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8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶（Fpg） 货 号 #M0240LNEB酶试剂 New England Biolabs

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特性

 单细胞凝胶电泳（彗星试验）
 碱性析出
 碱解旋 

概述

Fpg（甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶）也称作 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶，既有 N-端糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N-端糖基化酶活性可以切下双链 DNA 上受损的嘌呤碱基，产生一个脱嘌呤（AP）位点。AP-裂解酶活性可以切割 AP 位点的 3´ 或 5´ 端，因此可以除去 AP 位点，产生一个具有 3´ 和 5´ 磷酸的碱基缺口。
被 Fpg 识别并切除的受损碱基包括：7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤（8-氧代鸟嘌呤）、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素 B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和 5-羟基尿嘧啶。 

来源

克隆有 fpg 基因的重组 E. coli 菌株。 

反应条件

1X NEBuffer 1
[10 mM Bis Tris 丙烷-HCl，10 mM MgCl2 ，1mM DTT（pH 7.0 @ 25℃）] 加入 100 μg/ml BSA，37℃ 温育。
热失活：60℃ 加热 10 分钟。

质保声明

8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃条件下， 1 小时内能够切割 10 pmol 含单个与胞嘧啶配对的 8-氧代鸟嘌呤的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

彗星试验的推荐稀释倍数

1:103～1:104。详细步骤见 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

8,000 units/ml。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） 货 号 #M0280LNEB酶试剂 New England Biolabs

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尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）                              收藏

尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） 货 号 #M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） 货 号 #M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） 货 号 #M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） 货 号 #M0280L 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG） 货 号 #M0280L

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相关产品

尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI）
 

特性

 去除 PCR 残存污染
 去除单链或双链 DNA 尿嘧啶碱基
 

概述

E. coli 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）催化从含尿嘧啶的 DNA 上释放尿嘧啶。UDG 能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶，但不能从 6 碱基或更少的寡核苷酸上水解尿嘧啶。 

来源

克隆有 E. coli UDG 基因的重组 E. coli 菌株。 

应用

在 37℃ 条件下，1 单位 UDG 与 0.1 μg 含尿嘧啶 DNA 温育 10 分钟后，此 DNA 不能再被 DNA 聚合酶复制。95℃ 加热 10 分钟可使该酶 95% 的活性丧失。由于 95℃ 热处理后该酶仍有部分活性，建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂来阻止产物 DNA 的降解，也可以立即用酚/氯仿抽提反应产物。 

反应条件

1X UDG 反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，1 mM DTT（pH 8.0 @ 25℃）]，37℃ 温育。 

质保声明

尿嘧啶-DNA 糖基化酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量。通过检测 37℃ 条件下，30 分钟从 50 μl 含 0.2 μg DNA（104～105 cpm/μg）的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

5,000 units/ml。 

注意事项

UDG 在较广的 pH 范围均内有活性，最适 pH 为 8.0，不需要二价阳离子。活性受高离子强度（＞ 200 mM）所抑制。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI） 货 号 #M0281LNEB酶试剂 New England Biolabs

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尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI）                              收藏

尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI） 货 号 #M0281L 尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI） 货 号 #M0281L 尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI） 货 号 #M0281L 尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI） 货 号 #M0281L

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描述

 尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI），来源于枯草芽孢杆菌噬菌体（Bacillus subtilis bacteriophage PBS1），蛋白分子量较小（9.5 kDa），可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶（UDG）以及来源于其它物种的 UDG。UDG 与 UGI 按 1：1 比例进行可逆蛋白结合，发挥对 UDG 的抑制作用。UGI 可解离 UDG 与 DNA 的复合物。

浓度

 2,000 units/ml

特点

·尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI）蛋白分子量较小（9.5 kDa），可抑制大肠杆菌尿嘧啶 – DNA 糖基化酶（UDG）以及来源于其它物种的 UDG。

·95℃ 热处理后该酶仍有部分活性。

·可用于阻止产物 DNA 的后续降解。

来源

 由携带有克隆自枯草芽孢杆菌噬菌体（Bacillus subtilis bacteriophage PBS1）UGI 基因的大肠杆菌菌株表达纯化得来。

单位定义

 1 单位 UGI 指在 50 µl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时抑制 1 单位大肠杆菌 UDG 酶所需的酶量。1 单位 UDG 是指每分钟从含尿嘧啶的双链 DNA 上催化解离 60 pmol 的尿嘧啶所需要的酶量。

反应条件

 1X UDG 反应缓冲液，37℃ 温育。

热失活

 不能热失活。

注意事项

 1、由于 95℃ 热处理后， UDG 酶仍有部分活性，建议加入尿嘧啶糖基化酶抑制剂（UGI）来阻止产物 DNA 的降解。

2、对 NEB 的大肠杆菌 UDG 酶有效（NEB #M0280）。

3、在原始反应中加入与 UDG 等量或者过量的 UGI。

4、在四种 NEBuffer 中都有活性（NEB #B7001, NEB #B7002, NEB #B7003, NEB #B7004）。

5、UGI 的热稳定性极高，煮沸 10 分钟仍具有 95% 以上的活性。

参考文献

 Lindahl,T.et al.(1977).J. Biol.Chem..252,3286-3294.

Wang,Z.,et al.(1991).Gene.99,31-37.

Bennett,S.E.and Mosbaugh,D.W.(1992).J.Biol.Chem..267,22512-22521.

T4 PDG 嘧啶二聚体糖基化酶（T4 核酸内切酶 V） 货 号 #M0308SNEB酶试剂 New England Biolabs

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T4 PDG 嘧啶二聚体糖基化酶（T4 核酸内切酶 V）                              收藏

T4 PDG 嘧啶二聚体糖基化酶（T4 核酸内切酶 V） 货 号 #M0308S T4 PDG 嘧啶二聚体糖基化酶（T4 核酸内切酶 V） 货 号 #M0308S T4 PDG 嘧啶二聚体糖基化酶（T4 核酸内切酶 V） 货 号 #M0308S T4 PDG 嘧啶二聚体糖基化酶（T4 核酸内切酶 V） 货 号 #M0308S T4 PDG 嘧啶二聚体糖基化酶（T4 核酸内切酶 V） 货 号 #M0308S

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特性

 DNA 损伤研究
 单细胞凝胶电泳（彗星实验） 

概述

T4 PDG（T4 嘧啶二聚体糖基化酶）既有 DNA 糖基化酶活性，又有 AP 裂解酶活性。16 KD 的蛋白质可识别因紫外线照射引起的 cis-syn 型环丁烷嘧啶二聚体。该酶切割嘧啶二聚体的 5´ 端糖苷键，同时其内切酶活性切割 AP 位点上的磷酸二酯键。 

来源

含有编码 T4 denV 基因质粒的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X T4 PDG 反应缓冲液
[25 mM Na2PO4（pH 7.2 @ 25℃），100 mM NaCl，1 mM EDTA，1 mM DTT]。加入 100 μg/ml BSA，37℃ 温育。 

质保声明

T4 嘧啶二聚体糖基化酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位指 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟内使超过95% 的 0.5 μg 经紫外线照射诱变的超螺旋 pUC19 DNA 变成切刻型质粒的酶量。切刻可通过琼脂糖凝胶电泳来检测。诱变后的质粒 DNA 平均含有 3-5 个嘧啶二聚体。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

为取得最佳使用效果，建议温育时间不超过 30 分钟。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶（hAAG） 货 号 #M0313SNEB酶试剂 New England Biolabs

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人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶（hAAG）                              收藏

人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶（hAAG） 货 号 #M0313S 人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶（hAAG） 货 号 #M0313S 人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶（hAAG） 货 号 #M0313S 人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶（hAAG） 货 号 #M0313S 人源烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶（hAAG） 货 号 #M0313S

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特性

 单细胞凝胶电泳（彗星试验）
 碱洗脱
 碱解旋 

概述

人类烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶（hAAG）作用于烷基化和氧化了的 DNA 损伤位点，包括 3-甲基腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、1,N6-乙烯基腺嘌呤和次黄嘌呤。hAAG 催化 N-糖苷键的水解断裂，释放受损碱基。hAAG 也被称作甲基嘌呤 DNA 糖基化酶（MPG）或 3-甲基腺嘌呤－DNA 糖基化酶（ANPG）。 

来源

克隆有截短型人类 AAG 基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X ThermoPol 反应缓冲液
[10 mM KCl，10 mM (NH4)2S04，20 mM Tris-HCl，2 mM MgS04，0.1% Triton X-100（pH 8.8 @ 25℃）]，37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

质保声明

人类烷基腺嘌呤 DNA 糖基化酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 单位是指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时从 1 pmol 含有单一脱氧次黄嘌呤核苷位点的 34 mer 寡核苷酸双链产生一个 AP 位点所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

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蛋白去糖基化混合液II 货 号 #P6044SNEB酶试剂 New England Biolabs

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蛋白去糖基化混合液II 货 号 #P6044S

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特性

 可快速建立反应
 混合糖苷酶有效去除 N-及 O-连接糖链
 可用于变性及非变性反应条件
 去糖基化后留下完整核心结构适用于后续研究

概述

蛋白去糖基化混合液 II 中包含五种糖苷酶、试剂和对照，能切割所有 N-连接糖链及简单 O-连接糖链，也能切割部分复杂 O-连接糖链。试剂盒中的酶能用于 20 次反应，作用于 2 mg 糖蛋白。
 
蛋白去糖基化混合液II 货 号 #P6044S
 
小牛胎球蛋白在酶作用下去糖基化，非变性条件使用 10X 去糖基化混合液 1，变性条件使用 10X 去糖基化混合液 2。20 μg 反应产物上样于 10-20% Tris-glycineSDS-PAGE 胶上。泳道 1：彩色预染蛋白标准（11-245kDa）（NEB #P7712）；泳道 2：20 μg 未去糖基化的胎球蛋白对照；泳道 3：20 μg 胎球蛋白使用去糖基化混合液 1 在非变性条件下去糖基化；泳道 4：20 μg胎球蛋白使用去糖基化混合液 2 在变性条件下去糖基化；泳道 5：5 μl 蛋白去糖基化酶混合液 II。

随酶提供的试剂

去糖基化混合液 1（10X）
去糖基化混合液 2（10X）

去糖基化酶混合液II

PNGase F（无甘油），重组酶：10,000 units/支
O-糖苷酶：80,000 units/支
α2-3,6,8,9 神经氨酸苷酶 A：400 units/支
β1-4 半乳糖苷酶 S：960 units/支
β-N-乙酰己糖胺酶f：300 units/支

参考文献

有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

蛋白去糖基化混合液II 货 号 #P6044SNEB酶试剂 New England Biolabs

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蛋白去糖基化混合液II 货 号 #P6044S

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20 rxns
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特性

 可快速建立反应

 混合糖苷酶有效去除 N-及 O-连接糖链
 可用于变性及非变性反应条件
 去糖基化后留下完整核心结构适用于后续研究

概述

蛋白去糖基化混合液 II 中包含五种糖苷酶、试剂和对照，能切割所有 N-连接糖链及简单 O-连接糖链，也能切割部分复杂 O-连接糖链。试剂盒中的酶能用于 20 次反应，作用于 2 mg 糖蛋白。
 
蛋白去糖基化混合液II 货 号 #P6044S
 
小牛胎球蛋白在酶作用下去糖基化，非变性条件使用 10X 去糖基化混合液 1，变性条件使用 10X 去糖基化混合液 2。20 μg 反应产物上样于 10-20% Tris-glycineSDS-PAGE 胶上。泳道 1：彩色预染蛋白标准（11-245kDa）（NEB #P7712）；泳道 2：20 μg 未去糖基化的胎球蛋白对照；泳道 3：20 μg 胎球蛋白使用去糖基化混合液 1 在非变性条件下去糖基化；泳道 4：20 μg胎球蛋白使用去糖基化混合液 2 在变性条件下去糖基化；泳道 5：5 μl 蛋白去糖基化酶混合液 II。

随酶提供的试剂

去糖基化混合液 1（10X）
去糖基化混合液 2（10X）

去糖基化酶混合液II

PNGase F（无甘油），重组酶：10,000 units/支
O-糖苷酶：80,000 units/支
α2-3,6,8,9 神经氨酸苷酶 A：400 units/支
β1-4 半乳糖苷酶 S：960 units/支
β-N-乙酰己糖胺酶f：300 units/支

参考文献

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