. Alpert, N. Ramdev, D. George and J. Loscalzo, "Detection of S-Nitrosothiols and Other Nitric Oxide Derivatives by Photolysis-chemiluminescence Spectrometry", Anal. Biochem., 1997, 245, 1.
15) T. Akaike, K. Inoue, T. Okamoto, H. Nishino, M. Otagiri, S. Fujii and H. Maeda, "Nanomolar Quantification and Identification of Various Nitrosothiols by High Performance Liquid Chromatography Coupled with Flow Reactors of Metals and Griess Reagent", J. Biochem., 1997, 122, 459.

取扱条件

規格
性状: 本品は、桃色粉末で水、ジメチルスルホキシドに溶ける。
純度(HPLC): 90.0% 以上
水溶状: 試験適合
ジメチルスルホキシド溶状: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍
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NO検出関連試薬 S-Nitrosoglutathione | CAS 57564-91-7 同仁化学研究所

関連製品

NO検出関連試薬 Peroxynitrite溶液 同仁化学研究所

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NO検出関連試薬 Peroxynitrite溶液 同仁化学研究所Peroxynitrite溶液

02 酸化ストレス関連試薬

Peroxynitrite溶液

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    P332  Peroxynitrite溶液
  • 化学名
    Peroxynitrite in NaOH solution
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
1 ml x 5 ¥29,500 340-08831
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参考文献

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1) J. J. Moreno and W. A. Pryor, "Inactivation of A1-Proteinase Inhibitor by Peroxynitrite", Chem. Res. Toxicol., 1992, 5(3), 425.
2) R. E. Huie and S. Padmaja, "The Reaction of NO with Superoxide", Free Rad. Res. Commun., 1993, 18, 195.
3) D. S. Bohle, B. Hansert, S. C. Paulson and B. D. Smith, "Biomimetic Synthesis of the Putative Cytotoxin Peroxynitrite, ONOO-, and Its Characterization as a Tetramethylammonium Salt", J. Am. Chem. Soc., 1994, 116, 7423.
4) J. O. Edwards and R. C. Plumb, "The Chemistry of Peroxynitrites", Prog. Inorg. Chem, 1994, 41, 599.
5) H. Ischiropoulos and A. B. Al-Mehdi, "Peroxynitrite-mediated Oxidative Protein Modifications", FEBS Lett., 1995, 364, 279.
6) J. T. Groves, N. Sudhakar and S. Marla, "Peroxynitrite-induced DNA Strand Scission Mediated by a Manganese Porphyrin", J. Am. Chem. Soc., 1995, 117, 9578.
7) A. F. Huhmer, C. R. Nishida, P. R. Ortiz de Montellano and C. Schoneich, "Inactivation of the Inducible Nitric Oxide Synthase by Peroxynitrite", Chem. Res. Toxicol., 1997, 10(5), 618.
8) J. M. Fukuto and L. J. Ignarro, "In vivo Aspects of Nitric Oxide(NO) Chemistry: Does Peroxynitrite(OONO-) Play a Major Role in Cytotoxicity", Accounts of Chemical Research, 1997, 30(4), 149.
9) 川西正祐, 井上純子, "活性酸素とNOによるDNA損傷", 生化学, 1997, 69(8), 1014.
10) S. Pfeiffer, A. C. F. Gorren, K. Schmidt, E. R. Werner, B. Hansert, D. S. Bohle and B. Mayer, "Metabolic Fate of Peroxynitrite in Aqueous Solution", J. Biol. Chem., 1997, 272, 3465.
11) T. Okamoto, T. Akaike, T. Nagano, S. Miyajima, M. Suga, M. Ando, K. Ichimori and H. Maeda, "Activation of Human Neutrophil Procollagenase by Nitrogen Dioxide and Peroxynitrite: A Novel Mechanism for Procollagenase Activation Involving Nitric Oxide", Arch. Biochem. Biophys., 1997, 342(2), 261.
12) T. Akaike, S. Okamoto, T. Sawa, J. Yoshitake, F. Tamura, K. Ichimori, K. Miyazaki, K. Sasamoto and H. Maeda, "8-Nitroguanosine Formation in Viral Pneumonia and Its Implication for Pathogenesis" Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2003, 100, 685.

よくある質問

Q

Peroxynitrite溶液を使用する場合、どのように希釈すればよいのでしょうか?

A

Peroxynitriteは生理的pH及び酸性領域では速やかに分解しますが、
アルカリ性領域では比較的安定であることが報告されています。
よって、ご使用の際は1 mmol/L程度のNaOH水溶液などで希釈してご使用ください。
pH10程度では安定で、pH7での半減期は1.9秒と報告されています。

・W.H.Koppenol, J.J.Moreno, W.A.Pryor, H.Ischiropoulos, J.S.Beckman, Chem.Res.Toxicol., 5, 834 (1992).

・N.Hogg, V.Darley-Usmar, M.T.Wilson, S.Moncada, Biochem.J., 281, 419 (1992).

Q

Peroxynitrite溶液の保存方法および安定性は?

A

冷凍保存でも徐々に分解が見られます。

-20℃保存においては2ヶ月で約20%分解というデータもございます。

保存温度が低ければ低いほど、分解は遅くなります。

(-20℃以下、ディープフリーザーあるいは液体窒素中の保存の方が好ましい)

そのため、サンプルは用時調製をお願いします。

また、解凍を繰り返すことにより分解は促進されますのでご注意ください。

NO検出関連試薬 Peroxynitrite溶液 同仁化学研究所 NO検出関連試薬 Peroxynitrite溶液 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、淡黄色液体である。
濃度: 45 mmol/L 以上
取扱条件
保存条件: 冷凍(-80℃)
危険・有害
シンボルマーク
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NO検出関連試薬 Peroxynitrite溶液 同仁化学研究所

関連製品

NO検出関連試薬 SIN-1 | CAS 16142-27-1 同仁化学研究所

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NO検出関連試薬 SIN-1 | CAS 16142-27-1 同仁化学研究所SIN-1

02 酸化ストレス関連試薬

SIN-1

NO検出関連試薬 SIN-1 | CAS 16142-27-1 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    S264  SIN-1
  • CAS番号
    16142-27-1
  • 化学名
    3-(4-Morpholinyl)sydnonimine, hydrochloride
  • 分子式・分子量
    C6H11ClN4O2=206.63
容 量 メーカー希望
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和光純薬
25 mg ¥16,300 342-06831
  • NO検出関連試薬 SIN-1 | CAS 16142-27-1 同仁化学研究所
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技術情報

溶解例

10 mg/mL(メチルアルコール)

参考文献

参考文献を表示する

1) M. Feelisch, J. Ostrowski and E. Noack, "On the Mechanism of NO Release from Sydnonimines", J. Cardiovasc. Pharmacol.198914, S13. 
2) M. Feelisch, "The Biochemical Pathways of Nitric Oxide Formation from Nitrovasodilators: Appropriate Choice of Exogenous NO Donors and Aspects of Preparation and Handling of Aqueous NO Solutions", J. Cardiovasc. Pharmacol.199117, S25. 
3) N. Hogg, V. M. Darley-Usmar, M. T. Wilson and S. Moncada, "Production of Hydroxyl Radicals from the Simultaneous Generation of Superoxide and Nitric Oxide", Biochem. J.1992281, 419. 
4) M. E. Murphy and J. E. Brayden, "Nitric Oxide Hyperpolarizes Rabbit Mesenteric Arteries via ATP-sensitive Potassium Channels", J. Physiol.1995486(1), 47. 
5) 青柳一正, "腎疾患", 臨床検査, 199640(2), 188. 
6) 川西正祐, 井上純子, "活性酸素とNOによるDNA損傷", 生化学, 199769(8), 1014. 
7) H. Kankaanranta, R. G. Knowles, P. Vuorinen, O. Kosonen, P. Holm and E. Moilanen, "3-Morpholino-sydnonimine-induced Suppression of Human Neutrophil Degranulation in Not Mediated by Cyclic GMP, Nitric Oxide or Peroxynitrite: Inhibition of the Increase in Intracellular Free Calcium Concentration by N-Morpholinoiminoacetoni", Mol. Pharmacol.199751(5), 882. 
8) S. Yamamoto, S. Nishizawa, T. Yokoyama, H. Ryu and K. Uemura, "Subarachnoid Hemorrhage Impairs Cerebral Blood Flow Response to Nitric Oxide but Not to Cyclic GMP in Large Cerebral Arteries", Brain Res.1997757, 1. 
9) S. Pfeiffer, E. Leopold, B. Hemmens, K. Schmidt, E. R. Werner and B. Mayer, "Interference of carboxy-PTIO with Nitric-oxide and Peroxynitrite-mediated Reactions", Free Radic. Biol. Med.199722, 787. 
10) M. B. Herrero, E. de Lamirande and C. Gagnon, "Tyrosine Nitration in Human Spermatozoa: A Physiological Function of Peroxynitrite, the Reaction Product of Nitric Oxide and Superoxide", Mol. Hum. Reprod., 20017, 913. 
11) P. D. Lu, C. Jousse, S. J. Marciniak, Y. Zhang, I. Novoa, D. Scheuner, R. J. Kaufman, D. Ron and H. P. Harding, "Cytoprotection by Pre-emptive Conditional Phosphorylation of Translation Initiation Factor 2", EMBO J.200423, 169.

よくある質問

Q

SIN-1の溶解方法を教えてください。

A

溶解するSIN-1よりも高濃度の塩酸溶液に溶解し、所定量を試料溶液に加えてください。ストック溶液は用時調整とし、調整後は1日以内に使用してください。

NO検出関連試薬 SIN-1 | CAS 16142-27-1 同仁化学研究所 NO検出関連試薬 SIN-1 | CAS 16142-27-1 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~微黄白色針状結晶又は結晶性粉末で、メチルアルコールに溶ける。
融点: 180~190℃(分解)
薄層クロマトグラフィー: 試験適合
取扱条件
1.保存方法:冷凍,遮光
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関連製品

NO検出関連試薬 L-NAME | CAS 51298-62-5 同仁化学研究所

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NO検出関連試薬 L-NAME | CAS 51298-62-5 同仁化学研究所L-NAME

02 酸化ストレス関連試薬

L-NAME

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  • 酸化ストレス関連試薬

NO検出関連試薬

  • 製品コード
    N412  L-NAME
  • CAS番号
    51298-62-5
  • 化学名
    NG-Nitro-L-arginine methyl ester, hydrochloride
  • 分子式・分子量
    C7H16ClN5O4=269.69
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 g ¥11,900 340-07231
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技術情報

溶解例

10 mg/mL (水)

参考文献

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1) G. A. Gray, C. Schott, Geraldine, Julou-Schaeffer, I. Fleming, J. R. Parratt and J.-C. Stoclet, "The Effect of Inhibitors of the L-Arginine/Nitrtic Oxide Pathway on Endotoxin-induced Loss of Vascular Responsiveness in Anaesthetozed Rats", Br. J. Pharmacol., 1991, 103, 1218.
2) M. G. Belvisi, D. Stretton and P. J. Barnes, "Nitric Oxide as an Endogenous Modulator of Cholinergic Neurotransmission in Guinea-pig Airways", Eur. J. Pharmacol., 1991, 198, 219.
3) P. K. Moore, A. O. Oluyomi, R. C. Babbedge, P. Wallace and S. L. Hart, "L-NG-Nitro Arginine Methyl Ester Exhibits Antinociceptive Activity in the Mouse", Br. J. Pharmacol., 1991, 102, 198.
4) S. M. Gardiner, A. M. Compton, P. A. Kemp and T. Bennett, "Effects of NG-Nitro-L-arginine Methyl Ester or Idomethacin on Differential Regional and Cardiac Haemodynamic Actions of Arginine Vasopressin and Lysine Vasopressin in Conscious Rats", Br. J. Pharmacol., 1991, 102, 65.
5) T. B. Macall, M. Feelisch, R. M. J. Palmer and S. Moncada, "Identification of N'-Iminoethyl-L-ornithine as an Irreversible Inhibitor of Nitric Oxide Synthase in Phagocytic Cells", Br. J. Pharmacol., 1991, 102, 234.
6) P. Kubes, M. Suzuki and D. N. Granger, "Nitric Oxide: An Endogenous Modulator of Leukocyte Adhesion", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, 88, 4651.
7) B. Heinzel, M. John, P. Klatt, E. Bohme and B. Mayer, "Ca2+/Calmodulin-dependent Formation of Hydrogen Peroxide by Brain Nitric Oxide Synthase", Biochem. J., 1992, 281, 627.
8) B. L. Tepperman and B. D. Soper, "Interaction of Nitric Oxide and Salivary Gland Epidermal Growth Factor in the Modulation of Rat Gastric Mucosal Integrity", Br. J. Pharmacol., 1993, 110, 229.
9) K. Kumagai, H. Suzuki, M. Ichikawa, M. Jinbo, M. Murakami, M. Ryuzaki and T. Saruta, "Nitric Oxide Increases Renal Blood Flow by Interactiong with the Synpathetic Nervous System", Hypertension, 1994, 24(2), 220.
10) L. Yu, P. E. Gengaro, M. Niederberger, T. J. Burke and R. W. Schrier, "Nitric Oxide: A Mediator in Rat Tubular Hypoxia/Reoxygenation Injury", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1994, 91, 1691.
11) C. Baylis, S. Masilamani, G. Losonczy, L. Samsell, P. Harton and K. Engels, "Blood Pressure(BP) and Renal Vasoconstrictor Responses to Acute Blockade of Nitric Oxide : Persisitence of Renal Vasoconstriction Despite Normalization of Bpwith Either Verapamil or Sodium Nitroprusside", J. Pharmacol. Exp. Ther., 1995, 274(3), 1135.
12) T. T. Ma, H. Ischiropoulos and C. A. Brass, "Endotoxin-Stimulated Nitric Oxide Production Increases Injury and Reduces Rat Liver Chemiluminescence During Reperfusion", Gastroenterology, 1995, 108, 463.
13) J. C. Simmons and R. H. Freeman, "L-Argine Analogues Inhibit Aldosterone Secretion in Rats", Am. J. Physiol., 1995, 268(5Pt2), R1137.
14) Hyeyoung Kim and Kyung Hwan Kim, "Effects of a Nitric Oxide Donor and Nitric Oxide Synthase Inhibitors on Acid Secretion of Isolated Rabbit Gastric Glands", Pharmcol., 1996, 53, 331.
15) O. W. Griffith and R. G. Kilbourn, "Nitric Oxide Synthase Inhibitors: Amino Acids", Methods Enzymol., 1996, 268(A), 375.

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色粉末又は結晶性粉末で水に溶ける。
水溶状: 試験適合
薄層クロマトグラフィー: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵
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関連製品

Enzyme Set A酶试剂盒Takara


Enzyme Set A
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6604 Enzyme Set A 50 Rxns ¥1,202 Enzyme Set A Enzyme Set A Enzyme Set A
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■ 制品内容
Acc 100 U × 3 (Code No.: 1001A×3)
Afa 1,000 U (Code No.: 1116A)
BmeT110Ⅰ (Ava I) 500 U (Code No.: 1207A)
VpaK11BⅠ(Ava II) 300 U (Code No.: 1196A)
Bgl 2,000 U (Code No.: 1021A)
 
■ 制品说明
本制品与TaKaRa PCR Human Papillomavirus Typing Set (Code No.: 6603) 配合使用。
 
■ 保存
-20℃。
 
 

页面更新:2021-02-08 16:01:53

腺病毒早期检测酶试剂盒Takara


腺病毒早期检测
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632270 Adeno-X GoStix 20 Tests ¥4,794 腺病毒早期检测 腺病毒早期检测 腺病毒早期检测
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Code No. 产品名称
632270   Adeno-X GoStix
 
产品详情请点击:腺病毒早期检测
 
 

页面更新:2019-11-19 14:13:14

糖蛋白富集 & 检测酶试剂盒Takara


糖蛋白富集 & 检测
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635647 Glycoprotein Enrichment Resin 10 ml ¥3,163 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测
Clontech 635648 Glycoprotein Western Detection Kit 20 Rxns ¥2,442 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测
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Code No. 产品名称
635647   Glycoprotein Enrichment Resin
635648   Glycoprotein Western Detection Kit
 
■ 产品描述
Glycoprotein Enrichment Resin用于从血清当中富集糖基化蛋白质,在蛋白质组学研究中能够显著降低样品的复杂性。这种苯基硼酸类的树脂,可以在90 min内富集糖基化蛋白质,产品包装形式灵活,可用于重力流或FPLC纯化。
 
Glycoprotein Western Detection Kit是Glycoprotein Enrichment Resin的辅助产品,用于在Western Blotting实验中对糖基化蛋白质选择性染色。试剂盒使用的是一种改良的过碘酸希夫法,对糖基化蛋白质的碳水化合物部分进行染色,产生有色条带。过碘酸希夫试剂针对的是存在于糖和唾液酸中相邻的二醇基,通常用作一般的糖蛋白染色剂。因此,本试剂盒的检测不依赖抗体,可以快速、灵敏地检测富集的糖蛋白。
 
■ 原理
 
糖蛋白富集 & 检测
Glycoprotein Enrichment Resin是一种硼酸基树脂,能够从复杂样品(例如人血清)中快速、有效、特异性地富集糖基化蛋白质,可以使用简单的重力流方法或中等压力的方法(例如FPLC)进行操作。树脂是偶联了间氨基苯硼酸配体的琼脂糖珠,该配体能够结合存在于糖蛋白分子糖部分内的残基如甘露糖、半乳糖或葡萄糖,与这些糖残基的顺式二醇基团形成可逆的五元环络合物。这种复合物可通过降低pH,或使用含Tris或山梨糖醇的洗脱buffer使其分离。
 
■ 产品特点
灵活、有效、特异性的富集和检测糖基化蛋白质。
· 灵活——使用本树脂可以应用重力流法或FPLC法
· 性能出色——本树脂特异性结合糖蛋白能力更强,而非特异性结合很弱
· 特异性——本树脂对血清中的高、低丰度糖蛋白均能够有效富集
· 快速——90 min内即可完成糖蛋白的富集
· Western Detection Kit可提供快速(1 hr)、灵敏、特异性的不依赖抗体的检测
 
■ 应用
糖蛋白的富集和检测
 
■ 实验例
 
糖蛋白富集 & 检测
通过Western Blotting对Glycoprotein Enrichment Resin纯化产物进行分析,结果显示,该树脂特异性地富集了高丰度和低丰度的血清糖蛋白。图A.使用IgG抗体检测到特异性富集的高丰度血清糖蛋白IgG,lane 1是人血清,lane 2是流穿液,lane 3是洗脱液(糖蛋白)。图B和C是通过Western Blotting对纯化得到的两种特异性的低丰度血清糖蛋白α-1酸性糖蛋白(图B)和α-1抗胰蛋白酶(图C)进行检测的结果,lane 1是人血清,lane 2是洗脱组分,lane 3是洗脱组分。
 
 
 
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页面更新:2019-11-12 10:52:12

杆状病毒表达系统酶试剂盒Takara


杆状病毒表达系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631401 BacPAK6 DNA (Bsu36 I digest) 5 Transfections ¥6,798 杆状病毒表达系统 杆状病毒表达系统
Clontech 631721 X-GLUC 100 mg ¥5,354 杆状病毒表达系统 杆状病毒表达系统
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Code No. 产品名称
631401   BacPAK6 DNA (Bsu36 I digest)
631721   X-GLUC
 
产品介绍
    与细菌表达系统相比,在昆虫细胞中产生的重组蛋白质的翻译后加工和折叠更类似于哺乳动物过程,有功能的目的蛋白质的产量通常要大得多。因此,为了生产大量的重组蛋白质,许多研究者已经转向杆状病毒表达系统。
 
BacPAK法
    BacPAK系统采用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)在昆虫细胞中表达目标蛋白质。首先把目的基因插入到穿梭载体中,然后与线性化的BacPAK6病毒DNA共转染至昆虫宿主细胞。这个特殊设计的BacPAK6病毒DNA能够迫使病毒和载体之间发生重组,实现高的重组效率。重组之后挑选并纯化几个噬菌斑,验证重组表型。新分离得到的重组病毒就可以扩增并且感染昆虫细胞产生大量的目的蛋白质。
    如有需要,可以使用产品附带的pBacPAK8-GUS作为共转染步骤的阳性对照。该载体具有大肠杆菌β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS),克隆在多角体蛋白质启动子的下游。pBacPAK8-GUS与BacPAK6病毒DNA重组后能够表达β-葡糖苷酸酶,该酶可催化底物X-GLUC显现蓝色。
 
产品特点
    ● 每L培养基表达的蛋白质量最高可达500 mg
    ● 重组效率>90%
    ● 蛋白质折叠正确
    ● 可以有效表达具有生物活性的蛋白质
    ● 真核蛋白质的翻译后修饰
 
产品应用
在昆虫细胞中表达重组蛋白质
 
BacPAK6 Viral DNA 图谱
杆状病毒表达系统
 
操作流程示意图
杆状病毒表达系统
In-Fusion Ready BacPAK载体和杆状病毒表达系统。将含有目的基因的PCR片段直接克隆到In-Fusion Ready BacPAK载体以构建N末端或C末端蛋白质的表达载体。将验证过的克隆与BacPAK6病毒DNA共转染至昆虫细胞中,通过AcMNPV序列二者进行重组,被感染的昆虫细胞就会随着病毒的扩增而产生重组蛋白质,最后使用TALON技术对其进行纯化。
 
实验例1
杆状病毒表达系统
使用表达水母绿色荧光蛋白质(AcGFP1)的重组杆状病毒载体感染昆虫细胞。使用In-Fusion Ready BacPAK载体构建重组杆状病毒,用以表达带有N末端标签的AcGFP1。被感染的Sf9细胞能够表达高水平的AcGFP1并发出强烈的荧光,流式细胞术的检测结果显示,被感染细胞的平均荧光强度是未感染对照组的约440倍。
 
实验例2
杆状病毒表达系统
使用BacPAK杆状病毒表达系统生产重组病毒制备蛋白质。通过共转染载体和BacPAK6病毒DNA (Bsu36 I消化)产生重组病毒,然后在Sf21细胞中进行扩增。感染48 hr后裂解细胞进行SDS PAGE检测。
泳道1:未被感染的Sf21细胞
泳道2:野生型AcMNPV病毒感染的Sf21细胞
泳道3:未重组BacPAK6病毒感染的Sf21细胞
泳道4:BacPAK8-GUS重组病毒感染的Sf21细胞
泳道5:纯化的CAT蛋白质
泳道6:BacPAK8-CAT重组病毒感染的Sf21细胞
泳道M:分子量marker
 
产品详情请点击:杆状病毒表达系统
 
 

页面更新:2019-11-11 14:55:28

Aureobasidin A酶试剂盒Takara


Aureobasidin A
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 630466 Aureobasidin A 1 mg ¥2,373
¥1,898
Aureobasidin A Aureobasidin A Aureobasidin A
Clontech 630499 Aureobasidin A 10 mg ¥6,135
¥4,908
Aureobasidin A Aureobasidin A Aureobasidin A

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Code No. 产品名称
630466   Aureobasidin A
630499   Aureobasidin A
 
■ 制品说明
Aureobasidin A
Aureobasidin A (AbA)是从丝状真菌Aureobasidium pullulans R106中分离的一种环状缩肽抗生素,在较低浓度下(0.1–0.5 μg/ml)即可对酵母产生毒性。对其敏感的真菌种类包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(A. niger)
AbA抑制酵母中AUR1基因(1,2)编码的肌醇磷脂酰胺(inositol phosphorylceramide ,IPC)合成酶的活性,突变基因AUR1-C的表达使转化酵母对AbA产生了抗性。Matchmaker Gold系统用这个基因作为蛋白质互作研究的报告基因。
AbA筛选大大消除了仅用营养报告基因(如HIS3)进行低严紧度初筛时产生的背景克隆。由于AbA可以直接杀死敏感的酵母菌株,而不是使菌株生长延迟,所以基于AbA的筛选有利于阳性克隆的生长和识别。一般实际操作中,用AbA进行低严紧度初筛时会获得很多克隆,之后再用Matchmaker Gold系统中的4个报告子(AUR1-C,HIS3ADE2 和MEL1)进行高严紧度的二次筛选以验证阳性克隆。
 
■ 制品特点
1. 用于酵母的严紧药物筛选标记
2. AbA抗性是酵母双杂交研究中理想的报告子
3. 筛选结果适用于Matchmaker Gold酵母单杂交和双杂交系统
 
■ 制品用途
1. 酵母双杂交研究
2. 酵母单杂交研究
 
■ 属性
1. 分子量:1100 Da
2. 不溶于水
 
■ 文献
1. Takesako, K. et al. (1993) J. Antibiot. (Tokyo) 46(9):1414–20.
2. Hashida-Okado, T. et al. (1996) Mol. Gen. Genet251(2):236–244.
 
 
产品详情请点击:Aureobasidin A
 
 

页面更新:2019-11-11 13:09:38