核酸外切酶 I（E. coli）货号 #M0293LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年2月12日由whatman中国官网

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 核酸酶

核酸外切酶 I（E. coli）收藏

货号

规格

价格(元)

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#M0293L

15,000 unit

3,059.00

有

无

有

#M0293S

3,000 units

759.00

有

无

有

#M0293V

1,500 units

399.00

有

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特性

 3´ →5´ 单链外切酶活性
 PCR 扩增后降解引物

概述

具有从 3´ →5´ 方向水解单链 DNA 的外切酶活性。

来源

重组 E. coli 菌株，其携带有从 E. coli NM554 克隆的 exo I 基因。

反应条件

1X 核酸外切酶 I 反应缓冲液

[67 mM Glycine-KOH（pH 9.5 @ 25℃），6.7 mM MgCl₂ ，10 mM 2-巯基乙醇]，37℃ 温育。
热失活：80℃ 加热 20 分钟。

质保声明

核酸外切酶 I 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

单位定义

1 单位指在 37℃ 条件下，30 分钟内催化释放 10 nmol 的酸溶性核苷释放所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

浓度

20,000 units/ml。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

拓扑异构酶 I（E. coli）货号 #M0301LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年2月12日由whatman中国官网

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 修复蛋白

拓扑异构酶 I（E. coli）收藏

货号

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#M0301L

500 units

3,179.00

有

无

#M0301S

100 units

789.00

有

无

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特性

 识别错配 DNA
 催化负超螺旋 DNA 松弛

概述

拓扑异构酶 I（E. coli）催化负超螺旋 DNA 的松弛。拓扑异构酶 I 也参与 DNA 螺旋化的形成和解旋以及将两条互补的单链 DNA 环耦合为双链 DNA 环。完整的全酶分子量为 97 kDa。

来源

克隆有 topA 基因的重组 E. coli 菌株。

反应条件

1X CutSmart 反应缓冲液

[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)₂，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。

质保声明

拓扑异构酶 I 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系，37℃ 条件下，15 分钟内能催化超过 95% 的 0.5 μg pUC19 RF I 型（负超螺旋）DNA 松弛所需要的酶量。DNA 超螺旋化通过不含溴化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。

浓度

5,000 units/ml 和 15,000 units/ml。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

无机焦磷酸酶（E. coli）货号 #M0361LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年2月11日由whatman中国官网

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

无机焦磷酸酶（E. coli）收藏

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#M0361L

50 units

3,009.00

有

无

#M0361S

10 units

749.00

有

无

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特性

 反转录反应中提高 RNA 产量
 增强 DNA 复制

概述

无机焦磷酸酶（E. coli）催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。

P₂0₇^–4 + H₂0 → 2HP0₄^–2

来源

无机焦磷酸酶（大肠杆菌）纯化自携带 E.coli 无机焦磷酸酶基因的重组 E. coli 菌株。

无机焦磷酸酶（酵母）纯化自重组 E. coli 菌株，携带有从酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）克隆的 ppa 基因和蟾分枝杆菌（Mycobacterium xenopi）GyrA 内含肽的融合基因。由 Biohelix（现为 Quidel公司的全资子公司）研发，由 New England Biolabs生产。

质保声明

无机焦磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

单位定义

1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。

浓度

100 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

无机焦磷酸酶（E. coli）货号 #M0361LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月29日由whatman中国官网

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

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#M0361L

50 units

3,009.00

有

无

#M0361S

10 units

749.00

有

无

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特性

 反转录反应中提高 RNA 产量
 增强 DNA 复制能力

概述

无机焦磷酸酶（PPase）催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。
P₂0₇^–4 + H₂0 → 2HP0₄^–2

来源

无机焦磷酸酶（E. coli）纯化自携带 E. coli 无机焦磷酸酶基因的重组 E. coli 菌株。

无机焦磷酸酶（酵母）纯化自重组 E. coli 菌株，携带有从酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）克隆的 ppa 基因和蟾分枝杆菌（Mycobacterium xenopi）GyrA 内含肽的融合基因。由 Biohelix 公司（现在是Quidel 公司的全资子公司）研发，由 New England Biolabs 生产。

质保声明

无机焦磷酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

单位定义

1 单位指标准反应条件下每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1 μmol 磷酸盐所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

浓度

100 units/ml。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

E. coli 核糖体货号 #P0763SNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月25日由whatman中国官网

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产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统：无细胞表达

E. coli 核糖体收藏

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#P0763S

1mg

2,999.00

有

无

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特性

 合成用于蛋白质特性研究的分析量级别的样品

 确定开放阅读框

 合成具有活性和功能域的截短蛋白

 在合成的蛋白质中掺入修饰的、非天然的或标记的氨基酸（NEB# E6840 ，#E6850）

 tRNA 结构与功能研究（NEB #E6840）

 核糖体结构与功能研究（NEB# E3313，NEB #P0763）

 释放因子功能研究/ 核糖体展示（NEB #E6850）
 绘制抗原表位图谱

PURExpress 试剂盒采用 PURE 系统技术，该技术最早由东京大学 Takuya Ueda 博士发明，Biocomber（日本，东京）商业化为 PUResYsTeM^®。

概述

PURExpress^® 体外蛋白合成试剂盒是新型无细胞转录/翻译系统，用于基因快速表达分析，是由大肠杆菌翻译所必需组份纯化而构成。PURExpress 系统无核酸酶和蛋白酶的污染，保护了模板 DNA 和 RNA，避免了蛋白的修饰及降解。转录和翻译过程仅需将两管试剂混合，一步反应即可完成，几个小时就可观察实验结果，PURExpress 系统大大地节省了宝贵的实验时间，特别适合于高通量技术。

E. coli 核糖体货号 #P0763S

使用 PURexpress 体外蛋白合成试剂盒表达蛋白质。25 μl 反应体系中加入 250 ng 模板 DNA 和 20 单位 RNase 抑制剂，37℃ 反应 2 小时。各取 2.5 μl 反应液，进行 10-20% Tris-甘氨酸 SDS-PAGE 电泳分析。红点处指示的为目的蛋白。Marker M 是蛋白质分子量标准（NEB #P7703）

优点

• 适用于环状或线型 DNA 模板

• 合成的蛋白经考马斯亮蓝染色可见

• 约 2 小时即可完成蛋白表达
• 转录/翻译的组份通过亲和层析即可去除

PURexpress 二硫键增强剂

该专利产品的成分为蛋白质与缓冲液，当 PURExpress 系统合成或 E. coli S30 提取的目的蛋白具有较多二硫键时，能帮助其正确折叠。在合成反应开始时加入 PURExpress 二硫键增强剂，能够协助半胱氨酸硫醇的氧化，并纠正硫醇的错误氧化，从而提高可溶性蛋白及具有功能活性蛋白的产量。

E. coli 核糖体货号 #P0763S

PURexpress 二硫键增强剂。（PDBE）促进活性 vtPA 的正确折叠。反应按照 PURExpress 系统说明进行，以 vtPA DNA 为模板。37℃ 下温育 2 小时后，取 5 μl 反应液进行活性检测，在 1 小时内监测发光底物的剪切反应。

PURexpress Δ Ribosome 试剂盒

此试剂盒中移除了核糖体，使得研究蛋白翻译的用户能够使用自己的修饰核糖体。试剂盒还提供单独一管的对照核糖体（2 次反应用量）。

PURexpress Δ RF123 试剂盒

释放因子通过识别 mRNA 序列上的终止密码子参与蛋白翻译的终止过程。采用 PURExpress 进行核糖体展示实验时，缺乏释放因子能够稳定 mRNA-核糖体-新生肽链形成的三元复合体。因此 cDNA 的回收率会更高。该试剂盒单独提供三种释放因子，用户能够自行选择在有或无释放因子的条件下进行蛋白质体外合成或核糖体展示。

PURexpress Δ (aa, tRNA) 试剂盒

该试剂盒单独提供 tRNA 与氨基酸，用户能够向反应体系中加入修饰过的氨基酸与 tRNA 混合液进行蛋白质合成反应。

E. coli 核糖体

大肠杆菌的 70S 核糖体由一个小亚基（30S）与一个大亚基（50S）组成。该核糖体试剂在 NEB 的 PURExpress体外蛋白合成试剂盒（NEB #E6800）中活性很高，在核糖体结构与功能研究中，能够用于药物筛选的靶标以及分离天然核糖体 RNA（5S、16S、23S）的起始材料。该产品溶液浓度为 33.3 mg/ml。

PURexpress 试剂盒组分

E. coli 核糖体货号 #P0763S

E.coli HB101 Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli HB101 Competent Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9051	E.coli HB101 Competent Cells	100 μl × 10	￥413

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■ 制品内容
E.coli HB101 Competent Cells	100 μl × 10
pBR322 plasmid ( 0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出Competent Cells，当1 ng pBR322转化100 μl 细胞时，转化效率>1×10⁸ cfu/μg。
E.coli HB101 Competent Cells 可用来制作DNA文库或重组质粒的亚克隆。

■ 细胞浓度

1-2×10⁹ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli HB101:
F-, hsd S 20(rB-, mB-), recA13, ara-14, proA2, lacY1, galK2, rpsL20 (str), xyl-5, mtl-1,supE44, leuB6, thi-1.

■ 保存

-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pBR332对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 转化效率

转入1 ng 的pBR322，涂于含有Amp⁺ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁸ cfu/μg pBR322

■ 注意事项

1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 对于转化，可以使用1.5 ml微量离心管代替14 ml圆底管（BD Code：352059或352057等），
但转化效率可能会降低。

3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。

4. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth :	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yyeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φ b-broth :	Ingredient	per liter water
	Ttryptone	20 g
	Yeast extract	5 g
	MgSO4·7H2O	5 g
用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。

6. 稀释转化混合物时，使用“使用方法”中步骤7中添加的培养基。

7. 一旦感受态细胞解冻，不建议重新冷冻储存。如果不可避免，应用干冰/乙醇快速冷冻细胞，
并在-80℃下迅速保存。但是，转化效率将会降低。

页面更新：2018-08-14 10:09:51

E.coli JM109 Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli JM109 Competent Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9052	E.coli JM109 Competent Cells	100 μl × 10	￥300

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→	→	→	→

■ 制品内容
E.coli JM109 Competent Cells	100 μl × 10
pBR322 plasmid ( 0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Takara在Hanahan's method基础上进行了改良，制备出E.coli JM109 Competent Cells。
由于E. coli JM109 Competent Cells含有F' 质粒，可以作为M13噬菌体载体的宿主细胞，也可用于制作DNA文库或进行亚克隆。当转化pUC载体或转染M13噬菌体载体DNA时，重组体可以利用感受态细胞的β-半乳糖苷酶的α-互补性，通过添加X-Gal和IPTG很容易地筛选出来。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside

■ 细胞浓度

1-2×10⁹ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli JM109： recA1 , endA1 , gyrA96 , thi-1 , hsdR17 (rk^-mk⁺), e14^-(mcrA^- ) supE44 , relA1 , Δ(lac-proAB )/F'[traD36 , proAB⁺, lacI^q, lacZΔM15]

■ 保存

-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pBR332 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 转化效率

转入1 ng 的pBR322，涂于含有Amp⁺ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁸ transformants/μg pBR322

■ 注意事项

1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 可使用1.5 ml的microcentrifuge tubes代替14 ml的圆底tubes (BD company Code: 352059 或 352057等)，但效率可能会降低。

3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度DNA样品不超过10 ng。否则转化效率会降低。

4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒，而不是45秒。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth :	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH7.5并高压灭菌。
·φ b-broth:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	20 g
	Yeast extract	5 g
	MgSO4·7H2O	5 g
用1 N KOH调整pH7.5并高压灭菌。

6. YT soft agar:	Ingredient	per 100 ml water
	Tryptone	0.8 g
	Yeast extract	0.5 g
	NaCl	0.5 g
用1 N NaOH调整pH7.6，添加agar至浓度为0.6%，并高压灭菌。
7. 制备宿主细胞。
8. L-plate:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5，加入agar至浓度为1.5%，并高压灭菌。

9. 当加入X-Gal或IPTG时，按照以下方法操作：

·将100 mM IPTG按100-300 μl/100 ml的比例加入到agar medium 中，若使用soft agar，比例为 25 μl/3 ml。

·将20 mg /ml X-Gal（溶解于二甲基甲酰胺）按200-300 μl/100 ml的比例加入到agar medium中，若使用soft agar，比例为50 μl/3 ml。

10. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中快速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2020-05-22 14:21:58

E.coli CJ236 Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli CJ236 Competent Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9053	E.coli CJ236 Competent Cells	100 μl × 10	￥502

收藏产品加入购物车

■ 制品内容
E.coli CJ236 Competent Cells	100 μl × 10
pUC119 plasmid ( 0.1 ng/μl)	10 μl × 1
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E.coli CJ236 Competent Cells，当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时，转化效率可达1×10⁷ cfu/μg。
E. coli CJ236 Competent Cells适用于制备含有dU的ssDNA。通过CJ236转化后富集的ssDNA，可用于Kunkel法进行定点突变。

■ 细胞浓度

1 – 2×10⁹ Bacteria/ml

■ Genotype

E. coli CJ236 : dut1, ung1, thi-1, recA1 / pCJ105 (F’ cam^r)

■ 保存

-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC119对照质粒来验证细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 转化效率

转入1 ng 的pUC119，涂于含有Amp⁺ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁷ cfu/μg pUC119

■ 注意事项

1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 可使用microcentrifuge tubes代替Falcon tubes (CORNING #352059或352057)，但效率可能会降低。

3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。

4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth :	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φ b-broth:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	20 g
	Yeast extract	5 g
	MgSO4·7H2O	5 g
用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。

6. 稀释时使用SOC培养基。

7. 建议在选择培养基中加入 Chloramphenicol (30 μg/ml) 以保证F’ 质粒稳定。

8. YT soft agar:	Ingredient	per 100 ml water
	Tryptone	0.8 g
	Yeast extract	0.5 g
	NaCl	0.5 g
用1 N NaOH调整pH到7.6，加入agar至浓度为0.6%，并高压灭菌。
9. YT-plate:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	8 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5，加入agar至浓度为1.5%，并高压灭菌。

10. 制备感受态细胞。

11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2021-02-09 13:06:27

E.coli DH5α Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli DH5α Competent Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9057	E.coli DH5α Competent Cells	100 μl × 10	￥300

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→	→	→	→

■ 制品内容
E.coli DH5α Competent Cells	100 μl × 10
pUC19 plasmid ( 0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Takara在Hanahan's method基础上进行了改良，制备出E.coli DH5α Competent Cells。 E.coli DH5α Competent Cells在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时，利用β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性)，通过蓝白斑方法可以很容易地鉴别重组体菌株。由于菌株无lac l^q，故不需要IPTG。因此，当制作基因文库或进行亚克隆时，可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside

■ 细胞浓度

1 - 2×10⁹ bacteria/ml

■ Genotype

E.coli DH5α : F^-, φ 80dlacZ ΔM15, Δ(lacZYA -argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK^-, mK⁺), phoA, supE44 , λ^-, thi -1, gyrA96 , relA1

■ 保存

-80℃。
注意： -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定，转化效率将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 质量控制

1. 转化效率

转入1 ng 的pUC19，涂于含有Amp⁺ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁸ transformants/μg pUC19

2. β-半乳糖苷酶的α-互补性

当使用pUC19 plasmid进行转化时，含有100 μg/ml Ampicillin和60 μg/ml X-Gal的L-agar plate出现蓝色菌落。

■ 注意事项

1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (BD company Code: 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。

3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度DNA样品不要超过10 ng。否则转化效率会降低。

4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth :	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φ b-broth:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	20 g
	Yeast extract	5 g
	MgSO4·7H2O	5 g
用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。

6. 当加入X-Gal时，按照以下操作进行：

·将 20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml的比例加入到 agar培养基中。

7. DH5α可用于M13mp载体的复制。但由于其不携带F因子，因而不能形成菌斑。

8. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2020-05-22 14:26:31

E. coli MV1184 Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E. coli MV1184 Competent Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9055	E. coli MV1184 Competent Cells	100 μl × 10	￥530

收藏产品加入购物车

■ 制品内容
E. coli MV1184 Competent Cells	100 μl × 10
pUC119 plasmid (0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium 2%		tryptone
0.5%		yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E.coli MV1184 Competent Cells，当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时，转化效率可达1×10⁷ cfu/μg。
E.coli MV1184宿主具有琥珀突变抑制因子，只允许没有发生琥珀突变的载体进行复制，可以用作琥珀突变DNA的选择宿主。同时本宿主含有F’质粒，也可作为M13 phage载体DNA的宿主菌，制备单链DNA。此外，本宿主在使用pUC系列质粒载体或M13 phage载体进行转化或转染时，具有α-互补性，可以通过在培养基中加入X-Gal 和 IPTG进行蓝白筛选。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside

■ 细胞浓度

1-2×10⁹ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli MV1184：ara,△(lac-proAB),rpsL, thi (Φ80lacZ△M15), △(srl-recA) 306::Tn10 (tet ^r) / F’ [traD36, proAB⁺, lac I^q, lacZ△M15]

■ 保存

-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC119 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 转化效率

按照“质粒载体转化”的使用方法，使用1 ng 的pUC119转化到100 μl E. coli MV1184 Competent Cells中，在含有氨苄青霉素的LB平板上筛选，转化效率 : >1 x 10⁷ cfu/μg pUC119

页面更新：2021-02-09 08:46:32

E.coli HST08 Premium Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli HST08 Premium Competent Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9128	E.coli HST08 Premium Competent Cells	100 μl × 10	￥401

收藏产品加入购物车

无标题文档

→	→	→	→

■ 制品内容
E.coli HST08 Premium Competent Cells	100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Takara在Hanahan's method基础上进行了改良，制备出具有很高转化效率的E. coli HST08 Premium Competent Cells。另外，E.coli HST08是mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrA (这些基因是大肠杆菌切除外源甲基化DNA所必需的基因) 缺失的菌株，这使得其可广泛应用于甲基化质粒的制备、基因文库的制作以及亚克隆。当和较大质粒一起使用时，也可维持较高转化效率和菌落生长率^*。10 kb以上长片段DNA克隆和基因文库构建时，可与TaKaRa DNA Ligation Kit LONG (Code No. : 6024) 一起使用，效果很好。
*：与其他相同基因型的感受态细胞相比较。
对于pUC系列质粒，可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性，在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选，以筛选阳性克隆。
X-Gal：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside

■ 细胞浓度

1-2×10⁹ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli HST08 Premium： F^-, endA1 , supE44 , thi -1 , recA1 , relA1, gyrA96 , phoA , Φ80d lacZ ΔM15,Δ(lacZYA - argF)U169 , Δ(mrr - hsdRMS - mcrBC), ΔmcrA , λ^-

■ 保存

-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 质量标准

[1] 转化效率
转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁸ colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时，含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。

■ 注意事项

1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。

3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。

4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，转化效率可能会降低。

·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。

·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O，用1 N KOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。

·L-plates： 10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，使体系终体积为1 L，高压灭菌。

6. 当使用X-Gal 时，按照以下操作进行：

将20 mg /ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml 的比例加入到agar media中。

7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2020-08-07 16:23:37

E.coli HST04 dam-/dcm- Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli HST04 dam^–/dcm^– Competent Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9129	E.coli HST04 dam^–/dcm^– Competent Cells	100 μl × 10	￥407

收藏产品加入购物车

■ 制品内容
E.coli HST04 dam^–/dcm^– Competent Cells	100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Ttryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Takara公司在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出E. coli HST04 dam^–/dcm^– Competent Cells，当用1 ng pUC19转化100 μl细胞时，转化效率＞1×10⁶ cfu/μg。
E.coli HST04 dam^–/dcm^–是甲基化基因dam、dcm缺失的菌株，使DNA不被甲基化。使用本菌株转化所得到的质粒，可以被对dam、dcm甲基化敏感的限制酶切割。
另外，dam、recA双重突变的菌株是致死的，本菌株为recA⁺菌株。因此，易与带有同源序列的外源DNA发生重组。本制品只适用于转化已经构筑好的质粒, 而不适用于常规的克隆转化。

■ 细胞浓度

1-2×10⁹ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli HST04 dam^–/dcm^–： F^–, ara, △(lac-proAB) [Φ80dlacZ△M15], rpsL( str), thi, △(mrr-hsdRMS-mcrBC), △mcrA, dam, dcm

■ 保存

-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 质量标准

转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁶ colonies/μg pUC19 plasmid

■ 注意事项

1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (CORNING Code No. 352059 或 352057,等)，但效率可能会降低。

3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入的高纯度质粒DNA不要超过10 ng。否则转化效率会降低。

4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，适当调整反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，42℃放置60秒而不是45秒。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，转化效率可能会降低。

·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 N NaOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。

·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MaSO4·7H2O，用1 N KOH调整pH到7.5，使体系终体积为1 L，高压灭菌。

·L-plates： 10 g Tryptone，5 g Yeast extract，5 g NaCl/1 L water, 使用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，使体系终体积为1 L，高压灭菌。

6. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2020-12-14 14:12:25

E. coli HB101 Electro-Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E. coli HB101 Electro-Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9021	E. coli HB101 Electro-Cells	50 μl × 10	￥391

收藏产品加入购物车

■ 制品内容
E.coli HB101 Electro-Cells	50 μl × 10
pBR322 plasmid (10 pg/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

E. coli HB101是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜，从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大，尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
E. coli HB101电转细胞可用于制备DNA文库或重组质粒的亚克隆。此电转细胞不能进行蓝白斑筛选。

■ 细胞浓度

>1×10¹⁰ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli HB101：supE44, △(mcrC-mrr), recA13, ara-14, proA2, lacY1, galK2, rpsL20, xyl-5, mtl-1, leuB6, thi-1

■ 保存

-80℃。
注意： -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定，转化降低将会降低。请使用附带的pBR322照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 质量标准

转入10 pg 的pBR322，涂于含有Amp⁺ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >5 x 10⁸ cfu/μg pBR322

■ 注意事项

1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 当使用50 μl Electro-Cells时，添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。

3. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。

4. 导入分子量较大的DNA (＞7 kb) 时，转化效率降低。

5. 使用TE buffer制备DNA样品。DNA样品溶液中高盐浓度可能会降低转化效率。

6. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth :	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
·φ b-broth:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	20 g
	Yeast extract	5 g
	MgSO4·7H2O	5 g
用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。
·L-plates	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，高压灭菌。

7. Electro-Cells一旦解冻，不能再次冻结保存。如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中快速冻结，于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2021-02-08 11:27:50

E.coli HST16CR Competent Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli HST16CR Competent Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9131	E.coli HST16CR Competent Cells	100 μl×10	￥601

收藏产品加入购物车

■ 制品内容
E.coli HST16CR Competent Cells	100 μl × 10
pUC19 plasmid (0.1 ng/μl)	10 μl
SOC media^*	1 ml × 10

*SOC Media: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

感受态细胞是具有摄取外源DNA能力的受体菌，可摄取基因重组质粒等，是转化时的重要工具。Takara在Hanahan’s method基础上进行了改良，制备出的E. coli HST16CR Competent Cells。
E. coli HST16CR Competent Cells是以E. coli HST08 Premium Competent Cells（Code No. 9128）为基础，获得的ColE1 ori的复制相关基因 pcnB缺失的具有高转化效率的菌株。由于pcnB基因的缺失，能够降低pUC系列载体的拷贝数，可有效用于难以克隆的含跨膜结构域蛋白质等、克隆基因对大肠杆菌生长有抑制作用的高拷贝载体克隆。
因为是以E. coli HST08 Premium Competent Cells为基础，缺失外源甲基化DNA的基因群(mrr –mcrBC–hsdRMS )和mcrA，因此可用于甲基化DNA的克隆、基因组文库构建和常规亚克隆。另外，使用pUC系列载体转化时，可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性，在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选，以筛选重组体。
X-Gal：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside

■ 细胞浓度

1-2×10⁹ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli HST16 CR: ： F-, endA1 , supE44 , thi –1, recA 1, relA 1, gyrA 96, phoA ,Φ80d lacZ ΔM15,Δ（ lacZYA – argF ）U169 , Δ ( mrr – hsdRMS – mcrBC ), ΔmcrA ,ΔpcnB, λ^–

■ 保存

-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC19 对照质粒来确认细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 质量标准

[1] 转化效率
转化质粒载体时，转入1 ng 的pUC19 plasmid，涂于Amp⁺ 的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁸ colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 plasmid时，确认含100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。

■ 注意事项

1. 取出所需管数的感受态细胞后，搬运时请置于干冰/乙醇中。

2. 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml 圆底 tubes (BD Code: 352059 或 352057，等)，但效率可能会降低。

3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。增加DNA量转化效率会降低。

4. 当改变感受态细胞使用体积或tube类型时，需要研讨适当的反应条件。例如，当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时，请42℃加热60秒。

5. 可以使用L-broth 或φb-broth替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 M NaOH调整pH到7.5，加水使终体积为1 L，高压灭菌。

·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O，用1 M KOH调整pH到7.5，加水使终体积为1 L，高压灭菌。

·L-plate: 10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl，用1 M NaOH调整pH到7.5，添加agar到1.5%，加水使终体积为1 L，高压灭菌。

6. 当加入X-Gal时，按照以下操作进行：
将 20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml 的比例加入到agar media中。

页面更新：2020-12-14 14:13:02

E.coli JM109 Electro-Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli JM109 Electro-Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9022	E.coli JM109 Electro-Cells	50 μl × 10	￥1,013

收藏产品加入购物车

无标题文档

→	→	→	→

■ 制品内容
E.coli JM109 Electro-Cells	50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜，从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大，尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
由于E. coli JM109 Electro-Cells含有F' 质粒，可以作为M13噬菌体载体的宿主细胞，也可用于制作DNA文库或进行亚克隆。当转化pUC载体或转染M13噬菌体载体DNA时，重组体可以利用电转化细胞的β-半乳糖苷酶的α-互补性，通过添加X-Gal和IPTG很容易地筛选出来。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
IPTG : Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside

■ 细胞浓度

>1×10¹⁰ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli JM109： recA1 , endA1 , gyrA96 , thi -1 , hsdR17 (rk-mk⁺), e14-(mcrA^- ) supE44 , relA1 , Δ (lac-proAB )/F'[traD36 , proAB⁺, lacI^q, lacZ ΔM15]

■ 保存

-80℃。
注意： -80℃或更低温度下保存。如果保存温度不能恒定，转化降低将会降低。请使用附带的pUC19 对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 质量标准

转入10 pg 的pUC19，涂于含有Amp⁺ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁹ cfu/μg pUC19

■ 注意事项

1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 当使用50 μl Electro-Cells时，添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。

3. 导入分子量较大的DNA (＞7 kb) 时，转化效率降低。

4. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth :	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH7.5并高压灭菌。
·φ b-broth:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	20 g
	Yeast extract	5 g
	MgSO4·7H2O	5 g
用1 N KOH调整pH7.5并高压灭菌。

6. 稀释时，使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。

7. YT soft agar:	Ingredient	per 100 ml water
	Tryptone	0.8 g
	Yeast extract	0.5 g
	NaCl	0.5 g
用1 N NaOH调整pH7.6，添加agar至浓度为0.6%，高压灭菌。
8. 制备感受态细胞。当DNA插入M13噬菌体载体克隆位点时，重组体可通过在YT-soft agar添加X-Gal 和IPTG进行筛选，因为非重组体存在于蓝斑中。
9. YT-plate:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	8 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH7.6，添加agar至浓度为1.5%，高压灭菌。

10. 当加入X-Gal或IPTG时，按照以下方法操作：

·加入100 mM IPTG，100 μl-300μl IPTG/100 ml agar medium 和 25 μl IPTG /3 ml soft agar。

·加入20 mg/ml X-Gal（溶解于二甲基甲酰胺）到agar medium中，比例为200 μl-300 μl /100 ml。若使用 soft agar，比例为50 μl/3 ml。

11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中快速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2021-03-12 11:49:46

E.coli DH5α Electro-Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli DH5α Electro-Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9027	E.coli DH5α Electro-Cells	50 μl × 10	￥433

收藏产品加入购物车

无标题文档

→	→	→	→

■ 制品内容
E.coli DH5α Electro-Cells	50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

E. coli DH5α Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜，从而使外源DNA转入宿主细胞的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大，尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。
E.coli DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时，利用β-半乳糖苷酶活性 (α-互补性) ，应用蓝白斑方法可以很容易鉴别重组体菌株。由于菌株无lacl ^q，故不需要IPTG。因此，当制作基因文库或进行亚克隆时，可以使用X-Gal筛选重组DNA或重组质粒。
X-Gal : 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside

■ 细胞浓度

>1×10¹⁰ bacteria/ml

■ Genotype

E. coli DH5α：F-, φ80dlacZ Δ M15, Δ ( lacZYA -argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK^-, mK⁺), phoA , supE44 , λ^-, thi -1 , gyrA96 , relA1

■ 保存

■ 质量标准

1. 转化效率
转入10 pg 的pUC19，涂于含有A⁺ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁹ transformants /μg pUC19
2. β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时，含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-琼脂平板上出现蓝色菌落。

■ 注意事项

1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 当使用50 μl Electro-Cells时，添加不多于10 ng的高纯度样品DNA。否则会降低转化效率。

3. 导入分子量较大的DNA (＞7 kb) 时，转化效率降低。

4. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth: Ingredient		per liter water
Tryptone		10 g
Yeast extract		5 g
NaCl		5 g

用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。

·φb-broth: Ingredient		per liter water
Tryptone		20 g
Yeast extract		5 g
MgSO4·7H2O		5 g

用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。

6. 稀释时，使用“使用方法4”中加入的SOC培养基。

7. 当使用X-Gal时：

·将20 mg/ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200～300 μl/100 ml的比例加入到agar medium中。

8. DH5α可作为M13mp载体的复制。但由于不携带F因子，因而不能形成菌斑。

9. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2020-04-30 14:30:57

E.coli HST08 Premium Electro-Cells酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli HST08 Premium Electro-Cells
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9028	E.coli HST08 Premium Electro-Cells	50 μl × 10	￥636

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■ 制品内容
E.coli HST08 Premium Electro-Cells	50 μl × 10
pUC19 plasmid ( 10 pg/μl)	10 μl
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

E. coli HST08 Premium Electro-Cells是Takara Bio特别制备的适用于电穿孔法的制品。用高电压脉冲电流瞬间击穿细胞的细胞质膜，从而使外源DNA转入宿主细胞内的转化方法称为电穿孔法。通过此种方法制备的感受态细胞转化效率高、产量大，尤其适合在短时间内将少量样品转入大肠杆菌内。 E.coli HST08是mrr, hsdRMS, mcrBC, mcrA缺失的菌株，这使得其可广泛应用于甲基化质粒的制备、基因文库的制作以及BAC文库的构建。即便转化较大的质粒，也可维持较高的转化效率和菌落生长率^*。10 kb以上长片段DNA克隆和构建基因文库时，可与Takara DNA Ligation Kit LONG (Code No. : 6024) 一起使用，效果很好。
*：与其他相同基因型的感受态细胞相比较。
对于pUC系列质粒，可通过β-半乳糖苷酶的α-互补性，在培养基中添加X-gal进行蓝白筛选，以筛选阳性克隆。
X-Gal：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside

■ 细胞浓度

>1×10¹⁰ bacteria/ml

■ Genotype

■ 保存

■ 质量标准

[1] 转化效率
转入10 pg 的pUC19，涂于含有ampicillin的L-plate进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁹ colonies/μg pUC19 plasmid
[2] β-半乳糖苷酶的α-互补性
转化pUC19 DNA时，含有100 μg/ml ampicilin 和 60 μg/ml X-Gal的L-agar plate上出现蓝色菌落。

■ 注意事项

1. 将Electro-Cells从-80℃取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 当使用50 μl Electro-Cells时，高纯度样品DNA添加量不要超过10 ng，否则会降低转化效率。

3. 当使用50 μl Electro-cells时，DNA溶液添加量不要超过5 μl，否则会降低转化效率。

4. 当改变实验规模时，适当改变反应条件。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基，但转化效率会降低。

·L-broth：10 g Tryptone, 5 g Yeast extract, 5 g NaCl/1 L water，用1 N NaOH调整pH7.5左右并高压灭菌。

·φ b-broth：5 g Yeast extract, 20 g Tryptone, 5 g MgSO4·7H2O/1 L water，用1 N KOH调整pH7.5左右并高压灭菌。

6. 当使用X-Gal时，按照以下操作进行：

·将20 mg /ml X-Gal (溶解于二甲基甲酰胺) 按200-300 μl/100 ml的比例加入到agar media中。

页面更新：2020-12-31 12:14:07

E.coli DNA Ligase酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

E.coli DNA Ligase
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	2161	E.coli DNA Ligase	1,000 U	￥161

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■ 制品内容

Code No.: 2161
E.coli DNA Ligase (60 U/μl)	1,000 Units
10X E.coli DNA Ligase Buffer	100 μl
10X BSA (0.05%)^*	100 μl
* BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

■ 制品说明

本酶催化相邻DNA链的5′-P末端和3′-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，与T4 DNA Ligase作用相同。分子量为77,000，最适反应pH为7.5-8.0 (Tris-HCl buffer)。反应需NAD作辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。与T4 DNA Ligase能将DNA的5′-P末端与RNA的3′-OH以及RNA的5′-P末端与DNA的3′-OH连接不同，本酶不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接。

■ 保存

-20℃。

■ 起源

Escherichia coli UT481 carrying the plasmid encoding the ligase

■ 活性定义

在20 μl的连接反应体系中，6 μg的λ DNA-Hind III在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位 (U)。

■ 用途

Okayama-Berg法克隆cDNA，实验操作中酶的用量约为50 units。

■ 使用注意

本酶由大肠杆菌克隆体精制而成，杂质很少，是纯度很高的制品。因此，即便是高浓度制品，大量使用也完全没有问题。

页面更新：2019-03-07 16:23:00

Alkaline Phosphatase (E.coli C75)酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

Alkaline Phosphatase (E.coli C75)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	2120A	Alkaline Phosphatase (E.coli C75)	50 U	￥437
Takara	2120B(A × 5)	Alkaline Phosphatase (E.coli C75)	50 U × 5	￥2,067

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■ 制品内容

Alkaline Phosphatase (0.5 U/μl)	50 U
10X Alkaline Phosphatase Buffer	1 ml

■ 制品说明

本酶催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯及磷酸三酯的水解。
这种酶也能催化ATP等焦磷酸键的水解。

■ 保存

-20℃。

■ 起源

Escherichia coli C75

■ 活性定义

在25℃、pH8.0的条件下，1分钟内水解对硝基苯磷酸盐 (p-nitrophenyl phosphate) 生成1 μmol的对硝基苯酚 (p-nitrophenol) 所需的酶量定义为1个活性单位 (unit)。

■ 用途

1. 在用³²P标记5′-末端之前，去除RNA或DNA的5′-末端的磷酸基。
2. 去除载体DNA片段的5′-末端磷酸基，便于T4 DNA Ligase连接反应。

■ 使用注意

本酶是一种稳定性很高、反应需要Zn²⁺。在螯合剂存在的条件下，100℃加热可暂时性失活，但由于恢复至室温时酶活性可以恢复，因此必须进行苯酚处理，才能使其完全失活。本酶合适pH在8.0附近，Tris等醇类化合物可使其活性提高。

页面更新：2019-03-07 16:01:38

DNA Polymerase I (E. coli)酶试剂盒Takara

发表于2024年1月8日由whatman中国官网

DNA Polymerase I (E. coli)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	2130A	DNA Polymerase I (E. coli)	500 U	￥261
Takara	2130B (A × 5)	DNA Polymerase I (E. coli)	500 U × 5	￥1,172

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■ 制品内容

DNA Polymerase I (5 U/μl)	500 U
10X E.coli DNA Polymerase I Buffer	1 ml

■ 制品说明

DNA Polymerase I 在模板和引物 (DNA或RNA) 存在的条件下，以dNTP作底物，沿5′→3′方向合成与模板互补的DNA。本酶分子量约为109,000，具有双链特异性的5′→3′外切核酸酶活性以及单链特异性的3′→5′外切核酸酶的活性。本酶是由带有编码E.coli DNA Polymerase I基因的大肠杆菌精制而成的。

■ 保存

-20℃。

■ 起源

Escherichia coli carrying the plasmid which encodes the gene of Pol I.

■ 活性定义

以合成的Poly d (A-T) DNA为模板/引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10 nmol 的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。

■ 用途

1. 与DNase I (Code No. 2270A/B) 一起使用，进行切口平移 (Nick translation)。
2. 通过Okayama-Berg法合成cDNA的第二条链 (0.3 μg DNA Polymerase I 约为2.5 units)。

■ 使用注意

1. 本酶稀释也不失活，但剧烈搅拌会使酶失活。
2. 不含内切酶活性，单独使用不表现切口平移活性。
3. 由于同DNA有较强的亲和性，过量使用易发生凝集作用 (Aggregation)，会使反应不能充分进行。

页面更新：2019-11-14 15:00:17

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