日本同仁化学SulfoBiotics- Biotin-HPDP(WS) solution试剂货号：SB17 生物素标记蛋白质巯基标记试剂（水溶性）- DOJINDO

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SulfoBiotics- Biotin-HPDP(WS) solution试剂货号：SB17

生物素标记蛋白质巯基标记试剂（水溶性）

SulfoBiotics- Biotin-HPDP(WS) solution

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SulfoBiotics- SSP4试剂

3′,6′-Di(O-thiosalicyl)fluorescein

SulfoBiotics- Biotin-HPDP(WS) solution试剂货号：SB17 生物素标记蛋白质巯基标记试剂（水溶性）

SulfoBiotics- HSip-1试剂

N-[3′,6′-Dihydroxy-3-oxo-3H-spiro(isobenzofuran-1,9′-xanthen)-5-yl]-(1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1-acetamide-κN1, κN4, κN7, κN10) copper(2+) sulfate

SulfoBiotics- HSip-1 DA试剂

N-[3′,6′-Bis(acetyloxy)-3-oxo-3H-spiro(isobenzofuran-1,9′-xanthen)-5-yl]-(1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1-acetamide-κN1,κN4,κN7,κN10copper(2+)sulfate

SulfoBiotics- GYY4137试剂

(4-Methoxyphenyl)morpholinylphosphinodithioic acid, morpholine salt

-SulfoBiotics- Protein Redox State Monitoring Kit Plus

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日本同仁化学Biotin-PEAC5-maleimide试剂货号：B299 CAS号：374592-98-0- DOJINDO

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Biotin-PEAC5-maleimide试剂货号：B299

N-6-(Biotinylamino)hexanoyl-N’-[2-(N-maleimido)ethyl]piperazine, hydrochloride

CAS号：374592-98-0

商品信息

储存条件：-20度保存

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分子式：

C₂₆H₄₁ClN₆O₅S

分子量：

585.16

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10mg

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蛋白抗体标记检测方案

Biotin-PEAC5-maleimide试剂货号：B299 CAS号：374592-98-0

试剂盒内含

规格性状

产品概述

原理

操作步骤

参考文献

试剂盒内含

Biotin-PEAC5-maleimide试剂货号：B299 CAS号：374592-98-0

规格性状

性状：该产品为白色至微黄色粉末，溶于二甲基亚砜。

纯度（HPLC）：90.0％以上

二甲基亚砜可溶：测试合格

产品概述

已知生物素与抗生物素蛋白牢固结合，其特性已广泛用于高灵敏度分析。由于生物素与抗生物素蛋白之间的结合稳定性常数为10¹⁵，比抗原-抗体反应高3至4个数量级，因此一旦结合至抗生物素蛋白的生物素在生理条件下不会脱落。另外，生物素是具有羧基的小分子，可以容易地化学修饰，并且可以在不损害蛋白质等的活性的情况下进行标记。因此，已经开发出许多生物素化合物作为使用抗体进行免疫测定的标记剂。具有活性酯基的生物素通常用于与蛋白质的氨基（NH₂基）结合，具有马来酰亚胺基的生物素用于巯基（SH基）。

根据目的，有必要选择在抗生物素蛋白识别的生物素头和反应性基团之间的间隔物的长度，但是通常，间隔物越长，当抗生物素蛋白结合时，对抗体的抗原识别活性越强。可以认为，间隔物的影响可能引起非特异性吸附，并且在测量期间的背景可能很高。因此，为了提高测量灵敏度，请查看S/N（信噪比）。必须选择适当长度的垫片。

间隔基通常使用氨基己酸，并且存在一种化合物，其中一个分子的氨基己酸通过酰胺键被引入生物素中，并且该化合物中的两个分子被引入。由于己酸间隔物变长，水溶性变差，因此通常将生物素标记试剂溶解在DMSO中并添加到含有蛋白质的缓冲液中的方法是普遍的。

当在用氨基标记蛋白质时不能使用有机溶剂时，可以使用具有磺酸基的活性酯化合物。此外，在与巯基的反应中，以相同的方式使用由DMSO制备的溶液，但是由于其在间隔部分具有哌嗪结构，因此通过质子化在中性区域显示水溶性。

用于还原糖的生物素酰肼化合物的水溶性低，需要在DMSO溶液中进行调节。

在ELISA（酶联免疫吸附测定）中，将酶标记的链霉亲和素与生物素标记的抗体结合的方法是常见的。与抗生蛋白链菌素相比，抗生物素蛋白便宜，但很少用于ELISA中。原因是背景极高，并且认为高PI是原因。抗生物素蛋白通常用于通过柱分离生物素结合蛋白等的目的。

原理

Biotin-PEAC5-maleimide试剂货号：B299 CAS号：374592-98-0

操作步骤

产品使用步骤:

1. 制备含巯基的抗体

1) 用PBS溶解DTT (浓度为200mmol/l)，制成DTT溶液。

2) 精确称量1.0-5.0mg抗体并记录，加入500ul 10mmol/l HEPES Buffer (pH8.0) 溶解蛋白质，制成抗体溶液。

3) 在抗体溶液加入2ul DTT溶液，充分混合。

2. 凝胶过滤纯化

1) 打开NAP-5层析柱上的盖子，弃去填充液。

2) 打开层析柱出口的盖子，用PBS分数次洗脱，每根层析柱收集大约10ml的洗脱液，使凝胶平衡。

3) 用移液器吸取500μl标记好的抗体溶液加入到层析柱中，弃去此时的流出液。

4) 在层析柱的出口处放置一根管子，在层析柱中加入1mlPBS，收集流出的抗体。

3. 生物素标记

1) 用DMSO溶解Biotin-PE-maleimide (浓度为50mmol/l，4.7mg/200ul或10mg/424ul)。

＊用Biotin-PEAC₅-maleimide时浓度为5.9mg/200ul或10mg/342ul。

2) 在纯化好的抗体溶液中加入配制好的生物素标记试剂溶液，抗体：生物素标记试剂的混合摩尔比为1:10左右。

3) 充分混合后，在水浴恒温摇床 (25℃)中过夜培养。

4. 标记抗体的凝胶过滤纯化

1) 打开NAP-10层析柱上的盖子，弃去填充液。

2) 打开层析柱出口的盖子，用PBS分数次洗脱，每根层析柱收集大约15ml的洗脱液，使凝胶平衡。

3) 用移液器吸取1ml标记好的抗体溶液加入到层析柱中，弃去此时的流出液。

4) 在层析柱的出口处放置一根管子，在层析柱中加入1.5ml PBS，收集流出的生物素标记抗体。

参考文献

1) S. Hashida, M. Imagawa, S. Inoue, K. H. Ruan and E. Ishikawa , “Mor Useful Maleimide Compounds for the Conjugation of Fab’ to Horseradish Peroxidase throuth Thiol Groups in the Hinge”, J. Appl. Biochem., 1984, 6, 56.

2) E. Ishikawa, M. Imagawa, S. Hashida, S. Toshitake, Y. Hamaguchi and T. Ueno, “Enzyme-labeling of Antibodies and their Fragments for Enzyme Immunoassay and Immunohistochemical Staining”, J. Immunoassay, 1983, 4, 209.

3) H. -J. Friesen, P. Hermentin and P. Gronski, “Novel Maleimido-Biotins for the Selective Biotinylation of Sulfhydrils”, Protides Biol. Fluids, 1987, 34, 43.

4) E. Ishikawa, S. Hashida, T. Kohno, T. Kotani and S. Ohtani, “Modification of Monoclonal Antibodies with Enzymes, Biotin, and Fluorochromes and Their Applications”, Immunol. Ser., 1987, 33, 113.

5) R. B. del Rosalio and R. L. Wahl, “Disulfide Bond-targeted Radiolabeling : Tumor Specificity of a Streptavidine-biotinylated Monoclonal Antibody Complex”, Cancer Res. (Suppl.), 1990, 50, 804S.

日本同仁化学Biotin-Osu试剂货号：B304 Biotin N-Succinimidyl D-biotin CAS号：35013-72-0- DOJINDO

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Biotin-Osu试剂货号：B304

Biotin N-Succinimidyl D-biotin

CAS号：35013-72-0

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分子式：

C₁₄H₁₉N₃O₅S

分子量：

341.38

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10mg

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蛋白抗体标记检测方案

Biotin-Osu试剂货号：B304 Biotin N-Succinimidyl D-biotin CAS号：35013-72-0

试剂盒内含

规格性状

产品概述

原理

操作步骤

常见问题Q&A

参考文献

试剂盒内含

Biotin-Osu试剂货号：B304 Biotin N-Succinimidyl D-biotin CAS号：35013-72-0

规格性状

性状：该产品为白色至微黄色粉末，溶于二甲基亚砜。

纯度（HPLC）：95.0％以上

二甲基亚砜可溶：测试合格

产品概述

已知生物素与抗生物素蛋白牢固结合，其特性已广泛用于高灵敏度分析。由于生物素与抗生物素蛋白之间的结合稳定性常数为10¹⁵，比抗原-抗体反应高3至4个数量级，因此一旦结合至抗生物素蛋白的生物素在生理条件下不会脱落。另外，生物素是具有羧基的小分子，可以容易地化学修饰，并且可以在不损害蛋白质等的活性的情况下进行标记。因此，已经开发出许多生物素化合物作为使用抗体进行免疫测定的标记剂。具有活性酯基的生物素通常用于与蛋白质的氨基（NH₂）结合，具有马来酰亚胺基的生物素用于巯基（SH）。

如果有机溶剂不能用于蛋白质的氨基标记，则可以使用带有磺酸基的活性酯化合物。此外，在与巯基的反应中，以相同的方式使用由DMSO制备的溶液，但是由于其在间隔部分具有哌嗪结构，因此通过质子化在中性区域显示水溶性。

用于还原糖的生物素酰肼化合物的水溶性低，需要在DMSO溶液中进行调节。

在ELISA（酶联免疫吸附测定）中，将酶标记的抗生蛋白链菌素与生物素标记的抗体结合的方法是常见的。与抗生蛋白链菌素相比，抗生物素蛋白便宜，但很少用于ELISA中。原因是背景极高，并且认为高PI是原因。抗生物素蛋白通常用于通过柱分离生物素结合蛋白等的目的。

原理

Biotin-Osu试剂货号：B304 Biotin N-Succinimidyl D-biotin CAS号：35013-72-0

操作步骤

产品使用步骤:

参照下表配制50mmol/l的生物素标记试剂溶液：

由于生物素标记试剂遇水易分解，所以需要现配现用。

2. 蛋白质的生物素标记操作方法

1) 用10mmol/l Bicine Buffer (pH8.5) 溶解蛋白质，制成蛋白质溶液。

2) 在蛋白质溶液中加入配制好的生物素标记试剂溶液，蛋白质：生物素标记试剂的混合摩尔比为1:2-1:10。

3) 充分混合后，在水浴恒温摇床 (25 ℃) 中培养2-4 h。

3. 标记蛋白质的凝胶过滤及纯化。

1) 打开层析柱上的盖子，弃去填充液。

2) 打开层析柱出口的盖子，用PBS分数次洗脱，每根层析柱收集大约10ml的洗脱液，使凝胶平衡。

3) 用移液器吸取500μl标记好的蛋白质溶液加入到层析柱中，弃去此时的流出液。

4) 在层析柱的出口处放置一个2ml的样品管，在层析柱中加入1ml PBS，收集流出的生物素标记蛋白质。

常见问题Q&A

Q1:氨基标记有两种类型，OSu和Sulfo-OSu。它们有何不同？

A:反应性几乎相同。由于磺基-OSu型具有磺酸基，因此它在水中的溶解度很高，并且可以在高浓度下反应。当您不想向系统中添加有机溶剂（例如DMSO）时，它也很有效。另一方面，在储存过程中它容易吸收水分并容易水解。

Q2:标记蛋白之前是否必须使用过滤管？

A:如果蛋白溶液中不含有带有活性氨基的小分子且蛋白浓度在10 mg/ml或者70 μM左右时，可以不使用过滤管来过滤，只需要将10 μl 样品溶液和90 μl Reaction Buffer以及8 μl NH2-reactive Fluorescein（由步骤3所得）混合并按照操作说明上的方法做从步骤4开始的后续试验。

参考文献

1) P. Kongtawelert and P. Ghosh, ” A New Sandwich-ELISA Method for the Determination of Keratan Sulphate Peptides in Biological Fluids Employing a Monoclonal Antibody and Labelled Avidin Biotin Technique.”, Clin. Chem. Acta,, 1990, 195, 17.

2) G. Paganelli, S. Pervez, A. G. Siccardi, G. Rowlinson, G. Deleide, F. Chiolerio, M. Malcovati, G. A. Scassllati and A. A. Epenetos, “Intraperitoneal Radio-localization of Tumors Pre-targeted by Biotinylated Monoclonal Antibodies”, Int. J. Cancer, 1990, 45, 1184.

3) C. Wagener, U. Kruger and J. E. Shively, “Selective Precipitation of Biotin-labeled Antigens or Monoclonal Antibodies by Avidin for Determining Epitope Specificities and Affinities in Solution-phase Assays”, Methods Enzymol., 1990, 184, 518.

4) D. M. Boorsma, J. Van Bommel and E. M. Vander Raaij-Helmer, “Simultaneous Immunoenzyme Double Labelling Using Two Different Enzymes Linked Directly to Monoclonal Antibodies or with Biotin-avidin”, J. Microscopy, 1986, 143, 197.

5) A. Komura, T. Tokuhisa, T. Nakagawa, A. Sasase, M. Ichihashi, S. Ferrone and Y. Mishima, “Specific Killing of Human Melanoma Cells with an Efficient 10B-compound on Monoclonal Antibodies”, Pigment Cell Res., 1989, 2, 259.

6) R. Rappuoli, P. Leoncini, P. Tarli and P. Neri, “Competitive Enzyme Immunoassay for Human Chorionic Somatomammotropin Using the Avidin-biotin System”, Anal. Biochem., 1981, 118, 168.

日本同仁化学Biotin-(AC5)2-Osu试剂货号：B306 CAS号：89889-52-1- DOJINDO

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Biotin-(AC5)2-Osu试剂货号：B306

6-[6-(Biotinylamino)hexanoylamino]hexanoic acid N-hydroxysuccinimide ester

CAS号：89889-52-1

商品信息

储存条件：-20度保存

运输条件：室温

分子式：

C₂₆H₄₁NO₇S

分子量：

567.7

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选择规格：

10mg

期货

蛋白质抗体标记检测方案

Biotin-(AC5)2-Osu试剂货号：B306 CAS号：89889-52-1

试剂盒内含

规格性状

产品概述

原理

操作步骤

常见问题Q&A

参考文献

试剂盒内含

10 mg Biotin-(AC5)2-Osu

规格性状

性状：该产品为白色至微黄色粉末，溶于二甲基亚砜。

纯度（HPLC）：90.0％以上

二甲基亚砜可溶：测试合格

红外光谱：测试合格

NMR谱：测试合格

产品概述

已知生物素与抗生物素蛋白牢固结合，其特性已广泛用于高灵敏度分析。由于生物素与抗生物素蛋白之间的结合稳定性常数为10¹⁵，比抗原-抗体反应高3至4个数量级，因此一旦结合至抗生物素蛋白的生物素在生理条件下不会脱落。另外，生物素是具有羧基的小分子，可以容易地化学修饰，并且可以在不损害蛋白质等的活性的情况下进行标记。因此，已经开发出许多生物素化合物作为使用抗体进行免疫测定的标记剂。具有活性酯基的生物素通常用于与蛋白质的氨基（NH₂）结合，具有马来酰亚胺基的生物素用于巯基（SH）。

用于还原糖的生物素酰肼化合物的水溶性低，需要在DMSO溶液中进行调节。

原理

Biotin-(AC5)2-Osu试剂货号：B306 CAS号：89889-52-1

操作步骤

产品使用步骤:

参照下表配制50mmol/l的生物素标记试剂溶液：

由于生物素标记试剂遇水易分解，所以需要现配现用。

2. 蛋白质的生物素标记操作方法

1) 用10mmol/l Bicine Buffer (pH8.5) 溶解蛋白质，制成蛋白质溶液。

2) 在蛋白质溶液中加入配制好的生物素标记试剂溶液，蛋白质：生物素标记试剂的混合摩尔比为1:2-1:10。

3) 充分混合后，在水浴恒温摇床 (25 ℃) 中培养2-4 h。

3. 标记蛋白质的凝胶过滤及纯化。

1) 打开层析柱上的盖子，弃去填充液。

2) 打开层析柱出口的盖子，用PBS分数次洗脱，每根层析柱收集大约10ml的洗脱液，使凝胶平衡。

3) 用移液器吸取500μl标记好的蛋白质溶液加入到层析柱中，弃去此时的流出液。

4) 在层析柱的出口处放置一个2ml的样品管，在层析柱中加入1ml PBS，收集流出的生物素标记蛋白质。

常见问题Q&A

Q1:氨基标记有两种类型，OSu和Sulfo-OSu。它们有何不同？

Q2:标记蛋白之前是否必须使用过滤管？

参考文献

6) R. Rappuoli, P. Leoncini, P. Tarli and P. Neri, “Competitive Enzyme Immunoassay for Human Chorionic Somatomammotropin Using the Avidin-biotin System”, Anal. Biochem., 1981, 118, 168.

日本同仁化学Biotin-AC5-Osu试剂货号：B305 CAS号：72040-63-2- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品，欢迎访问官网了解更多信息

Biotin-AC5-Osu试剂货号：B305

6-(Biotinylamino)hexanoic acid N-hydroxysuccinimide ester

CAS号：72040-63-2

商品信息

储存条件：-20度保存

运输条件：室温

分子式：

C₂₀H₃₀N₄O₆S

分子量：

454.54

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选择规格：

10mg

期货

蛋白抗体标记检测方案

试剂盒内含

规格性状

产品概述

原理

操作步骤

常见问题Q&A

参考文献

试剂盒内含

10 mg Biotin-AC5-Osu

规格性状

性状：该产品为白色至微黄色粉末，溶于二甲基亚砜。

纯度（HPLC）：95.0％以上

二甲基亚砜可溶：测试合格

产品概述

已知生物素与抗生物素蛋白牢固结合，其特性已广泛用于高灵敏度分析。由于生物素与抗生物素蛋白之间的结合稳定性常数为10¹⁵，比抗原-抗体反应高3至4个数量级，因此一旦结合至抗生物素蛋白的生物素在生理条件下不会脱落。另外，生物素是具有羧基的小分子，可以容易地化学修饰，并且可以在不损害蛋白质等的活性的情况下进行标记。因此，已经开发出许多生物素化合物作为使用抗体进行免疫测定的标记剂。具有活性酯基的生物素通常用于与蛋白质的氨基（NH₂）结合，具有马来酰亚胺基的生物素用于巯基（SH）。

用于还原糖的生物素酰肼化合物的水溶性低，需要在DMSO溶液中进行调节。

原理

Biotin-AC5-Osu试剂货号：B305 CAS号：72040-63-2

操作步骤

产品使用步骤:

1.参照下表配制50mmol/l的生物素标记试剂溶液：

Biotin-AC5-Osu试剂货号：B305 CAS号：72040-63-2

由于生物素标记试剂遇水易分解，所以需要现配现用。

2.蛋白质的生物素标记操作方法

1) 用10mmol/l Bicine Buffer (pH8.5) 溶解蛋白质，制成蛋白质溶液。

2) 在蛋白质溶液中加入配制好的生物素标记试剂溶液，蛋白质：生物素标记试剂的混合摩尔比为1:2-1:10。

3) 充分混合后，在水浴恒温摇床 (25 ℃) 中培养2-4 h。

3.标记蛋白质的凝胶过滤及纯化。

1) 打开层析柱上的盖子，弃去填充液。

2) 打开层析柱出口的盖子，用PBS分数次洗脱，每根层析柱收集大约10ml的洗脱液，使凝胶平衡。

3) 用移液器吸取500μl标记好的蛋白质溶液加入到层析柱中，弃去此时的流出液。

4) 在层析柱的出口处放置一个2ml的样品管，在层析柱中加入1ml PBS，收集流出的生物素标记蛋白质。

常见问题Q&A

Q1:氨基标记有两种类型，OSu和Sulfo-OSu。它们有何不同？

Q2:标记蛋白之前是否必须使用过滤管？

参考文献

6) R. Rappuoli, P. Leoncini, P. Tarli and P. Neri, “Competitive Enzyme Immunoassay for Human Chorionic Somatomammotropin Using the Avidin-biotin System”, Anal. Biochem., 1981, 118, 168.

日本同仁化学Biotin-SS-Sulfo-Osu试剂货号：B572 CAS号：325143-98-4- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

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Biotin-SS-Sulfo-Osu试剂货号：B572

N-[[2-(Biotinylamino)ethyl]dithiopropionyloxy]sulfosuccinimide, sodium salt

CAS号：325143-98-4

商品信息

储存条件：-20度保存,防潮

运输条件：室温

分子式：

C₁₉H₂₇N₄NaO₉S₄

分子量：

606.69

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选择规格：

100mg

期货

蛋白质抗体标记检测方案

关联产品

Biotin-SS-Sulfo-Osu试剂货号：B572 CAS号：325143-98-4

Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒

生物素抗体标记试剂盒-氨基

Peroxidase Labeling Kit – NH2试剂盒

过氧化物酶标记试剂盒-氨基

Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)试剂盒

生物素标记试剂盒-氨基

Fluorescein Labeling Kit – NH2试剂盒

荧光素标记试剂盒-氨基

Isothiocyanobenzyl-EDTA试剂

Isothiocyanobenzyl-EDTA（ITCBE）

日本同仁化学Biotin-PE-maleimide试剂货号：B592 CAS号：374592-99-1- DOJINDO

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Biotin-PE-maleimide试剂货号：B592

N-Biotinyl-N’-[2-(N-maleimido)ethyl]piperazine

CAS号：374592-99-1

商品信息

储存条件：-20度保存

运输条件：室温

分子式：

C₂₀H₂₉N₅O₄S

分子量：

435.54

SDS下载

选择规格：

10mg

期货

蛋白质抗体标记检测方案

关联产品

Biotin-PE-maleimide试剂货号：B592 CAS号：374592-99-1

Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒

生物素抗体标记试剂盒-氨基

Peroxidase Labeling Kit – NH2试剂盒

过氧化物酶标记试剂盒-氨基

Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)试剂盒

生物素标记试剂盒-氨基

Fluorescein Labeling Kit – NH2试剂盒

荧光素标记试剂盒-氨基

Isothiocyanobenzyl-EDTA试剂

Isothiocyanobenzyl-EDTA（ITCBE）

日本同仁化学Biotin Labeling Kit – SH试剂盒货号：LK10 生物素标记试剂盒-巯基- DOJINDO

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Biotin Labeling Kit – SH试剂盒货号：LK10

生物素标记试剂盒-巯基

Biotin Labeling Kit – SH

商品信息

储存条件：0-5度保存

运输条件：室温

特点：

● 整个标记过程仅需3个小时

● 整个标记过程在1支过滤管中进行

● 荧光标记抗体回收率高

● 适用于50-200 μg的IgG

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选择规格：

3samples

现货

蛋白抗体标记检测方案

Biotin Labeling Kit – SH试剂盒货号：LK10 生物素标记试剂盒-巯基

试剂盒内含

产品概述

原理

操作步骤

产品优势

常见问题Q&A

参考文献

试剂盒内含

Biotin Labeling Kit – SH试剂盒货号：LK10 生物素标记试剂盒-巯基

产品概述

生物素标记试剂盒-SH是用于在具有SH基团的蛋白质（尤其是抗体）上标记生物素的试剂盒。由于试剂盒中包含的SH反应性生物素分子中具有马来酰亚胺基团，因此仅通过与具有SH基团的分子混合即可形成稳定的共价键。如果蛋白质具有S-S键，则可以使用连接的还原剂制备游离的SH基团。（但是，由于SS键的断裂，蛋白质的活性可能会丢失。）当用生物素标记高分子量蛋白质（例如免疫球蛋白G（IgG））时，可以使用所附的过滤管轻松进行预采样。如果可以进行处理并且将铰链区中的SH基团用于标记，则可以制备生物素标记的还原IgG，而不会损害抗体活性。另外，未反应的SH-反应性生物素可以在反应后通过使用滤管的纯化操作除去。

原理

Biotin Labeling Kit – SH试剂盒货号：LK10 生物素标记试剂盒-巯基

操作步骤

使用注意事项:

1. 用该试剂盒标记的蛋白质的分子量要>50,000。

2. 在标记过程中，IgG或者Biotin-IgG标记物始终存在于过滤管的滤膜上。

3. 如果蛋白质溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白质，如BSA或明胶时，在使用该试剂盒标记前，先要纯化IgG溶液。IgG溶液能够用IgG Purification Kits (不包含于本试剂盒中) 来纯化。

4. 如果蛋白质溶液含有小的不溶物，离心后取上清液来进行标记。

5. 1管SH-Reactive Biotin可以标记50-200ug蛋白质。

标记IgG操作步骤

（1）将100μl WS buffer以及含有100μg IgG的样品溶液加入到过滤管中。^a）

（2）8,000-10,000g离心10分钟。^b）

（3）将150μl WS buffer加入到Reducing agent管中，并用移液器吹打使其溶解。

（4）将100μl Reducing agent溶液转移到过滤管的滤膜上，吹打使IgG在膜上溶解。

（5）37℃培养30分钟。加入100μl Reaction buffer，8,000-10,000g离心10分钟。^b）

（6）将10μl DMSO加入到SH-reactive biotin中，吹打使其溶解。^c）

（7）将100μl Reaction buffer与8μl SH-reactive biotin溶液加入到过滤管中，吹打使其混合。^d）

（8）37℃培养30分钟。将100μl WS buffer加入到过滤管中8,000-10,000g离心10分钟。 ^b）

（9）加入200μl WS buffer，8,000-10,000g离心10分钟。^b）再重复该步骤一次。

（10）加入200μl WS buffer，吹打10-15次来回收标记产物。^e）将该溶液转移到0.5ml试管中，在0-5℃下保存。

Biotin Labeling Kit – SH试剂盒货号：LK10 生物素标记试剂盒-巯基

a) 样品溶液的体积不应超过100ul。如果蛋白质浓度<0.5mg/ml，重复操作步骤1和2直至总的IgG聚积量达到100ug。如果聚积过程中滤液的体积超过400 ul，则在进行后续的离心操作前应除去滤液。

b) 如果溶液在离心后仍然残留在膜上，可以再离心5min或者适当增加转速直至膜上没有残留液体。

c) NH₂-Reactive Biotin/SH-Reactive Biotin在管子的底部，向管底加入10ul DMSO，吹打数次使其溶解。

d) 如果IgG的量为200ug，在步骤4时加入所有的NH₂-ReactiveBiotin溶液。

e) 并不一定要使用WS Buffer来回收标记产物，可以选择任何适合于该实验的缓冲液来替代。

产品优势

1、整个标记过程仅需3个小时

2、整个标记过程在1支过滤管中进行

3、荧光标记抗体回收率高

4、适用于50-200 μg的IgG

常见问题Q&A

Q1:样品溶液中的共存会影响反应吗？

A:它可能会受到共存类型的影响。确认溶液中包含哪种物质后，根据情况纯化用于标记的蛋白质，并将其用于标记反应。<聚合物：分子量10,000以上>它可能会影响。即使使用Filtration Tube，也无法去除具有氨基的高分子量化合物，例如BSA和明胶。因此，它被标记并充当荧光杂质。在反应中使用之前，请执行单独的清除操作。另一方面，如果存在许多高分子杂质，即使没有氨基的化合物也可能导致过滤器堵塞。它可能会干扰标记/纯化操作。
*不仅对于生物素标记试剂盒-SH，而且对于其他标记试剂盒，都需要采取相同的预防措施。

Q2:标记小分子蛋白质（分子量50,000或以下）的方法。

A:由于该试剂盒中包含的过滤管是分子量截断值为30K的超滤过滤器，因此我们建议使用50,000或分子量更大的蛋白质，并留有余量。当标记分子量为50,000或更小的蛋白质时，可以通过更换为分子量分数较小的超滤过滤器来标记甚至很小的蛋白质，如下所示。

——————————————

PALL Nanocep 3K产品编号OD003C33

PALL Nanocep 10K产品编号OD010C33

——————————————

离心所需的时间可能比试剂盒中随附的过滤器要长，因此请注意离心时间。

Q3:标记后，离心过滤管，液体仍会留在膜上怎么处理？

A:（1）目视检查隔膜时，如果液体稍微残留在隔膜杯的边缘，请继续执行下面操作。如果倾斜和旋转膜杯时液体残留在膜上或滴下，请以8,000 g离心约15至30分钟。（2）即使在1）中的离心操作之后，如果液体仍留在膜上，请检查标记物质是否聚集。

根据抗体或蛋白质本身的特性，用小分子标记剂进行标记可能会增加抗体或蛋白质的疏水性并使其聚集。如果在标记的物质上观察到团聚，将其转移到另一个微管中一次，离心并使用上清液。（回收的抗体/蛋白质的量将减少。）如果上述方法没有帮助，请与公司技术支持联系。

*如果您怀疑过滤器堵塞，可以通过更换新的膜过滤器来解决。

替代品：PALL Nanocep 30K（制造商代码：OD030C33）

Q4:该试剂盒可以标记什么？

A:可以标记分子量为“50,000或更高”并且具有[S-S]或[SH]的任何化合物（抗体，蛋白质等）。量为“50-200μg”。
*由于试剂盒中包含的过滤管尺寸为30K，因此无法纯化低分子量化合物。

参考文献

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6) M. Sakaguchi, H. Murata, K. Yamamoto, T. Ono, Y. Sakaguchi, A. Motoyama, T. Hibino, K. Kataoka and N.H. Huh, “TIRAP, an Adaptor Protein for TLR2/4, Transduces a Signal from RAGE Phosphorylated upon Ligand Binding”, PLoS ONE., 2011, 6, (8), e23132.

7) M. Sakaguchi, H. Murata, Y. Aoyama, T. Hibino, E.W. Putranto, I.M. Ruma, Y. Inoue, Y. Sakaguchi, K. Yamamoto, R. Kinoshita, J. Futami, K. Kataoka, K. Iwatsuki and N.H. Huh, “DNAX-activating Protein 10 (DAP10) Membrane Adaptor Associates with Receptor for Advanced Glycation End Products (RAGE) and Modulates the RAGE-triggered Signaling Pathway in Human Keratinocytes”, J. Biol. Chem.., 2014, 289, (34), 23389.

8) N. Kobayashi, K. Odaka, T. Uehara, K. Imanaka-Yoshida, Y. Kato, H. Oyama, H. Tadokoro, H. Akizawa, S. Tanada, M. Hiroe, T. Fukumura, I. Komuro, Y. Arano, T. Yoshida and T. Irie, “Toward in Vivo Imaging of Heart Disease Using a Radiolabeled Single-Chain Fv Fragment Targeting Tenascin-C”, Anal. Chem.., 2011, 83, (23), 9123.

9) T. Ikeda, R. Shinohata, M. Murakami, K. Hina, S. Kamikawa, S. Hirohata, S. Kusachi, A. Tamura and S. Usui, “A rapid and precise method for measuring plasma apoE-rich HDL using polyethylene glycol and cation-exchange chromatography: a pilot study on the clinical significance of apoE-rich HDL measurements”, Clin. Chim. Acta.,2017, 465, 112.

10) T. Into, M. Inomata, M. Nakashima, K. Shibata, H. Hacker and K. Matsushita, “Regulation of MyD88-Dependent Signaling Events by S Nitrosylation Retards Toll-Like Receptor Signal Transduction and Initiation of Acute-Phase Immune Responses”, Mol. Cell. Biol.., 2008, 28, (4), 1338.

11) W. Nakai, T. Yoshida, D. Diez, Y. Miyatake, T. Nishibu, N. Imawaka, K. Naruse, Y. Sadamura and R. Hanayama, “A novel affinity-based method for the isolation of highly purified extracellular vesicles”, Sci. Rep.., 2016, 6, 33935.

12) Y. Terasaki, T. Akuta, M. Terasaki, T. Sawa, T. Mori, T. Okamoto, M. Ozaki, M. Takeya and T. Akaike, “Guanine Nitration in Idiopathic Pulmonary Fibrosis and Its Implication for Carcinogenesis”, Am. J. Respir. Crit. Care Med.., 2006, 174, (6), 665.

13) I. W. Sumardika, C. Youyi, E. Kondo, Y. Inoue, I. M. W. Ruma, H. Murata, R. Kinoshita, K. Yamamoto, S. Tomida, K. Shien, H. Sato, A. Yamauchi, J. Futami, E. W. Putranto, T. Hibino, S. Toyooka , M. Nishibori and M. Sakaguchi, “β-1,3-Galactosyl-O-Glycosyl-Glycoprotein β-1,6-N-Acetylglucosaminyltransferase 3 Increases MCAM Stability, Which Enhances S100A8/A9-Mediated Cancer Motility.”, Oncol. Res., 2018, 26, (3), 431.

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15) D. S. On, P. Chertchinnapa, Y. Shinkai, T. Kojima and H. Nakano, “Development of a dual monoclonal antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of swine influenza virus using rabbit monoclonal antibody by Ecobody technology.”, J. Biosci. Bioeng., 2020, DOI:10.1016/j.jbiosc.2020.03.003.

日本同仁化学Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)试剂盒货号：LK55 生物素标记试剂盒-氨基- DOJINDO

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上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学 DOJINDO代理商全线产品，欢迎访问官网了解更多信息

Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)试剂盒货号：LK55

生物素标记试剂盒-氨基

Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)

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Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK03

生物素抗体标记试剂盒-氨基

Biotin Labeling Kit – NH2

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特点：

● 生物素标记的产品可以在大约2小时内制备。

● 只需将NH2反应性生物素与目标蛋白混合即可形成稳定的共价键。

● 可以标记分子量为50,000或更高的蛋白质。

● 可以标记50-200μg的蛋白质。

● 可以通过使用过滤管的分离操作以高回收率获得标记物质。

● 生物素标记的产品可以与试剂盒中包含的存储溶液一起存储。

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产品概述

原理

操作步骤

产品优势

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产品概述

生物素标记试剂盒-NH₂是用于用生物素标记带有氨基基团的蛋白质的试剂盒，尤其是抗体，由于该试剂盒中包含的NH₂-反应性生物素分子中具有活性酯基，因此仅通过与生物素混合即可形成稳定的共价键。当生物素标记在蛋白质（例如免疫球蛋白G（IgG））上时，可以使用随附的过滤管轻松去除抑制标记反应和未反应的NH₂-反应性生物素的低分子量化合物（例如Tris）。因此，没有必要进行诸如透析和凝胶过滤的处理，并且可以以高回收率获得高纯度的标记化合物。

原理

Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK03 生物素抗体标记试剂盒-氨基

操作步骤

使用注意事项：

1. 用本试剂盒标记的蛋白质的分子量要>50,000。

2. 在标记过程中，IgG或者Biotin-IgG标记物始终存在于过滤管的滤膜上。

3. 如果IgG溶液中含有分子量>10,000的其他蛋白质，如BSA或明胶时，在使用该试剂盒标记前，先要纯化IgG溶液。IgG溶液能够用IgG Purification Kits (不包含于本试剂盒中) 来纯化。

4. 如果IgG溶液含有小的不溶物，离心后取上清液来进行标记。

5. 1管NH₂-Reactive Biotin可以标记50-200 ug蛋白质。

标记IgG操作步骤

（1）将100μl WS buffer以及含有100μg IgG的样品溶液加入到过滤管中。^a）

（2）8,000-10,000g离心10分钟。^b）

（3）将10μl DMSO加入到NH₂-reactive biotin中并用移液器吹打使其溶解。^c）

（4）将100μl Reaction buffer以及8μl NH₂-reactive biotin溶液加入到过滤管中，吹打使其混合。^d）

（5）将过滤管放入培养箱中，37℃培养10分钟。

（6）将100μl WS buffer加入到过滤管中，8,000-10,000g离心10分钟，^b）除去滤液。

（7）将200μl WS buffer加入到过滤管中，8,000-10,000g离心10分钟，^b）重复该步骤一次。

（8）将200μl WS buffer加入到过滤管中吹打10-15次来回收标记产物。^e）将该溶液转移到0.5ml试管中，在0-5℃下保存。

Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒货号：LK03 生物素抗体标记试剂盒-氨基

a) 样品溶液的体积不应超过100ul。如果蛋白质浓度低于0.5mg/ml，重复操作步骤1和2直至总的蛋白质聚积量达到50-200ug。如果聚积过程中滤液的体积超过400ul，则在进行后续的离心操作前应除去滤液。

b) 如果溶液在离心后仍然残留在膜上，可以再离心5min或者适当增加转速直至膜上没有残留液体。

c) NH₂-Reactive Biotin在管子的底部，向管底加入10ul DMSO，吹打数次使其溶解。

d) 如果蛋白质的量为200ug，在操作步骤4时加入所有的NH₂-Reactive Biotin-DMSO溶液。

e) 并不一定要使用WS Buffer来回收标记产物，可以选择任何适合于该实验的缓冲液来替代。

产品优势

1）生物素标记的产品可以在大约2小时内制备。

2）只需将NH₂反应性生物素与目标蛋白混合即可形成稳定的共价键。

3）可以标记分子量为50,000或更高的蛋白质。

4）可以标记50-200μg的蛋白质。

5）可以通过使用过滤管的分离操作以高回收率获得标记物质。

6）生物素标记的产品可以与试剂盒中包含的存储溶液一起存储。

常见问题Q&A

Q1:这个试剂盒可以用于标记其他蛋白质吗？

A:可以。但是如果含有像血清白蛋白或者明胶的蛋白，标记反应可能会受到干扰。用这个试剂盒标记之前，有必要先纯化抗体溶液。如果您想进一步了解纯化过程可以联系我们。

Q2:我只有少量的IgG，可以标记吗？

A:在该试剂盒中，标记所需的IgG量为50至200μg。

在此范围内，性能没有太大差异。

可以用10μg IgG进行标记，但是可能会出现诸如背景升高的问题。

Q3:样品溶液中的共存会影响反应吗？

A:它可能会受到共存类型的影响。确认溶液中包含哪种物质后，根据情况纯化用于标记的蛋白质，并将其用于标记反应。

<聚合物：分子量10,000以上>它可能会影响。即使使用Filtration Tube，也无法去除具有氨基的高分子量化合物，例如BSA和明胶。因此，它被标记并充当荧光杂质。在反应中使用之前，请执行单独的清除操作。另一方面，如果存在许多高分子杂质，即使没有氨基的化合物也可能导致过滤器堵塞。它可能会干扰标记/纯化操作。

*生物素标记试剂盒-不仅需要对NH2采取相同的预防措施，还需要对其他标记试剂盒采取相同的预防措施。

Q4:标记小分子蛋白质（分子量50,000或以下）的方法。

A:由于该试剂盒中包含的过滤管是分子量截断值为30K的超滤过滤器，因此我们建议使用50,000或分子量更大的蛋白质，并留有余量。

当标记分子量为50,000或更小的蛋白质时，可以通过更换为分子量分数较小的超滤过滤器来标记甚至很小的蛋白质，如下所示。

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离心所需的时间可能比试剂盒中随附的过滤器要长，因此请注意离心时间。

Q5:标记后，离心过滤管，液体仍会留在膜上怎么处理？

A:（1）目视检查隔膜时，如果液体稍微残留在隔膜杯的边缘，请继续执行下面操作。如果倾斜和旋转膜杯时液体残留在膜上或滴下，请以8,000 g离心约15至30分钟。

（2）即使在1）中的离心操作之后，如果液体仍留在膜上，请检查标记物质是否聚集。根据抗体或蛋白质本身的特性，用小分子标记剂进行标记可能会增加抗体或蛋白质的疏水性并使其聚集。如果在标记的物质上观察到团聚，将其转移到另一个微管中一次，离心并使用上清液。（回收的抗体/蛋白质的量将减少。）

*如果您怀疑过滤器堵塞，可以通过更换新的膜过滤器来解决。

替代品：PALL Nanocep 30K（制造商代码：OD030C33）

Q6:该试剂盒可以标记什么？

A:可以标记分子量为“ 50,000或更高”和反应性氨基（NH2）的化合物（抗体，蛋白质等）。标记样品量为“50-200μg”。

*当考虑标记“ mg”的量时，也可以使用“生物素化试剂盒（Sulfo-OSu）；同仁产品货号：BK01”。

*由于试剂盒附带的过滤管为30K，因此无法纯化低分子量化合物。

Q7:一个IgG分子能标记多少生物素？

A:每个IgG分子平均能标记7至10个生物素。

Q8:标记产物能保存多久？

A:在0-5℃下能够保存2个月。如果需要保存更久，可以添加等量的丙三醇，并在-20℃下 (只要该蛋白可以冷冻) 存放。但是，还要注意样品自身是否稳定。

Q9:能不能用这个试剂盒标记寡核苷酸和寡肽？

A:不能，寡核苷酸和寡肽的分子量太小不能使其保留在过滤膜上。请参照Q4。

Q10:含有生物素标记蛋白质的活细胞怎么处理？

A:我们推荐使用PBS (含2-10% FBS) 制备细胞悬液，保持最佳细胞状态。

Q11:回收缓冲液 (WS Buffer)对活细胞有危害吗？

A:没有。WS Buffer含有表面活性剂，它的浓度控制在对细胞没有毒性的范围内。如果您担心WS Buffer中的添加剂，请您使用常用的缓冲液代替。

参考文献

1) Y. Kubota, Y. Oike, S. Satoh, Y. Tabata, Y. Niikura, T. Morisada, M. Akao, T. Urano, Y. Ito, T. Miyamoto, N. Nagai, G. Y. Koh, S. Watanabe and T. Suda, “Cooperative Interaction of Angiopoietin-like Proteins 1 and 2 in Zebrafish Vascular Development “, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2005, 102(38), 13502.

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12) M. Tahara, S. Ohno, K. Sakai, Y. Ito, H. Fukuhara, K. Komase, M.A. Brindley, P.A. Rota, R.K. Plemper, K. Maenaka and M. Takeda, “The receptor-binding site of the measles virus hemagglutinin protein itself constitutes a conserved neutralizing epitope”, J. Virol.., 2013, 87, (6), 3583.

13) M. Takahashi, Y. Ishida, D. Iwaki, K. Kanno, T. Suzuki, Y. Endo, Y. Homma and T. Fujita, “Essential role of Mannose-binding lectin-associated serine protease-1 in activation of the complement factor D”, J. Exp. Med.., 2010, 207, (1), 29.

14) N. Hosen, Y. Matsunaga, K. Hasegawa, H. Matsuno, Y. Nakamura, M. Makita, K. Watanabe, M. Yoshida, K. Satoh, S. Morimoto, F. Fujiki, H. Nakajima, J. Nakata, S. Nishida, A. Tsuboi, Y. Oka, M. Manabe, H. Ichihara, Y. Aoyama, A. Mugitani , T. Nakao, M. Hino, R. Uchibori, K. Ozawa, Y. Baba, S. Terakura, N. Wada, E. Morii, J. Nishimura, K. Takeda, Y. Oji, H. Sugiyama, J. Takagi and A. Kumanogoh, “The activated conformation of integrin β7 is a novel multiple myeloma-specific target for CAR T cell therapy”, Nat. Med.., 2017, 23, (12), 1436.

15) R. Nishino, A. Takano, H. Oshita, N. Ishikawa, H. Akiyama, H. Ito, H. Nakayama, Y. Miyagi, E. Tsuchiya, N. Kohno, Y. Nakamura and Y. Daigo, “Identification of Epstein-Barr virus–induced gene 3 as a novel serum and tissue biomarker and a therapeutic target for lung cancer”, Clin. Cancer Res.., 2011, 17, (19), 6272.

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18) T. Yoshida, N. Shiraki, H. Baba, M. Goto, S. Fujiwara, K. Kume and S. Kume, “Expression patterns of epiplakin1 in pancreas, pancreatic cancer and regenerating pancreas”, Genes Cells., 2008, 13, (7), 667.

19) X. Piao, T. Ozawa, H. Hamana, K. Shitaoka, A. Jin, H. Kishi and A. Muraguchi, “TRAIL-receptor 1 IgM antibodies strongly induce apoptosis in human cancer cells in vitro and in vivo”, Oncoimmunology., 2016, 5, (5), e1131380.

20) Y. Shimazaki, Y. Kohno, “Successive analysis of antigen trapping and enzymatic digestion on membrane-immobilized avidin”, Anal. Biochem.., 2012, 422, (1), 55.

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荧光素标记试剂盒-氨基

Isothiocyanobenzyl-EDTA试剂

Isothiocyanobenzyl-EDTA（ITCBE）

R-Phycoerythrin Labeling Kit – NH2试剂盒

藻红蛋白标记试剂盒-氨基

在线小工具

实验工具|稀释计算器|摩尔浓度计算器

日本同仁化学Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒 LK03 生物素标记-氨基（50-200ug/sample）- DOJINDO

发表于2024年6月19日由whatman中国官网

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生物素

荧光标记

酶标记物

螯合标记

藻胆蛋白

ICG标记

IgG纯化分离

交联剂

品名货号用途

Biotin Labeling Kit – NH2试剂盒	LK03	生物素标记-氨基（50-200ug/sample）
Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg)试剂盒	LK55	生物素标记-氨基（1 mg/sample）
Biotin Labeling Kit – SH试剂盒	LK10	生物素标记-巯基（50-200ug/sample）
Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit试剂盒	LK37	生物素标记-氨基（10 ug/sample）
Biotinylation Kit (Sulfo-OSu)试剂	BK01	生物素标记-氨基（1-5 mg/sample）
Biotin-PE-maleimide试剂	B592	生物素
Biotin-SS-Sulfo-Osu试剂	B572	生物素
Biotin-AC5-Osu试剂	B305	生物素
Biotin-(AC5)2-Osu试剂	B306	生物素
Biotin-Osu试剂	B304	生物素
Biotin-PEAC5-maleimide试剂	B299	生物素
ARP(Aldehyde Reactive Probe)试剂	A305	生物素

THERMO/LIFE Avidin/Biotin Blocking Kit货号004303

发表于2024年4月4日由whatman中国官网

THERMO/LIFE Avidin/Biotin Blocking Kit货号004303

产品型号：
简单描述
THERMO/LIFE Avidin/Biotin Blocking Kit货号004303 也被称为 00-4303描述This kit is used to block endogenous biotin or biotin-binding activity in tissue sections. The kit contains 18 mL each of Avid

详细介绍

THERMO/LIFE Avidin/Biotin Blocking Kit货号004303

也被称为 00-4303
描述
This kit is used to block endogenous biotin or biotin-binding activity in tissue sections. The kit contains 18 mL each of Avid

THERMO/LIFE Avidin/Biotin Blocking Kit货号004303

规格

Reagent Type:	Blocking⁄Background Suppression Reagent
Product Size:	1 kit
Shipping Condition:	Wet Ice

内容及储存

Store in refrigerator (2–8°C).

我公司代理thermo/life产品，备有大量现货，*，咨询和选购

赛默飞世尔科技进入中国发展已有30多年，在中国的总部设于上海，并在北京、广州、香港、中国台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉、昆明等地设立了分公司，员工人数约3700名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等，提供实验室综合解决方案，为各行各业的客户服务。为了满足中国市场的需求，现有8家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心，将zui前沿技术和产品带给国内客户，并提供应用开发与培训等多项服务；位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和*技术，研发适合中国的技术和产品；我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队，在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。

生体硫黄解析用試薬 -SulfoBiotics- Biotin-HPDP(WS) solution | CAS – 同仁化学研究所

发表于2024年3月17日由whatman中国官网

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–SulfoBiotics– Biotin-HPDP(WS) solution

02 酸化ストレス関連試薬

–SulfoBiotics– Biotin-HPDP(WS) solution

酸化ストレス関連試薬

生体硫黄解析用試薬

製品コード

SB17　 –SulfoBiotics– Biotin-HPDP(WS) solution
CAS番号

–

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
500 μl	￥23,500	345-91931

試験成績書

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
Manual English

技術情報

試薬の溶解性の比較

各試薬にその濃度が20 mmol/lとなるように水を加えたところ、Biotin-HPDP(WS)は水に溶解して澄明な溶液となったが、Biotin-HPDPは不溶であった（上写真）。Biotin-HPDP(WS)では高濃度の水溶液を調製することが可能なことから、タンパク質のビオチン化反応に有機溶媒を一切使用する必要がない。Biotin-HPDP(WS) solutionは、20 mmol/lの水溶液タイプであり、ビオチン化反応に使用するバッファーに必要量のBiotin-HPDP(WS) solutionを添加・希釈するだけであるため、試薬の溶解操作も不要である。

参考文献

参考文献を表示する

1) S. R. Jaffrey and Solomon H. Snyder, "The biotin switch method for the detection of S-nitrosylated proteins ", Sci. STKE, 2001, 86, pl1.
2) X. Wang, N. Kettenhofen, S. Shiva, N. Hogg, and M. Gladwin, "Copper dependence of the biotin switch assay: modified assay for measuring cellular and blood nitrosated proteins", Free Radic. Biol. Med., 2008, 44, 1362.
3) M. T. Forrester, M. W. Foster, M. Benhar, and J. S. Stamler, "Detection of protein S-nitrosylation with the biotin switch technique", Free Radic. Biol. Med., 2009, 46(2), 119.
4) M. D. Kornberg, N. Sen, M. R. Hara, K. R. Juluri, J. V. K. Nguyen, A. M. Snowman, L. Law, L. D. Hester, and S. H. Snyder, "GAPDH mediates nitrosylation of nuclear proteins", Nat. Cell Biol., 2010, 12(11), 1094.
5) J. Wan, A. F. Roth, A. O. Bailey, and N. G. Davis, "Palmitoylated proteins: purification and identification", Nat. Protoc., 2007, 1573.
6) A. K. Mustafa, M. M. Gadalla, N. Sen, S. Kim, W. Mu, S. K. Gazi, R. K. Barrow, G. Yang, R. Wang, and S. H. Snyder, "H2S signals through protein S-sulfhydration", Sci. Signal., 2009, 2(96), ra72.

よくある質問

Q Biotin-HPDPとの違いを教えてください。: A

Biotin-HPDPは殆ど水に溶けず、DMSO等の有機溶媒で数mmol/Lの溶液を調製した後、バッファーで希釈してBiotin switch法のラベル化に使用します。Biotin-HPDPを用いたBiotin switch法では、一般的に終濃度0.3 mmol/L程度で用いられます。
一方、Biotin-HPDP(WS)は水溶性が高いため、有機溶媒を使用する必要がありません。Biotin-HPDP(WS) solutionをバッファーに希釈してラベル化をすることが可能です。

Q Biotin Switch法でビオチン標識したタンパク質を回収するためのアビジン固定化樹脂には、どのようなものを用いれば良いでしょうか？: A

タンパク回収に適用できる市販品をご利用いただくことができます。弊社ではThermo Fisher社のPierce^TM NeutrAvidin^TM Agarose(製品番号：29200,29201)の使用実績があります。

Q 誤って試薬を冷凍してしまいました。使用することはできますか？: A

解凍してご使用下さい。凍結融解を10回繰り返した場合でもBiotinラベル化に影響を与えないことを確認しております。

取扱条件

規格
性状：	本品は無色～微黄色液体である。
含量：	0.400～0.440

取扱条件
保存条件: 冷蔵

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抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit – NH2 同仁化学研究所

发表于2024年3月16日由whatman中国官网

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Biotin Labeling Kit – NH₂

08 ラベル化剤

Biotin Labeling Kit – NH₂

ラベル化剤
細胞機能解析
標識キット

抗体・タンパク質標識キット

初めてビオチン標識をする
感度をあげたい
蛍光色素でうまくいかなかった

製品コード

LK03　 Biotin Labeling Kit – NH₂

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
3 samples	￥15,000	347-90891

サンプル量	50-200 µg
所要時間	2時間
標識部位	-NH₂
検出方法	顕微鏡・FCM・ウエスタンブロット・プレートリーダー
・NH₂-Reactive Biotinと標的タンパク質を混合するだけで、安定な共有結合を形成する。・Filtraiton Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。・キット付属の保存溶液でビオチン標識体の保存ができる。

キット内容

3 samples	・NH₂-Reactive Biotin ・WS Buffer ・Reaction Buffer ・Filtration Tube	3 tubes 4 ml x1 500 μl x1 3 tubes

試験成績書

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ご購入方法
お問い合わせ

マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English

Biotin Labeling Kit – NH₂の使い方

技術情報

特徴

1) 約2時間でビオチン標識体が調製できる。
2) NH₂-Reactive Biotinと標的タンパク質を混合するだけで、安定な共有結合を形成する。
3) 分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
4) 50～200 μgのタンパク質を標識可能である。
5) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
6) キット付属の保存溶液でビオチン標識体の保存ができる。

参考文献

参考文献を表示する

No.	標識対象	ストレプトアビジン	検出装置	引用（リンク）
1	抗体	POD標識ストレプトアビジン	プレートリーダー	M. Takahashi, Y. Ishida, D. Iwaki, K. Kanno, T. Suzuki, Y. Endo, Y. Homma and T. Fujita, "Essential role of Mannose-binding lectin-associated serine protease-1 in activation of the complement factor D", J. Exp. Med.., 2010, 207, （1）, 29.
2	ポリクローナル抗体（anti-human EBI3）	POD標識ストレプトアビジン	プレートリーダー	R. Nishino, A. Takano, H. Oshita, N. Ishikawa, H. Akiyama, H. Ito, H. Nakayama, Y. Miyagi, E. Tsuchiya, N. Kohno, Y. Nakamura and Y. Daigo, "Identification of Epstein-Barr virus–induced gene 3 as a novel serum and tissue biomarker and a therapeutic target for lung cancer", Clin. Cancer Res.., 2011, 17, （19）, 6272.
3	マウスモノクローナル抗体（MAb 2F4）	POD標識ストレプトアビジン	プレートリーダー	M. Tahara, S. Ohno, K. Sakai, Y. Ito, H. Fukuhara, K. Komase, M.A. Brindley, P.A. Rota, R.K. Plemper, K. Maenaka and M. Takeda, "The receptor-binding site of the measles virus hemagglutinin protein itself constitutes a conserved neutralizing epitope", J. Virol.., 2013, 87, （6）, 3583.
4	抗体（Anti-Nectin-2 mAbs）	–	–	T. Oshima, S. Sato, J. Kato, Y. Ito, T. Watanabe, I. Tsuji, A. Hori, T. Kurokawa and T. Kokubo, "Nectin-2 is a potential target for antibody therapy of breast and ovarian cancers", Mol. Cancer., 2013, 12, （60）, .
5	マウスIgG抗体（MMG-49）	POD/R-PE標識ストレプトアビジン	ウエスタンブロッティング, フローサイトメーター	D. Men, T.T. Zhang, L.W. Hou, J. Zhou, Z.P. Zhang, Y.Y. Shi, J.L. Zhang, Z.Q. Cui, J.Y. Deng, D.B. Wang and X.E. Zhang, "Self-Assembly of Ferritin Nanoparticles into an Enzyme Nanocomposite with Tunable Size for Ultrasensitive Immunoassay", ACS Nano., 2015, 9, （11）, 10852.
6	IgM抗体（TR1）	POD/R-PE標識ストレプトアビジン	ウエスタンブロッティング, フローサイトメーター	X. Piao, T. Ozawa, H. Hamana, K. Shitaoka, A. Jin, H. Kishi and A. Muraguchi, "TRAIL-receptor 1 IgM antibodies strongly induce apoptosis in human cancer cells in vitro and in vivo", Oncoimmunology., 2016, 5, （5）, e1131380.
7	マウスモノクローナル抗体（16A11）	POD標識ストレプトアビジン	プレートリーダー	N. Hosen, Y. Matsunaga, K. Hasegawa, H. Matsuno, Y. Nakamura, M. Makita, K. Watanabe, M. Yoshida, K. Satoh, S. Morimoto, F. Fujiki, H. Nakajima, J. Nakata, S. Nishida, A. Tsuboi, Y. Oka, M. Manabe, H. Ichihara, Y. Aoyama, A. Mugitani , T. Nakao, M. Hino, R. Uchibori, K. Ozawa, Y. Baba, S. Terakura, N. Wada, E. Morii, J. Nishimura, K. Takeda, Y. Oji, H. Sugiyama, J. Takagi and A. Kumanogoh, "The activated conformation of integrin β7 is a novel multiple myeloma-specific target for CAR T cell therapy", Nat. Med.., 2017, 23, （12）, 1436.
8	レクチン（Recombinant BC2LCN ）	Alexa Fluor^TM 555標識ストレプトアビジン	蛍光顕微鏡	D. Sugahara, Y. Kobayashi, Y. Akimoto, H. Kawakami, "Mouse intestinal niche cells express a distinct α1,2-fucosylated glycan recognized by a lectin from Burkholderia cenocepacia", Glycobiology., 2017, 27, （3）, 246.
9	モノクローナル抗体（H1 HA）	–	–	T. Hiono, A. Matsuda, T. Wagatsuma, M. Okamatsu, Y. Sakoda and A. Kuno, "Lectin microarray analyses reveal host cell-specific glycan profiles of the hemagglutinins of influenza A viruses", Virology., 2019, 527, 132.
10	抗体（lysozyme sdAb, Y52A mutant）	–	プレートリーダー	T. Kaya, S. Nagatoishi, K. Nagae, Y. Nakamura and K. Tsumoto, "Highly sensitive biomolecular interaction detection method using optical bound/free separation with grating-coupled surface plasmon field-enhanced fluorescence spectroscopy （GC-SPFS）.", PLoS ONE, 2019, 14, （8）, DOI:10.1371/journal.pone.0220578.
11	タンパク質（recombinant human IL-12P40）	–	プレートリーダー	Y. Morita, T. Imai, S. Bamba, K. Takahashi, O. Inatomi, T. Miyazaki, K. Watanabe, S. Nakamura, A. Yoshida, Y. Endo, N. Ohmiya, T. Tsujikawa and A. Andoh, "Clinical relevance of innovative immunoassays for serum ustekinumab and anti-ustekinumab antibody levels in Crohn's disease.", J Gastroenterol Hepatol Res, 2019, DOI:10.1111/jgh.149628.
12	レクチン（SeviL was isolated from Mytilisepta virgata）	–	–	Y. Fujii, M. Gerdol, S.M.A. Kawsar, I. Hasan, F. Spazzali, T. Yoshida, Y. Ogawa, S. Rajia, K. Kamata, Y. Koide, S. Sugawara, M. Hosono, J.R.H. Tame, H. Fujita, A. Pallavicini and Y. Ozeki, "A GM1b/asialo-GM1 oligosaccharide-binding R-type lectin from purplish bifurcate mussels Mytilisepta virgata and its effect on MAP kinases.", FEBS J., 2019, DOI: 10.1111/febs.15154..
13	モノクローナル抗体（ mAb2H6, mAb10D11）	–	–	K. Okada, H. Itoh and M. Ikemotob, "Circulating S100A8/A9 is potentially a biomarker that could reflect the severity of experimental colitis in rats', Heliyon, 2020, 6, （2）, e03470.
14	抗体（CD31）	–	–	Y. Yamazaki, M. Shinohara, A. Yamazaki, Y. Ren, Y. W. Asmann, T. Kanekiyo and Guojun Bu, "SApoE （Apolipoprotein E） in Brain Pericytes Regulates Endothelial Function in an Isoform-Dependent Manner by Modulating Basement Membrane Components", Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2020, 40, （1）, 128.

よくある質問

Q Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。: A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル　～カスタマーサポートの視点から～」

Q 使用できるIgGの量が少量しかありませんが標識できますか？: A

本キットでは、標識に必要なIgGの量は50～200μgとしています。
この範囲であれば性能に大きな違いはありません。

10μgのIgGでも標識可能ですが、バックグランドの上昇などの問題が生じる可能性があります。

Q サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか？: A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

＜高分子：分子量1万以上＞
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
＊本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q 低分子のタンパク質（分子量50,000以下）に標識する場合の方法を教えて下さい。: A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社　ナノセップ　 3K　製品No.OD003C33
PALL社　ナノセップ　10K　製品No.OD010C33
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q 標識後、フィルトレーションチューブを遠心してもメンブレン上に液が残る。: A

（１）メンブレンを目視で確認した際、メンブレンカップの淵にうっすら液が残る程度であれば、次の操作に進んで下さい。

メンブレン上に液が残っていたり、メンブレンカップを傾けて回転させたとき、液が垂れてくるようであれば、さらに遠心を8,000xg で15分～30分程度行って下さい。

（２）1)の遠心操作後もメンブレン上に液が残る場合は、標識体が凝集していないか確認してください。

抗体やタンパク質自身の性質によりますが、低分子標識剤を標識することで抗体やタンパク質の疎水性が増し、凝集する場合がございます。

標識体に凝集が見られる場合は、一度別のマイクロチューブに移し、遠心し上澄みをご使用ください。(抗体・タンパク質の回収量は低下いたします。)

上記でも解決しない場合は、小社カスタマーサポートまでお問い合わせください。

※フィルターの目詰まりが疑われる場合は、メンブレンフィルターを新しいものに交換すると解決する場合がございます。
代替品：　PALL社製　ナノセップ　30K (メーカーコード：OD030C33)

Q このキットではどのようなものが標識できますか？: A

分子量が「50,000以上」で反応性のアミノ基(NH₂)を有している化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。
量は「50～200μg」が対象となります。

＊『mg』量の標識をお考えの際には「Biotinylation Kit (Sulfo-OSu)；同仁品コード：BK01」もございます。

＊キットに添付しているFiltration Tubeのサイズが30Kのため、低分子の化合物は精製できません。

Q IgG １分子に対して、どれくらいのBiotinが標識されますか？: A

IgG １分子に対して平均7～10個のBiotinが標識されます。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意

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抗体・タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit – SH 同仁化学研究所

发表于2024年3月16日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

Biotin Labeling Kit – SH

08 ラベル化剤

Biotin Labeling Kit – SH

ラベル化剤
細胞機能解析
標識キット

抗体・タンパク質標識キット

アミノ基でうまくいかなかった
感度をあげたい

製品コード

LK10　 Biotin Labeling Kit – SH

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
3 samples	￥15,000	348-90941

サンプル量	50-200 µg
所要時間	3時間
標識部位	-SH
検出方法	顕微鏡・FCM・ウエスタンブロット・プレートリーダー
・SH-Reactive Biotinと混ぜるだけで、安定な共有結合を形成する。・分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。・付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である*。・Filtration tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。・付属の保存溶液でBiotin標識体の保存ができる。

キット内容

3 samples	・SH-Reactive Biotin ・Reducing Agent ・WS Buffer ・Reaction Buffer ・Filtration Tube	3 tubes 3 tubes 4 ml x 1 1 ml x 1 3 tubes

試験成績書

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ご購入方法
お問い合わせ

マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English

Biotin Labeling Kit – SHの使い方

技術情報

特長

1) 約3時間でビオチン標識体が調製できる。
2) SH-Reactive Biotinと混ぜるだけで、安定な共有結合を形成する。
3)分子量50,000以上のタンパク質が標識できる。
4)50～200 μgのタンパク質を標識可能である。
5) 付属の還元剤を用いることで、遊離SH基を持たないタンパク質への標識も可能である^*。
6) Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
7) 付属の保存溶液でBiotin標識体の保存ができる。

参考文献

参考文献を表示する

1) E. Terasaka, K. Yamada, P.H. Wang, K. Hosokawa, R. Yamagiwa, K. Matsumoto, S. Ishii, T. Mori, K. Yagi, H. Sawai, H. Arai, H. Sugimoto, Y. Sugita, Y. Shiro and T. Tosha, "Dynamics of nitric oxide controlled by protein complex in bacterial system", Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.., 2017, 114, (37), 9888.
2) J. Hiruma, K. Harada, A. Motoyama, Y. Okubo, T. Maeda, M. Yamamoto, M. Miyai, T. Hibino and R. Tsuboi, "Key component of inflammasome, NLRC4, was identified in the lesional epidermis of psoriatic patients", J. Dermatol.., 2018, 45, (8), 971.
3) K. Gonda, M. Watanabe, H. Tada, M. Miyashita, Y. Takahashi-Aoyama, T. Kamei, T. Ishida, S. Usami, H. Hirakawa, Y. Kakugawa, Y. Hamanaka, R. Yoshida, A. Furuta, H. Okada, H. Goda, H. Negishi, K. Takanashi, M. Takahashi, Y. Ozaki, Y. Yoshihara, Y. Nakano and N. Ohuchi, "Quantitative diagnostic imaging of cancer tissues by using phosphor-integrated dots with ultra-high brightness", Sci. Rep.., 2017, 7, (1), 7509.
4) K. Saito, M. Sakaguchi, H. Iioka, M. Matsui, H. Nakanishi, N.H. Huh and E. Kondo, "Coxsackie and adenovirus receptor is a critical regulator for the survival and growth of oral squamous carcinoma cells", Oncogene., 2014, 33, (10), 127401286.
5) K. Yamamoto, H. Murata, E.W. Putranto, K. Kataoka, A. Motoyama, T. Hibino, Y. Inoue, M. Sakaguchi and N.H. Huh, "DOCK7 is a critical regulator of the RAGE-Cdc42 signaling axis that induces formation of dendritic pseudopodia in human cancer cells", Oncol. Rep.., 2013, 29, (3), 1073.
6) M. Sakaguchi, H. Murata, K. Yamamoto, T. Ono, Y. Sakaguchi, A. Motoyama, T. Hibino, K. Kataoka and N.H. Huh, "TIRAP, an Adaptor Protein for TLR2/4, Transduces a Signal from RAGE Phosphorylated upon Ligand Binding", PLoS ONE., 2011, 6, (8), e23132.
7) M. Sakaguchi, H. Murata, Y. Aoyama, T. Hibino, E.W. Putranto, I.M. Ruma, Y. Inoue, Y. Sakaguchi, K. Yamamoto, R. Kinoshita, J. Futami, K. Kataoka, K. Iwatsuki and N.H. Huh, "DNAX-activating Protein 10 (DAP10) Membrane Adaptor Associates with Receptor for Advanced Glycation End Products (RAGE) and Modulates the RAGE-triggered Signaling Pathway in Human Keratinocytes", J. Biol. Chem.., 2014, 289, (34), 23389.
8) N. Kobayashi, K. Odaka, T. Uehara, K. Imanaka-Yoshida, Y. Kato, H. Oyama, H. Tadokoro, H. Akizawa, S. Tanada, M. Hiroe, T. Fukumura, I. Komuro, Y. Arano, T. Yoshida and T. Irie, "Toward in Vivo Imaging of Heart Disease Using a Radiolabeled Single-Chain Fv Fragment Targeting Tenascin-C", Anal. Chem.., 2011, 83, (23), 9123.
9) T. Ikeda, R. Shinohata, M. Murakami, K. Hina, S. Kamikawa, S. Hirohata, S. Kusachi, A. Tamura and S. Usui, "A rapid and precise method for measuring plasma apoE-rich HDL using polyethylene glycol and cation-exchange chromatography: a pilot study on the clinical significance of apoE-rich HDL measurements", Clin. Chim. Acta.,2017, 465, 112.
10) T. Into, M. Inomata, M. Nakashima, K. Shibata, H. Hacker and K. Matsushita, "Regulation of MyD88-Dependent Signaling Events by S Nitrosylation Retards Toll-Like Receptor Signal Transduction and Initiation of Acute-Phase Immune Responses", Mol. Cell. Biol.., 2008, 28, (4), 1338.
11) W. Nakai, T. Yoshida, D. Diez, Y. Miyatake, T. Nishibu, N. Imawaka, K. Naruse, Y. Sadamura and R. Hanayama, "A novel affinity-based method for the isolation of highly purified extracellular vesicles", Sci. Rep.., 2016, 6, 33935.
12) Y. Terasaki, T. Akuta, M. Terasaki, T. Sawa, T. Mori, T. Okamoto, M. Ozaki, M. Takeya and T. Akaike, "Guanine Nitration in Idiopathic Pulmonary Fibrosis and Its Implication for Carcinogenesis", Am. J. Respir. Crit. Care Med.., 2006, 174, (6), 665.
13) I. W. Sumardika, C. Youyi, E. Kondo, Y. Inoue, I. M. W. Ruma, H. Murata, R. Kinoshita, K. Yamamoto, S. Tomida, K. Shien, H. Sato, A. Yamauchi, J. Futami, E. W. Putranto, T. Hibino, S. Toyooka , M. Nishibori and M. Sakaguchi, "β-1,3-Galactosyl-O-Glycosyl-Glycoprotein β-1,6-N-Acetylglucosaminyltransferase 3 Increases MCAM Stability, Which Enhances S100A8/A9-Mediated Cancer Motility.", Oncol. Res., 2018, 26, (3), 431.
14) J. Iwano, D. Shinmi, K. Masuda, T. Murakami and J. Enokizono, "Impact of Different Selectivity between Soluble and Membrane-bound Forms of Carcinoembryonic Antigen (CEA) on the Target-mediated Disposition of Anti-CEA Monoclonal Antibodies.", Drug Metab. Dispos., 2019, 47, (1), 1240.
15) D. S. On, P. Chertchinnapa, Y. Shinkai, T. Kojima and H. Nakano, "Development of a dual monoclonal antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of swine influenza virus using rabbit monoclonal antibody by Ecobody technology.", J. Biosci. Bioeng., 2020, DOI:10.1016/j.jbiosc.2020.03.003.

よくある質問

Q Labeling Kitで1次抗体を直接標識する利点を教えてください。: A

はじめて抗体標識をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
カスタマーサポートの視点から直接標識法の利点や実施例等を記載しておりますので、ご参照下さい。
下記リンクよりダウンロード可能です。
「はじめての抗体標識プロトコル　～カスタマーサポートの視点から～」

Q サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか？: A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

＜高分子：分子量1万以上＞
影響する可能性があります。
高分子でSH基をもつ化合物は、Filtration Tubeでも除くことができません。そのため標識され、蛍光性不純物として影響します。反応に使用する前に別途精製を行ってください。一方、SH基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。
＊本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

Q 低分子のタンパク質（分子量50,000以下）に標識する場合の方法を教えて下さい。: A

キット付属のフィルトレーションチューブは分画分子量30Kの限外濾過フィルターのため、余裕をもって50,000以上のタンパク質のご使用を推奨しております。

分子量50,000以下のタンパク質を標識される場合は、下記のような分画分子量の小さい限外濾過フィルターに変更して頂くことで、低分子のタンパク質でもラベル化可能でございます。

——————————————
PALL社　ナノセップ　 3K　製品No.OD003C33
PALL社　ナノセップ　10K　製品No.OD010C33
——————————————

キット同梱のフィルターを用いた場合に比べ遠心に時間を要することがございますので遠心時間はご検討下さい。

Q 標識後、フィルトレーションチューブを遠心してもメンブレン上に液が残る。: A

（１）メンブレンを目視で確認した際、メンブレンカップの淵にうっすら液が残る程度であれば、次の操作に進んで下さい。
メンブレン上に液が残っていたり、メンブレンカップを傾けて回転させたとき、液が垂れてくるようであれば、さらに遠心を8,000g で15分～30分程度行って下さい。　　　　　　　　　　
（２）1)の遠心操作後もメンブレン上に液が残る場合は、標識体が凝集していないか確認してください。

抗体やタンパク質自身の性質によりますが、低分子標識剤を標識することで抗体やタンパク質の疎水性が増し、凝集する場合がございます。

標識体に凝集が見られる場合は、一度別のマイクロチューブに移し、遠心し上澄みをご使用ください。(抗体・タンパク質の回収量は低下いたします。)

上記でも解決しない場合は、小社カスタマーサポートまでお問い合わせください。

※フィルターの目詰まりが疑われる場合は、メンブレンフィルターを新しいものに交換すると解決する場合がございます。
代替品：　PALL社製　ナノセップ　30K (メーカーコード：OD030C33)

Q どのようなものが標識できますか？: A

分子量が「50,000以上」で[S-S]もしくは[SH]を有している化合物(抗体、蛋白質など)であれば標識できます。
量は「50～200 μg」が対象となります。
＊キットに添付しているFiltration Tubeのサイズが30Kのため、低分子の化合物は精製できません。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意

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抗体標識キット Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit 同仁化学研究所

发表于2024年3月16日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit

08 ラベル化剤

Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit

ラベル化剤
細胞機能解析
標識キット

抗体標識キット

初めてビオチン標識をする
少量で試してみたい
感度をあげたい
蛍光色素でうまくいかなかった
30分以内で標識したい

製品コード

LK37　 Ab-10 Rapid Biotin Labeling Kit

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
3 samples	￥20,500	348-92021

サンプル量	10 µg (lgG)
所要時間	30分以内
標識部位	-NH₂
検出方法	顕微鏡・FCM・ウエスタンブロット・プレートリーダー

キット内容

3 samples	・Reactive Biotin 　　・Reaction Buffer ・Stop Solution	× 3 100 μl × 1 100 μl × 1

試験成績書

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ご購入方法
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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English

技術情報

特徴

1）少量の抗体（10 μg）でBiotin標識抗体を調製できる。
2）抗体と混ぜるだけで標識できる。
3） 30分以内に標識できる。

よくある質問

Q 抗体溶液中に含まれる添加剤は標識反応に影響しますか？: A

抗体溶液中の添加剤によっては影響を受ける場合がございますので、ご使用前に必ず取り扱い説明書中の注意事項をご確認ください。

Q 標識にはどのようなサンプルが使用できますか？: A

10 μg のIgG抗体をご使用頂けます。

Q 使用可能な抗体のクラスには、どのようなものがありますか？: A

本製品はIgG抗体へ標識するよう最適化しています。IgG以外のクラス（IgMやIgA等）では標識実績はございません。

Q 直接標識することで免疫染色に影響がみられた抗体種はありますか？

抗体の種類によっては直接標識法（1次抗体法）により抗原認識能を失うことがあります。抗原認識部位またはその近傍にアミノ基が存在した場合に、その部分に標識体が結合することで抗原認識能が低下することが考えられます。
弊社で確認した抗体のうち、直接標識することで免疫染色に問題が生じた抗体をご案内いたします。

抗体名	由来	クローナリティ
Anti-VDAC1 antibody	Rabbit	ポリクローナル
Anti-EEA1 antibody	Rabbit	ポリクローナル
Anti-α-actin antibody	Mouse	モノクローナル
Anti-LAMP 1 antibody	Mouse	モノクローナル
Anti-Calnexin Antibody	Rabbit	ポリクローナル

Q 標識操作時に準備するものはありますか？: A

はい。DMSOを準備して頂く必要があります。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意

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タンパク質標識キット Biotin Labeling Kit – NH2 (for 1mg) 同仁化学研究所

发表于2024年3月16日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品，欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

Biotin Labeling Kit – NH₂ (for 1mg)

08 ラベル化剤

Biotin Labeling Kit – NH₂ (for 1mg)

ラベル化剤
細胞機能解析
標識キット

タンパク質標識キット

大容量のサンプルをラベル化したい
感度をあげたい
蛍光色素でうまくいかなかった

製品コード

LK55　 Biotin Labeling Kit – NH₂ (for 1mg)

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 sample	￥26,200	344-91141

サンプル量	1 mg
所要時間	2時間
標識部位	-NH₂
検出方法	顕微鏡・FCM・ウエスタンブロット・プレートリーダー
・高分子化合物（MW>50,000)に標識できる。・NH2-Reactive Biotinと混合するだけで標識体を形成する。・Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

キット内容

1 sample	・NH₂-Reactive Biotin ・WS Buffer ・Reaction Buffer ・Filtration Tube ・15 ml Tube (for counterbalance)	1 tube 13 ml x 1 1.2 ml x 1 1 tube 1 tube

試験成績書

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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English

技術情報

特徴

1）1 mgのタンパク質を標識可能である。
2）高分子化合物（MW>50,000)に標識できる。
3）NH₂-Reactive Biotinと混合するだけで標識体を形成する。
4）Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。

よくある質問

Q サンプル溶液中の共存物は反応に影響しますか？: A

共存物の種類により影響することがあります。
溶液中にどのような物質が含まれるかを確認の上、状況に応じてラベル化に用いるサンプルの精製を行い、標識反応にご使用ください。

＜高分子：分子量1万以上＞
影響する可能性があります。
BSAやゼラチンなどアミノ基をもつ化合物が含まれると、抗体への標識効率が低下します。また、高分子のためFiltration Tubeでも除くことができません。また、アミノ基を持たない化合物でも、高分子の不純物が多いとフィルターの目詰まりの原因になり、標識・精製操作に支障がでる可能性もあります。反応に使用する前に別途精製を行ってください。
＊本製品に限らず他のLabeling kit に関しても同様の注意が必要です。

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意

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Self Assembled Monolayer(SAM)研究用試薬 Biotin-SAM Formation Reagent 同仁化学研究所

发表于2024年3月16日由whatman中国官网

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Biotin-SAM Formation Reagent

20 機能性有機材料

Biotin-SAM Formation Reagent

機能性有機材料

Self Assembled Monolayer(SAM)研究用試薬

製品コード

B564　 Biotin-SAM Formation Reagent

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
1 μmol x 3	￥19,800	340-91481

試験成績書

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マニュアル

取扱説明書日本語
取扱説明書 English
プロトコル自己組織化単分子膜(SAMs)をつくりたい
パンフレット自己組織化単分子膜作製用試薬

技術情報

溶解例

1 mmol/L エタノール溶液： 1 ボトルをエタノール 1 mL で溶解

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵

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3´-Biotin-GTP 货号 #N0760SNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年2月14日由whatman中国官网

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 核苷酸溶液和缓冲液

3´-Biotin-GTP 收藏

货号

规格

价格(元)

北京库存

上海库存

广州库存

成都库存

苏州库存

#N0760S

0.5 μmol

3,929.00

无

Download:

isoschizomers |
compatible ends |
single letter code

Description:

3´-Biotin-GTP can be used with the Vaccinia Capping System (NEB #M2080),to cap 5´ ends of tri- or di- phosphorylated RNA (1). This enables capture of the RNA 5´ ends using streptavidin.

3´-Biotin-GTP 货号 #N0760S

Supplied in: Ultrapure water as a Triethylammonium salt at pH 7.0
Molecular Formula: C₃₁H₅₀N₁₁O₁₉P₃S
Molecular Weight: 1005.78 g/mol
Extinction Coefficient: λ260 = ~11,700 Lmol-1 cm-1

Proterties and Usage

Storage Temperature

-20°C

SNAP-Biotin® 货号 #S9110SNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月16日由whatman中国官网

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产品资料 – 细胞分析 – 细胞影像学及分析

SNAP-Biotin^® 收藏

货号

规格

价格(元)

北京库存

上海库存

广州库存

成都库存

苏州库存

#S9110S

50 nmol

3,379.00

有

无

Download:

isoschizomers |
compatible ends |
single letter code

特性

 用生物素标记 SNAP-、CLIP- 或 ACP-tag 融合蛋白

 可以与多种链霉亲合素结合

 可与微孔板表面的链亲和素吸附

概述

为了灵活应用于现有的技术，NEB 提供生物素标记物，用于链霉亲和素平台进行的研究。细胞通透性（ SNAP-Biotin 和 CLIP-Biotin）或细胞非通透性底物（CoA-Biotin）通过一个氨己酰基与生物素相连。生物素标记物可用于对活细胞内部或表面的融合蛋白的生物素化，从而检测链亲和素荧光基耦联物，或在溶液中标记，以进行SDS-PAGE/ Western blot 分析。生物素标记物也被用于与链霉亲和素结合，以进行结合和相互作用方面的研究。

规格

内容及储存

–SulfoBiotics– Biotin-HPDP(WS) solution

–SulfoBiotics– Biotin-HPDP(WS) solution

生体硫黄解析用試薬

マニュアル

技術情報

試薬の溶解性の比較

参考文献

よくある質問

取扱条件

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技術情報

特徴

参考文献

よくある質問

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技術情報

特長

参考文献

よくある質問

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特徴

よくある質問

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技術情報

溶解例

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Proterties and Usage

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特性

概述

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