Enzyme Set A酶试剂盒Takara


Enzyme Set A
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Takara 6604 Enzyme Set A 50 Rxns ¥1,202 Enzyme Set A Enzyme Set A Enzyme Set A
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■ 制品内容
Acc 100 U × 3 (Code No.: 1001A×3)
Afa 1,000 U (Code No.: 1116A)
BmeT110Ⅰ (Ava I) 500 U (Code No.: 1207A)
VpaK11BⅠ(Ava II) 300 U (Code No.: 1196A)
Bgl 2,000 U (Code No.: 1021A)
 
■ 制品说明
本制品与TaKaRa PCR Human Papillomavirus Typing Set (Code No.: 6603) 配合使用。
 
■ 保存
-20℃。
 
 

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Xfect 小鼠胚胎干细胞转染试剂酶试剂盒Takara


Xfect 小鼠胚胎干细胞转染试剂
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631320 Xfect mESC Transfection Reagent 100 Rxns ¥3,459 Xfect 小鼠胚胎干细胞转染试剂 Xfect 小鼠胚胎干细胞转染试剂 Xfect 小鼠胚胎干细胞转染试剂
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Code No. 产品名称
631320   Xfect mESC Transfection Reagent
 
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逆转录病毒浓缩酶试剂盒Takara


逆转录病毒浓缩
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631455 Retro-X Concentrator 100 ml ¥2,892 逆转录病毒浓缩 逆转录病毒浓缩 逆转录病毒浓缩
Clontech 631456 Retro-X Concentrator 500 ml ¥10,005 逆转录病毒浓缩 逆转录病毒浓缩 逆转录病毒浓缩
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Code No. 产品名称
631455   Retro-X Concentrator
631456   Retro-X Concentrator
 
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腺病毒早期检测酶试剂盒Takara


腺病毒早期检测
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 632270 Adeno-X GoStix 20 Tests ¥4,794 腺病毒早期检测 腺病毒早期检测 腺病毒早期检测
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Code No. 产品名称
632270   Adeno-X GoStix
 
产品详情请点击:腺病毒早期检测
 
 

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c-Myc琼脂糖珠酶试剂盒Takara


c-Myc琼脂糖珠
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631208 c-Myc Monoclonal Antibody-Agarose Beads 1 ml ¥7,100 c-Myc琼脂糖珠 c-Myc琼脂糖珠 c-Myc琼脂糖珠
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Code No. 产品名称
631208   c-Myc Monoclonal Antibody-Agarose Beads
 
■ 产品描述
本制品是将能够识别c-Myc标签(人p62-c-Myc蛋白质410-419部分)的单克隆anti-c-Myc抗体(Clone 9E10)交联到固定化proteinA琼脂糖珠的产品。可以用来从细胞裂解液中纯化或免疫沉淀融合了c-Myc标签的蛋白质。琼脂糖珠上交联的抗体量>0.5 mg/ml。
 
■ 应用
Myc标签蛋白质小量纯化
 
■ 实验例
 
c-Myc琼脂糖珠
使用c-Myc单克隆抗体进行免疫共沉淀检测。在HEK293细胞中共表达以GFP变异体为标签的Max蛋白质和带有c-Myc标签的Myc蛋白质,然后使用anti-GFP抗体(泳道2)或anti-Myc 抗体(泳道4)进行免疫沉淀反应,再使用anti-Myc抗体进行Western Blotting检测。泳道2显示Myc蛋白质能够被Max蛋白质pull down。泳道4显示c-Myc单克隆抗体能够有效的pull down Myc蛋白质。泳道1和3是对照。
 
 
产品详情请点击:c-Myc琼脂糖珠
 
 

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糖蛋白富集 & 检测酶试剂盒Takara


糖蛋白富集 & 检测
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635647 Glycoprotein Enrichment Resin 10 ml ¥3,163 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测
Clontech 635648 Glycoprotein Western Detection Kit 20 Rxns ¥2,442 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测 糖蛋白富集 & 检测
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Code No. 产品名称
635647   Glycoprotein Enrichment Resin
635648   Glycoprotein Western Detection Kit
 
■ 产品描述
Glycoprotein Enrichment Resin用于从血清当中富集糖基化蛋白质,在蛋白质组学研究中能够显著降低样品的复杂性。这种苯基硼酸类的树脂,可以在90 min内富集糖基化蛋白质,产品包装形式灵活,可用于重力流或FPLC纯化。
 
Glycoprotein Western Detection Kit是Glycoprotein Enrichment Resin的辅助产品,用于在Western Blotting实验中对糖基化蛋白质选择性染色。试剂盒使用的是一种改良的过碘酸希夫法,对糖基化蛋白质的碳水化合物部分进行染色,产生有色条带。过碘酸希夫试剂针对的是存在于糖和唾液酸中相邻的二醇基,通常用作一般的糖蛋白染色剂。因此,本试剂盒的检测不依赖抗体,可以快速、灵敏地检测富集的糖蛋白。
 
■ 原理
 
糖蛋白富集 & 检测
Glycoprotein Enrichment Resin是一种硼酸基树脂,能够从复杂样品(例如人血清)中快速、有效、特异性地富集糖基化蛋白质,可以使用简单的重力流方法或中等压力的方法(例如FPLC)进行操作。树脂是偶联了间氨基苯硼酸配体的琼脂糖珠,该配体能够结合存在于糖蛋白分子糖部分内的残基如甘露糖、半乳糖或葡萄糖,与这些糖残基的顺式二醇基团形成可逆的五元环络合物。这种复合物可通过降低pH,或使用含Tris或山梨糖醇的洗脱buffer使其分离。
 
■ 产品特点
灵活、有效、特异性的富集和检测糖基化蛋白质。
· 灵活——使用本树脂可以应用重力流法或FPLC法
· 性能出色——本树脂特异性结合糖蛋白能力更强,而非特异性结合很弱
· 特异性——本树脂对血清中的高、低丰度糖蛋白均能够有效富集
· 快速——90 min内即可完成糖蛋白的富集
· Western Detection Kit可提供快速(1 hr)、灵敏、特异性的不依赖抗体的检测
 
■ 应用
糖蛋白的富集和检测
 
■ 实验例
 
糖蛋白富集 & 检测
通过Western Blotting对Glycoprotein Enrichment Resin纯化产物进行分析,结果显示,该树脂特异性地富集了高丰度和低丰度的血清糖蛋白。图A.使用IgG抗体检测到特异性富集的高丰度血清糖蛋白IgG,lane 1是人血清,lane 2是流穿液,lane 3是洗脱液(糖蛋白)。图B和C是通过Western Blotting对纯化得到的两种特异性的低丰度血清糖蛋白α-1酸性糖蛋白(图B)和α-1抗胰蛋白酶(图C)进行检测的结果,lane 1是人血清,lane 2是洗脱组分,lane 3是洗脱组分。
 
 
 
产品详情请点击:糖蛋白富集 & 检测
 
 

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杆状病毒表达系统酶试剂盒Takara


杆状病毒表达系统
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631401 BacPAK6 DNA (Bsu36 I digest) 5 Transfections ¥6,798 杆状病毒表达系统 杆状病毒表达系统
Clontech 631721 X-GLUC 100 mg ¥5,354 杆状病毒表达系统 杆状病毒表达系统
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Code No. 产品名称
631401   BacPAK6 DNA (Bsu36 I digest)
631721   X-GLUC
 
产品介绍
    与细菌表达系统相比,在昆虫细胞中产生的重组蛋白质的翻译后加工和折叠更类似于哺乳动物过程,有功能的目的蛋白质的产量通常要大得多。因此,为了生产大量的重组蛋白质,许多研究者已经转向杆状病毒表达系统。
 
BacPAK法
    BacPAK系统采用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)在昆虫细胞中表达目标蛋白质。首先把目的基因插入到穿梭载体中,然后与线性化的BacPAK6病毒DNA共转染至昆虫宿主细胞。这个特殊设计的BacPAK6病毒DNA能够迫使病毒和载体之间发生重组,实现高的重组效率。重组之后挑选并纯化几个噬菌斑,验证重组表型。新分离得到的重组病毒就可以扩增并且感染昆虫细胞产生大量的目的蛋白质。
    如有需要,可以使用产品附带的pBacPAK8-GUS作为共转染步骤的阳性对照。该载体具有大肠杆菌β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS),克隆在多角体蛋白质启动子的下游。pBacPAK8-GUS与BacPAK6病毒DNA重组后能够表达β-葡糖苷酸酶,该酶可催化底物X-GLUC显现蓝色。
 
产品特点
    ● 每L培养基表达的蛋白质量最高可达500 mg
    ● 重组效率>90%
    ● 蛋白质折叠正确
    ● 可以有效表达具有生物活性的蛋白质
    ● 真核蛋白质的翻译后修饰
 
产品应用
在昆虫细胞中表达重组蛋白质
 
BacPAK6 Viral DNA 图谱
杆状病毒表达系统
 
操作流程示意图
杆状病毒表达系统
In-Fusion Ready BacPAK载体和杆状病毒表达系统。将含有目的基因的PCR片段直接克隆到In-Fusion Ready BacPAK载体以构建N末端或C末端蛋白质的表达载体。将验证过的克隆与BacPAK6病毒DNA共转染至昆虫细胞中,通过AcMNPV序列二者进行重组,被感染的昆虫细胞就会随着病毒的扩增而产生重组蛋白质,最后使用TALON技术对其进行纯化。
 
实验例1
杆状病毒表达系统
使用表达水母绿色荧光蛋白质(AcGFP1)的重组杆状病毒载体感染昆虫细胞。使用In-Fusion Ready BacPAK载体构建重组杆状病毒,用以表达带有N末端标签的AcGFP1。被感染的Sf9细胞能够表达高水平的AcGFP1并发出强烈的荧光,流式细胞术的检测结果显示,被感染细胞的平均荧光强度是未感染对照组的约440倍。
 
实验例2
杆状病毒表达系统
使用BacPAK杆状病毒表达系统生产重组病毒制备蛋白质。通过共转染载体和BacPAK6病毒DNA (Bsu36 I消化)产生重组病毒,然后在Sf21细胞中进行扩增。感染48 hr后裂解细胞进行SDS PAGE检测。
泳道1:未被感染的Sf21细胞
泳道2:野生型AcMNPV病毒感染的Sf21细胞
泳道3:未重组BacPAK6病毒感染的Sf21细胞
泳道4:BacPAK8-GUS重组病毒感染的Sf21细胞
泳道5:纯化的CAT蛋白质
泳道6:BacPAK8-CAT重组病毒感染的Sf21细胞
泳道M:分子量marker
 
产品详情请点击:杆状病毒表达系统
 
 

页面更新:2019-11-11 14:55:28

HAT-标签酶试剂盒Takara


HAT-标签
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631205 HAT Protein Expression and Purification System 1 Set ¥8,518 HAT-标签 HAT-标签 HAT-标签
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Code No. 产品名称
631205   HAT Protein Expression & Purification System
 
■ 产品介绍
    HAT(组氨酸亲和标签)蛋白质表达和纯化系统为蛋白质表达和纯化提供了方便且有效的解决方案。
    HAT载体编码一种新的多聚组氨酸表位标签,这种标签可以使细菌中表达的蛋白质在中性或生理pH、变性或非变性条件下进行纯化。
 
HAT系统
    HAT表位是天然存在的非相邻组氨酸残基序列,其总电荷比具有连续His残基标签的低。
    HAT融合蛋白质的溶解度更接近野生型蛋白质,同时对固定化金属离子仍具有很强的亲合力,使用HAT系统纯化蛋白质有两个主要优点:
    ● 蛋白质是可溶的,因此它不会形成聚集体或包涵体
    ● 蛋白质可以在温和条件(例如中性pH或低咪唑浓度)下洗脱
    使用TALON树脂纯化pHAT载体表达的蛋白质是一种很好的选择,搭配分批法、重力流法或者使用TALON superflow树脂搭配中压的FPLC纯化。TALON树脂的钴离子对HAT以及其他的多聚组氨酸标签蛋白质有很强的亲和力,对其他蛋白质的亲和性很低。TALON树脂理想的选择特异性降低了背景,洗涤的步骤较少并且为中性,因此能够非常好的保持蛋白质的完整性。
 
pHAT载体
    HAT系统包含3种pHAT载体——pHAT10/11/12,三者结构相同,只是多克隆位点处的阅读框稍有不同。每个载体都有肠激酶(EK)切割位点,用来将纯化的蛋白质的HAT序列除去。 限制性酶切位点的存在是为了可以将HAT序列切除(带或不带EK位点),以便于克隆至其他载体。
    单独提供的pHAT20载体,具备pHAT10/11/12的所有优点,并且提供额外的克隆位点,使用方便,更容易将您的cDNA框与HAT序列融合。
 
产品特点
● 在中性pH下纯化蛋白质
● 在变性或非变性条件下使用
● 蛋白质溶解度更高
● 用TALON IMAC树脂可以得到优化的纯化产物
 
应用
在细菌系统中更容易表达和纯化蛋白质,并且蛋白质溶解度更高。
 
实验例
HAT-标签
FPLC方法纯化HAT标签蛋白质。使用组分为50 mM sodium phosphate,0.3 M NaCl,5 mM imidazole,pH7.0的buffer破碎E. coli细胞提取蛋白质并纯化,最终以150 mM imidazole进行洗脱。
图A. 使用TALON Superflow柱对细胞裂解液进行纯化
图B. SDS-PAGE 分析
 M: 分子量marker
 
6xHis、6xHN和HAT标签的氨基酸序列
HAT-标签
 
产品详情请点击:HAT-标签
 

页面更新:2019-11-11 14:47:08

Aureobasidin A酶试剂盒Takara


Aureobasidin A
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 630466 Aureobasidin A 1 mg ¥2,373
¥1,898
Aureobasidin A Aureobasidin A Aureobasidin A
Clontech 630499 Aureobasidin A 10 mg ¥6,135
¥4,908
Aureobasidin A Aureobasidin A Aureobasidin A

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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Code No. 产品名称
630466   Aureobasidin A
630499   Aureobasidin A
 
■ 制品说明
Aureobasidin A
Aureobasidin A (AbA)是从丝状真菌Aureobasidium pullulans R106中分离的一种环状缩肽抗生素,在较低浓度下(0.1–0.5 μg/ml)即可对酵母产生毒性。对其敏感的真菌种类包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(A. niger)
AbA抑制酵母中AUR1基因(1,2)编码的肌醇磷脂酰胺(inositol phosphorylceramide ,IPC)合成酶的活性,突变基因AUR1-C的表达使转化酵母对AbA产生了抗性。Matchmaker Gold系统用这个基因作为蛋白质互作研究的报告基因。
AbA筛选大大消除了仅用营养报告基因(如HIS3)进行低严紧度初筛时产生的背景克隆。由于AbA可以直接杀死敏感的酵母菌株,而不是使菌株生长延迟,所以基于AbA的筛选有利于阳性克隆的生长和识别。一般实际操作中,用AbA进行低严紧度初筛时会获得很多克隆,之后再用Matchmaker Gold系统中的4个报告子(AUR1-C,HIS3ADE2 和MEL1)进行高严紧度的二次筛选以验证阳性克隆。
 
■ 制品特点
1. 用于酵母的严紧药物筛选标记
2. AbA抗性是酵母双杂交研究中理想的报告子
3. 筛选结果适用于Matchmaker Gold酵母单杂交和双杂交系统
 
■ 制品用途
1. 酵母双杂交研究
2. 酵母单杂交研究
 
■ 属性
1. 分子量:1100 Da
2. 不溶于水
 
■ 文献
1. Takesako, K. et al. (1993) J. Antibiot. (Tokyo) 46(9):1414–20.
2. Hashida-Okado, T. et al. (1996) Mol. Gen. Genet251(2):236–244.
 
 
产品详情请点击:Aureobasidin A
 
 

页面更新:2019-11-11 13:09:38

T载体+连接试剂盒的促销专属套装酶试剂盒Takara


T载体+连接试剂盒的促销专属套装
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3271-C1 T-Vector pMD™ 19 (Simple)+ DNA Ligation Kit Ver.2.1 1.0 μg*2+30次 ¥1,020
¥510
T载体+连接试剂盒的促销专属套装 T载体+连接试剂盒的促销专属套装 T载体+连接试剂盒的促销专属套装

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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3271-C1是T载体+连接试剂促销专属套装,包括2个T-Vector pMD19 (Simple)(Code No. 3271)和1个DNA Ligation Kit Ver.2.1(Code No. 6022Q)
 
■ 制品内容
T-Vector pMD19 (Simple)(Code No. 3271)
T Vector pMD 19 (Simple) (50 ng/μl) 20 μl
Control Insert (50 ng/μl) 10 μl
 
DNA Ligation Kit Ver.2.1(Code No. 6022Q)
Solution Ⅰ:Enzyme Solution 250 μl
Solution Ⅱ:Concatenation Buffer 750 μl
Solution III:Transformation Enhancer 200 μl
* 如果每次使用 7.5 μl Solution I,可反应 30 次。
 
■ 制品说明
T-Vector pMD19 (Simple) 是两侧的3’端添加了“T”的线性化载体,因大部分耐热性DNA聚合酶进行PCR反应时都有在PCR 产物的3’末端添加一个“A”的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR产物的连接、克隆效率。本载体尽管消除了LacZ基因上的多克隆酶切位点,但不影响β-半乳糖苷酶的正常表达,因此,PCR产物克隆后仍可以利用α-互补性进行蓝白菌落的筛选,挑选阳性克隆。由于本载体上消除了多克隆酶切位点,克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。本制品中的Control Insert (500 bp) 还可以用于Control反应。
DNA Ligation Kit Ver.2.1是用于快速DNA连接反应的简易系统。在本试剂进行连接反应时,只需要加入一种包含T4 DNA Ligase和最适buffer的酶溶液,终反应液体积小。因为反应高效,大多数连接反应只需3分钟,较难的反应也可在30分钟内完成。
转化之前在连接混合液中加入Solution III(转化增强剂)有助于提高转化效率。如果目的DNA含量低或预期的连接效率较低,建议使用Solution III。连接反应液不必经过DNA纯化,可直接用于细菌的转化。
 
■ 保存
-20℃。
6022Q中的Solution Ⅲ融化后室温保存,如果产生沉淀,可涡旋数分钟溶解。
 
 

页面更新:2022-09-02 08:14:56

Yatalase酶试剂盒Takara


Yatalase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
OZK T017 Yatalase 2 g ¥2,535 Yatalase Yatalase Yatalase
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■ 制品说明
本制品是从Corynebacterium sp. OZ-21培养上清液中制备而来的复合酶。
◇ 具有良好的热稳定性
◇ 具有Chitinase、Chitobiase酶活性
◇ 可制备丝状真菌的原生质体
对于一些难处理的黑曲霉等丝状真菌,建议使用Yatalase -Plus-(Code No. T030)
 
■ 保存
4℃,干燥条件。
 
■ 形态
干粉(含乳糖作为辅料)
 
■ 酶活性
Chitinase活性: 50 U/g powder 以上
Chitobiase活性:500 U/g powder 以上
细胞壁溶解活性: 约10,000 U/g powder
 
■ 起源
Corynebacterium sp. OZ-21
 
■ Chitinase活性测定
活性定义:在下述条件下,1分钟释放1 μmol的游离N –Acetylglucosamine所需要的酶量定义为1 U。
测定方法:
试剂A:醋酸缓冲液
  在90 ml 蒸馏水中溶解0.82 g的醋酸钠。在溶液中逐次少量加入醋酸调节pH至6.0。定容至100 ml,该溶液即为0.1 M醋酸缓冲液。
试剂B:基质液
  在A液中加入0.5%的Chitin制成基质液。
试剂C:酶液
  加蒸馏水溶解使其终浓度为0.8 mg/ml。
操作步骤
1. 在L型实验管中加入1 ml 试剂B,37℃孵育5~10分钟。
2. 添加0.2 ml试剂C后,37℃轻柔振荡反应1小时。
3. 加热失活(煮沸5分钟)后,3,000 rpm离心10分钟,通过Reissig法测定上清中的N-Acetylglucosamine的量。
4. 通过标准曲线计算出酶反应释放的游离N-Acetylglucosamine量。
 
■ Chitobiase活性测定
活性定义:在下述条件下,1分钟释放1 μmol游离的p-Nitrophenol所需的酶活性定义为1 U。
测定方法:
试剂A:MclLvaine缓冲液
  0.1 M柠檬酸(柠檬酸2.1 g溶解于蒸馏水中定容至100 ml)中加入0.2 M磷酸氢二钠溶液(十二水合磷酸氢二钠10.74 g溶解于蒸馏水中定容至150 ml)并调整pH为6.0。
试剂B:基质液
  将8.56 mg p-Nitrophenyl-N-acetyl-β-D-glucosaminide 添加到5.0 ml A液中使其溶解。
试剂C:酶液
  加蒸馏水溶解使其终浓度为0.8 mg/ml。
试剂D:反应停止液
  碳酸钠(无水)2.65 g 加蒸馏水溶解后定容至100 ml。
 
操作步骤
1. L型反应管中添加0.75 ml试剂A和0.2 ml试剂B,37℃孵育5~10分钟。
2. 加入50 μl试剂C,迅速将反应管混匀后开始反应。
3. 10分钟轻柔振荡后,添加2.0 ml试剂D,迅速混匀后,在405 nm测定吸光度。
4. 通过标准曲线计算酶反应释放出的游离p-Nitrophenol的量。
 
■ 细胞壁溶解活性测定
活性定义:在下述条件下,1小时内引起溶液于660 nm处吸光度减少1%时所需的酶量定义为1 U。
测定方法:
试剂A:基质液
  收集Aspergillus oryzae菌体(Dextrin-Peptone培养基,25~30℃培养1-2天)并使用Waring搅拌器匀浆(16,000 rpm,3 min)。之后使用French press(弗氏压碎器)将菌体压成碎片,在滤纸上充分水洗后,再使用丙酮和乙醚洗涤。风干沉淀后添加0.1 M醋酸缓冲液(pH6.0)将其溶解成终浓度为0.125%(w/v)的悬浊液,此为基质液。
试剂B:酶液
  加蒸馏水溶解使其终浓度为0.8 mg/ml。
 
操作步骤
1. 反应管中加入4 ml试剂A。
2. 添加1 ml 试剂B后,迅速混匀,于37℃轻柔振荡培养1小时。
3. 迅速检测660 nm波长下溶液的吸光度。
 
■ 一般性质
最适pH : pH7.2
最适温度 : 37℃
 
Yatalase
 
表1:各种酶活性
活性(U/g powder)
Chitinase >50
Chitobiase >500
Chitosanase* 19
β-1,3-Glucanase* 300
Protease* 31
细胞壁溶解活性 10,000
* Chitosanase、β-1,3-Glucanase、Protease的值为代表性的样品值,不是标准值。
 
本制品由Ozeki corporation制造。
 
 

页面更新:2020-10-20 16:34:19