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Qiagen质粒纯化试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kitqiagen 12143

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Qiagen质粒纯化试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kit

  • 产品型号：  qiagen 12143
  • 简单描述
  • Qiagen质粒纯化试剂盒纯化Z高产量可达 100 ug的转染级别纯度的质粒或科斯质粒DNA纯度相当于 2倍氯化铯梯度离心高重现性的产量和转染级别纯度经济实惠使用LyseBlue，获得Z佳的裂解和Z大的DNA产量
详细介绍

Qiagen质粒纯化试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kit

传统的QIAGEN Plasmid Giga Kits应用重力流阴离子交换柱QIAGEN-tip 100 高效纯化质粒DNA，也单独提供QIAGEN-tips 100。

QIAGEN Plasmid Midi Kit 特性
预期产量* 柱子容量 培养体积†
Up to 100 µg 100 µg 25 -100 ml

* 实际产量取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌、培养基和培养体积。
† 培养体积取决于质粒拷贝数、插入片段大小、宿主菌和培养基。

原理

QIAGEN *的阴离子交换柱于核酸纯化，其的抽提性能可确保DNA纯度相当于甚至高于两次CsCl梯度离心的产物。预装的QIAGEN柱子以重力流方式纯化，不会流干，将质粒制备所需的手工操作时间降至zui少。整个质粒纯化系统避免了苯酚、氯仿、ethidium bromide和CsCl等有毒物质，将对用户和环境的危害降至zui低。

操作步骤

应用QIAGEN Plasmid Kits纯化过程中，通过离心取出细菌裂解液。然后将澄清的裂解液装入阴离子交换柱，在适当的低盐浓度和pH值条件下，阴离子交换柱会选择性地结合质粒DNA。RNA、蛋白质、代谢物和其他小分子杂质通过中盐浓度洗涤去除，应用高盐浓度缓冲夜洗脱超纯的质粒DNA（见流程图”Comparison of QIAGEN Plasmid Kit Procedures”）。通过异丙醇沉淀浓缩并脱盐DNA，离心法收集DNA。

应用

QIAGEN Plasmid Kits 纯化所得的质粒DNA非常适合于诸如转染、克隆、手动或自动测序（包括毛细管测序）和体外转录等应用。

Images

Qiagen质粒纯化试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kitqiagen 12143 Comparison of QIAGEN Plasmid Kit Procedures Qiagen质粒纯化试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kitqiagen 12143 QIAGEN Plasmid Kit Anion-Exchange Tips Qiagen质粒纯化试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kitqiagen 12143 QIAGEN Plasmid Kits制备超纯的质粒DNA Qiagen质粒纯化试剂盒QIAGEN Plasmid Midi Kitqiagen 12143 转染效率 vs 质粒纯化方法

 

QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054

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QuantiFast SYBR Green PCR Kit

  • 产品型号：  qiagen204054
  • 简单描述
  • QuantiFast SYBR Green PCR Kit试剂盒通过正在申请Q-Bond技术实现快速real-time PCR。不仅通过快速PCR仪上快速升降温缩短循环时间，在普通PCR仪上也可快速循环。提供即用型预混液，包含SYBR Green I 染料、ROX参比染料 （浓度优化）、HotStarTaq Plus DNA Polymerase （严谨的热启动酶确保高特异性PCR和含有
详细介绍

QuantiFast SYBR Green PCR Kit 

  • 快速分析，节约至60%的时间
  • 含单细胞灵敏度极热启动PCR酶HotStarTaq
  • 通用的操作流程用于标准和快速定量PCR仪
  • 可特异性检测低拷贝的模板，准确检测各种起始量的模板
  • 优化的即用型预混液用于快速循环

QuantiFast SYBR Green PCR Kit 

原理

缩减多至60%的PCR运行时间（见图“明显缩减时间”），让您可更快获取结果。您也可以大幅度提高样本通量，或通过与其他用户共用PCR仪。试剂盒提供*的PCR缓冲夜，包含正在申请的添加剂Q-Bond，可缩减变性、退化和延伸时间（见图 “引物快速退火”）。缓冲夜也包含HotStarTaq Plus DNA Polymerase，激活该聚合酶在95°C 的条件下只需5分钟。可快速获取PCR结果的同时丝毫不影响PCR的表现（见图“在Applied Biosystems 7500 Fast System工作站上更快获取结果，PCR表现有保障”）。

应用可获得高特异、高灵敏的结果，胜过快速循环模式下的其他 real-time PCR 试剂盒（见图 “iCycler iQ上灵敏的两步法RT-PCR”）。快速PCR缓冲夜中KCl和NH4Cl 的平衡组合有利于特异引物的退火，支持高特异性的PCR。另外，HotStarTaq Plus DNA Polymerase 确保起始严谨，避免形成非特异性的产物。

确保对模板得多个稀释倍数可精确定量分析靶分子。即使是差异较小的低拷贝也可有明显的差异（见图 “在Mastercycler ep realplex上小差异拷贝的分辨率”）。

过程

是即用型预混液，无需优化反应和循环条件。操作手册提供可用于所有real-time PCR仪的操作程序。

2x QuantiFast SYBR Green PCR 预混液组分

组分 特性和优点

HotStarTaq Plus DNA Polymerase

95ºC 下激活只需5分钟，确保快速严谨的启动。

QuantiFast SYBR Green PCR Buffer

*的缓冲夜成分，包含Q-Bond，缩减变性、退火和延伸时间，离子平衡有利于特异性引物延伸。

dNTP Mix

dATP、dCTP、 dGTP和dTTP混合物

SYBR Green I dye

结合双链DNA，产生强烈的荧光信号。无需设计序列特异性探针，可定量分析任何靶分子。

ROX dye

Applied Biosystems与任意Stratagene仪器上荧光信号标准化 。在任何real-time R仪上不干扰PCR反应。

2x QuantiFast SYBR Green PCR 预混液可储存在2-8ºC，无需解冻反应组分，可更快构建反应体系。

 

应用

适用于任何real-time PCR仪，包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid,、Corbett、Eppendorf、 Roche和Stratagene的仪器。

为了获得*的real-time两步法RT-PCR结果，我们推荐使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。该试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA，同时去除基因组。除了QuantiTect Reverse Transcription Kit 还可应用FastLane Cell cDNA Kit，该试剂盒可直接从培养细菌中制备cDNA，没有纯化RNA。如果只有少量的RNA模板，我们建议应用QuantiTect Whole Transcriptome Kit制备cDNA存档，该试剂盒可均一扩增靶分子，确保可靠的基因表达分析。

对于两步法real-time RT-PCR我们也推荐QuantiTect Primer Assays ，这是全基因组的，多样的，经验证的引物系列。

对于普通PCR，我们推荐QIAGEN Fast Cycling PCR Kit，该试剂盒基于与QuantiFast Kits同样的技术，可在任何PCR仪上实现快速、特异性PCR 。

Images

QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 大幅度缩减PCR运行时间 QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 引物快速退火 QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 在Applied Biosystems 7500 Fast System工作站上更快获取结果，PCR表现有保障 QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 iCycler iQ上灵敏的两步法RT-PCR QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 在Mastercycler ep realplex上小差异拷贝的分辨率 QuantiFast SYBR Green PCR Kitqiagen204054 Specific primer annealing.

 

qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription Kitqiagen205311

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qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription Kit

  • 产品型号：  qiagen205311
  • 简单描述
  • qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription KitQuantiTect Reverse Transcription Kit方便快速的操作过程可实现高效的逆转录，并有效去除基因组DNA。应用gDNA Wipeout Buffer可高效去除RNA样本中的基因组DNA污染。通过逆转录酶、缓冲夜和*的引物混合物可实现高效的逆转录。合成的cDNA经过优化可用于r
详细介绍

qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription Kit 

  • cDNA合成和gDNA去除仅用20分钟完成
  • 有效去除基因组DNA，无需设计RNA特异性引物或探针
  • 高特异性，即便是低丰度的转录本也能获得高产量的cDNA
  • 转录本的5' 和3' 端区域都可以进行cDNA 合成

For 50 x 20 ul reactions: 100 ul 7x gDNA Wipeout Buffer, 50 ul Quantiscript Reverse Transcriptase, 200 ul 5x Quantiscript RT Buffer, 50 ul RT Primer Mix, 1.9 ml RNase-Free Water

逆转录试剂盒组分确保高效、高灵敏的Real-Time RT-PCR

组分 优点
gDNA Wipeout Buffer 仅在real-time RT-PCR 中检测RNA
Quantiscript Reverse Transcriptase

可用于广泛RNA起始量（10 pg to 1 µg RNA），高特异性
Quantiscript RT Buffer 可通读困难模板
RT Primer Mix 所有转录本区域合成cDNA, 甚至从5' 端区域

qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription Kit 

原理

为获得准确的real-time RT-PCR基因表达分析结果，很重要的是仅扩增和检测cDNA。基因组DNA的干扰可通过设计横跨外显子/外显子边界的引物或探针避免。尽管如此，在某些特殊情况下（如：cDNA来自一个单外显子基因），起始RNA样品必须无基因组DNA。

使用QuantiTect Reverse Transcription Kit，基因组DNA污染物可使用*的gDNA去除缓冲液迅速有效的去除（见图：“高效去除基因组DNA，确保精确的Real-Time RT-PCR”）。因为纯化RNA样品后无需另外采用DNA酶消化，从而可节省时间和费用。并且也无需设计RNA特异性引物和探针。

低丰度转录本获得更高产量的cDNA

  CT values for IL12A
（low expression）

CT values for IL1RN
（higher expression）
Input RNA （ng） QIAGEN Supplier AII QIAGEN Supplier AII
1000 30.9 32.0 23.1 24.9
100 34.2 35.4 26.3 26.6
10 37.8 46.8 29.7 30.3
1 N.D. N.D. 32.4 34.5

应用Real-time，两步法RT-PCR 分析IL12A 和IL1RN，起始RNA量不同 。应用QuantiTect Reverse Transcription Kit 或来自供应商Supplier AII的试剂盒逆转录总 RNA 。在 ABI PRISM 7900 上应用的QuantiTect Probe PCR Kit 、IL12A或 IL1RN的 QuantiTect Gene Expression Assays 分析合成的。 应用凯杰试剂盒CT值较低，尤其中等丰度的基因IL12A（粗体），cDNA产量更高。N.D.：未检测（Not detected）。

RT Primer Mix包含有特别优化的oligo-dT和随机引物的混合物，使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始，甚至可从5'区域开始（见图：“高灵敏度检测12.5 kb 转录本5'区域的靶分子”）。相对于其他供应商提供的试剂盒来说，QuantiTect Reverse Transcription Kit为real-time PCR分析提供高产量的cDNA，无需考虑待扩增目标序列位于转录本的哪个区域。同时，QuantiTect Reverse Transcription Kit也确保了real-time RT-PCR结果更好的重复性。

 

操作流程

使用QuantiTect逆转录试剂盒可在20分钟内去除基因组DNA和合成cDNA（见流程图）。由于两个反应均在同一孵育温度并使用预混液构建反应，因此操作过程快速且方便。相反，供应商I提供的试剂盒操作需更多移液步骤且经常需要调整孵育温度，因此需要更长时间和更多手动操作。

 

应用

QuantiTect Reverse Transcription Kit可从各种类型的起始样品中合成cDNA以实现高效和高灵敏度的real-time RT-PCR，包括激光显微切割样品和活组织切片样品。与其他供应商提供的试剂相比，QuantiTect Reverse Transcription Kit在检测低丰度基因时具有更高的灵敏度（见图：“Real-Time，两步法RT-PCR精确度更高”）。

为获得高特异性和高灵敏度的real-time RT-PCR结果，又避免耗时的反应步骤优化过程，我们推荐QuantiTect Reverse Transcription Kit和其他QuantiTect产品联合使用。包括经优化的PCR反应预混液和即用型引物，使用SYBR Green染料法或序列特异性探针法进行 real-time RT-PCR。

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qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription Kitqiagen205311 高效去除基因组DNA，确保精确的Real-Time RT-PCR — A qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription Kitqiagen205311 高灵敏度检测12.5 kb转录本5'区域的靶分子 qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription Kitqiagen205311 快速方便的cDNA合成 qiagen205311QuantiTect Rev. Transcription Kitqiagen205311 高灵敏度的Real-Time，两步法RT-PCR