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NEBExpressTM MBP 融合表达及纯化系统 收藏
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产品特点
该产品可直接替换 NEB #E8200，pMAL™ 蛋白融合表达系统
特性
概述
在 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统中，pMAL-c6T 载体提供了一种将克隆基因或开放阅读框编码的蛋白质表达和纯化的方法。首先，将目标克隆基因插入大肠杆菌编码麦芽糖结合蛋白（MBP）的 malE 基因框架下游；这样构建的载体可表达 MBP 融合蛋白（2,3）。pMAL-c6T 载体表达 N 端标记六组氨酸的 malE 基因（缺少分泌信号序列，并且经改造可以与直链淀粉更紧密地结合），其后是 TEV 蛋白酶识别序列、多克隆酶切位点和三位终止密码子。pMAL-c6T 载体在细胞质中表达 MBP 融合蛋白。这种方法使用“tac”强启动子和 malE 翻译起始信号，从而能够使克隆序列进行高水平表达（4,5）。然后，利用 MBP 与麦芽糖的亲和特性，使用直链淀粉树脂对融合蛋白进行一步纯化（6）。
试剂盒组分
随产品提供如下试剂
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名称 |
储存温度(℃) |
浓度 |
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pMAL-c6T DNA |
200 µg/ml |
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Amylose Resin
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4 |
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TEV Protease
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-20 |
10,000 units/ml |
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TEV Protease Reaction Buffer |
-20 |
10 X |
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Anti-MBP Monoclonal Antibody |
-20 |
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MBP6 Protein |
-20 |
40 µg/ml |
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MBP6-TEV-Paramyosin ΔSal |
-20 |
5 mg/ml |
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E. coli ER2523 (NEB Express) (Glycerol Stock) |
-20 |
储存温度
-20℃
