日本同仁化学ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552- DOJINDO

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ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552
ADP/ATP比率检测试剂盒
ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence
商品信息
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特点:

●可获得稳定的ADP/ATP比值

●溶液配制后可以保存

●冷藏保存(无需解冻操作)

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100tests

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ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

产品解说
产品概述
参考文献
规格性状
检测原理
与其他公司产品比较
实验例
常见问题Q&A

产品解说

 

产品概述

通常情况下,当细胞内ATP浓度降低时,会由二磷酸腺苷(ADP)重新合成为ATP,以维持细胞内一定的ATP浓度。当产生ATP的相关代谢发生紊乱时,ADP无法再合成为ATP,ATP却不断地分解成为ADP,导致ADP/ATP的比例上升。而ADP/ATP比率的变化与细胞凋亡、细胞自噬、能量代谢等诸多途径息息相关,因此经常被作为细胞活性的指标之一检测。

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

参考文献

1、Hao Gu, Yuhui Zhu, Jiawei Yang, Ruixue Jiang, Yuwei Deng, Anshuo Li, Yingjing Fang, Qianju Wu, Honghuan Tu, Haishuang Chang, Jin Wen, Xinquan Jiang,”Liver-Inspired Polyetherketoneketone Scaffolds Simulate Regenerative Signals and Mobilize Anti-Inflammatory Reserves to Reprogram Macrophage Metabolism for Boosted Osteoporotic Osseointegration.Advanced Science”,2023, Advanced Science, doi:10.1002/advs.202302136

2、Hao Gu, Yuhui Zhu, Jiawei Yang, Ruixue Jiang, Yuwei Deng, Anshuo Li, Yingjing Fang, Qianju Wu, Honghuan Tu, Haishuang Chang, Jin Wen, and Xinquan Jiang,“Liver-Inspired Polyetherketoneketone Scaffolds Simulate Regenerative Signals and Mobilize Anti-Inflammatory Reserves to Reprogram Macrophage Metabolism for Boosted Osteoporotic Osseointegration”,2023Advanced Science ,DOI: 10.1002/advs.202302136

3、Takeshi Ikizawa , Kazutaka Ikeda, Makoto Arita, Shojiro Kitajima , Tomoyoshi Soga , Hidenori Ichijo, and Isao Naguro,“Mitochondria directly sense osmotic stress to trigger rapid metabolic remodeling via regulation of pyruvate dehydrogenase phosphorylation”,2022Research Article,doi.org/10.1016/j.jbc.2022.102837

 

规格性状

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

检测原理

本试剂盒可以检测细胞中ADP与ATP的比率。首先用萤火虫荧光素酶法检测细胞内的ATP。

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

之后用酶将细胞内的ADP全部转化为ATP,再用相同的发光原理检测ATP,即可算出细胞内ADP/ATP的比率。

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与其他公司产品比较

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

本试剂盒的检测结果,不受ATP和ADP的总量影响,比值的结果稳定。

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实验例

使用Staurosporine诱导细胞凋亡后,用本试剂盒检测细胞中ADP/ATP的比值。另外,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测Annexin V-FITC/PI染料标记的Staurosporine诱导凋亡的细胞。

结果显示,Staurosporine诱导后的细胞中ADP/ATP的比例明显上升。相同条件的细胞中也观察到磷脂酰丝氨酸(PS)的外翻以及细胞膜破损。说明凋亡细胞中的ADP/ATP的比率上升。

 

<ADP/ATP比的检测结果>

 

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

常见问题Q&A

Q:一个试剂盒可以检测多少个样品?
A:按照每个样品3个复孔计算,可以检测32个样品,96孔板的孔板设置请参考说明书。
Q:检测时是否可以用白色96孔板以外的孔板?
A:黑色和透明孔板都会造成发光强度的降低,透明孔板还会导致背景升高。因此建议使用白色96孔板。
Q:配制好的working solution是否可以保存?
A:本试剂盒共包含4种working solution,ADP working solution无法保存,请现配现用。其他3种的保存条件及保存时间如下:

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

Q:确定最佳细胞数的方法是什么?
A:配制梯度浓度的细胞悬液播种至孔板中,按照最终实验相同的条件进行培养。使用本试剂盒制作标准曲线(参照图1),选择呈直线性的范围,并且ADP/ATP比率(参考图2)在相对稳定的范围内进行最终实验的检测。下图的情况,最细胞数的范围是2,000~4,000个。

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

Q:发光法检测波长为多少?
A:由于是通过萤光素检测,所以检测波长为556 nm。

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ADP/ATP比率检测试剂盒
ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence
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产品概述

通常情况下,当细胞内ATP浓度降低时,会由二磷酸腺苷(ADP)重新合成为ATP,以维持细胞内一定的ATP浓度。当产生ATP的相关代谢发生紊乱时,ADP无法再合成为ATP,ATP却不断地分解成为ADP,导致ADP/ATP的比例上升。而ADP/ATP比率的变化与细胞凋亡、细胞自噬、能量代谢等诸多途径息息相关,因此经常被作为细胞活性的指标之一检测。

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产品文献

1、Hao Gu, Yuhui Zhu, Jiawei Yang, Ruixue Jiang, Yuwei Deng, Anshuo Li, Yingjing Fang, Qianju Wu, Honghuan Tu, Haishuang Chang, Jin Wen, Xinquan Jiang,”Liver-Inspired Polyetherketoneketone Scaffolds Simulate Regenerative Signals and Mobilize Anti-Inflammatory Reserves to Reprogram Macrophage Metabolism for Boosted Osteoporotic Osseointegration.Advanced Science”,2023, Advanced Science, doi:10.1002/advs.202302136

规格性状

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检测原理

本试剂盒可以检测细胞中ADP与ATP的比率。首先用萤火虫荧光素酶法检测细胞内的ATP。

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之后用酶将细胞内的ADP全部转化为ATP,再用相同的发光原理检测ATP,即可算出细胞内ADP/ATP的比率。

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ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

本试剂盒的检测结果,不受ATP和ADP的总量影响,比值的结果稳定。

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实验例

使用Staurosporine诱导细胞凋亡后,用本试剂盒检测细胞中ADP/ATP的比值。另外,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测Annexin V-FITC/PI染料标记的Staurosporine诱导凋亡的细胞。

结果显示,Staurosporine诱导后的细胞中ADP/ATP的比例明显上升。相同条件的细胞中也观察到磷脂酰丝氨酸(PS)的外翻以及细胞膜破损。说明凋亡细胞中的ADP/ATP的比率上升。

 

<ADP/ATP比的检测结果>

 

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常见问题Q&A

Q:一个试剂盒可以检测多少个样品?
A:按照每个样品3个复孔计算,可以检测32个样品,96孔板的孔板设置请参考说明书。
Q:检测时是否可以用白色96孔板以外的孔板?
A:黑色和透明孔板都会造成发光强度的降低,透明孔板还会导致背景升高。因此建议使用白色96孔板。
Q:配制好的working solution是否可以保存?
A:本试剂盒共包含4种working solution,ADP working solution无法保存,请现配现用。其他3种的保存条件及保存时间如下:

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence货号:A552

Q:确定最佳细胞数的方法是什么?
A:配制梯度浓度的细胞悬液播种至孔板中,按照最终实验相同的条件进行培养。使用本试剂盒制作标准曲线(参照图1),选择呈直线性的范围,并且ADP/ATP比率(参考图2)在相对稳定的范围内进行最终实验的检测。下图的情况,最细胞数的范围是2,000~4,000个。

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Q:发光法检测波长为多少?
A:由于是通过萤光素检测,所以检测波长为556 nm。

ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

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ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所ATP Assay Kit-Luminescence

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

ATP Assay Kit-Luminescence

ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • ミトコンドリア関連
  • 細胞内代謝

ATP測定キット

  • 安定した発光による高感度検出
  • 標準品の同梱で、不安定なATPの秤量が不要
  • 試薬を加えるだけの簡単な操作
  • 製品コード
    A550  ATP Assay Kit-Luminescence
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
50 tests ¥26,800 346-09793
200 tests ¥48,200 340-09791
キット内容
50 tests ・Enzyme Solution
・Substrate
・Assay Buffer
・ATP Standard
10 μl×1
×1
5.5 ml×1
×1
200 tests ・Enzyme Solution
・Substrate
・Assay Buffer
・ATP Standard
20 μl×2
×2
11 ml×2
×1

  • ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所
  • ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所
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  • 取扱説明書 日本語
    ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所
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技術情報

ATPの測定原理

ATP Assay Kit-Luminescenceは、培養細胞中のアデノシン三リン酸(ATP)量をホタル・ルシフェラーゼ発光法で定量するキットです。
本キットではマイクロプレートを用いた多検体測定が可能です。

ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

 

文献No. 対象サンプル 装置    引用(リンク)
1) 細胞
DLD-1 (ヒト結腸腺癌)
プレートリーダー

G. Enkhbat, A. Nakanishi, Y. Miki, "The BRCA2 missense mutation K2497R suppressed self-degradation and increased ATP production and cell proliferation", 2021, doi:10.1016/j.bbrc.2021.12.073.

よくある質問

Q

1キットで測定可能なサンプル数を教えて下さい

A

検量線の作成およびサンプルの測定をそれぞれn=3で行った場合、以下のサンプル数を測定できます。
96ウェルプレートのレイアウト例については、取扱説明書をご参照ください。
 ・50 tests :8サンプル
 ・200 tests:48サンプル(96 ウェルプレート2枚で検量線を2回測定した場合)

Q

発光シグナルはどの程度安定ですか?

A

発光シグナルは3時間安定です。ただし、温度と光が発光に影響しますので、すぐに測定できない場合は、遮光し温度を一定(25℃付近)に保てる場所で静置してください。

Q

測定用のプレートは白色以外のプレートを使用できますか?

A

測定はできますが、ブラックプレートや透明プレートを用いた場合、発光強度が下がります。
また、透明プレートの場合はブランクが高くなりますので、白色プレートを推奨しております。

Q

測定試料は保存できますか?

A

ATPが不安定なため保存できません。実験後は直ぐにWorking solutionを添加し、3時間以内に測定してください。

Q

Working solutionは保存できますか?

A

冷凍(-20℃)で30日間の保存が可能です。
凍結融解を繰り返すことは試薬の劣化を招く恐れがありますので、その場合はあらかじめ小分けしてから保存することをお勧めします。

Q

組織を用いた実験例はありますか?

A

マウス肝臓組織を用いてATPおよびNAD/NADH量を測定した事例がございます。
実験操作の詳細は下記をご参照ください。

アルカリ抽出法による肝臓サンプルからの代謝指標の抽出

1. マウス肝臓100 mgあたり500 µlの冷えた0.5 mol/l KOH水溶液を入れる。
 *使用する組織は必ず灌流操作等で十分に脱血してください。血液の残存は測定に影響を与えます。

2. ダウンス型ホモジナイザーで組織を破砕する。
 *氷浴上で行ってください。

3. サンプルを回収し、サンプルチューブに移す。破砕に使用した容器を500 µlの冷えた0.5 mol/l KOH水溶液で共洗いし、チューブ内のサンプルと合わせる。
 (全量 1 ml)

4. 冷えた超純水 1 mlをサンプルチューブに加え、よく混合し氷上で5分間静置する。(全量 2 ml)
 *溶液の粘性が高いと、次操作の遠心後の分離が困難になる場合があります。その際は、シリンジに25 G(針のゲージ数)程度の細い針を付け、サンプル溶液をシリンジでスムーズに出し入れができるまで(20-30回)混合してください。

5. 12,000 x g , 4℃で5分間遠心し、上清を900 µlずつ二つのサンプルチューブに回収する。
 *1本をATP測定、もう1本をNAD/NADH測定に使用。ATPのみを測定する場合は900 μlx1本のみで構いません。

 

ATP測定用サンプルの調製
6. 上記5. で調製した900 µlのサンプルに200 µl の1 mol/l KH2PO4水溶液を入れ中和し、よく混合後氷上で5分間静置する。

7. 12,000 x g , 4℃で5分間遠心し、上清1 mlをサンプルチューブに回収し測定用サンプルとする。

 

<測定時の注意点>
*操作5、7で得たサンプルは保存できません。その日のうちに測定してください。
*スタンダード、サンプルの希釈には希釈用溶液として0.5 mol/l KOH水溶液と1 mol/l KH2PO4水溶液を9:5の比率で混合したものを使用してください。

<測定例>
NASH誘導マウス肝臓組織におけるATP量の変化

ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

 

Q

発光測定の波長を教えてください。

A

本キットには、ホタルルシフェリンを使用しているため、発光測定の波長は556nmとなります。

ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所 ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷凍 , 取扱条件: 吸湿注意
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    MTT

  • ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

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    Mitophagy Detection Kit

  • ATP測定キット ATP Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

    トータルROS検出キット

    ROS Assay Kit -Highly Sensitive DCFH-DA-

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

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ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence

01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬

ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
  • ミトコンドリア関連
  • 細胞内代謝
  • 細胞毒性

ADP/ATP比測定キット

  • 安定したADP/ATPの値が取得可能
  • 調液後、保存可能
  • 冷蔵保存(凍結融解不要)
  • 製品コード
    A552  ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
100 tests ¥53,500 346-09911

<使用回数の目安> 96-well plate 1枚

アプリケーションデータ追加してます!
アポトーシス誘導におけるADP/ATP比の変動
老化誘導におけるADP/ATP比の変動

キット内容
100 tests ・ATP Enzyme Solution
・ATP Substrate
・Assay Buffer
・ADP Enzyme Solution
・ADP Substrate
・ADP Dilution Buffer
20 ×l×1
×1
11 ml×1
25 ×l×1
×1
250 ×l×1

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技術情報

既存品との比較

他社既存品との比較を下記表にまとめます。

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

本キットは、既存品に比べATPとADPの総量に依存せず、比率を安定的に測定することが可能です。

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

よくある質問

Q

1キットあたり測定可能なサンプル数を教えて下さい。

A

サンプルの測定をn=3で行った場合、32サンプルの測定が可能です。96ウェルプレートのレイアウト例については、取扱説明書をご参照下さい。

Q

測定用のプレートは白色以外のプレートを使用できますか?

A

ブラックプレートや透明プレートを用いた場合、発光強度が下がります。また、透明プレートの場合はブランクが高くなります。よって、白色プレートを推奨致します。

Q

working solutionは保存できますか?

A

本キットには4種類のworking solutionがございます。ADP working solutionは保存できないため、用時調製して下さい。その他の3種類に関して、保存条件と保存可能期間は以下の通りです。

 

保存条件

保存期間

ATP working solution

冷凍(-20℃)

30日間

ADP Substrate working solution

冷蔵(0-5℃)

30日間

ADP Enzyme working solution

冷蔵(0-5℃)

30日間

ADP working solution

保存不可

保存不可

Q

細胞数の最適化の方法を教えて下さい。

A

段階希釈した細胞をプレートに播種し、目的実験と同様の条件で培養します。その後、本キットを用いて検量線(図1参照)を作成しその結果、直線性がある範囲であり、ADP/ATP 比率(図2参照)が一定となる細胞数範囲内で測定を行って下さい。下記の例の場合、細胞数範囲は2,000~4,000 cellsとなります。

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所 ADP/ATP比測定キット ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
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ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所

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ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所Caged ATP

04 細胞内蛍光プローブ

Caged ATP

ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所

  • 細胞内蛍光プローブ

ケージド試薬: ATP

  • 製品コード
    CC01  Caged ATP
  • CAS番号
    67030-27-7(free acid)
  • 化学名
    P3-[1-(2-Nitrophenyl)ethyl]adenosine-5′-triphosphate,trisodium salt
  • 分子式・分子量
    C18H20N6Na3O15P3=722.27
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 mg ¥23,800 345-05503
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マニュアル

  • プロトコル ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所 細胞内目的部位にATP を局部添加したい
    ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所

参考文献

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1) J. H. Kaplan, B. F. Iii and J. F. Hoffman, "Rapid Photolytic Release of Adenosine 5'-triphosphate from a Protected Analogue: Utilization by the Na: K Pump of Human Red Blood Cell Ghosts", Biochemistry, 197817, 1929. 
2) E. Ohtsuka, H. Uemura, T. Doi, T. Miyake, S. Nishikawa and M. Ikehara, "A New Method for 3'Labelling of Polyribonucleotides by Phosphorylation with RNA Ligase and Its Application to the 3'-Modification for Joining Reactions", Nucleic Acids Res.19796, 443. 
3) J. A. McCray, L. Herbette, T. Kihara and D. R. Trentham, "A New Approach to Time-resolved Studies of ATP-requiring Biological Systems: Laser Flash Photolysis Caged ATP", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 198077, 7237. 
4) Y. E. Goldman, M. G. Hibberd, J. A. McCray and D. R. Trentham, "Relaxation of Muscle Fibres by Photolysis of Caged ATP", Nature, 1982300, 701. 
5) D. H. Pierce, A. Scarpa, M. R. Topp and J. K. Blasie, "Kinetics of Calcium Uptake by Isolated Sarcoplasmic Reticulum Vesicles Using Flash Photolysis of Caged Adenosine 5'-Triphoshate", Biochemistry, 198322, 5254. 
6) 杉晴夫, "アクチンとミオシンの構造と両者間の相互作用", 生体の科学, 198334, 334. 
7) B. F. Iii, "Na+ Movement in a Single Turnover of the Na Pump", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 198481, 5310. 
8) Y. E. Goldman, "Laser Pulsed Release of ATP and Other Optical Methods in the Study of Muscle Contraction", Soc. Gen. Physiol. Ser., 198640, 397. 
9) J. W. Walker, G. P. Reid, J. A. McCray and D. R. Trentham, "Photolabile 1-(2-Nitrophenyl)ethyl Phosphate Esters of Adenine Nucleotide Analogues. Synthesis and Mechanism of Photolysis", J. Am. Chem. Soc.1988110, 7170. 
10) J. W. Walker, G. P. Reid and D. R. Trentham, "[16] Synthesis and Properties of Caged Nucleotides", Methods in Enzymol.1989172, 288. 
11) K. Horiuti, T. Sakoda, M. Takei and K. Yamada, "Effects of Ethylene Glycol on the Kinetics of Contraction on Flash Photolysis of Caged ATP in Rat Psoas Muscle Fibres", J. Muscle. Res. and Cell Motility, 199213, 199. 
12) Z. Lu, R. L. Moss and J. W. Walker, "Tension Transients Initiated by Photogenerations of MgADP in Skinned Skeletal Muscle Fibers", J. Gen. Physiol.1993101, 867.

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色粉末で水に溶ける。
純度(HPLC): 98.0% 以上
ATP含量(HPLC): 0.1% 以下
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷凍,遮光
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ケージド試薬: ATP Caged ATP | CAS 67030-27-7(free acid) 同仁化学研究所

関連製品

5´ -三磷酸腺苷(ATP) 货 号 #P0756LNEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 核苷酸溶液和缓冲液

5´ -三磷酸腺苷(ATP)                              收藏

货 号
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#P0756L
5.0 ml
1,479.00

#P0756S
1.0 ml
379.00

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概述

 

5´ -三磷酸腺苷(ATP):  浓度为 10mM

 

dNTP 套装:
四种独立包装的超纯脱氧核苷三磷酸的溶液(dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP)。每种的浓度为 100 mM。

dNTP 混合液:
含相同摩尔数的超纯 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP。每种的浓度为 10 mM。

rNTP 套装:
四种独立包装的核苷三磷酸溶液(ATP、CTP、GTP 和 UTP),pH 7.5,以钠盐形式存在。

rNTP 混合液:
含相同摩尔数的四种核苷三磷酸:rATP、rCTP、rGTP 和 rUTP。每种浓度为 25 mM(rNTP 总浓度相当于 100 mM)。

7-去氮-dGTP:
含有 5 mM 7-去氮-dGTP 的二锂盐溶液。

5-甲基-dCTP:
10 mM 溶液,pH 7.0。

dATP 溶液:

含有 100 mM dATP,pH 7.4 的钠盐溶液。

acyNTP 套装:
四种独立包装的 acyNTP (acyATP、acyCTP、acyGTP 和 acyTTP)。以干粉形式提供,加入 50 μl 蒸馏水或去离子水(Milli-Q®)后,acyNTP 的终浓度为 10 mM。

acyNTP 可作为链终止基团,因而可用于一般采用 ddNTP 的实验,如 DNA 测序和 SNP 分析。acyNTP 尤其适用于古生菌 DNA 聚合酶的反应,特别是 Therminator DNA 聚合酶。Therminator DNA 聚合酶经过基因工程改造后,拥有更强的掺入核苷酸类似物的能力,这些类似物的糖环发生了改变,如 rNTP,ddNTP,2´ 脱氧核苷酸,特别是 acy 碱基类似物。  

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。  

ATP 双磷酸酶 货 号 #M0398LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 磷酸酶 & 硫酸化酶

ATP 双磷酸酶                              收藏

ATP  双磷酸酶                货   号                  #M0398L ATP  双磷酸酶                货   号                  #M0398L ATP  双磷酸酶                货   号                  #M0398L ATP  双磷酸酶                货   号                  #M0398L

货 号
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#M0398L
50 units
3,559.00

#M0398S
10 units
879.00

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特性

 高效将 ATP 转化为 AMP
 在 DNA 测序循环中去除脱氧核糖核苷酸
 将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为可连接的单磷酸化 RNA
 将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为单磷酸 RNA,后者可被 5´ 核酸外切酶 XRN-1(NEB #M0338)切割
 提供 10 倍高浓度产品 

概述

ATP 双磷酸酶(重组酶,E. coli)是一种高效 ATP 双磷酸酶。该酶可相继催化去除 ATP 的磷酸基团生成ADP,然后 ADP 生成 AMP,释放无机磷酸盐。该酶为重组酶,是三磷酸腺苷双磷酸酶的一个亚型。它可以水解三磷酸和双磷酸核苷以及脱氧核糖核苷生成相应的单磷酸核糖核苷。三磷酸腺苷双磷酸酶可以相继去除 γ 和 β 磷酸基团,将 5´ 端三磷酸化的 RNA 转化为单磷酸化 RNA。 

来源

纯化自大肠杆菌,其携带有编码马铃薯 ATP 双磷酸酶的基因(S. tuberosum apyrase)。 

反应条件

1X Apyrase 反应缓冲液。
[20 mM MES, 50 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 1 mM DTT,0.05% Tween 20,(pH 6.5 @ 25℃)]。

热失活:65℃ 温育 20 分钟。 

质保声明

ATP 双磷酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,1X Apyrase 反应缓冲液,30℃ 条件下,1 分钟内催化 1 μmol ATP(1 μM, NEB #P0756)释放 1 μmol 无机磷酸盐所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

500 units/ml。 

注意事项

Apyrase 对 ATP 和 ADP 的催化活性比高达 14:1。
Apyrase 是一种钙激酶。在 Apyrase 反应缓冲液中,Mg2+ 代替 Ca2+,Apyrase 大约有 50% 的活性。
作为金属离子依赖性的酶,EGTA 和 EDTA 可以抑制 Apyrase 的活性。
在 NEBuffers 1.1、2.1、3.1 和 CutSmart Buffer 中大约有 30% 的活性。
Apyrase 不会去除真核 mRNA 5´ 端的帽结构。 

ATP酶试剂盒Takara


ATP
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 4041 ATP 25 μmol ¥412 ATP ATP ATP
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□ 浓度 100 mM
□ 贮存溶液 水溶液 (Na盐),pH7.0±0.1
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 纯度
≥95%
 
■ 用途
本制品溶于含Na盐的水溶液中,使用时请选择合适的Buffer稀释。
 
 

页面更新:2017-08-10 15:58:37