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日本同仁化学Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341- DOJINDO

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Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341
2′-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
CAS号：23491-45-4
商品信息
储存条件：0-5度保存，避光
运输条件：室温
分子式：

C25H27Cl3N6O

分子量：

533.88

特点：

 

● 可用于活/死细胞DNA检测

● 蓝色荧光，毒性低

● 试剂盒稳定性高。

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选择规格：
1ml

现货

 
细胞染色

规格性状
产品概述
荧光特性
原理
操作说明
文献
常见问题Q&A

规格性状

规格

特性：该产品为黄色液体。

内容：试验成功

产品概述

荧光染料Hoechst 33258是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258,常用于细胞凋亡检测。

Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst染料可透过细胞膜并对DNA染色而发出强烈的蓝色荧光。它们在聚AT序列的富集区域的小沟处与DNA结合。Hoechst 33258和Hoechst 33342均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechst-DNA的激发和发射波长分别为350 nm和460 nm。

Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341

荧光特性

λex=350nm, λem=461nm

原理

Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341

操作说明

染色步骤

1.用PBS或适当的缓冲液制备10-50μMHoechst染料溶液。a）

2.在细胞培养基中加入体积为细胞培养基1/10的Hoechst染料溶液。b）

3.将细胞在37ºC下孵育10-20分钟。

4.用PBS或适当的缓冲液清洗细胞两次。

5.在带有350 nm激发和460 nm发射滤光片的荧光显微镜下观察细胞。

a）由于赫斯特染料可能具有致癌性，因此在处理过程中必须格外小心。

b）或者您可以用1/10浓度的Hoechst染料缓冲溶液代替培养基。

文献

1) M.   J. Lydon, K. D. Keeler and D. B. Thomas, “Vital   DNA Staining and Cell Sorting by Flow Microfluorometry”, J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.

2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H.   L. Roelen, van J. H. Boo and A. H. Wang,   “Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation Lesion on DNA:   Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin   Complex”, Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.

3) T. Ohara and T. Tsuge, “FoSTUA, Encoding a Basic Helix-Loop-Helix Protein, Differentially   Regulates Development of Three Kinds of Asexual Spores, Macroconidia,   Microconidia, and Chlamydospores, in the Fungal Plant Pathogen Fusarium oxysporum”, Eukaryot. Cell, 2004, 3, 1412.

常见问题Q&A

Q1:如何使用Hoechst 33258。

 
 

 

 

 

 

A1：有多种使用方法，但以形态观察为例。

它用作观察凋亡细胞中核变化（染色质浓缩，断裂）的简便方法。

<试剂>

・细胞固定液：1％戊二醛/ PBS（-）

・荧光染色：1 mM Hoechst33258 / PBS（-）

•Dojindo的产物为[1 mg / mL]（约1.87 mmol / L）

<操作方法>

1. 将含有约1 x 106个细胞的细胞培养基以400 Xg离心5分钟，并弃去上清液。

2.加入100μL细胞固定溶液，并通过移液或类似方法混合。

3.在室温下静置30分钟。

4.离心400Xg，5分钟，弃去上清液。

加入1 mL PBS（-），用移液器等混合，以400Xg离心5分钟，弃去上清液。

（*此时，戊二醛经常被洗涤和去除。可能会导致变色）

5.添加20μLPBS（-）并混合，然后添加4μL荧光染料并混合。

6.将1滴（5）的细胞溶液滴在载玻片上，盖上玻璃盖，然后按边缘。

7.在荧光显微镜下观察。

*由田沼靖（Yasushi Tanuma）指导的细胞工程独立体积实验规程系列“细胞凋亡实验规程”

 
 

Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。
A2：

Cellstain- Hoechst 33258 solution细胞核染色试剂货号：H341

Q3：Hoechst 33258和Hoechst 33342解决方案的激发波长和发射波长及其区别。

 
 

 

 

 

 

 

A3:波长如下。
Hoechst33342 Ex：350 nm Em：461 nm
Hoechst33258 Ex：352 nm Em：461 nm

两者的基本用法是相同的。
我们的产品是水溶液，所以稀释至所需浓度并添加。

两者之间的区别在于，它基本上是一种特异性结合腺嘌呤-胸苷部分的药物。
它也穿过活细胞的膜并与活细胞的DNA结合。
Hoechst 33342的膜渗透性略高。
Hoechst 33258似乎是dsDNA的选择性抗体。

日本同仁化学Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342- DOJINDO

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Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342
2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride
CAS号：23491-52-3
商品信息
储存条件：0-5度保存，避光
运输条件：室温
分子式：

C27H31Cl3N6O

分子量：

 561.93

特点：

 

● 结合活细胞DNA

● 试剂盒稳定性高。

● 激发和发射波长分别为350 nm和460 nm

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1 ml

现货

 
细胞染色

Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342

Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342

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荧光特性
文献
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规格性状

规格

特性：该产品为黄色液体

含量：试验成功

产品概述

荧光染料Hoechst 33342是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，也称bisBenzimide H33342或HOE33342常用于细胞凋亡检测。

Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。

Hoechst染料可透过细胞膜并对DNA染色而发出强烈的蓝色荧光。它们在聚AT序列的富集区域的小沟处与DNA结合。Hoechst 33258和Hoechst 33342均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechst-DNA的激发和发射波长分别为350 nm和460 nm。

Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342

荧光特性

λex=352 nm, λem=461 nm

文献

1) M. J. Lydon, K. D. Keeler and   D. B. Thomas, “Vital DNA Staining and Cell Sorting by Flow   Microfluorometry”, J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.

2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H. L. Roelen, van J. H. Boo   and A. H. Wang, “Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation   Lesion on DNA: Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the   d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin Complex”, Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.

3) Y. Tadokoro, K. Yomogida, Y. Yagura, S. Yamada, M. Okabe   and Y. Nishimune, “Characterization of Histone H2A.X Expression in   Testis and Specific Labeling of Germ Cells at the Commitment Stage of Meiosis   with Histone H2A.X Promoter-Enhanced Green Fluorescent Protein   Transgene”, Biol. Reprod., 2003, 69,   1325.

4) F. Wada, A. Ogawa, Y. Hanai, A. Nakamura, M. Maki and K.   Hitomi, “Analyses of Expression and Localization of Two Mammalian-Type   Transglutaminases in Physarum polycephalum, an Acellular Slime   Mold”, J. Biochem.(Tokyo), 2004, 136, 665.

5) M.   Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki, “Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human   Pluripotent Stem Cells into Classical Brown   Adipocytes”, Cells., 2019, 8, (4), 373

6)   T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y.   Morita, “Lactobacillus paracasei KW3110   Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human   Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy   Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

常见问题Q&A

Q1:如何使用Hoechst 33258。

 
 

 

 

 

 

A1：有多种使用方法，但以形态观察为例。

它用作观察凋亡细胞中核变化（染色质浓缩，断裂）的简便方法。

<试剂>

・细胞固定液：1％戊二醛/ PBS（-）

・荧光染色：1 mM Hoechst33258 / PBS（-）

•Dojindo的产物为[1 mg / mL]（约1.87 mmol / L）

<操作方法>

1. 将含有约1 x 106个细胞的细胞培养基以400 Xg离心5分钟，并弃去上清液。

2.加入100μL细胞固定溶液，并通过移液或类似方法混合。

3.在室温下静置30分钟。

4.离心400Xg，5分钟，弃去上清液。

加入1 mL PBS（-），用移液器等混合，以400Xg离心5分钟，弃去上清液。

（*此时，戊二醛经常被洗涤和去除。可能会导致变色）

5.添加20μLPBS（-）并混合，然后添加4μL荧光染料并混合。

6.将1滴（5）的细胞溶液滴在载玻片上，盖上玻璃盖，然后按边缘。

7.在荧光显微镜下观察。

*由田沼靖（Yasushi Tanuma）指导的细胞工程独立体积实验规程系列“细胞凋亡实验规程”

 
 

Q2：细胞染料的激发波长和发射波长是多少。
A2：

Cellstain- Hoechst 33342 solution试剂货号：H342

Q3：Hoechst 33258和Hoechst 33342解决方案的激发波长和发射波长及其区别。

 
 

 

 

 

 

 

A3:波长如下。
Hoechst33342 Ex：350 nm Em：461 nm
Hoechst33258 Ex：352 nm Em：461 nm

两者的基本用法是相同的。
我们的产品是水溶液，所以稀释至所需浓度并添加。

两者之间的区别在于，它基本上是一种特异性结合腺嘌呤-胸苷部分的药物。
它也穿过活细胞的膜并与活细胞的DNA结合。
Hoechst 33342的膜渗透性略高。
Hoechst 33258似乎是dsDNA的选择性抗体。

Hoechst 33258染料C1011

发表于由

Hoechst 33258染料

  • 产品型号：  C1011
  • 简单描述
  • Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
详细介绍

Hoechst 33258，也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式为C25H24N6O·3HCl，分子量为533.88，CAS Number 23491-45-4。
Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。
Hoechst 33258染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33258也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
Hoechst 33258的zui大激发波长为346nm，zui大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，zui大激发波长为352nm，zui大发射波长为461nm。
Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10mg/ml。
用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

C1011

Hoechst 33258

10mg

—

说明书

1份

保存条件：
-20℃避光保存，一年有效。
注意事项：
Hoechst 33258对人体有害，请注意适当防护。
荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液（P0126）可以向我公司订购。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

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核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所–Cellstain®– Hoechst 33342 solution

03 分子生物学関連試薬
05 細胞染色用色素

–Cellstain®– Hoechst 33342 solution

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

  • 分子生物学関連試薬
  • 細胞染色用色素

核染色用色素

  • 製品コード
    H342　 –Cellstain®– Hoechst 33342 solution
  • CAS番号
    23491-52-3(Hoechst 33342:free base)
  • 化学名
    2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole, trihydrochloride, solution
  • 分子式・分子量
    C27H31Cl3N6O=561.93
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
1 ml ￥5,700 346-07951
  • 核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所
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  • プロトコル 核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所 細胞を染色したい
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  • パンフレット 核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所 細胞増殖測定細胞染色プロトコル
    核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

参考文献

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1) M. J. Lydon, K. D. Keeler and D. B. Thomas, "Vital DNA Staining and Cell Sorting by Flow Microfluorometry", J. Cell Physiol., 1980, 102(2), 175.
2) M. Sriram, van der G. A. Marel, H. L. Roelen, van J. H. Boo and A. H. Wang, "Structural Consequences of a Carcinogenic Alkylation Lesion on DNA: Effect of O6-ethylguanine on the Molecular Structure of the d(CGC[e6G]AATTCGCG)-netropsin Complex", Biochemistry, 1992, 31(47), 11823.
3) Y. Tadokoro, K. Yomogida, Y. Yagura, S. Yamada, M. Okabe and Y. Nishimune, "Characterization of Histone H2A.X Expression in Testis and Specific Labeling of Germ Cells at the Commitment Stage of Meiosis with Histone H2A.X Promoter-Enhanced Green Fluorescent Protein Transgene", Biol. Reprod., 2003, 69, 1325.
4) F. Wada, A. Ogawa, Y. Hanai, A. Nakamura, M. Maki and K. Hitomi, "Analyses of Expression and Localization of Two Mammalian-Type Transglutaminases in Physarum polycephalum, an Acellular Slime Mold", J. Biochem.(Tokyo), 2004, 136, 665.
5) M. Oka, N. Kobayashi, K. Matsumura, M. Nishio and K. Saeki, "Exogenous Cytokine-Free Differentiation of Human Pluripotent Stem Cells into Classical Brown Adipocytes", Cells., 2019, 8, (4), 373
6) T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, "Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

よくある質問

Q

Hoechst 33258 ,Hoechst 33342 solutionの波長とこの２つの違いについて教えて下さい。

A

波長は以下の通りです。
Hoechst33342 Ex:350 nm Em:461 nm
Hoechst33258 Ex:352 nm Em:461 nm

基本的な使用方法は両方とも同じです。
弊社の製品は水溶液になっておりますので、
ご希望の濃度の希釈し、添加して下さい。

この二つの違いですが、基本的にはAdenine-Thymidine部に特異的に結合する薬品です。
生細胞の膜も通過し、生細胞のDNAとも結合します。
膜の透過率はHoechst 33342の方が若干上です。
Hoechst33258はdsDNA selectiveのようです。

Q

核染色剤に使用される色素の特徴、違いは何でしょうか？

A

ここで紹介している色素は核酸との相互作用により蛍光を発するか、蛍光強度が強くなる特徴があります。
蛍光波長以外の違いとしては下記の点がございます。

【EB】
塩基特異性は無く、全DNA,RNAに結合します。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【PI】
EBと同様に塩基特異性はありません。インターカレーションした時の蛍光強度がEBより高いため、より広く使用される色素です。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【DAPI】
２重鎖の副溝(minor groove)と結合します。アデニン-チミジンクラスターに高い結合性を持っています。
生細胞の膜透過性がなく、死細胞を染色します。

【AO】
２重鎖にインターカレーションしたときと、単鎖のリン酸に結合した時では蛍光波長が異なることを利用して、２重鎖と単鎖を区別して検出できます。
生細胞の細胞膜を透過します。

【Hoechst33342､33258】
DNAのアデニン-チミジン部に特異的に結合します。
生細胞の細胞膜を透過し、生細胞のDNAを染色できる色素です。

Q

細胞染色色素の励起と蛍光の波長を教えて下さい。

A

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

＊AOはフローサイトメトリーなどでは488nm励起で観察されることもあります

Q

Hoechst33342の使用方法を教えてください。

A

一例として下記に示します。
・フローサイトメトリーによる培養株化細胞あるいは固形腫瘍の例
 

【試薬】

Hoechst33324 solution (1 mg/mL, 1.78 mmol/L)

【操作】

1)培養株化細胞あるいは固形腫瘍を0.25％トリプシンにて分離、浮遊細胞を用意する。

2)培養液で10 μmol/L Hoechst33342溶液とする。

3)細胞浮遊液105個あたり、10 μmol/L Hoechst33342溶液を1 mL加える。

4)37℃,60分インキュベートする。

5)この染色液をフローサイトメトリーで測定する。

励起波長：352 nm、蛍光波長：461 nm

核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所 核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状： 本品は、黄色液体である。
含量： 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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核染色用色素 | CAS 23491-52-3(Hoechst 33342:free base) 同仁化学研究所

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