凯杰qiagen 76506 RNAprotect Bacteria Reagent

凯杰qiagen 76506 RNAprotect Bacteria Reagent

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  • 凯杰qiagen 76506 RNAprotect Bacteria Reagent稳定细菌样本中的RNA立即稳定RNA室温下方便安全的操作可稳定革兰氏阳性和阴性菌立即稳定和保护RNA,确保可靠的基因分析
详细介绍

凯杰qiagen 76506 RNAprotect Bacteria Reagent

RNAprotect Bacteria Reagent可在RNA纯化步骤前立即稳定RNA,从而确保可靠的基因表达和分析数据。在细菌培养基中直接加入试剂即可稳定革兰氏阳性和革兰氏阴性菌。

凯杰qiagen 76506 RNAprotect Bacteria Reagent

GeneChip分析。

使用RNeasy Protect Bacteria Kit(RNeasy Protect Bacteria)从RNAprotect稳定的E. coli培养物中分离总RNA,或者使用商品化的沉淀方法(Supplier EIII)从未稳定的培养物中分离总RNA。在分离RNA前将RNA聚合酶抑制剂利福平加入到一半的培养物中,以区分在限定培养条件下的基因表达以及在收集和RNA分离过程中人为基因诱导的作用。加入和未加入利福平时转录水平的差异基本上反映出RNA降解的程度。[A] 参照标准的Affymetrix实验方案对E. coli微阵列进行GeneChip分析。[B] 通过GeneChip分析测得的不同转录本数目除以微阵列中的转录本总数,评估基因表达百分比。(数据来自于与Affymetrix合作开展的一项研究。)

RNAprotect Bacteria Reagent防止mRNA降解。

将RNA聚合酶抑制剂利福平加入到E. coli培养物中,停止转录,仅监测RNA的降解。培养物分为两半,在其中一半加入RNAprotect Bacteria Reagent。样本置于室温0、4、8和16分钟后离心并分离RNA。采用琼脂糖凝胶电泳分析获得的RNA(上图)。采用northern印迹分析检查两半培养物中两种标记基因的表达。中图:ompA(半衰期15分钟);下图:α-内酰胺酶(半衰期2–5分钟)。

Bacteria(tuf gene) Quantitative PCR Kit酶试剂盒Takara


Bacteria(tuf gene) Quantitative PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR240A Bacteria(tuf gene) Quantitative PCR Kit 100 Rxns 询价 Bacteria(tuf gene) Quantitative PCR Kit Bacteria(tuf gene) Quantitative PCR Kit Bacteria(tuf gene) Quantitative PCR Kit
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■ 制品内容 (25 μl反应×100次量)
TB Green Premix Ex Taq GC*1 (2×conc.) 625 μl × 2支
TUF Primer Mix (5×conc.) 250 μl × 2支
dH2O 1 ml
ROX Reference Dye*2 (50×conc.) 50 μl
ROX Reference Dye II*2 (50×conc.) 50 μl
TUF Positive Control (1×105 Copies/μl) 100 μl
EASY Dilution (for Real Time PCR) 1ml × 2支
   
*1 含有TaKaRa Ex Taq HS, dNTP Mixture, Mg2+, and TB Green。
*2 用于Applied Biosystems Real Time PCR扩增仪,用以校正孔与孔之间的荧光信号误差。
◆ 使用ROX Reference Dye的PCR仪
· StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用ROX Reference Dye II的PCR仪
· Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 不使用ROX Reference Dye或ROX Reference Dye II的PCR仪
· Thermal Cycler Dice Real Time System II(Code No. TP900/TP960:终卖)
· Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(Code No. TP700/TP760:终卖)
 
■ 制品说明
本制品是使用Real Time PCR方法对细菌数进行定量的试剂盒。同常规需要2-4天的培养时间相比,本制品可快速地获得检测结果,能够有效应用于食品、环境管理领域。常规方法因菌种的适宜培养条件不同,要考虑检测样本的种类及储存条件等,因此,对检测样本中存在的菌种所需要的培养基和培养温度要花费很大功夫。使用本制品可一次性地检测多种菌种,而且不必考虑特殊培养条件。
 
■ 保存
◇ TB Green Premix Ex Taq GC
4℃避光保存保存,保存6个月性能稳定。保存时要避免污染。
注:长期保存时-80℃保存。勿存于-20℃,产品融解后请与4℃保存,并在6个月内用完。
◇ 其他组份
-20℃保存。
 
■ 检测基因
目前,对细菌的检测方法是通过PCR法扩增16S rRNA,由于16S rRNA在细菌菌种间的拷贝数不同,因此无法进行准确定量。本制品是以菌种间存在性高、染色体上拷贝数低 (1或2个拷贝) 的蛋白质延伸因子Tu (tuf) 为靶基因进行检测的试剂盒。
 
■ Real Time PCR方法
Real Time PCR方法是在PCR扩增过程中,通过测定荧光强度实时监测扩增产物量的一种快速、准确定量的检测方法。制品中的TB Green Premix Ex Taq GC是一种嵌合荧光染料检测法用试剂,对GC序列含量高的DNA片段也可以很好地进行扩增,适用于多种菌种的检测。
 
 

页面更新:2022-06-24 13:02:00

TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0酶试剂盒Takara


TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9763 TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0 50 Rxns ¥650
¥520
TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0 TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0 TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 制品内容 (50 次量)
本试剂盒分Part I 与 Part II两部分。
□ Part I (-20℃保存)
Proteinase K (20 mg/ml) 1 ml
Lysozyme (20 mg/ml)*1 1.25 ml × 2
RNase A (10 mg/ml) 500 μl
*1 应尽量避免反复冻融,融化后请于4℃长期保存。
 
□ Part II 室温 (15-25℃) 保存  
Buffer BS 28 ml
Buffer GL*1 12 ml
Buffer GB*1 12 ml
Buffer WA*1 28 ml
Buffer WB*2 24 ml
Elution Buffer 14 ml
Spin Columns 50 支
Collection tubes 50 支
*1 含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*2 在首次使用前,请添加56 ml的100%乙醇,混合均匀。
 
■ 制品说明
本试剂盒是专门用于提取各种革兰氏阳性/阴性细菌 (Gram-positive/negative Bacteria) 基因组DNA的小量纯化试剂盒。试剂盒采用了溶菌酶以及特别的细胞裂解系统,由细胞裂解液裂解细胞释放基因组DNA,再结合DNA制备膜技术纯化基因组DNA,适用于革兰氏阴性菌及绝大部分革兰氏阳性菌。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点,组织细胞裂解后,提取操作仅需20分钟便可完成。使用本试剂盒可从1.0-5.0E+09 (当OD600=1时,认为1 ml菌液中含有1.0E+09个细胞) 的细菌中纯化得到1-20 μg的高纯度基因组DNA,提取得到的基因组DNA可用于PCR反应、Southern杂交以及RAPD、AFLP、RFLP等多种分子生物学实验。
 
■ 保存与运输
1. 本试剂盒分三部分保存,Part I请于-20℃保存,其中Lysozyme (20 mg/ml) 融化后请于4℃长期保存;Part II于室温下 (15-25℃) 保存。
2. 本试剂盒分两部分运输,Part I请于-20℃条件下运输;Part II于室温下 (15-25℃) 运输。
 
■ 实验操作流程图
TaKaRa MiniBEST Bacteria Genomic DNA Extraction Kit Ver.3.0
 
■ 注意事项
1. 应尽量使用新鲜的菌体,以确保提取的基因组DNA的收量及完整性。
2. 部分试剂中含刺激性化合物,操作时请戴上乳胶手套和眼镜,避免沾染皮肤和眼睛等,并应尽量在通风橱中进行操作。若沾染皮肤、眼睛,要立即用大量清水冲洗,必要时应寻求医疗咨询。
3. 基因组DNA需长期保存时,建议用Elution Buffer溶出。
4. 菌体起始量不要过多,过夜培养的菌体0.1-1 ml集菌即可。
 
 

页面更新:2019-12-09 14:24:39