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cDNA Library,Mouse Smooth Muscle酶试剂盒Takara

发表于2024年2月29日由whatman中国官网

cDNA Library,Mouse Smooth Muscle
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9535	cDNA Library,Mouse Smooth Muscle	5 μg	￥6,008

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□ 浓度        200 μg/ml   □ 贮存溶液        Tris-HCl (pH8.0) 10 mM      EDTA 1 mM

■ 制品说明

本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

■ pAP3neo载体结构图

页面更新：2021-02-22 14:35:58

cDNA Library,Mouse Spleen酶试剂盒Takara

发表于2024年2月29日由whatman中国官网

cDNA Library,Mouse Spleen
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9536	cDNA Library,Mouse Spleen	5 μg	￥6,008

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□ 浓度        200 μg/ml   □ 贮存溶液        Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM      EDTA 1 mM

■ 制品说明

本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

■ pAP3neo载体结构图

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cDNA Library,Mouse Testis酶试剂盒Takara

发表于2024年2月29日由whatman中国官网

cDNA Library,Mouse Testis
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9537	cDNA Library,Mouse Testis	5 μg	Inquire

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□ 浓度        200 μg/ml   □ 贮存溶液        Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM      EDTA 1 mM

■ 制品说明

本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

■ pAP3neo载体结构图

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cDNA Library,Mouse Thymus酶试剂盒Takara

发表于2024年2月29日由whatman中国官网

cDNA Library,Mouse Thymus
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9538	cDNA Library,Mouse Thymus	5 μg	￥6,008

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本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

■ pAP3neo载体结构图

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cDNA Library,Rat Brain酶试剂盒Takara

发表于2024年2月29日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Brain
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9539	cDNA Library,Rat Brain	5 μg	￥6,008

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本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

■ pAP3neo载体结构图

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cDNA Library,Rat Heart酶试剂盒Takara

发表于2024年2月28日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Heart
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9540	cDNA Library,Rat Heart	5 μg	￥6,008

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■ pAP3neo载体结构图

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cDNA Library,Rat Kidney酶试剂盒Takara

发表于2024年2月28日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Kidney
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9541	cDNA Library,Rat Kidney	5 μg	Inquire

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□ 浓度        200 μg/ml   □ 贮存溶液        Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM      EDTA 1 mM

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cDNA Library,Rat Liver酶试剂盒Takara

发表于2024年2月28日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Liver
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9542	cDNA Library,Rat Liver	5 μg	Inquire

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本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

■ pAP3neo载体结构图

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cDNA Library,Rat Lung酶试剂盒Takara

发表于2024年2月28日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Lung
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9543	cDNA Library,Rat Lung	5 μg	Inquire

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□ 浓度        200 μg/ml   □ 贮存溶液        Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM      EDTA 1 mM

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本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

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cDNA Library,Rat Retina酶试剂盒Takara

发表于2024年2月28日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Retina
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9544	cDNA Library,Rat Retina	5 μg	Inquire

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□ 浓度        200 μg/ml   □ 贮存溶液        Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM      EDTA 1 mM

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本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

■ pAP3neo载体结构图

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cDNA Library,Rat Skeletal Muscle酶试剂盒Takara

发表于2024年2月28日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Skeletal Muscle
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9545	cDNA Library,Rat Skeletal Muscle	5 μg	Inquire

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本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

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页面更新：2021-02-22 14:37:29

cDNA Library,Rat Spleen酶试剂盒Takara

发表于2024年2月28日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Spleen
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9547	cDNA Library,Rat Spleen	5 μg	Inquire

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cDNA Library,Rat Testis酶试剂盒Takara

发表于2024年2月28日由whatman中国官网

cDNA Library,Rat Testis
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9548	cDNA Library,Rat Testis	5 μg	Inquire

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本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene (1983) 25:263-269)， 由各种Poly(A)+ RNA制作的质粒DNA型cDNA文库。合成cDNA片段时，使用了含有限制酶Not I位点的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接头，通过这两个限制酶位点，使cDNA片段定向克隆到载体中。克隆前，做了短片段的分离处理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初级文库构建完成后，采用了固体平板培养法，仅对初级文库进行一次扩增，然后使用质粒提取试剂盒，从扩增文库的菌体中提取质粒，调整得到扩增的质粒cDNA文库。使用这种方法得到的扩增文库，尽可能保持了各种cDNA片段的克隆在初级文库中所占的比例。   ■ 保存 -20℃。   ■ cDNA文库使用的载体和多克隆位点 本cDNA文库制品使用的载体为pAP3neo，含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞中进行表达。同时，该载体含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶启动子。 GenBank Accession No.AB003468 1. cDNA片段克隆在pAP3neo载体的Bgl II位点和Not I位点之间。 * 由于cDNA片段合成时，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接头，克隆后，载体的Bgl II 位点失效，不能再被Bgl II酶切开。 2. Xba I 位点受dam methylase的影响。   ■ 用途 对未知或已知的cDNA进行PCR筛选。

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页面更新：2020-07-31 15:23:18

NGS文库定量酶试剂盒Takara

发表于2024年1月11日由whatman中国官网

NGS文库定量
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	638325	DNA Standards for Library Quantification	50 Rxns	￥2,780
Clontech	638324	Library Quantification Kit	500 Rxns	￥7,087

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高性能的文库定量试剂盒

Library Quantification Kit

· 可以对Illumina测序文库进行高灵敏度定量 · 基于qPCR的方法，可以对低浓度的文库进行定量 · 只特异性检出含有接头的DNA · 添加了四种已知浓度的标准样品

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页面更新：2020-09-16 09:25:20

cDNA Library Construction Kit酶试剂盒Takara

发表于2024年1月9日由whatman中国官网

cDNA Library Construction Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6136	cDNA Library Construction Kit	5 Rxns	￥9,980

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■ 制品内容 (5 次量)

PrimeScript RTase(200 U/μl) 5 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 5 μl Oligo(dT)18 Anchor Primer (1 μg /μl)*1 10 μl 5×1st Strand Synthesis Buffer*2 20 μl 1st Strand dNTP Mixture 6 μl E.coli RNase H/E.coli DNA Ligase Mixture 10 μl E.coli DNA Polymerase I (20 U/μl) 10 μl 2nd Strand dNTP Mixture 23 μl 5×2nd Strand Synthesis Buffer*2 150 μl T4 DNA Polymerase (1 U/μl) 20 μl 10×T4 DNA Ligase Buffer 20 μl T4 DNA Ligase (350 U/μl) 20 μl EcoR I-Sma I Adaptor (0.4 μg/μl) 18 μl Not I Supplement 135 μl Not I (50 U/μl) 15 μl tRNA (10 μg/μl) 5 μl Dr. GenTLE Precipitation Carrier (4℃保存)*3 60 μl 3 M Sodium Acetate (pH5.2) (4℃保存) 1 ml pAP3neo Predigested Vector (100 ng/μl)*4 5 μl RNase-free H2O 640 μl Control RNA (1 μg/μl)*5 5 μl T7 Promoter Primer (5 pmol/μl)*6 20 μl T3 Promoter Primer (for pAP3neo) (5 pmol/μl)*6 20 μl Spin Column (CHROMA SPIN™-1000＋DEPC-H2O Columns*7) (4℃保存) 5 支   *1 Oligo(dT)18 Anchor Primer中含有Not I Site及Xho I Site。如果不用Not I 而用Xho I 进行酶切时，也可以制备EcoR I-Xho I 双链cDNA片段构建cDNA文库，利用这些Site的载体 (不可去磷酸化) 也可用来构建cDNA文库。另外，本试剂盒中不含有Xho I 酶，需要时请另外购买。 *2 与PrimeScript Double Strand cDNA Synthesis Kit[Code No.: 6111A] 中所含有的组份不同。 *3 同Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094)。 *4 经EcoR I、Not I 酶切处理。 *5 本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段，该DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板，由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的，Control RNA (约1.4 kb )的3’端具有30 个A碱基的Poly(A)+尾。以这种RNA为模板合成的双链cDNA插入到适当的质粒载体中后，如果插入的cDNA确实为全长，那这种质粒便可获得四环素抗性。 *6 可用于Insert Check及DNA测序。 *7 Clontech Laboratories公司产品。 (带下盖) (注) 本制品不含对电转化法十分重要的大肠杆菌。使用本制品时，需用大肠杆菌的感受态细胞转化甲基化DNA。可采用E. coli HST08 Premium Electro-Cells (Code No.: 9028)、Clontech的Stellar™ Electrocompetent Cells (Clontech Code: 636756)

■ 制品说明

利用真核生物的各种组织或细胞中的Poly(A)+RNA合成cDNA，然后进行基因克隆，这在分子生物学实验中被广泛应用。这一技术的使用，使基因的结构解析及目的蛋白的表达等变得更为方便。 一般合成cDNA以及构建cDNA Library的方法为： ① 合成与目的Poly(A)+RNA相互补的双链cDNA；② 将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组； ③ 将重组体导入细菌或真核细胞内进行扩增，构建cDNA Library。构建成的cDNA Library可以用于cDNA的解析，或者进一步进行体外转录或体外翻译等。 本试剂盒原理采用了Gubler-Hoffman法 (Linker Primer法)，是一种可以控制克隆基因方向性的Directional Cloning法，其原理见下图，具体说明如下： 1. 利用反转录酶PrimeScript RTase和Oligo(dT)18 Anchor Primer1,3-5)合成1st Strand cDNA。1st Strand cDNA合成时使用5-methyl dCTP。 2. E.coli RNase H使mRNA-1st Strand cDNA杂合体中的RNA形成Nick，再使用E.coli DNA Ploymerase和E.coli DNA Ligase将RNA链置换成DNA链，合成2nd Strand cDNA。 3. 使用T4 DNA Polymerase将双链cDNA末端平滑化。 4. 与Adaptor连接后，使用Not I 进行酶切。 5. 使用Spin Column除去短链cDNA。 6. 与Vector pAP3neo进行连接 (Directional Cloning)。 7. 利用电刺激转化法导入大肠杆菌。 8. 确认克隆效率及插入片段大小等。

■ cDNA Library合成原理图

■ 保存

Dr. GenTLE Precipitation Carrier 4℃保存。 3 M Sodium Acetate (pH5.2) 4℃保存。 Spin Column 4℃保存。 其他组份 -20℃保存。

页面更新：2017-04-07 10:29:07

cDNA文库构建酶试剂盒Takara

发表于2024年1月9日由whatman中国官网

cDNA文库构建
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	634933	In-Fusion SMARTer Directional cDNA Library Construction Kit	10 Rxns	￥18,158
Clontech	634901	SMART cDNA Library Construction Kit	Each	￥13,901
Clontech	635003	pEXP-Lib Vector	20 μg	￥4,518
Clontech	635002	pRetro-Lib Vector	20 μg	￥4,518

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由于产品升级，从即日起，您订购的In-Fusion SMARTer Directional cDNA Library Construction Kit（634933）中的组分In-Fusion HD Cloning Kit (Code No. 639649)将陆续替换为性能更高的In-Fusion® Snap Assembly Master Mix (Code No. 638948)，该组分数量保持不变，请以实际收到的产品为准。如需含HD组分的旧版说明书或产品组分列表文件，请邮件联络zhukx@takarabiomed.com.cn

Clontech提供利用SMART技术构建全长cDNA的cDNA文库构建试剂盒。

创建长插入片段文库

SMART cDNA Library Construction Kit用于向噬菌体TriplEx2载体上克隆全长cDNA。试剂盒结合了RNA模板5’末端转换机制，即SMART技术，用于cDNA扩增，无需adaptor连接，即可定向克隆至TriplEx2载体。试剂盒提供了两种独立的流程，可以根据您的起始材料选择其中一种。起始材料有限可以使用长距离PCR(LD-PCR)方法，起始total RNA的量可以低至50 ng。另一种流程适用于起始材料充足的情况，例如起始材料是多于1 μg的 poly A+ RNA。与传统方法构建的cDNA文库或其他方法合成的全长cDNA比较，SMART文库包含了更大比例的全长克隆。所以，SMART cDNA文库分离出的克隆包含了对应的mRNA全部5’非翻译区的序列。

富集全长cDNA

SMART cDNA合成技术保证了cDNA合成连续不间断，得到的cDNA很好地反映了5’端的序列。

精简的流程更节省时间

由于高效的cDNA合成和克隆过程，In-Fusion SMARTer Library Construction流程比其他文库构建方法的步骤更少。全过程仅需三个酶，而其他方法需要6-8个酶参与反应。SMART(er) cDNA合成流程是用户友好的且更直接的，无需连接接头或加尾步骤。处理RNA样本的步骤少，从而降低了珍贵的RNA被降解的风险。

向任意载体插入您的文库

试剂盒结合In-Fusion克隆方法，仅需一个30分钟的反应即可把您的SMARTer cDNA文库克隆到In-Fusion SMARTer试剂盒附带的pSMART2IF或pSMART2IFD线性载体上。更重要的是，因为In-Fusion克隆是依赖于DNA片段末端15个互补碱基的，可以使用In-Fusion试剂盒准确地将您的SMARTer cDNA转移到任意线性载体上。如果您想把文库克隆到自己的表达载体上做功能分析，只需简单地通过反向PCR来扩增您的载体，生成线性载体时使用的引物需要与SMARTer cDNA末端互补。引物必须有两个特点：引物5’端包含15个碱基，这15个碱基与连接载体的DNA片段末端的15个碱基相互补；引物3’端必须包含与目标载体特异性结合的序列。

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