菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry) 同仁化学研究所

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菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry) 同仁化学研究所-Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry)

06 細菌研究用試薬

-Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry)

  • 細菌研究用試薬

菌染色キット

  • 製品コード
    BS01  -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry)
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 Assays ¥25,700 348-91301
キット内容
100 Assays ・CTC
・Enhancing reagent A
10 mg x3
100 μl x1

試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry) 同仁化学研究所
  • Manual English
    菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry) 同仁化学研究所
  • プロトコル 菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry) 同仁化学研究所 細菌を蛍光染色したい
    菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry) 同仁化学研究所

技術情報

特長

1)従来のCTC染色に比べ高感度な検出が可能である。
2)少量小分け品であるため、試薬の調製が容易である。

※本品は、福岡県工業技術センター生物食品研究所との共同開発製品である。

※使用方法は、プロトコルをご覧ください。

参考文献

参考文献を表示する

1) A. W. Coleman, "Enhanced Detection of Bacteria in Natural Environments by Fluorochrome Staining of DNA", Limnol. Oceanogr., 198025, 948.
2) E. Severin, J. Stellmach and H. -M. Nachtigal, "Fluorimetric Assay of Redox Activity in Cells", 
Anal. Chim. Acta1985170, 341.
3) G. G. Rodriguez, D. Phipps, K. Ishiguro and H. F. Ridgway, "Use of a Fluorescent Redox Probe for Direct Visualization of Actively Respiring Bacteria", 
Appl. Environ. Microbiol.199258(6), 1801.
4) G. Schaule, H. C. Flemming and H. F. Ridgway, "Use of 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride for Quantifying Planktonic and Sessile Respiring Bacteria in Drinking Water", Appl. Environ. Microbiol., 1993, 59(11), 3850.
5) R. A. Bovill, J. A. Shalloross and B. M. Markey, "Comparison of the Fluorescent Redox Dye 5-Cyano-2,3-ditolyltetrazolium Chloride with 
p-Iodonitrotetrazolium Violet to Detect Metabolic Activity in Heat-stressed Listeria monocytogenes Cells", J. Appl. Bacteriol., 199477(4), 353.
6) M. T. E. Suller and D. Lloyd, "Flow Cytometric Assesment of the Postantibiotic Effect of Methicillin on 
Staphylococcus aureus", Antimicrob. Agents Chemother., 199842(5), 1195.
7) M. Kawai, N. Yamaguchi and M. Nasu "Rapid Enumeration of Physiologically Active Bacteria in Purified Water Used in the Pharmaceutical Manufacuturing Process", 
J. Appl. Microbiol., 199986, 496. 
8) N. Yamaguchi, M. Sasada, M. Yamanaka and M. Nasu, "Rapid Detection of Respiring 
Escherichia coli O157:H7 in Apple Juice, Milk and Ground Beef by Flow Cytometry", Cytometry 200354A, 27.
9) A. Kitaguchi, N. Yamagauchi and M. Nasu, "Enumeration of Respiring Pseudomonas spp. in Milk within 6 Hours by Fluorescence In Situ Hybridization Following Formazan Reduction", Appl. Environ. Microbiol., 200571(5), 2748.
10)A. Hiraishi and N. Yoshida, "An Improved Redox Dye-Staining Method Using 5-Cyano-2,3-Ditoryl Tetrazolium Chloride for Detection of Metabolically Active Bacteria in Activated Sludge", Microbes Environ., 200419(1), 61.
11)平石 明, 吉田 奈央子, “活性汚泥における培養不能な細菌の検出”, 月刊 海洋 培養不能細菌 -VNC研究の現状と課題2003, 3348
12)染谷 孝, “蛍光染色による土壌微生物の検出法”, 月刊 海洋 培養不能細菌 –VNC研究の現状と課題20033314

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
危険・有害
シンボルマーク
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関連製品

菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy) 同仁化学研究所

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菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy) 同仁化学研究所Bacstain– CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy)

06 細菌研究用試薬

Bacstain– CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy)

  • 細菌研究用試薬

菌染色キット

  • 製品コード
    BS02  –Bacstain– CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy)
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 Assays ¥25,100 345-91311
キット内容
100 Assays ・CTC
・Enhancing Reagent B
10 mg × 3
500 μl × 1

試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy) 同仁化学研究所
  • Manual English
    菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy) 同仁化学研究所
  • プロトコル 菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy) 同仁化学研究所 細菌を蛍光染色したい
    菌染色キット -Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy) 同仁化学研究所

技術情報

キット以外に必要なもの

・20 μL, 1000 μLマイクロピペット ・インキュベーター 
・蛍光顕微鏡(blue excitation filter, red emission filter)
 

参考文献

参考文献を表示する

1) A. W. Coleman, "Enhanced Detection of Bacteria in Natural Environments by Fluorochrome Staining of DNA", Limnol. Oceanogr., 198025, 948.
2) E. Severin, J. Stellmach and H. -M. Nachtigal, "Fluorimetric Assay of Redox Activity in Cells", Anal. Chim. Acta1985170, 341.
3) G. G. Rodriguez, D. Phipps, K. Ishiguro and H. F. Ridgway, "Use of a Fluorescent Redox Probe for Direct Visualization of Actively Respiring Bacteria", Appl. Environ. Microbiol.199258(6), 1801.
4) G. Schaule, H. C. Flemming and H. F. Ridgway, "Use of 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride for Quantifying Planktonic and Sessile Respiring Bacteria in Drinking Water", Appl. Environ. Microbiol., 1993, 59(11), 3850.
5) R. A. Bovill, J. A. Shalloross and B. M. Markey, "Comparison of the Fluorescent Redox Dye 5-Cyano-2,3-ditolyltetrazolium Chloride with p-Iodonitrotetrazolium Violet to Detect Metabolic Activity in Heat-stressed Listeria monocytogenes Cells", J. Appl. Bacteriol., 199477(4), 353.
6) M. T. E. Suller and D. Lloyd, "Flow Cytometric Assesment of the Postantibiotic Effect of Methicillin on Staphylococcus aureus", Antimicrob. Agents Chemother., 199842(5), 1195.
7) M. Kawai, N. Yamaguchi and M. Nasu "Rapid Enumeration of Physiologically Active Bacteria in Purified Water Used in the Pharmaceutical Manufacuturing Process", J. Appl. Microbiol., 199986, 496. 
8) N. Yamaguchi, M. Sasada, M. Yamanaka and M. Nasu, "Rapid Detection of Respiring Escherichia coli O157:H7 in Apple Juice, Milk and Ground Beef by Flow Cytometry", Cytometry200354A, 27.
9) A. Kitaguchi, N. Yamagauchi and M. Nasu, "Enumeration of Respiring Pseudomonas spp. in Milk within 6 Hours by Fluorescence In Situ Hybridization Following Formazan Reduction", Appl. Environ. Microbiol., 200571(5), 2748.
10)A. Hiraishi and N. Yoshida, "An Improved Redox Dye-Staining Method Using 5-Cyano-2,3-Ditoryl Tetrazolium Chloride for Detection of Metabolically Active Bacteria in Activated Sludge", Microbes Environ.200419(1), 61.
11)平石 明,吉田 奈央子,“活性汚泥における培養不能な細菌の検出”,月刊 海洋 培養不能細菌 -VNC研究の現状と課題-,200333, 48.
12)染谷 孝, “蛍光染色による土壌微生物の検出法”, 月刊 海洋 培養不能細菌 -VNC研究の現状と課題-, 200333, 14.

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit – CTC/DAPI 同仁化学研究所

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CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CTC/DAPI

06 細菌研究用試薬

Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CTC/DAPI

CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所

  • 細菌研究用試薬

CTC/DAPI で菌を二重染色

  • 蛍光二重染色に最適化した試薬を添加するだけのプロトコル
  • 複数の指標で薬剤効果や菌の状態を評価できる
  • 培養法と比較して評価にかかる時間を大幅に短縮できる
  • 製品コード
    BS09  –Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CTC/DAPI
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 set ¥38,500 348-09731
キット内容
1 set CTC
DAPI Solution
Enhancing Reagent
10 mg × 4
25 μl × 4
700 μl × 1

  • CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所
試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 日本語
    CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所
  • Manual English
    CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所

技術情報

蛍光染色例

Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – DAPI/PICTC/DAPICFDA/PI を用いて、S. aureus(グラム陽性菌)ならびに E. coli(グラム陰性菌)をイメージングしました。

S. aureus(グラム陽性菌)の染色例

CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所

E. coli(グラム陰性菌)の染色例

CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所

よくある質問

Q

Bacterial Viability Detection Kitで使用している染色試薬の蛍光特性を教えてください。

A

蛍光特性とその性質は以下の表をご参照ください。

なお、小社では共焦点蛍光顕微鏡と落射蛍光顕微鏡で観察した実績があります。

 

色素名 極大励起波長/極大蛍光波長 励起フィルター(推奨) 備考
CTC 430, 480 nm / 630 nm Bもしくは G 励起 呼吸活性により還元され赤色蛍光色素 (CTC formazan) を生成する。
DAPI 360 nm / 460 nm UV 励起 膜損傷の有無に関わらず細胞内に透過し、核酸を染色する。
CFDA 493 nm / 515 nm B 励起 エステラーゼにより加水分解され緑色蛍光色素 (carboxy-fluorescin)を生成する。
PI 530 nm / 620 nm G 励起 膜損傷を有する細胞内にのみ透過し、核酸を染色する。
Q

グラム陽性菌やグラム陰性菌で染色に違いはありますか?

A

各色素の特徴として、以下が挙げられます。

DAPI:

グラム陰性菌では染まりにくい場合があります。

CTC:

グラム陽性、陰性に関わらず、CTCのみでは染まりにくい傾向がありますが、-Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CTC/DAPI(BS09)に付属するEnhancing Reagentを使用することで染色能が向上します。

CFDA:

一般的にグラム陰性菌では染まりにくい傾向がございますが、本製品のプロトコルに記載しています、0.1mol/lリン酸バッファーを使用することで染色能が向上します。

Q

染色前に細菌を洗浄する必要はありますか?

A

細菌は染色前に洗浄する必要があります。
細菌を洗浄しない場合、DAPIやPIでは菌体外に存在する核酸を染色したり、CTCやCFDAでは培地成分の影響で蛍光を示すことでバックグラウンド上昇の原因となる可能性があります。

Q

菌の懸濁液や染色後の洗浄には何を使用すれば良いですか?

A

滅菌したPBSや生理食塩水が使用できます。

Q

蛍光が弱い場合の対処方法を教えてください。

A

試薬の添加量を増やすか(試薬濃度を上げる)、インキュベート時間を長くすることをご検討ください。

Q

二重染色後に菌を固定化することはできますか?

A

可能です。小社では二重染色後に終濃度4%のホルムアルデヒドで菌を固定化した実績があります。

CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所 CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所

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    菌蛍光染色用色素

    Bacstain– DAPI solution

  • CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所

    DAPI/PI で菌を二重染色

    Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – DAPI/PI

  • CTC/DAPI で菌を二重染色 -Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit - CTC/DAPI 同仁化学研究所

    CFDA/PI で菌を二重染色

    Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CFDA/PI

還元系発色試薬・細菌検出試薬 CTC | CAS 90217-02-0 同仁化学研究所

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還元系発色試薬・細菌検出試薬 CTC | CAS 90217-02-0 同仁化学研究所CTC

10 酸化還元系発色試薬

CTC

還元系発色試薬・細菌検出試薬 CTC | CAS 90217-02-0 同仁化学研究所

  • 酸化還元系発色試薬

還元系発色試薬・細菌検出試薬

  • 製品コード
    C440  CTC
  • CAS番号
    90217-02-0
  • 化学名
    5-Cyano-2,3-ditolyl-2H-tetrazolium chloride
  • 分子式・分子量
    C16H14ClN5=311.77
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 mg ¥19,800 341-91031
  • 還元系発色試薬・細菌検出試薬 CTC | CAS 90217-02-0 同仁化学研究所
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技術情報

特長

1) 呼吸活性を有する細菌を選択的に染色できる。
2) 寒天平板培地法に比べ短時間で結果が得られる。
3) 蛍光顕微鏡・フローサイトメトリーで検出できる。

参考文献

参考文献を表示する

1) A. W. Coleman, "Enhanced Detection of Bacteria in Natural Environments by Fluorochrome Staining of DNA", Limnol. Oceanogr., 1980, 25, 948.
2) E. Severin, J. Stellmach and H.-M. Nachtigal, "Fluorimetric Assay of Redox Activity in Cells", Anal. Chim. Acta, 1985, 170, 341.
3) G. G. Rodriguez, D. Phipps, K. Ishiguro and H. F. Ridgway, "Use of a Fluorescent Redox Probe for Direct Visualization of Actively Respiring Bacteria", Appl. Environ. Microbiol., 1992, 58 (6), 1801.
4) G. Schaule, H. C. Flemming and H. F. Ridgway, "Use of 5-Cyano-2,3-ditolyl Tetrazolium Chloride for Quantifying Planktonic and Sessile Respiring Bacteria in Drinking Water", Appl. Environ. Microbiol., 1993, 59 (11), 3850.
5) R. A. Bovill, J. A. Shalloross and B. M. Markey, "Comparison of the Fluorescent Redox Dye 5-Cyano-2,3-ditolyltetrazolium Chloride with p-Iodonitrotetrazolium Violet to Detect Metabolic Activity in Heat-stressed Listeria monocytogenes Cells", J. Appl. Bacteriol., 1994, 77 (4), 353.
6) M. T. E. Suller and D. Lloyd, "Flow Cytometric Assesment of the Postantibiotic Effect of Methicillin on Staphylococcus aureus", Antimicrob. Agents Chemother., 1998, 42 (5), 1195.
7) M. Kawai, N. Yamaguchi and M. Nasu "Rapid Enumeration of Physiologically Active Bacteria in Purified Water Used in the Pharmaceutical Manufacuturing Process", J. Appl. Microbiol., 1999, 86, 496. 
8) N. Yamaguchi, M. Sasada, M. Yamanaka and M. Nasu, "Rapid Detection of Respiring Escherichia coli O157:H7 in Apple Juice, Milk, and Ground Beef by Flow Cytometry", Cytometry , 2003, 54A, 27.
9) A. Kitaguchi, N. Yamaguchi and M. Nasu, "Enumeration of Respiring Pseudomonas spp. in Milk within 6 Hours by Fluorescence In Situ Hybridization Following Formazan Reduction", Appl. Environ. Microbiol., 2005, 71(5), 2748.

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~微橙色粉末又は結晶性粉末で、水、メタノールに溶ける。
純度(HPLC): 95.0% 以上
水溶状: 試験適合
モル吸光係数: 7,500 以上(300 nm付近)
鋭敏度: 試験適合
IRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光
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還元系発色試薬・細菌検出試薬 CTC | CAS 90217-02-0 同仁化学研究所

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    Bacstain– Bacterial Viability Detection Kit – CTC/DAPI