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C12H18Cl4N4
360.11
产品简介
DAB是在免疫组化中最常用的氧化型过氧化物酶显色底物之一。在过氧化氢和过氧化酶存在时，DAB被氧化成棕色的显色底物。这种棕色的显色底物是苯胺黑类化合物，可以牢固的沉积在细胞膜或组织上的过氧化物酶的周围。市面上销售的DAB往往由于生产和保存期间的氧化问题呈褐色。而同仁化学研究所的提供的高纯度DAB的性状呈白色或略带红色的灰色粉末，可以得到灵敏度更高的染色效果。
染色溶液的制备
1. 用1 ml PBS溶解9 mg DAB制备成100 x DAB solution。
2. 用1 ml PBS混合5 μl 的30%过氧化氢酶溶液制备成200 x H2O2 solution。
3. 向1 ml PBS中加入10 μl 的100 x DAB solution和5 μl的 200 x 的H2O2 solution制成Staining soluiton1)。
4. 将Staining solution加入到染色容器中并将样品在室温下培养1 h2)。
5. 用PBS清洗样品数次使染色反应停止。
1) Staining solution不稳定，请现配现用。
2) 为了获得更好的染色效果，可以在加入Staining solution之前预先用0.09 mg DAB/PBS溶液培养样品10 min。
参考文献
1) A. B. Novikoff, et al., Studies on Microperoxisomes V. Are Microperoxisomes Ubiquitous in Mammalian Cells. J Histochem Cytochem. 1973;21:737.
2) V. Herzog, et al., A New Sensitive Colorimetric Assay for Peroxidaase Using 3, 3 EDiaminobenzidine as Hydrogen Donor. Anal Biochem. 1973;55:554.
3) H. Yamada, et al., Improvement of Technique of Immunohistochemical Demonstraction of Bioactive Substances in the Central Nervous System. Acta Histochem Cytochem. 1987;20:629.
4) K. L. Cheng, Determination of Traces of Selenium 3,3 EDiaminobenzidine as Selenium(IV) Organic Reagent. Anal Chem. 1956;28:1738.
操作和储存条件
规格：
性状：红色或略带红色的灰色粉末
纯度(滴定法)：≥97.0%(干燥固态)
水中溶解度：通过检测
Tris缓冲液中溶解度：通过检测
吸光度(硒化合物)：≧ 0.500 (420 nm附近)
干燥失重：≤5.0%
硫酸盐灰分：≤0.05%
IR谱图：一致
操作和储存条件：
0-5℃，避光
危险/有害性标志
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DAB
