The NEBNext® End Repair Module has been optimized to convert 1 μg – 5μg of fragmented DNA to blunt-

ended DNA having 5´ phosphates, and 3´-hydroxyls. The module is optimized for use with the NEBNext dA-Tailing Module (NEB #E6053), and is part of the original standard DNA library prep workflow.

NEBNext End Repair Enzyme Mix

NEBNext End Repair Reaction Buffer

-20°C

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The NEBNext® End Repair Module has been optimized to convert 1 μg – 5μg of fragmented DNA to blunt-

ended DNA having 5´ phosphates, and 3´-hydroxyls. The module is optimized for use with the NEBNext dA-Tailing Module (NEB #E6053), and is part of the original standard DNA library prep workflow.

 NEBNext End Repair Enzyme Mix

 NEBNext End Repair Reaction Buffer

-20°C
 

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The NEBNext® dA-Tailing Module enables incorporation of a non-templated dAMP on the 3´ end of a blunt-ended DNA fragment. The module is optimized for use with the NEBNext dA-Tailing Module (NEB #E6053), and is part of the original standard DNA library prep workflow, which is suitable for 1 – 5 µg of input DNA.

 Klenow Fragment (3´→ 5´ exo–)

 NEBNext dA-Tailing Reaction Buffer

-20°C
 

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The NEBNext® dA-Tailing Module enables incorporation of a non-templated dAMP on the 3´ end of a blunt-ended DNA fragment. The module is optimized for use with the NEBNext dA-Tailing Module (NEB #E6053), and is part of the original standard DNA library prep workflow, which is suitable for 1 – 5 µg of input DNA.

 Klenow Fragment (3´→ 5´ exo–)

 NEBNext dA-Tailing Reaction Buffer

-20°C

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The NEBNext® Quick Ligation Module has been optimized to ligate efficiently DNA adaptors compatible

with Illumina® sequencing to end-repaired, dA-tailed DNA fragments. The module is optimized for use with the NEBNext End Repair Module (NEB #E6050) and the NEBNext dA-Tailing Module (NEB #E6053) and is part of the original standard DNA library prep workflow, which is suitable for 1 – 5 μg of input DNA.

 Quick T4 DNA Ligase

 NEBNext Quick Ligation Reaction Buffer

-20°C

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The NEBNext® Quick Ligation Module has been optimized to ligate efficiently DNA adaptors compatible

with Illumina® sequencing to end-repaired, dA-tailed DNA fragments. The module is optimized for use with the NEBNext End Repair Module (NEB #E6050) and the NEBNext dA-Tailing Module (NEB #E6053) and is part of the original standard DNA library prep workflow, which is suitable for 1 – 5 μg of input DNA.

 Quick T4 DNA Ligase

 NEBNext Quick Ligation Reaction Buffer

-20°C

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 简单方便的操作流程 – 产品可用于快速操作和低样本起始量。
 简单方便的剂型 – 试剂盒包含的酶、核苷酸和缓冲液都按照操作所需的浓度和体积提供；
    许多产品都有预混液形式；客户可根据需要个性化选择模块试剂。
 严格的质量监控 – 更多的质量监控确保产品的质量及纯度
 功能验证 – 每种试剂盒和模块都经过相应的文库制备，再通过相应测序平台测序验证（Illumina、
    Ion torrent、454 或 SOLiD）。
 更高性价比   

使用下面的图表，选择最适合 454 文库制备的 NEBNext 产品。 

适用于 454 的 NEBNext DNA 文库制备试剂以试剂盒的形式提供，您可以选择以下两种方法中的任何一种，DNA 快速文库制备法：其中包括末端修复、加 dA 尾、连接接头和片段筛选；也可以选择经典 DNA 文库制备法：其中包括末端修复、连接接头、缺口填充和 ssDNA 筛选步骤。每批次试剂盒都经过构建基因组 DNA 文库，再在 454 测序平台测序进行验证。下表列出了用于 454 DNA 测序文库制备的试剂盒，根据文库制备流程，每个步骤所需试剂也列在表中。适用于 SOLiD 的 NEBNext Small RNA 文库制备试剂以试剂盒形式提供。根据文库制备流程，每个步骤所需试剂也列在表中。 

 –  RNA Sample Preparation
 –  Second Strand Synthesis of cDNA

The NEBNext Ultra II Non-Directional RNA Second Strand Synthesis Module has been optimized to generate double-stranded cDNA from first-strand cDNA, as part of the NEBNext non-directional RNA library preparation workflow. 

The NEBNext Ultra II Non-Directional RNA Second Strand Synthesis Module is Designed for Use with the

Following:

 –  NEBNext Ultra II RNA First Strand Synthesis Module (NEB #E7771)

 –  NEBNext Ultra II End Repair/dA-Tailing Module (NEB #E7546)

 –  NEBNext Ultra II Ligation Module (NEB #E7595)

 –  NEBNext Ultra™ II Q5^® Master Mix (NEB #M0544)

 –  NEBNext^® Oligos for Illumina^® (NEB #E7335, #E7500, #E7710, #E7730, #E6609, #E7600,

    #E7535,  #E7350)

NEBNext^® Second Strand Synthesis Enzyme Mix

NEBNext^® Second Strand Synthesis Reaction Buffer

The NEBNext® Magnesium RNA Fragmentation Module has been optimized to fragment RNA into small

pieces by incubation with Magnesium ions at 94˚C. Fragment size is controlled by incubation time (Figure 1), and the reaction is ended by the addition of NEBNext Fragmentation Stop Solution.

  NEBNext® RNA Fragmentation Buffer

  NEBNext RNA Fragmentation Stop Solution

该产品已停产，推荐替代产品为  NEBNext ChIP-Seq  文库制备预混液试剂盒（NEB#6240） 或  NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒（NEB#7645）。

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 “该产品已停产，推荐替代产品为 NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒（NEB #E7645）或 NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒-含纯化磁珠（NEB #E7103）或 NEBNext 末端修复模块（NEB #E6050）或 NEBNext 加 dA 尾模块（NEB #E6053）”

The NEBNext ChIP-Seq Library Prep Master Mix Set for Illumina contains reagents for preparation of

libraries for next-generation sequencing on the Illumina platform from 10 ng of ChIP DNA, in a standard workflow. Please note that adaptors and primers are not included in the kit and are available separately.

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 NEBNext® 免疫测序试剂盒（小鼠）

 • 通过对受体序列的深入分析，揭示复杂的免疫系统

 概述：

免疫组库测序常常用来分析当下的和过去的免疫应答反应。最常应用领域包括：自身免疫性疾病的表征、肿瘤学、传染病中和抗体的发现、肿瘤浸润淋巴细胞以及用作研究残留病的工具。二代测序（NGS）平台在读长和通量方面的最新进展促进了免疫组库测序的发展。

NEBNext® 免疫测序试剂盒（人）

 • 通过对受体序列的深入分析，揭示复杂的免疫系统

概述：

免疫组库测序常常用来分析当下的和过去的免疫应答反应。最常应用领域包括：自身免疫性疾病的表征、肿瘤学、传染病中和抗体的发现、肿瘤浸润淋巴细胞以及用作研究残留病的工具。二代测序（NGS）平台在读长和通量方面的最新进展促进了免疫组库测序的发展。

NEBNext® 免疫测序试剂盒（人）通过对 B 细胞和 T 细胞全长免疫组库分析，能获得体细胞的所有突变信息。该试剂盒提供引物模块，可用于分析完整的 V、D、J 区域和 IgM、IgD、IgG、IgA、IgE 亚类，并分析 BCR 轻链、BCR 重链、TCRα 链和 TCRβ 链。该试剂盒还提供分子标签序列（UMI），将来源于同一个分子的 PCR 产物组成共有序列，以便提高测序准确性，消除 PCR 偏差。Galaxy 平台提供一个开源软件工具——pRESTO，用于在本地或云端开展超强生物信息分析。为了确保不熟悉 Galaxy 平台的用户能成功使用分析软件，pRESTO 提供教学教程。

 抗体和 TCR 结构的简化示意图：

产品描述：

使用唯一分子标签序列（UMI）实现克隆型的精准检测。在有或没有 UMI 情况下，比较小鼠 TCR 克隆型频率。根据有 UMI 的测序结果，对前 100 个高表达克隆型进行排序。在有或没有 UMI 情况下，重复建库，克隆型频率重叠绘制于图中。每个条形或圆点代表一个克隆，该克隆经过总读长分析或使用 UMI 过滤。使用 UMI 可对原始样本中的起始 RNA 分子进行绝对定量。当将克隆按照富集度从高到底进行排序，没有 UMI 的数据会导致 PCR 或测序扩增的偏差，从而误导样本中克隆型频率的分析。UMI 的使用通过对起始样本中 RNA 的绝对定量来校正偏差。使用 UMI 也可以在重复本之间实现更好的相关性，尤其是起始量较低时。各个文库向下抽样 500,000 reads。

使用 NEBNext 免疫测序试剂盒（小鼠），能够在同一管中制备小鼠 BCR 和 TCR 文库。分别使用 10 ng、100 ng 和 1,000 ng 小鼠脾脏总 RNA（Takara Bio #636605）制备小鼠 BCR+TCR 文库，每个起始量都做有平行实验。所有文库向下抽样 1,000,000 reads。使用 pRESTO 工具完成 reads 过滤、序列组装和基于 UMIs 组成共有序列。使用 MiGMAP 鉴别 V、D 和 J 区域。图（A）表示每个小鼠脾脏总 RNA 起始样本检测到的克隆型数量。图（B）表示各文库中 B 细胞重链（IGH）和轻链（IGK 和 IGL）以及 Tα 链（TRA）、β 链（TRB）、δ 链（TRD）和 γ 链（TRG）所占百分比。