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日本同仁化学Ab-10 Rapid HiLyte Fluor 555 Labeling Kit试剂盒货号：LK35 HiLyte Fluor 555快速标记试剂盒（微量- DOJINDO

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Ab-10 Rapid HiLyte Fluor 555 Labeling Kit试剂盒货号：LK35
HiLyte Fluor 555快速标记试剂盒（微量）
Ab-10 Rapid HiLyte Fluor 555 Labeling Kit
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Ab-10 Rapid HiLyte Fluor 555 Labeling Kit试剂盒货号：LK35 HiLyte Fluor 555快速标记试剂盒（微量
Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒
生物素抗体标记试剂盒-氨基

Peroxidase Labeling Kit – NH2试剂盒
过氧化物酶标记试剂盒-氨基

Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)试剂盒
生物素标记试剂盒-氨基

Fluorescein Labeling Kit – NH2试剂盒
荧光素标记试剂盒-氨基

Isothiocyanobenzyl-EDTA试剂
Isothiocyanobenzyl-EDTA（ITCBE）

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日本同仁化学Ab-10 Rapid HiLyte Fluor 647 Labeling Kit试剂盒货号：LK36 HiLyte Fluor 647快速标记试剂盒（微量）- DOJINDO

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Ab-10 Rapid HiLyte Fluor 647 Labeling Kit试剂盒货号：LK36
HiLyte Fluor 647快速标记试剂盒（微量）
Ab-10 Rapid HiLyte Fluor 647 Labeling Kit
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Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒
生物素抗体标记试剂盒-氨基

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生物素标记试剂盒-氨基

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Fluorescein Labeling Kit – NH2试剂盒
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Isothiocyanobenzyl-EDTA试剂
Isothiocyanobenzyl-EDTA（ITCBE）

日本同仁化学HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK15 HiLyte Fluor 647标记试剂盒-氨基- DOJINDO

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HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK15
HiLyte Fluor 647标记试剂盒-氨基
HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2
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特点：

 

● 荧光素标记的产品可以在大约2小时内制备。

● 可以标记分子量为50,000或更高的蛋白质。

● 可以标记50至200μg的蛋白质。

● 可以通过使用过滤管的分离操作以高回收率获得标记物质。

● 荧光素标记的物体可以与所附的存储溶液一起存储。

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HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK15 HiLyte Fluor 647标记试剂盒-氨基

HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK15 HiLyte Fluor 647标记试剂盒-氨基

试剂盒内含
产品概述
原理
荧光特性
操作步骤
产品优势
常见问题Q&A
参考文献

试剂盒内含

HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK15 HiLyte Fluor 647标记试剂盒-氨基

产品概述

NH2-reactive HiLyte FluorTM 647是试剂盒的成分之一，它有一个琥珀酰亚胺基（NHS），能与蛋白质或者其它分子的氨基反应。该试剂盒中包含了标记所需的全部试剂。每一管NH2-reactive HiLyte FluorTM 647最多能够标记200 μg的IgG，每个IgG分子可与4-6个HiLyte FluorTM 647分子共价结合。标记过程十分简单，只需要在特制的过滤膜上将NH2-reactive HiLyte FluorTM 647加入到IgG溶液中，然后在37℃下培养10分钟。过量的HiLyte FluorTM 647能够用过滤管除去。被HiLyte FluorTM 647标记后的IgG的激发和发射波长分别为652 nm和673 nm。

* HiLyte FluorTM为AnaSpec,Inc公司的商标

原理

HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK15 HiLyte Fluor 647标记试剂盒-氨基

荧光特性

HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK15 HiLyte Fluor 647标记试剂盒-氨基

操作步骤

使用注意事项:

1. 用该试剂盒标记的蛋白质的分子量要>50,000。

2. 在标记过程中，IgG或者HiLyte FluorTM 647-IgG标记物始终在Filtration tube的滤膜上。

3. 如果IgG溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白质，如BSA或明胶时，在使用该试剂盒标记前，先要纯化IgG溶液。IgG溶液能够用IgG Purification Kits（不包含于本试剂盒 中）来纯化。

4. 如果IgG溶液含有小的不溶物，离心后取上清液来进行标记。

5. 如果长时间不使用，建议您把试剂盒中的标记试剂NH2-reactive HiLyte FluorTM 647放在-20℃冰箱中保存，不需要充氮气，可以更好地保持标记试剂的活性，但请不要把其它试剂和过滤管放到-20℃冰箱中，仍请放在0-5℃冰箱中保存。

标记IgG操作步骤

（1）将100μl WS buffer以及含有100μg IgG的样品溶液加入到过滤管中。a）

（2）8,000-10,000g离心10分钟。b）

（3）将10μl DMSO加入到NH2-reactive HiLyte FluorTM647中并用移液器吹打使其溶解。c）

（4）将100μl Reaction buffer以及8μl NH2-reactive HiLyte FluorTM647溶液加入到过滤管中，吹打使其混合。d）

（5）将过滤管放入培养箱中，37℃培养10分钟。

（6）将100μl WS buffer加入到过滤管中，8,000-10,000g离心10分钟，b）除去滤液。

（7）将200μl WS buffer加入到过滤管中，8,000g离心10分钟，b）重复该步骤一次。

（8）将200μl WS buffer加入到过滤管中吹打10-15次来回收标记产物。e）将该溶液转移到0.5ml试管中，在0-5℃下保存。

HiLyte Fluor 647 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK15 HiLyte Fluor 647标记试剂盒-氨基

a）样品溶液的体积不应超过100μl。如果抗体浓度低于1mg/ml，重复步骤1和2直至总的IgG聚积量达到100μg。如果聚积过程中滤液的体积超过400μl，则在进行后续的离心操作前应除去滤液。

b）如果溶液在离心后仍然残留在膜上，可以再离心5分钟或者适当增加转速。

c）NH2-reactive HiLyte FluorTM647在管子的底部，向管底加入10μl DMSO，吹打数次使其溶解。

d）如果IgG的量为200μg，加入所有的NH2-reactive HiLyte FluorTM647溶液。

e）并不一定要使用WS buffer来回收标记产物，可以选择任何适合于该实验的缓冲液来替代。

产品优势

1）荧光素标记的产品可以在大约2小时内制备。

2）可以标记分子量为50,000或更高的蛋白质。

3）可以标记50至200μg的蛋白质。

4）可以通过使用过滤管的分离操作以高回收率获得标记物质。

5）荧光素标记的物体可以与所附的存储溶液一起存储。

常见问题Q&A

Q1:能够用这个试剂盒标记其他蛋白质吗？
A:可以。只要标记分子的分子量>50,000。
Q2:标记蛋白之前是否必须使用过滤管？
A:如果蛋白溶液中不含有带有活性氨基的小分子且蛋白浓度在10 mg/ml或者70 μM左右时，可以不使用过滤管来过滤，只需要将10 μl 样品溶液和90 μl Reaction Buffer以及8 μl NH2-reactive HiLyte FluorTM 555（由步骤3所得）混合并按照操作说明上的方法做从步骤4开始的后续试验。
Q3:能够使用这个试剂盒标记寡核苷酸或者寡肽吗？
A:不行。寡核苷酸或者寡肽可能因为分子量太小而不能存在于滤膜上。
Q4:用该试剂盒所能标记的IgG的最小量是多少？
A:IgG的最小量为10 μg。IgG的量在10 μg-100 μg之间时，标记比率是相同的。
Q5:标记产物能保存多久？
A:在4℃下能够保存2个月。如果需要保存更久，可以添加等量的丙三醇，并在-20℃下存放。但是，还要注意样品自身是否稳定。

参考文献

1) S. Hiroyasu, T. Ozawa, H. Kobayashi, M. Ishii, Y. Aoyama, Y. Kitajima, T. Hashimoto,   J.C.R. Jones and D. Tsuruta, “Bullous pemphigoid IgG induces BP180   internalization via a macropinocytic pathway”, Am. J. Pathol.., 2013,   182, (3), 828.
2) W. Jin, K. Yamada, M.   Ikami, N. Kaji, M. Tokeshi, Y. Atsumi, M.   Mizutani, A. Murai, A. Okamoto, T. Namikawa, Y.   Baba, M. Ohta, “Application of IgY to sandwich enzyme-linked   immunosorbent assays, lateral flow devices, and immunopillar chips for   detecting staphylococcal enterotoxins in milk and dairy   products”, J. Microbiol. Methods., 2013, 92, (3), 323.
3) Y. Hayashi, M. Okutani, S.   Ogawa, T. Tsukahara, R. Inoue, “Generation of anti-porcine CD69   monoclonal antibodies and their usefulness to evaluate early activation of   cellular immunity by flow cytometric analysis”, Anim. Sci. J.., 2018,   89, (5), 825.
4) T. Kojima, J. Hata, H.   Oka, K. Hayashi, K. Hitomi and H. Nakano, “Spatial arrangement of   proteins using scCro-tag: application for an in situ enzymatic microbead   assay.”, Biosci. Biotechnol. Biochem., 2018, 82, (11), 1911.
5) S. Mawaribuchi, Y.   Haramoto, H. Tateno, Y. Onuma, Y. Aiki and Y. Ito, “rBC2LCN lectin as a   potential probe of early-stage HER2-positive breast carcinoma.”, FEBS   Open Bio., 2020, DOI: 10.1002/2211-5463.12852.

日本同仁化学HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK14 HiLyte Fluor 555标记试剂盒-氨基- DOJINDO

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HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK14
HiLyte Fluor 555标记试剂盒-氨基
HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2
商品信息
储存条件：0-5度保存
运输条件：室温

特点：

● 荧光素标记的产品可以在大约2小时内制备。

● 可以标记分子量为50,000或更高的蛋白质。

● 可以标记50至200μg的蛋白质。

● 可以通过使用过滤管的分离操作以高回收率获得标记物质。

● 荧光素标记的物体可以与所附的存储溶液一起存储。

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蛋白抗体标记检测方案

HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK14 HiLyte Fluor 555标记试剂盒-氨基

HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK14 HiLyte Fluor 555标记试剂盒-氨基

试剂盒内含
产品概述
原理
荧光特性
操作步骤
产品优势
常见问题Q&A
参考文献

试剂盒内含

HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK14 HiLyte Fluor 555标记试剂盒-氨基

产品概述

该试剂盒主要用于制备红色荧光标记的蛋白质，如免疫转染中的IgG和示踪用胞内蛋白。用NH2-reactive HiLyte FluorTM 555是试剂盒的成分之一，它有一个琥珀酰亚胺基（NHS），能与蛋白质或者其它分子的氨基反应。该试剂盒中包含了标记所需的全部试剂。每一管NH2-reactive HiLyte FluorTM 555最多能够标记200μg的IgG，每个IgG分子与4-6个HiLyte FluorTM 555分子共价结合。标记过程十分简单，只需要在特制的过滤膜上将NH2-reactive HiLyte FluorTM 555加入到IgG溶液中，然后在37℃下培养10分钟。过量的HiLyte FluorTM 555能够用过滤管除去。被HiLyte FluorTM 555标记后的IgG的激发和发射波长分别为555nm和570nm。

* HiLyte FluorTM 为AnaSpec,Inc公司的商标

原理

HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK14 HiLyte Fluor 555标记试剂盒-氨基

荧光特性

HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK14 HiLyte Fluor 555标记试剂盒-氨基

操作步骤

使用注意事项:

1. 用该试剂盒标记的蛋白质的分子量要>50,000。

2. 在标记过程中，IgG或者HiLyte FluorTM 555-IgG标记物始终在Filtration tube的滤膜上。。

3. 如果IgG溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白质，如BSA或明胶时，在使用该试剂盒标记前，先要纯化IgG溶液。IgG溶液能够用IgG Purification Kits（不包含于本试剂盒 中）来纯化。

4. 如果IgG溶液含有小的不溶物，离心后取上清液来进行标记。

5. 如果长时间不使用，建议您把试剂盒中的标记试剂NH2-reactive HiLyte FluorTM 555放在-20℃冰箱中保存，不需要充氮气，可以更好地保持标记试剂的活性，但请不要把其它试剂和过滤管放到-20℃冰箱中，仍请放在0-5℃冰箱中保存。

标记IgG操作步骤：

（1）将100μl WS buffer以及含有100μg IgG的样品溶液加入到过滤管中。a）

（2）8,000-10,000g离心10分钟。 b）

（3）将10μl DMSO加入到NH2-reactive HiLyte FluorTM 555中并用移液器吹打使其溶解。c）

（4）将100μl Reaction buffer以及8μl NH2-reactive HiLyte FluorTM 555溶液加入到过滤管中，吹打使其混合。d）

（5）将过滤管放入培养箱中，37℃培养10分钟。

（6）将100μl WS buffer加入到过滤管中，8,000-10,000g离心10分钟，b）除去滤液。

（7）将200μl WS buffer加入到过滤管中，8,000g离心10分钟，b）重复该步骤一次。

（8）将200μl WS buffer加入到过滤管中吹打10-15次来回收标记产物。e）将该溶液转移到0.5ml试管中，在0-5℃下保存。

HiLyte Fluor 555 Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK14 HiLyte Fluor 555标记试剂盒-氨基

a）样品溶液的体积不应超过100μl。如果抗体浓度低于1mg/ml，重复步骤1和2直至总的IgG聚积量达到100μg。如果聚积过程中滤液的体积超过400μl，则在进行后续的离心操作前应除去滤液。

b）如果溶液在离心后仍然残留在膜上，可以再离心5分钟或者适当增加转速。

c）NH2-reactive HiLyte FluorTM 555在管子的底部，向管底加入10μl DMSO，吹打数次使其溶解。

d）如果IgG的量为200μg，加入所有的NH2-reactive HiLyte FluorTM 555溶液。

e）并不一定要使用WS buffer来回收标记产物，可以选择任何适合于该实验的缓冲液来替代。

产品优势

1）荧光素标记的产品可以在大约2小时内制备。

2）可以标记分子量为50,000或更高的蛋白质。

3）可以标记50至200μg的蛋白质。

4）可以通过使用过滤管的分离操作以高回收率获得标记物质。

5）荧光素标记的物体可以与所附的存储溶液一起存储。

常见问题Q&A

Q1:能够用这个试剂盒标记其他蛋白质吗？
A:可以。只要标记分子的分子量>50,000。
Q2:标记蛋白之前是否必须使用过滤管？
A:如果蛋白溶液中不含有带有活性氨基的小分子且蛋白浓度在10 mg/ml或者70 μM左右时，可以不使用过滤管来过滤，只需要将10 μl 样品溶液和90 μl Reaction Buffer以及8 μl NH2-reactive HiLyte FluorTM 555（由步骤3所得）混合并按照操作说明上的方法做从步骤4开始的后续试验。
Q3:能够使用这个试剂盒标记寡核苷酸或者寡肽吗？
A:不行。寡核苷酸或者寡肽可能因为分子量太小而不能存在于滤膜上。
Q4:用该试剂盒所能标记的IgG的最小量是多少？
A:IgG的最小量为10 μg。IgG的量在10 μg-100 μg之间时，标记比率是相同的。
Q5:标记产物能保存多久？
A:在4℃下能够保存2个月。如果需要保存更久，可以添加等量的丙三醇，并在-20℃下存放。但是，还要注意样品自身是否稳定。

参考文献

1)A. Nagao, K. Sato, K.M. Nishida, H.   Siomi, M.C. Siomi, “Gender-specific hierarchy in nuage   localization of PIWI-interacting RNA factors in Drosophila”, Front   Genet.,2011, 2, 55.
2) H. Hoshino, G. Shioi, S.   Aizawa, “AVE protein expression and visceral endoderm cell behavior   during anterior–posterior axis formation in mouse embryos: Asymmetry in OTX2   and DKK1 expression”, Dev. Biol.., 2015, 402, (2), 175.
3) T. Kaneko, T. Minohara, S.   Shima, K. Yoshida, A. Fukuda, N. Iwamori, T. Inai and H. Iida, “A   membrane protein, TMCO5A, has a close relationship with manchette   microtubules in rat spermatids during spermiogenesis”, Mol. Reprod.   Dev.., 2019, 86, (3), 330.
4) Y. Nakashima, T. Mima, M.   Yashiro, T. Sonou, M. Ohya, A. Masumoto, S. Yamanaka, D. Koreeda, K. Tatsuta,   Y. Hanba, M. Moribata, S. Negi, T. Shigematsu, “Expression and   localization of fibroblast growth factor (FGF) 23 and Klotho in the spleen:   its physiological and functional implications”, Growth Factors ., 2016,   34, (5-6), 196.
5) Z. Zhang, K. Kakutani, K.   Maeno, T. Takada, T. Yurube, M. Doita, M. Kurosaka and K. Nishida,   “Expression of silent mating type information regulator 2 homolog 1 and   its role in human intervertebral disc cell homeostasis”, Arthritis Res.   Ther.., 2011, 13, (6), R200.
6) I. Hasan, M. Gerdol, Y.   Fujii and Y. Ozeki, “Functional Characterization of OXYL, A SghC1qDC   LacNAc-specific Lectin from The Crinoid Feather Star Anneissia   Japonica.”, Mar Drugs., 2019, 17, DOI:10.3390/md17020136.
7)Y.   Fujii, M. Gerdol, S.M.A. Kawsar, I. Hasan, F. Spazzali, T. Yoshida, Y. Ogawa,   S. Rajia, K. Kamata, Y. Koide, S. Sugawara, M. Hosono, J.R.H.  Tame, H. Fujita, A. Pallavicini and Y.   Ozeki, “A GM1b/asialo-GM1 oligosaccharide-binding R-type lectin from   purplish bifurcate mussels Mytilisepta virgata and its effect on MAP   kinases.”, FEBS J., 2019, DOI: 10.1111/febs.15154.

LIFE Alexa Fluor 488 Phalloidin鬼笔环肽（AF488标记）A12379

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LIFE Alexa Fluor 488 Phalloidin鬼笔环肽（AF488标记）

  • 产品型号：  A12379
  • 简单描述
  • LIFE Alexa Fluor 488 Phalloidin鬼笔环肽（AF488标记）描述Alexa Fluor 488® 鬼笔环肽是 F-肌动蛋白的高亲和探针，与高亮、稳定的绿色荧光 Alexa Fluor 488 染料耦合而成。• 仅使F-肌动蛋白着色•出色的荧光结果• 激发波长和/发射波长:495/518nm• 优于抗体着色• 对于固定样本和可渗透样本来说是*的
详细介绍

LIFE Alexa Fluor 488 Phalloidin鬼笔环肽（AF488标记）

在目的肌动蛋白染色中能够得到优异的实验结果
鬼笔环肽是由两个肽链组成，其属于蘑菇毒素家族鹅膏菌 “致死 cap” 通常用于F-肌动蛋白的标记成像。对于F-肌动蛋白染色，荧光标记的鬼笔环肽与抗体相比具有很多优势:与各种动植物的F-肌动蛋白具有共同的耦合特性，和低浓度非特异性结合。鬼笔环肽与F-肌动蛋白的结合具有高专一性，Alexa Fluor® 488能够发射高亮、稳定的绿色荧光。

多种应用
Alexa Fluor® 488 鬼笔环肽能够在组织切片、培养细胞或无细胞制剂中直观地定量检测F-肌动蛋白。 Alexa Fluor® 488 鬼笔环肽于其它应用与细胞分析的荧光染色一样，包括荧光蛋白、Qdot® 纳米晶体和Alexa Fluor®耦合物，包括二抗在内。

LIFE Alexa Fluor 488 Phalloidin鬼笔环肽（AF488标记）

规格

Label or Dye: Alexa Fluor™ 488
Sub-Cellular Localization: Actin, Cytoskeleton
Excitation⁄Emission (nm): 495⁄518
Product Size: 300 units
Shipping Condition: Room Temperature

订购信息：

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A12379  

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抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

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抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 簡単な操作で実験したい
  • 抗原認識部位を妨害しない低分子で標識したい
  • Cy3と類似した蛍光特性を持つ色素でみたい
  • 製品コード
    LK14　 HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit – NH2
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
3 samples ￥26,200 348-91041
サンプル量 50-200 µg
所要時間 2時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:555, Em:570]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でHiLyte Fluor™標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive Hilyte FluorTM 555
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube		 3 tubes
4 ml x1
500 μl x1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
試験成績書

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  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 日本語
    抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

技術情報

特長

1) 約2時間でHiLyte FluorTM標識体が調製できる。
2) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
3) 50～200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
5) 付属の保存溶液でHiLyte FluorTM標識体の保存ができる。
＊HiLyte FluorTMはAnaSpec 社の商標です。同仁化学では試験・研究用として許諾を得ております。

参考文献

参考文献を表示する

1) A. Nagao, K. Sato, K.M. Nishida, H. Siomi, M.C. Siomi, "Gender-specific hierarchy in nuage localization of PIWI-interacting RNA factors in Drosophila", Front Genet.,2011, 2, 55.
2) H. Hoshino, G. Shioi, S. Aizawa, "AVE protein expression and visceral endoderm cell behavior during anterior–posterior axis formation in mouse embryos: Asymmetry in OTX2 and DKK1 expression", Dev. Biol.., 2015, 402, (2), 175.
3) T. Kaneko, T. Minohara, S. Shima, K. Yoshida, A. Fukuda, N. Iwamori, T. Inai and H. Iida, "A membrane protein, TMCO5A, has a close relationship with manchette microtubules in rat spermatids during spermiogenesis", Mol. Reprod. Dev.., 2019, 86, (3), 330.
4) Y. Nakashima, T. Mima, M. Yashiro, T. Sonou, M. Ohya, A. Masumoto, S. Yamanaka, D. Koreeda, K. Tatsuta, Y. Hanba, M. Moribata, S. Negi, T. Shigematsu, "Expression and localization of fibroblast growth factor (FGF) 23 and Klotho in the spleen: its physiological and functional implications", Growth Factors ., 2016, 34, (5-6), 196.
5) Z. Zhang, K. Kakutani, K. Maeno, T. Takada, T. Yurube, M. Doita, M. Kurosaka and K. Nishida, "Expression of silent mating type information regulator 2 homolog 1 and its role in human intervertebral disc cell homeostasis", Arthritis Res. Ther.., 2011, 13, (6), R200.
6) I. Hasan, M. Gerdol, Y. Fujii and Y. Ozeki, "Functional Characterization of OXYL, A SghC1qDC LacNAc-specific Lectin from The Crinoid Feather Star Anneissia Japonica.", Mar Drugs., 2019, 17, DOI:10.3390/md17020136. 
7)Y. Fujii, M. Gerdol, S.M.A. Kawsar, I. Hasan, F. Spazzali, T. Yoshida, Y. Ogawa, S. Rajia, K. Kamata, Y. Koide, S. Sugawara, M. Hosono, J.R.H.  Tame, H. Fujita, A. Pallavicini and Y. Ozeki, "A GM1b/asialo-GM1 oligosaccharide-binding R-type lectin from purplish bifurcate mussels Mytilisepta virgata and its effect on MAP kinases.", FEBS J., 2019, DOI: 10.1111/febs.15154. 

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル　～カスタマーサポートの視点から～」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか？

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

＜高分子：分子量1万以上＞
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
＊本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

サンプルが溶液でも問題ないでしょうか？

A

溶液であること自体は問題ありません。
ただし、下記の点をご確認いただいた上でご使用ください。
-濃度-
　サンプル濃度が0.5mg/ml以下(50μg/100μl以下)である場合には
　Filtration tubeを用いてサンプル量が50～200μgとなるように
　遠心して濃縮を行ってください。
　フィルター上に残ったサンプルは再溶解させる必要はありません。
　そのまま反応にご使用ください。

-溶液量-
　Filtration tubeの容量に制限がありますので、溶液の量は100μl以下でご使用ください。

-共存物-
　・不溶性の低分子が含まれる場合は、予め遠心して上清のみを使用してください。
　・分子量10,000以上の物質が含まれる場合には、別途精製を行ってからご使用ください。
　　(市販の抗体の中には安定化剤としてBSAやアルブミンを含む場合があります）

Q

光による退色は起こりにくいのでしょうか？

A

当社での確認試験では、HiLyte Fluor 555, HiLyte Fluor 647ともにAlexaと同等の耐光性を示しています。

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Q

低分子のタンパク質（分子量50,000以下）に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社　ナノセップ　 3K　製品No.OD003C33
PALL社　ナノセップ　10K　製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

標識後、フィルトレーションチューブを遠心してもメンブレン上に液が残る。

A

（１）メンブレンを目視で確認した際、メンブレンカップの淵にうっすら液が残る程度であれば、次の操作に進んで下さい。
メンブレン上に液が残っていたり、メンブレンカップを傾けて回転させたとき、液が垂れてくるようであれば、さらに遠心を8,000g で15分～30分程度行って下さい。

（２）1)の遠心操作後もメンブレン上に液が残る場合は、標識体が凝集していないか確認してください。

抗体やタンパク質自身の性質によりますが、低分子標識剤を標識することで抗体やタンパク質の疎水性が増し、凝集する場合がございます。

標識体に凝集が見られる場合は、一度別のマイクロチューブに移し、遠心し上澄みをご使用ください。(抗体・タンパク質の回収量は低下いたします。)

上記でも解決しない場合は、小社カスタマーサポートまでお問い合わせください。

※フィルターの目詰まりが疑われる場合は、メンブレンフィルターを新しいものに交換すると解決する場合がございます。
代替品：　PALL社製　ナノセップ　30K (メーカーコード：OD030C33)

Q

IgG1分子に色素が幾つ標識されますか？

A

IgG1分子あたり、3～7個の色素が標識されます。
プロトコルや製品添付の説明書にも標識率を計算する式を載せてあります。

HiLyte Fluor 555/タンパク質の標識率=[A555/150,000]/[(A280-A555x0.1)/ε]

A555:555nmの吸光度
A280：280nmの吸光度
ε：タンパク質の280nmのモル吸光係数(IgGの場合には216,000)

Q

未反応の色素は除去できますか？

A

説明書にある反応後の2回の洗浄で、未反応色素の95％は除去されます。

必要であれば、WS buffer等での洗浄をさらに2～3回繰り返すことで未反応色素はほぼ除去されます。

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
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抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

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    抗体・タンパク質標識キット

    HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit – NH2

08 ラベル化剤

HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit – NH2

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

  • ラベル化剤
  • 細胞機能解析
  • 蛍光色素
  • 顕微鏡
  • FCM
  • 標識キット

抗体・タンパク質標識キット

  • 簡単な操作で実験したい
  • 抗原認識部位を妨害しない低分子で標識したい
  • Cy5と類似した蛍光特性を持つ色素でみたい
  • 製品コード
    LK15　 HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit – NH2
容　量 メーカー希望
小売価格		 富士フイルム
和光純薬
3 samples ￥27,700 345-91051
サンプル量 50-200 µg
所要時間 2時間
標識部位 -NH2
検出方法 顕微鏡・FCM
蛍光特性 [Ex:655, Em:670]

・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。

・Filtration Tubeを用いた分離操作により抗体の場合は高い回収率で標識体が得られる。

・付属の保存溶液でHiLyte Fluor™標識体の保存ができる。

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

キット内容
3 samples ・NH2-Reactive Hilyte FluorTM 647
・WS Buffer
・Reaction Buffer
・Filtration Tube		 3 tubes
4 ml×1
500 μl×1
3 tubes

  • 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 日本語
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  • 取扱説明書 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 English
    抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

技術情報

特長

1) 約2時間でHiLyte FluorTM標識体が調製できる。
2) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
3) 50～200 μgのタンパク質を標識可能である。
4) Filtration Tubeを用いた分離操作により抗体の場合は高い回収率で標識体が得られる。
5) 付属の保存溶液でHiLyte FluorTM標識体の保存ができる。
＊HiLyte FluorTMはAnaSpec 社の商標です。同仁化学では試験・研究用として許諾を得ております。

参考文献

参考文献を表示する

1) S. Hiroyasu, T. Ozawa, H. Kobayashi, M. Ishii, Y. Aoyama, Y. Kitajima, T. Hashimoto, J.C.R. Jones and D. Tsuruta, "Bullous pemphigoid IgG induces BP180 internalization via a macropinocytic pathway", Am. J. Pathol.., 2013, 182, (3), 828.
2) W. Jin, K. Yamada, M. Ikami, N. Kaji, M. Tokeshi, Y. Atsumi, M. Mizutani, A. Murai, A. Okamoto, T. Namikawa, Y. Baba, M. Ohta, "Application of IgY to sandwich enzyme-linked immunosorbent assays, lateral flow devices, and immunopillar chips for detecting staphylococcal enterotoxins in milk and dairy products", J. Microbiol. Methods., 2013, 92, (3), 323.
3) Y. Hayashi, M. Okutani, S. Ogawa, T. Tsukahara, R. Inoue, "Generation of anti-porcine CD69 monoclonal antibodies and their usefulness to evaluate early activation of cellular immunity by flow cytometric analysis", Anim. Sci. J.., 2018, 89, (5), 825.
4) T. Kojima, J. Hata, H. Oka, K. Hayashi, K. Hitomi and H. Nakano, "Spatial arrangement of proteins using scCro-tag: application for an in situ enzymatic microbead assay.", Biosci. Biotechnol. Biochem., 2018, 82, (11), 1911.
5) S. Mawaribuchi, Y. Haramoto, H. Tateno, Y. Onuma, Y. Aiki and Y. Ito, "rBC2LCN lectin as a potential probe of early-stage HER2-positive breast carcinoma.", FEBS Open Bio., 2020, DOI: 10.1002/2211-5463.12852.

よくある質問

Q

Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。

A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。
下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル　～カスタマーサポートの視点から～」

Q

サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか？

A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

＜高分子：分子量1万以上＞
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
＊本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q

サンプルが溶液でも問題ないでしょうか？

A

溶液であること自体は問題ありません。
ただし、下記の点をご確認いただいた上でご使用ください。

-濃度-
　サンプル濃度が0.5 mg/ml以下(50 μg/100 μl以下)である場合には

　Filtration tubeを用いてサンプル量が50～200 μgとなるように
　遠心して濃縮を行ってください。
　フィルター上に残ったサンプルは再溶解させる必要はありません。
　そのまま反応にご使用ください。

-溶液量-
　Filtration tubeの容量に制限がありますので、溶液の量は100μl以下でご使用ください。

-共存物-
　・不溶性の低分子が含まれる場合は、予め遠心して上清のみを使用してください。
　・分子量10,000以上の物質が含まれる場合には、別途精製を行ってからご使用ください。
　　(市販の抗体の中には安定化剤としてBSAやアルブミンを含む場合があります）

Q

光による退色は起こりにくいのでしょうか？

A

当社での確認試験では、HiLyte Fluor 555, HiLyte Fluor 647ともにAlexaと同等の耐光性を示しています。

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

Q

低分子のタンパク質（分子量50,000以下）に標識する場合の方法を教えて下さい。

A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、

余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、

下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して

頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社　ナノセップ　 3K　製品No.OD003C33
PALL社　ナノセップ　10K　製品No.OD010C33 
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することが

ございますので遠心時間はご検討下さい。

Q

標識後、フィルトレーションチューブを遠心してもメンブレン上に液が残る。

A

（１）メンブレンを目視で確認した際、メンブレンカップの淵にうっすら液が残る程度であれば、
　　　 次の操作に進んで下さい。
　　　 メンブレン上に液が残っていたり、メンブレンカップを傾けて回転させたとき、液が
　　　 垂れてくるようであれば、さらに遠心を8,000g で15分～30分程度行って下さい。　　　　　　　　　　
　　　
（２）1)の遠心操作後もメンブレン上に液が残る場合は、標識体が凝集していないか確認してください。

　　　 抗体やタンパク質自身の性質によりますが、低分子標識剤を
　　　　 標識することで抗体やタンパク質の疎水性が増し、凝集する場合がございます。

　　　 標識体に凝集が見られる場合は、一度別のマイクロチューブに移し、遠心し上澄みを
　　　 ご使用ください。(抗体・タンパク質の回収量は低下いたします。)

上記でも解決しない場合は、小社カスタマーサポートまでお問い合わせください。

※フィルターの目詰まりが疑われる場合は、メンブレンフィルターを新しいものに
　　　 交換すると解決する場合がございます。 
　　 　 代替品：　PALL社製　ナノセップ　30K (メーカーコード：OD030C33)

Q

IgG1分子に色素が幾つ標識されますか？

A

 IgG1分子あたり、3～7個の色素が標識されます。
プロトコルや製品添付の説明書にも標識率を計算する式を載せてあります。

HiLyte Fluor 647/タンパク質の標識率=[A655/250,000]/[(A280-A655x0.05)/ε]

A655：655nmの吸光度
A280：280nmの吸光度
ε：タンパク質の280nmのモル吸光係数(IgGの場合には216,000)

Q

未反応の色素は除去できますか？

A

説明書にある反応後の2回の洗浄で、未反応色素の95％は除去できます。

必要であれば、WS buffer等での洗浄をさらに2～3回繰り返すことで未反応色素はほぼ除去されます。

抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
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関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

  • 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体標識キット

    Ab-10 Rapid HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit

  • 抗体・タンパク質標識キット HiLyte Fluor™ 647 Labeling Kit - NH2 同仁化学研究所

    抗体・タンパク質標識キット

    HiLyte Fluor™ 555 Labeling Kit – NH2