N-[3′,6′-Bis(acetyloxy)-3-oxo-3H-spiro(isobenzofuran-1,9′-xanthen)-5-yl]-(1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1-acetamide-κN1,κN4,κN7,κN10copper(2+)sulfate

CAS号：1346170-03-3(free base)

商品信息

规格

性状：                          本品为蓝色固体

纯度（HPLC）：           90%以上

荧光光谱：                    符合实验要求

处理条件

保存方法：                    0~5°C

硫化氢 (H₂S) 在舒张血管，保护细胞和调节胰岛素分泌方面具有重要的生理作用已经得到广泛的认可。 H₂S被认为是一种类似于NO和CO的气体信号分子，但在生理条件下大约80％的H₂S是以HS^–的状态存在的 (pKa=7)。HS^– 很容易转变为各种过硫化物和多硫化物。 -SulfoBiotics- HSip-1 是一种新的特异性检测H₂S的荧光探针，当和H₂S反应时会发出较强的绿色荧光。 -SulfoBiotics- HSip-1 DA可以穿透细胞膜检测细胞内的H₂S。

硫化氢 (H₂S) 在舒张血管，保护细胞和调节胰岛素分泌方面具有重要的生理作用已经得到广泛的认可。H₂S被认为是一种类似于NO和CO的气体信号分子，但在生理条件下大约80％的H₂S是以HS^–的状态存在的(pKa=7)。HS^–很容易转变为各种过硫化物和多硫化物。

-SulfoBiotics- HSip-1 是一种新的特异性检测H₂S的荧光探针，当和H₂S反应时会发出较强的绿色荧光。

-SulfoBiotics- HSip-1 DA可以穿透细胞膜检测细胞内的H₂S。

制备1 mmol/l HSip-1 DA储存液

加53 ul DMSO至含有50 ug HSip-1 DA的管子中，用移液器吹打溶解。

*配制好的溶液请在-20℃保存，可以保存1个月

E x：470 ～ 500 nm

Em：500 ～ 550 nm

用HSip-1 DA检测硫化氢的荧光成像

1. 在 u-slide 8孔板 (ibidi)中接种HeLa细胞，并在37℃,5%的CO₂培养箱中过夜培养。

2. 更换培养基，用无血清的MEM培养基清洗细胞2次。

3. 用无血清的MEM培养基稀释1 mmol/l 的HSip-1 DA储存液，制成5 umol/l 的HSip-1 DA工作液。

* 请根据细胞种类优化HSip-1 DA的终浓度。

4. 在细胞中加入200 ul 5 umol/l的 HSip-1 DA工作液，并在37℃ 5%的CO₂培养箱中培养30 min。

5. 去除上清液，用HBSS清洗细胞2次。

6. 在每孔中加入200 ul 200 umol/l 的Na2S溶液，并在37℃ 5%的CO₂培养箱中培养30 min。

7. 去除上清液，用HBSS清洗细胞2次。

8. 加入200 ul HBSS，用共聚焦荧光显微镜观察细胞。

用HSip-1 DA检测HeLa细胞 (经过Na₂S处理) 中的硫化氢

(A: Control, B: 用200 umol/l Na₂S 处理)

     

1) Sasakura, et al., Development of a Highly Selective Fluorescence Probe for Hydrogen Sulfide,J. Am. Chem. Soc., 2011, 133, 18003-18005

2) Kenjiro Hanaoka, et al., Discovery and Mechanistic Characterization of Selective Inhibitors of H2Sproducing Enzyme: 3-Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (3MST) Targeting Active-site Cysteine Persulfide, Scientific Reports, 2017, 7, 40227