日本同仁化学Total Glutathione Quantification Kit试剂盒货号:T419 总谷胱甘肽定量试剂盒- DOJINDO

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Total Glutathione Quantification Kit试剂盒货号:T419
总谷胱甘肽定量试剂盒
Total Glutathione Quantification Kit
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100tests

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グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所

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グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所Total Glutathione Quantification Kit

02 酸化ストレス関連試薬

Total Glutathione Quantification Kit

グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬
  • 酸化ストレス関連試薬

グルタチオン定量キット

  • 製品コード
    T419  Total Glutathione Quantification Kit
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 tests ¥36,500 348-90201
キット内容
100 tests ・Substrate(DTNB)    
・Enzyme Solution   50 μl
・Coenzyme    
・Buffer Solution    50 ml
・Standard GSH       
x2
x1
x2
x1
x1

  • グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所
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マニュアル

  • 取扱説明書 グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所 日本語
    グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所
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    グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所

技術情報

特長

1) 高感度にtotal glutathioneを定量できる。
(検出範囲:6.25~100 μmol/L)
2) 一度に多検体の測定が可能である。

注意事項
キット開封後、各溶液の保存方法・保存期間は下記の通りである。
・Coenzyme working solution
純水で溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
・Substrate working solution
溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
・GSH standard solution
溶解後、-20℃にて保存。約2ヶ月使用できる。
・Enzyme working solution
希釈後、4℃にて保存。約2ヶ月使用できる。

参考文献

参考文献を表示する

    1) O. W. Griffith,"Determination of Glutathione and Glutathione Disulfide Using Glutathione Reductase and 2-Vinylpyridine", Anal. Biochem., 1980, 106, 207.
    2) M. E. Anderson, "Determination of Glutathione and Glutathione Disulfide in Biological Samples", Methods in Enzymol., 1985, 113, 548.
    3) M. A. Baker, G. J. Cerniglia and A. Zaman, "Microtiter Plate Assay for the Measurement of Glutathione and Glutathione Disulfide in Large Numbers of Biological Samples", Anal. Biochem., 1990, 190, 360.
    4) C. Vandeputte, I. Guizon, I. Genestie-Denis, B. Vannier and G. Lorenzon, "A Micrototer Plate Assay for Total Glutathione and Glutathione Disulfide Contents in Cultured/isolated Cells: Performance Study of a New Miniaturized Protocol", Cell Biol. Toxicol., 1994, 10, 415.
    5) S. A. McGrath-Morrow and J. Stahl,"Inhibition of Glutamine Synthetase in A549 Cells During Hyperoxia", Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 2002, 27, 99.
    6) T. Sato, K. Seyama, Y. Sato, H. Mori, S. Souma, T. Akiyoshi, Y. Kodama, T. Mori, S. Goto, K. Takahashi, Y. Fukuchi, N. Maruyama and A. Ishigami, "Senescence Marker Protein-30 Protects Mice Lungs from Oxidative Stress, Aging, and Smoking", Am. J. Respir. Crit. Care Med., 2006, 174, 530.
    7) M. L. Mulhern, C. J. Madson, A. Danford, K. Ikesugi, P. F. Kador and T. Shinohara, "The Unfolded Protein Response in Lens Epithelial Cells from Galactosemic Rat Lenses", Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 2006, 47(9), 3951.

よくある質問

Q

5-スルホサリチル酸(SSA)は何のために使用するのでしょうか? SSAの代わりに使用できる試薬はありませんか?

A

「除タンパク質」と「GSHの安定化」の目的で使用します。
また、除タンパク質剤として通常用いられる酸(トリクロロ酢酸、過塩素酸、メタリン酸など)
では、SSAとピクリン酸がGSHの酸化を防ぐ効果が高いといわれています。

弊社のプロトコールどおりにSSAを使用された際には、反応時のpHが適正に
なるように調整されておりますが、他の酸を用いた場合には
トリエタノールアミン等でpH7程度に中和するか、
酸濃度が1%程度以下になるように希釈してから測定して下さい。

pHが低すぎると定量に影響します。

Q

酸化ストレスの指標としてグルタチオン濃度・GSH/GSSG比はよく測定されますが、 グルタチオンの他に酸化ストレスマーカーとなるものはありますか?

A

酸化ストレスマーカーについてまとめた資料を作成しております。

カスタマーサポートの視点から、各酸化ストレスマーカーの特徴・測定サンプルの前処理方法などを記載しておりますので、ご参照ください。

下記URLよりダウンロード可能です。

「はじめての酸化ストレスマーカー測定プロトコル~カスタマーサポートの視点から~」

Q

サンプル中のglutathione量が多いのですが、 サンプルを薄める時はどのようにすればよいのでしょうか?

A

水または0.5%スルホサリチル酸(SSA)で希釈してください。

5%SSAでも調製可能ですが、測定時にはSSA濃度を1%以下にする必要があります。

SSA濃度が高いと反応時のpHが低くなり、吸光度に影響することが懸念されます。

Q

サンプル中のglutathione量が多いのですが、 サンプルを薄める時はどのようにすればよいのでしょうか?

A

 水または0.5%スルホサリチル酸(SSA)で希釈してください。

5%SSAでも調製可能ですが、測定時にはSSA濃度を1%以下にする必要があります。

SSA濃度が高いと反応時のpHが低くなり、吸光度に影響することが懸念されます。

Q

グルタチオンのSH基に選択的に反応するのでしょうか? 測定上、妨害物質となるものはありますか?

A

グルタチオンだけでなく、他のSH基を持つ化合物とも反応します。

また、必ずしもSH基選択的ではありません。その理由はキットに使用しているSH基との反応試薬(DTNB)が、
亜硫酸イオンやジスルフィドイオンとも同様の反応をするためです。また、シアンイオンなども妨害します。

妨害物質としては、アスコルビン酸,β-メルカプトエタノール,ジチオスレイトール[DTT]
のような還元性物質やシステイン、また、SH基と反応するような
化合物(マレイミドなど)は測定に影響を与えます。

その他として、アセトンなどの有機溶媒が共存すると吸光度が著しく変化します。
反応時のpHが低く(酸性)になることでも定量に影響を与えますのでご注意ください。

グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所 グルタチオン定量キット Total Glutathione Quantification Kit 同仁化学研究所

取扱条件

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Code No. 产品名称
635619   GST Purification Kit
635607   Glutathione-Superflow Resin
635608   Glutathione-Superflow Resin
 
■ 产品描述
Glutathione-Superflow树脂可以通过分批、重力流以及FPCL的方法对GST标签蛋白质进行快速纯化。树脂的基本结构是6%的交联琼脂糖,共价结合了谷胱甘肽,可承受高达15 ml/cm2/min的流速和中等压力(最高150 psi)。
GST Purification Kit中包含足量的buffer和Glutathione-Superflow纯化柱(1 ml预装柱),可满足5次分批/重力流纯化,单次纯化得到的重组GST标签蛋白质的量最高可达10 mg。
 
■ 特点
· 简单易用,不需要优化
· 纯化产量更高,结合能力强(重组GST标签蛋白质的结合能力>10 mg/ml树脂)
· 产物更纯,没有细胞污染
· 可重复使用,树脂再生及储存操作简单
· 高性价比质
 
■ 产品应用
分批、重力流或FPLC的方法纯化GST标签蛋白质淀
 
Glutathione-Superflow树脂兼容的试剂
试剂 耐受浓度
  Beta-mercaptoethanol   10 mM (with caution)
  EDTA, EGTA   10 mM
  Ethanol   30%, for regeneration only
  Glycerol   20%
  HEPES   50 mM
  Imidazole   200 mM at pH 7.0-8.0
  KCl   500 mM
  MES   20 mM
  MOPS   50 mM
  NaCl   1.0 M
  NP-40   1%
  Tris   50 mM
 
Glutathione-Superflow树脂不兼容的试剂(以下试剂任意浓度都不兼容)
CHAPS、DTE、DTT、盐酸胍、SDS、尿素
 
■ 实验例
 
GST-纯化树脂
从全细胞裂解液中纯化GST标签蛋白质。使用本制品纯化柱分别对含有GST-DHFR(图A)和GST(图D)的全细胞裂解液样品进行纯化,对纯化过程中的各组分进行SDS-PAGE(图B&E)检测并使用anti-GST Ig G进行Western Blot检测(图C&F)。
 
 
产品详情请点击:GST-纯化树脂
 
 

页面更新:2019-11-12 09:36:28