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无需Polybrene的慢病毒快速转导酶试剂盒Takara

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无需Polybrene的慢病毒快速转导
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631256 Lenti-X Accelerator 400 μl ￥4,245 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导
Clontech 631257 Lenti-X Accelerator 1,000 μl ￥9,743 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导
Clontech 631254 Lenti-X Accelerator Starter Kit Each ￥12,183 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导 无需Polybrene的慢病毒快速转导
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Lenti-X Accelerator是一项基于磁珠的技术，其作用是加快慢病毒转导实验速度。传统的慢病毒转导需要将细胞和病毒与Polybrene孵育过夜，但是Lenti-X Accelerator可以让您在30分钟内完成这个过程，并且避免使用Polybrene。带电荷的磁珠与慢病毒包装上清液中的病毒粒子结合，并在磁场作用下拉近并与细胞接触。
 
Lenti-X Accelerator非常适合转导慢病毒和MMLV逆转录病毒，包括MSCV逆转录病毒制剂。它是Polybrene敏感细胞类型的理想选择。Lenti-X Accelerator reagent (Code No.631256 & 631257)和Magnetic Separator for Cell Culture (Code No.631255)可以单独购买，也可以购买套装Lenti-X Accelerator Starter Kit (Code No.631254)。低滴度慢病毒样品在转导前可以使用Lenti-X Concentrator进行浓缩，提高病毒滴度。
 
我确实需要使用磁力分选器吗？
Lenti-X Accelerator磁珠足够大，即便不使用磁铁，单依靠重力也可进行转导。与Polybrene（过夜）相比，转导仍然是非常快速的（15分钟），然而使用磁力分选器可以将转导时间缩短至5分钟，并且转导效率可以提高10％。磁力分选器还可以轻松地从转导细胞培养板中去除磁珠-比如，胰蛋白酶消化后分离细胞，可以将细胞短暂暴露于磁铁，然后再将它们吸到另一个培养皿中。
 
■ 概述/特点
· 使用磁珠仅需30分钟即可完成慢病毒转导
· 转导Polybrene敏感细胞类型的理想选择
· 转导前使用Lenti-X Concentrator浓缩低滴度慢病毒样品
 
■ 应用
· 慢病毒和MMLV逆转录病毒，包括MSCV逆转录病毒制剂的转导
· 转导Polybrene敏感细胞类型
 
■ 实验例
无需Polybrene的慢病毒快速转导
图1. Lenti-X Accelerator与Polybrene的转导作用对比。将结合了病毒的磁珠放置于磁场中，可大大提高单层细胞表面的局部病毒浓度。这样可以将预孵育后的转导时间缩短至5分钟，预孵育时间为20分钟，在这段时间中磁珠将与病毒进行结合，而使用Polybrene则需要转导过夜。加速转导也降低了敏感靶细胞在病毒上清液中的暴露时间。
 
无需Polybrene的慢病毒快速转导
图2. 使用Lenti-X Accelerator（25分钟）进行慢病毒转导要比使用Polybrene（16小时）快得多。使用表达ZsGreen1的慢病毒载体转染HT1080细胞。Lenti-X Accelerator磁珠(8 μl)与200 μl（approx. 1×106 total IFU）病毒上清液在室温下预孵育20分钟，然后添加到HT1080细胞中并放置在磁力分离器上孵育5分钟。同样也使用等量病毒、6 μg/ml Polybrene转导HT1080细胞5分钟或者过夜。37℃培养72小时后，使用流式细胞仪测定转导细胞数量。
 
无需Polybrene的慢病毒快速转导
图3. 磁力分离器适用于96孔、6孔、24孔、12孔细胞培养板。
 
 
产品详情请点击：无需Polybrene的慢病毒快速转导
 
 

页面更新：2020-04-10 16:07:10

慢病毒滴度测定 10分钟快速测定酶试剂盒Takara

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慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631280 Lenti-X GoStix Plus(20) 20 Tests ￥5,811
￥4,649 		慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
Clontech 631281 Lenti-X GoStix Plus(50) 50 Tests ￥11,811 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 → 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 → 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 → 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 → 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 → 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 → 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
 
 
10分钟定量慢病毒滴度测试— Lenti-X GoStix Plus
Lenti-X GoStix Plus提供了一种快速、简便、有效的方法，可以在非常短的时间内检测包装细胞上清液中的慢病毒滴度。这种检测方法包括将20 μl上清液添加到GoStix cassette中，等10分钟以等待表明慢病毒p24蛋白质存在的条带出现。我们早期的GoStix提供的是定性检测结果，而升级后的Lenti-X GoStix Plus的检测结果可以使用智能手机免费app进行分析，可以通过该应用程序比较条带强度来量化慢病毒滴度。
 

重要提示：我们将于2020年9月26日（星期六）太平洋夏令时间凌晨3:00，也就是北京时间18:00，发布支持慢病毒滴度测定产品Lenti-X™ GoStix™ Plus的新版本移动应用程序。我们强烈建议所有用户在上述发布日期之后，尽快更新为新版本。原因是：新版本GoStix Plus app一经发布，旧版本app将不支持之前没有检测过的新批次Lenti-X GoStix Plus。请注意，app更新将导致原有保存测定结果从移动设备中删除。因此，我们建议用户在安装新版本之前，确保所有测定结果均已保存或记录。了解更多关于GoStix Plus app更新相关FAQ，请点击此页面查阅。

下载iOS版GoStix Plus应用程序，请登录App Store搜索“GoStix Plus”获取；下载安卓版GoStix Plus应用程序，请登录Google Play商店搜索“GoStix Plus”获取，也可以点击此页面下载

 
Lenti-X GoStix app的定量检测结果（称为GoStix值或GV）可用于比较不同包装系统所产生的病毒量，其方式类似于ELISA方法，但比ELISA要更简便和快捷得多，可借助参考病毒计算出实际的IFU/ml。访问我们的FAQs页面，了解如何下载和使用智能手机app的相关信息。通过简便快速的慢病毒定量方式，Lenti-X GoStix Plus可以使您的转导实验方案差异更小化，确保每次实验可以达到更为一致的转导效果。
 
■ Overview
· 使用简单的智能手机app在10分钟内量化慢病毒滴度*
· 确定收集慢病毒上清液的理想时机
· 确保实验达到一致的转导效果
*最初的Lenti-X GoStix（Code No. 631243和631244）不能使用智能手机app进行慢病毒定量，并且该产品在逐步淘汰过程中。库存销售完毕后，将不再销售这些产品。如果需要的话，Lenti-X GoStix Plus可以使用与原始Lenti-X GoStix相同的方式进行定性分析。
 
■ 应用
· 确定慢病毒包装反应是成功的
· 比较不同包装系统所产生的病毒量
 
■ 观看视频
Applying lentiviral supernatants
了解如何将样品正确添加至Lenti-X GoStix Plus cassette。
 
■ 实验例
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图1. 展示了慢病毒载体滴度测定的常用方法及其相关时间表（以小时为单位）。使用Lenti-X GoStix Plus进行滴度测定仅需要十分钟，其测定时间远远短于传统方法。Lenti-X GoStix Plus：一种基于侧向层析技术的检测方法，用于检测上清液中的慢病毒p24衣壳蛋白质。qRT-PCR：通过qRT-PCR方法定量病毒RNA基因组。ELISA：检测p24衣壳蛋白质的量。PCR：通过qPCR测定整合的DNA前病毒。IFU（FACS）：通过FACS分析RFP/GFP阳性细胞测定被感染靶细胞的百分比。IFU（筛选）：通过检测转导细胞群中抗药细胞克隆的数量来确定感染单位。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图2. p24的产生，GoStix值和IFU/ml值都取决于收获病毒的时间。使用Lenti-X Single Shot按照制造商操作指导制备ZsGreen1慢病毒一式两份，并在指定时间收集病毒。在每个时间点，使用Lenti-X GoStix Plus分析样品的GV值，使用HT1080细胞测定病毒稀释液确定IFU/ml。检测结果除了表明GV（i.e., p24积累）和IFU/ml取决于收获时间之外，这些数据还表明GV和IFU/ml之间的比率随时间的变化而变化。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图3. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同浓度病毒的转导滴度是有相关性的。使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。将制备出的病毒样品进行梯度稀释，添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中，进行密度分析测定滴度。另外，将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。未知样品的IFU/ml使用GV与IFU/ml的比值进行计算，该比值由使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒来确定。然后以使用Lenti-X GoStix Plus测定并计算出的IFU/ml与实际IFU/ml作图。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图4. Lenti-X GoStix App通过测定测试（T）和对照（C）条带的相对强度来定量病毒滴度。Lenti-X GoStix App使用智能手机相机确定测试（T）和对照（C）条带的相对强度，并使用比率计算滴度。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图5. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同包装系统的转导滴度是有相关性的。使用市面上销售的三种不同的慢病毒载体和包装系统制备ZsGreen1慢病毒。将所有制备样品稀释并添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中并进行分析。另外，将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒所确定的GV与IFU/ml的比值，计算每个未知样品的IFU/ml。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图6. 比较使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度和基于ELISA方法测定的病毒滴度。Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度可以与基于ELISA方法测定的病毒滴度以相同的方式使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。使用HT1080细胞测定转导细胞的百分比（％转导），然后进行FACS分析。此外，使用Lenti-X p24 Rapid Titer Kit测定病毒p24值，使用Lenti-X GoStix Plus确定GoStix值。以一定范围MOIs的病毒转导HT1080细胞，以其转导效率和等同的ELISA和GoStix值作图。转导后48小时拍摄转导细胞的荧光图像。
 
 
 
产品详情请点击：慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
 

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高滴度慢病毒包装系统酶试剂盒Takara

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高滴度慢病毒包装系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631275 Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G) 16 Rxns ￥11,501 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631276 Lenti-X™ Packaging Single Shots (VSV-G) 96 Rxns ￥26,205 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631277 Lenti-X™ Packaging Single Shots (Integrase Deficient) 16 Rxns ￥10,926 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631278 Lenti-X™ Packaging Single Shots (Ecotropic) 16 Rxns ￥10,926 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631282 Lenti-X™ Packaging Single Shots (96-well, VSV-G) 4 × 96-well plates ￥12,228 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
Clontech 631294 Lenti-X™ Packaging Single Shots (Envelope-Free) 16 Rxns ￥11,323 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统 高滴度慢病毒包装系统
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高滴度慢病毒包装系统 → 高滴度慢病毒包装系统 → 高滴度慢病毒包装系统 → 高滴度慢病毒包装系统 → 高滴度慢病毒包装系统 → 高滴度慢病毒包装系统 → 高滴度慢病毒包装系统
 
 
高滴度慢病毒包装系统
Lenti-X Packaging Single Shots是第四代慢病毒包装系统，它通过非常简便、操作一致的一步法来制备高滴度慢病毒。通常情况下，VSV-G型慢病毒滴度可达到107-108 IFU/ml。Lenti-X Packaging Single Shots由单管形式的Xfect Transfection Reagent和经过配比优化的Lenti-X包装质粒组成，两者预混后经过预分装和冻干处理，所以无需额外的转染试剂。只需要将这种混合物与您选择的慢病毒载体在无菌水中重新配制，然后将其添加到10厘米培养皿或者96孔培养板培养的293T细胞中，例如Lenti-X 293T Cells（Code No. 632180）即可制备高滴度病毒。
 
我们提供以下四种类型的Lenti-X Packaging Single Shots，这些包装系统针对不同的嗜性和整合特征进行了优化。每管中试剂和载体的量，都是以在10厘米培养皿或者96孔培养板中制备慢病毒来进行优化的。转染过程完全可以在血清存在的情况下进行，使用不含四环素的FBS，对于使用该技术获得高病毒滴度是很关键的。

· Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G)和Lenti-X Packaging Single Shots (96-well, VSV-G) 在四种类型系统中提供最高的病毒滴度（107-108 IFU/ml），具有最广泛的病毒嗜性，分别以单管和96孔的形式提供。
· Lenti-X Packaging Single Shots (Ecotropic)病毒嗜性限于小鼠和大鼠来源细胞
· Lenti-X Packaging Single Shots (Integrase Deficient)制备整合能力显著降低的VSV-G假型慢病毒
· Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free) 可灵活制备带有所选包膜蛋白的假型慢病毒。

 
■ 应用
· 慢病毒可以转导广泛的难转染细胞类型
· 轻松构建稳转细胞系
· 制备VSV-G假型，单嗜型或整合酶缺陷型慢病毒
 
■ 观看视频
了解我们的第四代包装系统如何可以产生如此高的病毒滴度。
 
了解使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 如何轻松始终如一地获得高滴度慢病毒。
 

■ 实验例
 
高滴度慢病毒包装系统
图1. Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 操作流程。
 
高滴度慢病毒包装系统
图2. Lenti-X Packaging Single Shots (Envelope-Free)操作流程。
 
高滴度慢病毒包装系统
图3. 高效一致的转染可制备出高滴度病毒。在四个独立实验中，按照Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 操作流程包装含有ZsGreen1基因的慢病毒载体。简而言之，在四个Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 中，每一个都添加7 μg pLVX-ZsGreen1质粒；每管涡旋振荡20秒并在室温下孵育10分钟。然后，将混合物添加至汇合度约为80％的培养Lenti-X 293T cells中。转染后48小时，通过荧光显微镜（Panel A，顶部）和光学显微镜（Panel A，底部）拍摄图像。拍摄图像后，收集培养上清液，感染HT1080细胞并进行滴度测定（Panel B，IFU/ml）。
 
高滴度慢病毒包装系统
图4. 无论是哪种慢病毒载体骨架，使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 都可以制备出高滴度病毒。将CMV ZsGreen1表达框克隆到多个慢病毒载体骨架中，然后按照操作指导使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 将这些载体包装成为慢病毒。在四个Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 中，每一个都添加7 μg pLVX-ZsGreen1质粒；每管涡旋振荡20秒并在室温下孵育10分钟。然后，将混合物添加至汇合度约为80％的培养Lenti-X 293T cells中。转染后48小时，通过多种方法测定病毒滴度。为了确定感染性，收集上清液并感染HT1080细胞（流式细胞术）。收集的病毒上清液也通过RT-PCR方法定量病毒基因组拷贝数（qRT-PCR，Lenti-X qRT-PCR Titration Kit），ELISA方法测定p24（p24 ELISA，Lenti-X p24 Rapid Titer Kit），或者通过一种快速检测方法（Lenti-X GoStix）测定滴度。
 
高滴度慢病毒包装系统
图5. 第四代和第三代慢病毒包装系统比较。我们的Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G) 使用的是5个独立组件组成的包装系统(Panel A)，这5个组件按照特别比例混合，优化了病毒包装性能。gag，pol和env基因的分离有效地降低了RCL产生的概率（Wu et al., 2000）。Tet-Off和Tat反式激活因子驱动病毒必需成分高水平表达，诱导级联表达反应，从而可以制备出高滴度慢病毒。pol基因与vpr 基因的融合可以确保反转录酶/整合酶蛋白质能够转运到重组慢病毒颗粒中。本示意图没有显示所有的载体元件。而第三代慢病毒包装系统（Panel B）不包含分离的gag和pol序列，也没有使用反式激活级联机制，所以产生的病毒滴度较低。
 
 
 
产品详情请点击：高滴度慢病毒包装系统
 
 

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Lenti-X 293T 细胞系酶试剂盒Takara

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Lenti-X 293T 细胞系
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632180 Lenti-X 293T Cell Line 1 ml ￥7,650 Lenti-X 293T 细胞系 Lenti-X 293T 细胞系 Lenti-X 293T 细胞系
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Lenti-X 293T 细胞系
要充分利用慢病毒包装系统，就需要具备一个HEK 293T宿主细胞系，这个细胞系要易于转染并且可以高水平表达病毒蛋白质。我们的Lenti-X 293T cell line经过了克隆筛选，可以充分满足这些需求，当与我们优质的高滴度Lenti-X包装系统配合使用时，可以获得尽可能高的慢病毒滴度（高达108 IFU/ml）。Lenti-X 293T Cell Line是人胚胎肾细胞转化细胞HEK 293的亚克隆，它可高度转染并高水平表达病毒蛋白质，也可稳定表达猿猴病毒40（SV40）大T抗原。
 
温馨提示：建议细胞产品接收后立即进行复苏培养，如若不能立即复苏培养则需要保存在液氮中或者-150℃冰箱中，并尽早进行复苏培养。对于HEK 293细胞，建议采用胶原蛋白包被培养皿辅助细胞贴壁。
 
Lenti-X 293T 细胞系
图1. Lenti-X 293T细胞系
 
■ 实验例
Lenti-X 293T 细胞系
图2. 制备高滴度慢病毒。使用Lenti-X表达系统进行慢病毒包装，添加指定体积（μl）的慢病毒上清液转导Lenti-X 293T细胞，然后使用嘌呤霉素筛选9天形成抗性菌落，之后使用结晶紫进行染色。
 
Lenti-X 293T 细胞系
图3. 293T细胞系可制备出更高的病毒滴度。我们使用第四代慢病毒包装系统和一种pLVX-慢病毒载体，比较Lenti-X 293T Cell Line和其它两种常用HEK 293包装细胞系的病毒制备能力。Lenti-X 293T Cell Line明显优于其他细胞系——所获得的病毒滴度比293FT细胞高出6倍，比亲代HEK 293细胞系高出30倍。
 
 
 
产品详情请点击：Lenti-X 293T 细胞系
 
 
 
 

页面更新：2022-06-20 09:57:00

慢病毒纯化酶试剂盒Takara

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慢病毒纯化
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631233 Lenti-X Maxi Purification Kit 2 Preps ￥3,287 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631234 Lenti-X Maxi Purification Kit 5 Preps ￥5,474 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
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慢病毒纯化 → 慢病毒纯化 → 慢病毒纯化 → 慢病毒纯化 → 慢病毒纯化 → 慢病毒纯化 → 慢病毒纯化
 
 
慢病毒纯化
Lenti-X Maxi Purification Kit可从原始的培养上清液中纯化出高纯度和高产量的病毒。其基于重力流柱的实验操作，快速、简单、有效并且优于基于过滤器的纯化系统，后者会损坏易于损伤的慢病毒颗粒，从而降低产量。重力流柱会轻柔固定培养上清液中的病毒颗粒，未被结合的物质则会在洗涤步骤穿透柱子流出。
 
为什么要纯化慢病毒？
慢病毒纯化能去除可能对转导实验产生不利影响的细胞污染物。原始的培养上清液中包含残留的质粒DNA，不明感染和转导抑制剂，细胞和血清蛋白质，以及具有高度免疫原性的病毒蛋白质、核酸和病毒片段。在使用慢病毒作用于敏感靶细胞或体内应用之前，有必要通过纯化慢病毒来去除这些污染物。
 
简便的操作流程。
我们的慢病毒纯化柱是即用型预装柱，只需将10X结合缓冲液加入到上清液样品（9-45 ml）中，然后再将混合物添加至纯化柱即可。样品和缓冲液借助重力穿过树脂，就像是基于纯化柱的质粒制备。在两次洗涤纯化柱的过程中，杂质被去除掉了，纯化后的慢病毒回收在3 ml洗脱缓冲液中。
 
防止假转导。
使用纯化后的慢病毒储液还可以防止假转导，因为在感染的过程中，原始病毒上清液中高水平重组蛋白质会被转移至靶细胞中。而靶细胞假转导会掩盖慢病毒转导所预期的de novo表达。
 
更高的产量和纯度。
温和的纯化程序是维持病毒感染性和产生60-80％优良慢病毒产量的关键所在。基于阴离子交换的膜系统回收率要低得多，通常低于20％。而与基于过滤器的系统相比，Lenti-X纯化柱获得的病毒纯度更高。事实上，纯化后的Lenti-X样品中可检测到的蛋白质含量很低，而基于过滤器纯化的病毒液则含有与病毒共同纯化出来的高水平外源蛋白质。
 
■ Overview
· 与其他纯化技术相比，获得的纯度和产量更高
· 浓缩病毒至多10倍
· 简便而温和的重力流操作流程
· 专用收集架可与试剂盒 (Code No. 631245)一同购买，也可单独购买 (Code No. 631246)
· 实现更高效、更一致的慢病毒转导，收获更健康的靶细胞
· 有效去除转导抑制剂和细胞毒性污染物
 
■ 实验例
慢病毒纯化
图1 慢病毒纯化过程。基于Lenti-X重力柱的纯化方法（结合、清洗、洗脱），这种方法操作简便、有效，并且与基于针筒式过滤器的纯化方法相比能够更好地保存病毒。
 
慢病毒纯化
图2. 使用Clontech慢病毒纯化试剂盒可获得高产量和高纯度。使用我们的高滴度慢病毒包装系统制备并纯化慢病毒。Panel A. 为了确定病毒产量，通过qRT-PCR（RNA拷贝数）或流式细胞仪/荧光（IFU）测定纯化前和纯化后的慢病毒滴度，展示数据为七组实验的平均值。Panel B. 使用Lenti-X或基于过滤器的纯化系统（Vendor M和Vendor S）制备等量的纯化后慢病毒（1×105 IFU）进行SDS-PAGE和银染。与其它两种基于过滤器系统所制备的样品相比，在相同IFU的情况下Lenti-X样品含有明显更少的污染蛋白质。
 
 
 
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页面更新：2022-06-20 09:56:00

组成型慢病毒系统酶试剂盒Takara

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组成型慢病毒系统
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Clontech 632182 Lenti-X Bicistronic Expression System (Hyg) Each ￥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
Clontech 632181 Lenti-X Bicistronic Expression System (Neo) Each ￥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
Clontech 632183 Lenti-X Bicistronic Expression System (Puro) Each ￥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
Clontech 632164 Lenti-X Expression System Each ￥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
Clontech 631253 Lenti-X Expression System (EF1α Version) Each ￥13,884 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统 组成型慢病毒系统
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页面更新：2020-01-16 09:34:08

IRES双顺反子慢病毒系统酶试剂盒Takara

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IRES双顺反子慢病毒系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632182 Lenti-X Bicistronic Expression System (Hyg) Each ￥13,884 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 632181 Lenti-X Bicistronic Expression System (Neo) Each ￥13,884 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 632183 Lenti-X Bicistronic Expression System (Puro) Each ￥13,884 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631253 Lenti-X Expression System (EF1α Version) Each ￥13,884 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631982 pLVX-EF1α-IRES-ZsGreen1 Vector 10 μg ￥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631987 pLVX-EF1α-IRES-mCherry Vector 10 μg ￥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 632187 pLVX-IRES-ZsGreen1 Vector 10 μg ￥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631237 pLVX-IRES-mCherry Vector 20 μg ￥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631238 pLVX-IRES-tdTomato Vector 20 μg ￥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
Clontech 631988 pLVX-EF1α-IRES-Puro Vector 10 μg ￥8,531 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统 IRES双顺反子慢病毒系统
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慢病毒滴度测定 10分钟快速测定酶试剂盒Takara

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慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631280 Lenti-X GoStix Plus(20) 20 Tests ￥5,811
￥4,649 		慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
Clontech 631281 Lenti-X GoStix Plus(50) 50 Tests ￥11,811 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定 慢病毒滴度测定 10分钟快速测定

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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10分钟定量慢病毒滴度测试— Lenti-X GoStix Plus
Lenti-X GoStix Plus提供了一种快速、简便、有效的方法，可以在非常短的时间内检测包装细胞上清液中的慢病毒滴度。这种检测方法包括将20 μl上清液添加到GoStix cassette中，等10分钟以等待表明慢病毒p24蛋白质存在的条带出现。我们早期的GoStix提供的是定性检测结果，而升级后的Lenti-X GoStix Plus的检测结果可以使用智能手机免费app进行分析，可以通过该应用程序比较条带强度来量化慢病毒滴度。
Lenti-X GoStix app的定量检测结果（称为GoStix值或GV）可用于比较不同包装系统所产生的病毒量，其方式类似于ELISA方法，但比ELISA要更简便和快捷得多，可借助参考病毒计算出实际的IFU/ml。访问我们的FAQs页面，了解如何下载和使用智能手机app的相关信息。通过简便快速的慢病毒定量方式，Lenti-X GoStix Plus可以使您的转导实验方案差异更小化，确保每次实验可以达到更为一致的转导效果。
 
■ Overview
· 使用简单的智能手机app在10分钟内量化慢病毒滴度*
· 确定收集慢病毒上清液的理想时机
· 确保实验达到一致的转导效果
*最初的Lenti-X GoStix（Code No. 631243和631244）不能使用智能手机app进行慢病毒定量，并且该产品在逐步淘汰过程中。库存销售完毕后，将不再销售这些产品。如果需要的话，Lenti-X GoStix Plus可以使用与原始Lenti-X GoStix相同的方式进行定性分析。
 
■ 应用
· 确定慢病毒包装反应是成功的
· 比较不同包装系统所产生的病毒量
 
■ 观看视频
Applying lentiviral supernatants
了解如何将样品正确添加至Lenti-X GoStix Plus cassette。
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
 
Calculating lentiviral titer
了解如何使用智能手机免费app扫描Lenti-X GoStix Plus cassette。
 
■ 实验例
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图1. 展示了慢病毒载体滴度测定的常用方法及其相关时间表（以小时为单位）。使用Lenti-X GoStix Plus进行滴度测定仅需要十分钟，其测定时间远远短于传统方法。Lenti-X GoStix Plus：一种基于侧向层析技术的检测方法，用于检测上清液中的慢病毒p24衣壳蛋白质。qRT-PCR：通过qRT-PCR方法定量病毒RNA基因组。ELISA：检测p24衣壳蛋白质的量。PCR：通过qPCR测定整合的DNA前病毒。IFU（FACS）：通过FACS分析RFP/GFP阳性细胞测定被感染靶细胞的百分比。IFU（筛选）：通过检测转导细胞群中抗药细胞克隆的数量来确定感染单位。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图2. p24的产生，GoStix值和IFU/ml值都取决于收获病毒的时间。使用Lenti-X Single Shot按照制造商操作指导制备ZsGreen1慢病毒一式两份，并在指定时间收集病毒。在每个时间点，使用Lenti-X GoStix Plus分析样品的GV值，使用HT1080细胞测定病毒稀释液确定IFU/ml。检测结果除了表明GV（i.e., p24积累）和IFU/ml取决于收获时间之外，这些数据还表明GV和IFU/ml之间的比率随时间的变化而变化。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图3. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同浓度病毒的转导滴度是有相关性的。使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。将制备出的病毒样品进行梯度稀释，添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中，进行密度分析测定滴度。另外，将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。未知样品的IFU/ml使用GV与IFU/ml的比值进行计算，该比值由使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒来确定。然后以使用Lenti-X GoStix Plus测定并计算出的IFU/ml与实际IFU/ml作图。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图4. Lenti-X GoStix App通过测定测试（T）和对照（C）条带的相对强度来定量病毒滴度。Lenti-X GoStix App使用智能手机相机确定测试（T）和对照（C）条带的相对强度，并使用比率计算滴度。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图5. 使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度与不同包装系统的转导滴度是有相关性的。使用市面上销售的三种不同的慢病毒载体和包装系统制备ZsGreen1慢病毒。将所有制备样品稀释并添加到Lenti-X GoStix Plus cassettes中并进行分析。另外，将每个梯度稀释液使用HT1080细胞测定实际的IFU/ml。使用与未知样品相同的包装系统和在相同的时间收集的参考病毒所确定的GV与IFU/ml的比值，计算每个未知样品的IFU/ml。
 
慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
图6. 比较使用Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度和基于ELISA方法测定的病毒滴度。Lenti-X GoStix Plus测定的病毒滴度可以与基于ELISA方法测定的病毒滴度以相同的方式使用Lenti-X Packaging Single Shots慢病毒包装系统制备Lenti-X ZsGreen1慢病毒。使用HT1080细胞测定转导细胞的百分比（％转导），然后进行FACS分析。此外，使用Lenti-X p24 Rapid Titer Kit测定病毒p24值，使用Lenti-X GoStix Plus确定GoStix值。以一定范围MOIs的病毒转导HT1080细胞，以其转导效率和等同的ELISA和GoStix值作图。转导后48小时拍摄转导细胞的荧光图像。
 
 
 
产品详情请点击：慢病毒滴度测定 10分钟快速测定
 

页面更新：2020-02-28 09:10:44

慢病毒纯化酶试剂盒Takara

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慢病毒纯化
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631246 Collection Rack L Each ￥1,469 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631233 Lenti-X Maxi Purification Kit 2 Preps ￥3,287 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631234 Lenti-X Maxi Purification Kit 5 Preps ￥5,474 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
Clontech 631245 Lenti-X Maxi Purification Kit (with Rack) Each ￥6,864 慢病毒纯化 慢病毒纯化 慢病毒纯化
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慢病毒纯化
Lenti-X Maxi Purification Kit可从原始的培养上清液中纯化出高纯度和高产量的病毒。其基于重力流柱的实验操作，快速、简单、有效并且优于基于过滤器的纯化系统，后者会损坏易于损伤的慢病毒颗粒，从而降低产量。重力流柱会轻柔固定培养上清液中的病毒颗粒，未被结合的物质则会在洗涤步骤穿透柱子流出。
 
为什么要纯化慢病毒？
慢病毒纯化能去除可能对转导实验产生不利影响的细胞污染物。原始的培养上清液中包含残留的质粒DNA，不明感染和转导抑制剂，细胞和血清蛋白质，以及具有高度免疫原性的病毒蛋白质、核酸和病毒片段。在使用慢病毒作用于敏感靶细胞或体内应用之前，有必要通过纯化慢病毒来去除这些污染物。
 
简便的操作流程。
我们的慢病毒纯化柱是即用型预装柱，只需将10X结合缓冲液加入到上清液样品（9-45 ml）中，然后再将混合物添加至纯化柱即可。样品和缓冲液借助重力穿过树脂，就像是基于纯化柱的质粒制备。在两次洗涤纯化柱的过程中，杂质被去除掉了，纯化后的慢病毒回收在3 ml洗脱缓冲液中。
 
防止假转导。
使用纯化后的慢病毒储液还可以防止假转导，因为在感染的过程中，原始病毒上清液中高水平重组蛋白质会被转移至靶细胞中。而靶细胞假转导会掩盖慢病毒转导所预期的de novo表达。
 
更高的产量和纯度。
温和的纯化程序是维持病毒感染性和产生60-80％优良慢病毒产量的关键所在。基于阴离子交换的膜系统回收率要低得多，通常低于20％。而与基于过滤器的系统相比，Lenti-X纯化柱获得的病毒纯度更高。事实上，纯化后的Lenti-X样品中可检测到的蛋白质含量很低，而基于过滤器纯化的病毒液则含有与病毒共同纯化出来的高水平外源蛋白质。
 
■ Overview
· 与其他纯化技术相比，获得的纯度和产量更高
· 浓缩病毒至多10倍
· 简便而温和的重力流操作流程
· 专用收集架可与试剂盒 (Code No. 631245)一同购买，也可单独购买 (Code No. 631246)
· 实现更高效、更一致的慢病毒转导，收获更健康的靶细胞
· 有效去除转导抑制剂和细胞毒性污染物
 
■ 实验例
慢病毒纯化
图1. 收集架L。组装后，这个收集架可安全牢固地容纳三根色谱柱（例如慢病毒纯化柱）和三根收集管（50 ml锥形管）。
 
慢病毒纯化
图2. 使用Clontech慢病毒纯化试剂盒可获得高产量和高纯度。使用我们的高滴度慢病毒包装系统制备并纯化慢病毒。Panel A. 为了确定病毒产量，通过qRT-PCR（RNA拷贝数）或流式细胞仪/荧光（IFU）测定纯化前和纯化后的慢病毒滴度，展示数据为七组实验的平均值。Panel B. 使用Lenti-X或基于过滤器的纯化系统（Vendor M和Vendor S）制备等量的纯化后慢病毒（1×105 IFU）进行SDS-PAGE和银染。与其它两种基于过滤器系统所制备的样品相比，在相同IFU的情况下Lenti-X样品含有明显更少的污染蛋白质。
 
 
 
产品详情请点击：慢病毒纯化
 
 

页面更新：2020-02-25 11:41:30