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DNA Blunting Kit酶试剂盒Takara

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DNA Blunting Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6025 DNA Blunting Kit 20 Rxns ￥741 DNA Blunting Kit DNA Blunting Kit DNA Blunting Kit
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■ 制品内容 (20 次量)
T4 DNA Polymerase 20 μl
10×Buffer (含dNTP) 30 μl
DNA Dilution Buffer 500 μl
  (100 mM Tris-HCl < pH7.6，16℃> ,5 mM MgCl2)
Ligation Solution A* 600 μl × 2
Ligation Solution B* 150 μl
   
*：Ligation solution A和B与DNA Ligation Kit Ver.1 (Code No.：6021) 通用。
 
■ 制品说明
DNA Blunting Kit可使具有3’或5’突出末端的DNA平滑化。在T4 DNA Polymerase 5’→3’的聚合酶活性和3’→5’的外切酶活性的作用下，两种不同形式的粘性末端可被同时平滑化。再使用本试剂盒中的连接液即可高效地将得到的平末端DNA与平末端载体相连。并且反应液不需纯化，可以直接用于细菌转化和体外包装等。
本试剂盒也可将载体DNA的末端平滑化。经平滑化后的载体DNA再进行去磷酸化后使用。
很多PCR产物都含有3’-dA末端，因而不能有效连入载体。如果使用本试剂盒将此类PCR产物末端平滑化，再根据实际情况进行磷酸化处理，就可以有效地连入平末端载体。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ DNA末端平滑化原理
DNA Blunting Kit
 
■ 使用注意
1. 本试剂盒可使具有去磷酸化的5’突出末端的DNA末端平滑，但不能使磷酸化的3’凹陷末端的DNA末端平滑。在鸟枪法克隆时，应注意超声波分解的DNA片段，可能会产生具有磷酸化的3’凹陷末端的DNA片段。
2. Ligation Solution A和B置于冰中融解，使用前快速混匀。
3. 做细菌转化时，连接液不需要做苯酚抽提便可直接使用。如果有必要浓缩，可用乙醇沉淀法精制DNA。
 
 

页面更新：2020-04-28 11:38:13

Blunting Kination Ligation (BKL) Kit酶试剂盒Takara

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Blunting Kination Ligation (BKL) Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 6127A Blunting Kination Ligation (BKL) Kit 24 Rxns ￥841
￥673 		Blunting Kination Ligation (BKL) Kit Blunting Kination Ligation (BKL) Kit Blunting Kination Ligation (BKL) Kit

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 制品内容 (24 次量)
10X Blunting Kination Buffer 50 μl
Blunting Kination Enzyme Mix 25 μl
Ligation Solution I*1 150 μl
Control Vector (pUC118-Hinc II /BAP; 50 ng/μl) 5 μl
Control Insert (200 ng/μl)*2 10 μl
ddH2O 500 μl
 
*1 Ligation Solution I 即为DNA Ligation Kit Ver.2.1的一种组份。
*2 以λ DNA为模板，通过TaKaRa Taq反应扩增的500 bp的PCR片段。
 
■ 制品说明
Blunting Kination Ligation (BKL) Kit是一种能使DNA片段的末端平滑化、5’端的磷酸化、DNA片段和载体的连接等诸反应高效快速完成的试剂盒。使用本试剂盒时，DNA片段的末端平滑化反应和5’端的磷酸化反应可在一个反应体系中同时进行，反应时间只需10分钟。此外，本试剂盒中还含有高效的DNA连接液，可在短时间内完成连接反应。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ Takara BKL Kit原理
 
Blunting Kination Ligation (BKL) Kit
 
■ 注意事项
1. Ligation Solution I 请于冰中融解，使用前混匀。应避免多次反复冻融。
2. 连接转化效率低时，请试用下述方法进行改进。
① 确认感受态细胞的转化效率。
② 延长连接反应时间至过夜反应。
③ 连接反应后向溶液中加入NaCl使其终浓度为500 mM，再做细菌转化。
如果以上操作仍不能改善连接效率，则需对连接后的DNA进行纯化。
3. 当使用具有lacZ基因的载体克隆短链DNA片段时，有时即使插入了DNA片段也会有不出现停止密码或者读框不改变的情况发生，在颜色选择培养基上形成淡蓝色的单菌落。
4. 短链DNA克隆时，有时会有插入内含数个串联DNA片段的克隆体出现。
5. 如果PCR反应过程中需要加入矿物油，则要注意勿将其带入后面的反应液中。
6. 带有磷酸基的3’凹陷末端的DNA片段无法使用本试剂盒进行末端平滑化反应。
 
 

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