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THERMO T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase EL0014EL0011

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THERMO T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase EL0014

  • 产品型号：  EL0011
  • 简单描述
  • THERMO T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase单位：200U，1000U货号：EL0014,EL0011
详细介绍

THERMO T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase

描述

Thermo Scientific T4 DNA Ligase catalyzes the formation of a phosphodiester bond between juxtaposed 5'-phosphate and 3'-hydroxyl termini in duplex DNA or RNA. The enzyme repairs single-strand nicks in duplex DNA, RNA, or DNA/RNA hybrids. It also joins DNA fragments with either cohesive or blunt termini, but has no activity on single-stranded nucleic acids.

T4 DNA Ligase requires ATP as a cofactor.

Highlights

• Active in Themo Scientific restriction enzyme, PCR, and RT buffers (when supplemented with ATP)
• Fast—sticky-end ligation is completed in 10 minutes at room temperature
• Supplied with PEG solution for efficient blunt-end ligation

THERMO T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase

订购信息：

 

货号

 单位  
  EL0011

1,000 units

    
  EL0012

5 x 1,000 units

    
  EL0014

200 units

  

THERMO T4 DNA连接酶,T4 DNA Ligase

T4 DNA Ligase酶试剂盒Takara

发表于由

T4 DNA Ligase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2011A T4 DNA Ligase 25,000 U ￥130 T4 DNA Ligase T4 DNA Ligase T4 DNA Ligase
Takara 2011B (A × 5) T4 DNA Ligase 25,000 U × 5 ￥585 T4 DNA Ligase T4 DNA Ligase T4 DNA Ligase
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■ 制品内容
T4 DNA Ligase (350 U/μl) 25,000 U
10X T4 DNA Ligase Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本酶催化相邻DNA链的5’-P末端和3’-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，需Mg2+和ATP作辅因子，分子量为62,000，最适反应pH为7.6。本酶可以催化粘性末端之间和平滑末端之间的DNA的连接。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid that encodes the gene of T4 DNA ligase
 
■ 活性定义
在20 μl的连接反应体系中，6 μg的λDNA-Hind Ⅲ的分解物在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。
本酶的1 unit相当于在含有6.6 mM MgCl2，10 mM DTT，66 μM ATP和3.3 μM [32P]-Na4P2O7的66 mM Tris-HCl (pH7.6) 中发生ATP-PPi交换反应的0.008 Weiss Unit。
 
■ 用途
1. DNA片段和载体DNA的连接。
2. DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。
 
■ 注意事项
连接反应因末端碱基序列的不同而反应速度各异，一般有下列倾向 (由快至慢)：
突出末端：Hind III＞Pst I＞EcoR I＞BamH I＞Sal I
平滑末端：Hae III＞Alu I＞Hinc II＞Sma I
          EcoR V＞Sca I＞Pvu II＞Nru I
其中连接Hind III 末端的速度约为连接Sal I 末端速度的10～40倍；
而连接Hae III 末端的速度约为连接Sma I 末端速度的5～10倍。
 
 

页面更新：2021-08-09 16:36:35

E.coli DNA Ligase酶试剂盒Takara

发表于由

E.coli DNA Ligase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2161 E.coli DNA Ligase 1,000 U ￥161 E.coli DNA Ligase E.coli DNA Ligase E.coli DNA Ligase
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■ 制品内容
Code No.: 2161  
E.coli DNA Ligase (60 U/μl) 1,000 Units
10X E.coli DNA Ligase Buffer 100 μl
10X BSA (0.05%)* 100 μl
* BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
 
■ 制品说明
本酶催化相邻DNA链的5′-P末端和3′-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，与T4 DNA Ligase作用相同。分子量为77,000，最适反应pH为7.5-8.0 (Tris-HCl buffer)。反应需NAD作辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。与T4 DNA Ligase能将DNA的5′-P末端与RNA的3′-OH以及RNA的5′-P末端与DNA的3′-OH连接不同，本酶不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli UT481 carrying the plasmid encoding the ligase
 
■ 活性定义
在20 μl的连接反应体系中，6 μg的λ DNA-Hind III在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位 (U)。
 
■ 用途
Okayama-Berg法克隆cDNA，实验操作中酶的用量约为50 units。
 
■ 使用注意
本酶由大肠杆菌克隆体精制而成，杂质很少，是纯度很高的制品。因此，即便是高浓度制品，大量使用也完全没有问题。
 
 

页面更新：2019-03-07 16:23:00

T4 RNA Ligase酶试剂盒Takara

发表于由

T4 RNA Ligase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2050A T4 RNA Ligase 1,000 U ￥521 T4 RNA Ligase T4 RNA Ligase T4 RNA Ligase
Takara 2050B (A × 5) T4 RNA Ligase 1,000 U × 5 ￥2,343 T4 RNA Ligase T4 RNA Ligase T4 RNA Ligase
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■ 制品内容
T4 RNA Ligase (40 U/μl) 1,000 U
10X T4 RNA Ligase Buffer 1 ml
0.1% BSA 1 ml
 
■ 制品说明
本酶能使寡核苷酸的5’-P末端和3’-OH末端结合，以ATP为辅因子。最小底物为NpNpNOH和pNp。连接效率受供体和受体各自的碱基影响。DNA与RNA之间的连接效率较RNA之间的连接效率低，DNA之间的连接效率最低，常因不能识别双链核苷酸导致连接失败。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid encoding T4 RNA ligase gene
 
■ 活性定义
以Oligo(A)n为底物，标记RNA 3’末端，在5℃、10分钟内使1 pmol [5’-32P]pCp 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。
 
■ 用途
1. 单链RNA及单链DNA的3’-OH末端的标记。以tRNAPhe为底物，50 units的本酶于5℃反应16小时，tRNAPhe的3’-OH标记率高于80%。
2. 单链Oligo RNA及单链Oligo DNA的合成。
 
■ 使用注意
1. 连接反应的适合反应温度为5-16℃，若超过该温度活性会被抑制。
2. PEG共存的条件下能够促进反应，而反应特异性不变。
3. 为了提高连接反应效率，建议使用酶浓度高而ATP浓度尽量低的反应条件。
 
 

页面更新：2019-03-07 16:02:20