上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品,欢迎访问官网了解更多信息
特点:
·检测时间短
·固定和不固定都可以用
·悬浮细胞核贴壁细胞都可以用
关联产品
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特点:
·检测时间短
·固定和不固定都可以用
·悬浮细胞核贴壁细胞都可以用
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特点:
· 检测时间短
· 固定和不固定都可以
· 悬浮细胞和贴壁细胞都可以
关联产品
实验工具|稀释计算器|摩尔浓度计算器
上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。
容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
---|---|---|
50 tests | ¥13,900 | 348-09591 |
50 tests | Cell Cycle Assay Solution Deep Red | 250 ×l×1 |
---|
フローサイトメーターでの細胞周期測定で一般的に使用されるPropidium Iodide (PI) を用いた手法と比較して、本製品は細胞膜透過性があり、かつDNA 選択性が高い色素を使用しているため、細胞懸濁液に試薬を添加するだけで測定が可能です。また、633 nm のレーザーで測定可能なため、汎用性の高い488 nm のレーザーを用いた実験と併用することが可能です。
細胞周期のG2/M 期に作用して細胞増殖を停止させ、細胞老化を誘導することが知られているDoxorubicin(DOX) をA549 細胞へ添加後、本製品でA549 細胞における細胞周期の変化と、Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal(製品コード:SG03)で細胞老化、JC-1 MitoMP Detection Kit (製品コード:MT09)でミトコンドリア膜電位の変化を確認しました。
|
JC-1 MitoMP Detection Kit
Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal
文献No. | 対象サンプル | 引用(リンク) |
---|---|---|
1) | 細胞 (HCAECs) |
N. Sasaki, Y. Itakura and M. Toyoda, "Rapamycin promotes endothelial-mesenchymal transition during stress-induced premature senescence through the activation of autophagy”, Cell Commun. Signal, 2020, 18(1), 43 |
2) | 細胞 (ARPE-19) |
T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, "Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091 |
3) | 細胞 (MIA PaCa-2) |
N. Sasaki, F. Gomi, F. Hasegawa, K. Hirano, M. Fujiwara, M. Toyoda and T. Ishiwata, "Characterization of the metastatic potential of the floating cell component of MIA PaCa-2, a human pancreatic cancer cell line”, Biochem. biophys. res. commun, 2020, 522(4), 881-888 |
4) | 細胞 (ヒト小気道上皮細胞) |
M. Komura, T. Sata, H. Yoshikawa, N. A. Nitta, Y. Suzuki, K KOike, Y. Kodama, K. Seyama and K. Takahashi, "Propylene glycol, a component of electronic cigarette liquid, damages epithelial cells in human small airways", 2022, Respir. Res., doi:10.1186/s12931-022-02142-2. |
浮遊細胞と接着細胞のどちらも測定できますか?
浮遊細胞、接着細胞の両方で使用可能です。
トリプシンは測定に影響しますか?
トリプシンが残存すると測定に影響します。
トリプシンを用いた細胞の回収後は、プロトコルに従い染色前の洗浄操作を確実に行ってください。
トリプシンの影響を確認した実験例を以下に掲載します。
細胞表面抗原の免疫染色とCell Cycle Assay Solutionの共染色はできますか?
Cell Cycle Assay Solution中の添加剤が免疫検出系に影響するため、共染色は出来ません。
細胞の固定化は必要ですか?
未固定および固定化した細胞の両方に使用できます。
固定化細胞を保存して測定する場合、染色は保存する前と後のどちらが良いですか?
どちらも染色できます。小社では以下の条件で染色した実績がございます。
固定化細胞を保存する前後で染色した各サンプルをフローサイトメトリーで測定したところ、結果に変化は見られませんでした。
・固定化細胞を冷蔵(4℃)で1週間保存し、取扱説明書に従って細胞を染色した。
・固定化細胞を取扱説明書に従って染色し、細胞を冷蔵(4℃)で1週間保存した。
冷凍で細胞を保存すると不溶物が析出する可能性があるため、冷凍での保存はお勧めできません。
Cell Cycle Assay Solutonで染色後、過剰な試薬を除くために細胞を洗浄してもいいですか?
染色後の洗浄はお勧めしません。
洗浄時の遠心操作により、細胞周期解析に適切なヒストグラムが得られない可能性があります。
フローサイトメトリーを行う際は、どのような点に注意すべきでしょうか?
フローサイトメトリーを行う際は、最適な条件で測定を行う必要があります。
以下で実際にお客様から寄せられた測定時の失敗例をご紹介します。
①フィルターが測定条件に合っていない。
例えばフローサイトメーターでの細胞周期測定で一般的に使用されるPropidium Iodide (PI)法で使用するフィルターを用いた場合、
電圧の設定に関わらず、良好なヒストグラムが得られません。
測定には以下のフィルターをご利用下さい。
②測定電圧が適切でない。
例えばフローサイトメーターの電圧が高すぎる(または低すぎる)場合、良好なヒストグラムが得られません。
ヒストグラムでG0/G1期、S期、G2/M期が明瞭となる測定電圧に調整してください。
③細胞のゲーティングが適切でない。
例えば解析時のゲーティングが不適切な場合、良好なヒストグラムが得られません。
解析時には細胞全体をゲーティングするようにしてください。
試薬添加後に凝集物が見られました。どうすればよいですか?
細胞によっては、細胞数が多いと下記のような凝集物が見られる場合があります。
その場合、細胞数を減らして(目安:0.25-1×105 cells/ml)試薬を添加し、速やかに測定を行ってください。
*写真下の細胞数は、取扱説明書の操作1における細胞数を示しています。
保存条件: 冷凍,遮光 | |
危険・有害 シンボルマーク |
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この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。
上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。
容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
---|---|---|
50 tests | ¥13,900 | 341-09601 |
50 tests | Cell Cycle Assay Solution Blue | 250 μl×1 |
---|
フローサイトメーターでの細胞周期測定で一般的に使用されるPropidium Iodide (PI) を用いた手法と比較して、本製品は細胞膜透過性があり、かつDNA 選択性が高い色素を使用しているため、細胞懸濁液に試薬を添加するだけで測定が可能です。また、405 nm のレーザーで測定可能なため、汎用性の高い488 nm のレーザーを用いた実験と併用することが可能です。
細胞周期のG2/M 期に作用して細胞増殖を停止させ、細胞老化を誘導することが知られているDoxorubicin(DOX) をA549 細胞へ添加後、本製品でA549 細胞における細胞周期の変化と、Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal(製品コード:SG03)で細胞老化、JC-1 MitoMP Detection Kit (製品コード:MT09)でミトコンドリア膜電位の変化を確認しました。
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JC-1 MitoMP Detection Kit
Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal
文献No. | 対象サンプル | 引用(リンク) |
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1) | 細胞 (PC-9, A549) |
K. Tsuchiya, K. Yoshimura, Y. Iwashita, Y. Inoue, T. Ohta, H. Watanabe, H. Yamada, A. Kawase, M. Tanahashi, H. Ogawa, K. Funai, K. Shinmura, T. Suda and H. Sugimura, "m6 A demethylase ALKBH5 promotes tumor cell proliferation by destabilizing IGF2BPs target genes and worsens the prognosis of patients with non-small-cell lung cancer", Cancer Gene Ther., 2022, doi:10.1038/s41417-022-00451-8. |
浮遊細胞と接着細胞のどちらも測定できますか?
浮遊細胞、接着細胞の両方で使用可能です。
トリプシンは測定に影響しますか?
トリプシンが残存すると測定に影響します。
トリプシンを用いた細胞の回収後は、プロトコルに従い染色前の洗浄操作を確実に行ってください。
トリプシンの影響を確認した実験例を以下に掲載します。
細胞表面抗原の免疫染色とCell Cycle Assay Solutionの共染色はできますか?
Cell Cycle Assay Solution中の添加剤が免疫検出系に影響するため、共染色は出来ません。
細胞の固定化は必要ですか?
未固定および固定化した細胞の両方に使用できます。
固定化細胞を保存して測定する場合、染色は保存する前と後のどちらが良いですか?
どちらも染色できます。小社では以下の条件で染色した実績がございます。
固定化細胞を保存する前後で染色した各サンプルをフローサイトメトリーで測定したところ、結果に変化は見られませんでした。
・固定化細胞を冷蔵(4℃)で1週間保存し、取扱説明書に従って細胞を染色した。
・固定化細胞を取扱説明書に従って染色し、細胞を冷蔵(4℃)で1週間保存した。
冷凍で細胞を保存すると不溶物が析出する可能性があるため、冷凍での保存はお勧めできません。
Cell Cycle Assay Solutonで染色後、過剰な試薬を除くために細胞を洗浄してもいいですか?
染色後の洗浄はお勧めしません。
洗浄時の遠心操作により、細胞周期解析に適切なヒストグラムが得られない可能性があります。
フローサイトメトリーを行う際は、どのような点に注意すべきでしょうか?
フローサイトメトリーを行う際は、最適な条件で測定を行う必要があります。
以下で実際にお客様から寄せられた測定時の失敗例をご紹介します。
①フィルターが測定条件に合っていない。
例えばフローサイトメーターでの細胞周期測定で一般的に使用されるPropidium Iodide (PI)法で使用するフィルターを用いた場合、
電圧の設定に関わらず、良好なヒストグラムが得られません。
測定には以下のフィルターをご利用下さい。
②測定電圧が適切でない。
例えばフローサイトメーターの電圧が高すぎる(または低すぎる)場合、良好なヒストグラムが得られません。
ヒストグラムでG0/G1期、S期、G2/M期が明瞭となる測定電圧に調整してください。
③細胞のゲーティングが適切でない。
例えば解析時のゲーティングが不適切な場合、良好なヒストグラムが得られません。
解析時には細胞全体をゲーティングするようにしてください。
試薬添加後に凝集物が見られました。どうすればよいですか?
細胞によっては、細胞数が多いと下記のような凝集物が見られる場合があります。
その場合、細胞数を減らして(目安:0.25-1×105 cells/ml)試薬を添加し、速やかに測定を行ってください。
*写真下の細胞数は、取扱説明書の操作1における細胞数を示しています。
保存条件: 冷凍 | |
危険・有害 シンボルマーク |
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この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒Cell Cycle and Apoptosis Analysis Ki
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒Cell Cycle and Apoptosis Analysis KiT
碘化丙啶(Propidium,简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。
碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰,即凋亡细胞峰。
细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变化。在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。
本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测,则必须把组织消化成单细胞状态,才可以进行检测。
本试剂盒足够检测50个样品,每个样品的细胞数量可以为10-100万。
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒Cell Cycle and Apoptosis Analysis KiT
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
C1052-1 |
染色缓冲液 |
25ml |
C1052-2 |
碘化丙啶染色液(20X) |
1.25ml |
C1052-3 |
RNase A(50X) |
0.5ml |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
-20℃保存,一年有效。C1052-2碘化丙啶染色液(20X)需避光保存。本试剂盒可4℃保存,一个月内有效。
注意事项:
本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
需自备PBS和70%乙醇,PBS(C0221A)可以向碧云天订购。
荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
碘化丙啶对人体有刺激性,请注意适当防护。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
T 详细产品信息可和选购