标签归档：ligation

DNA Ligation Kit Ver.2.1酶试剂盒Takara

发表于由

DNA Ligation Kit Ver.2.1
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6022Q DNA Ligation Kit Ver.2.1 1 Kit ￥200 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1
Takara 6022 DNA Ligation Kit Ver.2.1 1 Kit ￥501
￥401 		DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1 DNA Ligation Kit Ver.2.1

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
DNA Ligation Kit Ver.2.1 → DNA Ligation Kit Ver.2.1 → DNA Ligation Kit Ver.2.1 → DNA Ligation Kit Ver.2.1 → DNA Ligation Kit Ver.2.1
 
DNA Ligation Kit Ver.2.1
DNA Ligation Kit Ver.2.1  
DNA Ligation Kit Ver.2.1
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 6022：100 次)
Solution Ⅰ：Enzyme Solution 3 × 250 μl
Solution Ⅱ：Concatenation Buffer 1 × 750 μl
Solution Ⅲ：Transformation Enhancer 1 × 200 μl
 
* 如果每次使用7.5 μl Solution Ⅰ则可反应100次。
 
■ 制品说明
本试剂盒是用于快速DNA连接反应的简易系统。在本试剂进行连接反应时，只需要加入一种包含T4 DNA Ligase和最适buffer的酶溶液，终反应液体积小。因为反应高效，大多数连接反应只需3分钟，较难的反应也可在30分钟内完成。
转化之前在连接混合液中加入Solution III（转化增强剂）有助于提高转化效率。如果目的DNA含量低或预期的连接效率较低，建议使用Solution III。连接反应液不必经过DNA纯化，可直接用于细菌的转化。
 
■ 保存
-20℃。Solution Ⅲ融化后室温保存，如果产生沉淀，可涡旋数分钟溶解。
 
■ Ligation Kit 的操作示意图及连接效率图
 
DNA Ligation Kit Ver.2.1
 
■ 使用注意
1. 试剂盒中的Solution Ⅰ和Solution Ⅱ建议-20℃保存，反复冻融不会失活。Solution Ⅰ因含有T4 DNA Ligase，使用前请在冰中融化并轻柔混匀。Solution Ⅱ可在室温融化并混匀。Solution Ⅲ一旦融化，就应于室温保存，若有沉淀，使用前请涡旋溶解。
2. DNA连接液可直接用于琼脂糖凝胶电泳。如要进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时，建议使用乙醇沉淀法*浓缩 DNA，请不要用苯酚抽提DNA连接液。
* 乙醇沉淀法：
1) 在反应液中加入1/10体积的3 M CH3COONa (pH5.2) 或1/20体积的5 M NaCl和2-2.5倍体积的无水乙醇。
2) -20℃静置20分钟或-80℃静置10分钟。
3) 4℃离心收集DNA。当DNA的含量较少时，可加入carrier使沉淀效果更好。
3. 如果在反应液中加入苯酚，则会出现类似沉淀物的白色浑浊，将不能用于连接反应。
 
 

页面更新：2021-09-28 09:23:29

TaKaRa DNA Ligation Kit LONG酶试剂盒Takara

发表于由

TaKaRa DNA Ligation Kit LONG
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6024 TaKaRa DNA Ligation Kit LONG 1 Kit ￥631 TaKaRa DNA Ligation Kit LONG TaKaRa DNA Ligation Kit LONG TaKaRa DNA Ligation Kit LONG
收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容 (50 次量)*
DNA Ligase 50 μl
10×LONG Ligation Buffer 300 μl
Control Vector (pUC118/Hind III/BAP) 10 μl
Control Insert DNA/Hind III (18 kb) 30 μl
dH2O 1 ml×2
* 本试剂盒对粘性末端的连接反应为50次量，对平末端的连接反应为10次量，反应体积均为50 μl。
 
■ 制品说明
TaKaRa DNA Ligation Kit LONG是对长链DNA片段进行高效连接的试剂盒，对10 kb以上的长片段DNA连接特别有效，特别适用于BAC Library的构建。本试剂盒适用于以下实验：
1) 插入长片段DNA的载体构建。
2) BAC Library的构建。
3) 长链cDNA的克隆。
转化实验推荐使用Stellar™ Competent Cells (Code No. 636763/636766) 和Stellar Electrocompetent Cells（Code No. 636765)，这些感受态细胞对于构建插入长片段DNA或cDNA的克隆有优势。
 
■ 保存
-20℃。
 
 

页面更新：2017-08-21 13:42:55

DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞酶试剂盒Takara

发表于由

DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6023Q DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ 1 Kit ￥150 DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
Takara 6023 DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ 1 Kit ￥501
￥401 		DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

收藏产品 加入购物车

无标题文档

 
 
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ → DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ → DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ → DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞ → DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
 
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞  
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 6023)
Ligation Mix 150 μl × 5
按每次反应使用7.5 μl 进行计算，可使用100次。
 
■ 制品说明
DNA片段连接反应频繁用于基因工程实验操作中。DNA的连接通常使用T4 DNA Ligase，但DNA片段的末端形状对T4 DNA Ligase连接反应速度影响很大。因此，根据DNA片段末端形状需要调整酶的添加量和反应时间。本公司研发的DNA Ligation Kit，不需要调整酶添加量和反应时间，可简便、快速地进行DNA连接反应。
DNA Ligation Kit〈Mighty Mix〉是以往DNA Ligation Kit 的升级产品，连接效率高。本制品具有以下特点：
1) 预混型
是酶和Buffer的预混型试剂，只需在DNA中加入Ligation Mix溶液即可高效完成连接反应，操作简便。本制品反复冻融后，反应性能仍然稳定。
2) 也适用于平滑末端和TA克隆
不仅适用于粘性末端连接，也可以高效地进行平滑末端的DNA连接和TA克隆。
3) 连接反应仅需5分钟
25℃反应5分钟即可完成插入片段与质粒载体的连接，节省实验时间。
 
DNA Ligation Kit的反应液量和反应条件
克隆编号 DNA溶液：Ligation Mix (体积比) 反应条件
[1] 质粒载体中插入外源DNA片段
[标准操作流程]
[快速操作流程]		 1：1
 
16℃，30分钟
25℃，5分钟
[2] PCR产物的T载体克隆 1：1 16℃，30分钟
[3] 线性DNA的分子内连接 (自身环化) 1：1 16℃，30分钟
[4] Linker Ligation，Adaptor Ligation质粒载体中插入linker DNA cDNA与连头 (Linker、 Adaptor) 连接
 
1：1
1：2
16℃，30分钟
[5] λ噬菌体中插入外源DNA片段(体外包装) 1：2 26℃，10分钟
* 说明书提供的实验结果是表中使用DNA Ligation Kit获得的实验数据，仅供参考。
 
■ 保存
-20℃。使用前在冰上融化 (5-10分钟)，吸打混匀。已证实反复冻融50次对反应性能没有影响。
 
■ DNA Ligation Kit的操作原理图
 
DNA Ligation Kit ＜Mighty Mix＞
 
■ 使用注意
1. DNA Ligation是-20℃保存的冷冻品，反复冻融不会失活。使用前在冰上融化，吸打混合。
2. 使用本试剂盒获得的DNA连接反应液，可直接用于琼脂糖凝胶电泳。如果进行聚丙烯酰胺凝胶电泳时，建议乙醇沉淀后再进行电泳。
3. DNA连接反应液直接进行苯酚抽提时，反应液会出现白色浑浊。
4. DNA连接反应后进行乙醇沉淀处理时，向反应液中加入1/10体积的3 M CH3COONa (pH5.2) 或1/20体积的5 M NaCl和2-2.5倍体积的无水乙醇，-20℃静置20分钟或-80℃静置10分钟后，4℃离心回收DNA。DNA含量较少时，加入Carrier使沉淀效果更好。
 
 

页面更新：2020-11-30 16:04:45

Blunting Kination Ligation (BKL) Kit酶试剂盒Takara

发表于由

Blunting Kination Ligation (BKL) Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6127A Blunting Kination Ligation (BKL) Kit 24 Rxns ￥841
￥673 		Blunting Kination Ligation (BKL) Kit Blunting Kination Ligation (BKL) Kit Blunting Kination Ligation (BKL) Kit

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

收藏产品 加入购物车
 
■ 制品内容 (24 次量)
10X Blunting Kination Buffer 50 μl
Blunting Kination Enzyme Mix 25 μl
Ligation Solution I*1 150 μl
Control Vector (pUC118-Hinc II /BAP; 50 ng/μl) 5 μl
Control Insert (200 ng/μl)*2 10 μl
ddH2O 500 μl
 
*1 Ligation Solution I 即为DNA Ligation Kit Ver.2.1的一种组份。
*2 以λ DNA为模板，通过TaKaRa Taq反应扩增的500 bp的PCR片段。
 
■ 制品说明
Blunting Kination Ligation (BKL) Kit是一种能使DNA片段的末端平滑化、5’端的磷酸化、DNA片段和载体的连接等诸反应高效快速完成的试剂盒。使用本试剂盒时，DNA片段的末端平滑化反应和5’端的磷酸化反应可在一个反应体系中同时进行，反应时间只需10分钟。此外，本试剂盒中还含有高效的DNA连接液，可在短时间内完成连接反应。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ Takara BKL Kit原理
 
Blunting Kination Ligation (BKL) Kit
 
■ 注意事项
1. Ligation Solution I 请于冰中融解，使用前混匀。应避免多次反复冻融。
2. 连接转化效率低时，请试用下述方法进行改进。
① 确认感受态细胞的转化效率。
② 延长连接反应时间至过夜反应。
③ 连接反应后向溶液中加入NaCl使其终浓度为500 mM，再做细菌转化。
如果以上操作仍不能改善连接效率，则需对连接后的DNA进行纯化。
3. 当使用具有lacZ基因的载体克隆短链DNA片段时，有时即使插入了DNA片段也会有不出现停止密码或者读框不改变的情况发生，在颜色选择培养基上形成淡蓝色的单菌落。
4. 短链DNA克隆时，有时会有插入内含数个串联DNA片段的克隆体出现。
5. 如果PCR反应过程中需要加入矿物油，则要注意勿将其带入后面的反应液中。
6. 带有磷酸基的3’凹陷末端的DNA片段无法使用本试剂盒进行末端平滑化反应。
 
 

页面更新：2020-01-16 11:52:52