日本同仁化学氧化应激与自由基 抗氧化能力 活性氧 谷胱甘肽 DNA损伤 脂质过氧化物- DOJINDO

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氧化应激与自由基

氧是合成激素和ATP等生物活性物质的一种重要的分子。获得利用氧的能力是生命进化的重要的驱动力。氧可以激活细胞中的各种酶,被激活的氧种类涉及细胞功能的运作。尽管氧本身是生命的一个基本元素,但在氧化应激中,诸如DNA和蛋白质等细胞中的分子有时会被活性氧 (Reactive oxygen species, ROS) 破坏。
抗氧化能力
活性氧
谷胱甘肽
DNA损伤
脂质过氧化物
铁离子
谷氨酰胺、谷氨酸
自由基
NO研究

品名货号用途

抗氧化能力检测试剂盒 (DPPH法 ) D678 抗氧化能力检测
超氧化物歧化酶检测——SOD Assay Kit S311 超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒-WST

细胞中的氧化应激是由代谢、电离辐射和与DNA直接相互作用的致癌化合物产生的ROS导致的。在代谢的过程中,小部分的氧由于一个电子的还原变成超氧阴离子,接着超氧阴离子被超氧化物岐化酶 (SOD) 转变成氧气和过氧化氢。过氧化氢由过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化物酶还原成水。然而如果过氧化氢并没有被这些酶完全还原,当它被铁(Fenton反应)氧化将产生反应性极强的羟自由基。羟自由基还可以由紫外线照射产生或直接电离辐射水产生。羟自由基可以与脂反应产生脂质过氧化物。然而并非所有ROS都是有害的。次氯酸盐离子是一种由中性粒细胞的髓过氧化物酶产生的过氧化氢衍生而来的ROS,它具有杀菌活性。NO也称为内皮来源的舒张因子,它是由NO合成酶产生的。不过NO和超氧阴离子反应可产生具有细胞毒性的过氧亚硝基阴离子。ROS和活性氮化合物在生物系统中具有许多不同的活性。相应地好氧生物会产生防止氧化应激的防御机制。最近在对防御机制以及氧化损伤与疾病或老化过程之间关系的研究中,氧化应激已成为许多研究的焦点。最终已发展出许多用于检测ROS相关或ROS来源的物质的方法,这些物质包括超氧阴离子、超氧化物岐化酶、谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶、DNA损伤、8-氧基鸟嘌呤、8-硝基鸟嘌呤和蛋白质羰基等。氧化应激与自由基 抗氧化能力 活性氧 谷胱甘肽 DNA损伤 脂质过氧化物

日本同仁化学线粒体染色 线粒体损伤 线粒体自噬 线粒体氧化应激 线粒体呼吸- DOJINDO

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线粒体

线粒体(mitochondrion) 是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的细胞器,是细胞中制造能量的结构,是细胞进行有氧呼吸的主要场所,线粒体拥有自身的遗传物质和遗传体系,但其基因组大小有限,是一种半自主细胞器。除了为细胞供能外,线粒体还参与诸如细胞分化、细胞信息传递和细胞凋亡等过程,并拥有调控细胞生长和细胞周期的能力。最近越老越多的研究发现线粒体在细胞中的作用远远不止”细胞能量站”。它们参与了各种细胞功能调控,与很多人类疾病存在着莫大的联系。包括细胞信号传导、代谢、自噬、衰老和肿瘤发生都与线粒体的质量和活性相关
线粒体染色
线粒体损伤
线粒体自噬
线粒体氧化应激
线粒体呼吸

品名货号用途

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂 MT15 免疫荧光用线粒体荧光染料Red
MitoBright LT Green试剂 MT10 线粒体长效荧光染色(绿色)
MitoBright LT Red试剂 MT11 线粒体长效荧光染色(红色)
MitoBright LT Deep Red试剂 MT12 线粒体长效荧光染色(深红色)

线粒体膜电位检测试剂盒 MT13 线粒体膜电位检测
线粒体膜电位检测试剂盒—JC-1 MitoMP Detection Kit MT09 线粒体膜电位检测
Cellstain- MitoRed试剂 R237 线粒体ATP检测-红色

Mtphagy Dye试剂 MT02 线粒体自噬
线粒体自噬—Mitophagy Detection Kit MD01 线粒体自噬检测

mtSOX Deep Red – Mitochondrial Superoxide Detection MT14 线粒体超氧化物检测
铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen M489 线粒体内二价铁离子检测
Si-DMA for Mitochondrial Singlet Oxygen Imaging试剂 MT05 线粒体内单线态氧检测
MitoPeDPP试剂 M466 线粒体内脂质过氧化物检测

ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence A552 检测细胞中ADP与ATP的比率
Oxygen Consumption Rate(OCR) Plate Assay Kit-氧消耗量检测试剂盒 E297 氧消耗量检测
Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒 CK18 ATP活性检测
Glutamine Assay Kit-WST试剂盒 G268 谷氨酰胺的定量检测
Glutamate Assay Kit-WST试剂盒 G269 谷氨酸的定量检测
NAD/NADH Assay Kit-WST试剂盒 N509 NAD/NADH检测试剂盒
NADP/NADPH Assay Kit-WST试剂盒 N510 NADP/NADPH检测
α-Ketoglutarate Assay Kit-Fluorometric K261 对细胞内的α-KG进行定量检测

线粒体功能研究

▶ 线粒体呼吸指标一览表

▶ 线粒体染色选择指南

▶ 线粒体自噬检测

▶ 线粒体膜电位选择指南

▶ 代谢相关检测

▶ 癌症关联检测

▶ 脂质过氧化物积累与细胞衰老、线粒体之间的联系

 

线粒体质量控制途径

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其他关联产品

 

线粒体呼吸 OCR耗氧率检测       Oxygen Consumption Rate(OCR) Plate Assay Kit
外泌体提取                                 ExoIsolator Exosome Isolation Kit
外泌体膜标记检测                       ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green/Red/Deep Red
溶酶体功能(pH)检测               Lysosomal Acidic pH Detection Kit

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线粒体简要通路图

 

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线粒体相关检测指标

线粒体自噬检测

线粒体自噬
试剂 Mtphagy Dye Keima-Red
原理 线粒体自噬染料是一种PH敏感的荧光探针,该染料聚集在线粒体中,并由溶酶体的酸性条件而发出荧光 这是一种基于PH感应比值的荧光蛋白。该蛋白在溶酶体中具有比较高的荧光比值(如550 nm/440 nm)。
固定细胞染色
活细胞染色 Yes Yes
活细胞染色后固定
染色时间 >30 min
Ex/Em 530/700 440,550/620
产品货号 MD01 , MT02

线粒体自噬Mitophagy试剂盒【MD01】无需蛋白质表达/转染。添加试剂即可轻松检测线粒体自噬。

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线粒体膜电位检测

Membrane potential

线粒体膜电位

试剂 JC-1 MT-1 TMRM,   TMRE
原理 JC-1是一种被广泛使用的小分子线粒体膜电位探针,依赖于线粒体膜电位在线粒体中聚集,染料伴随聚集过程,荧光从绿色   (530 nm) 变为红色 (590 nm)。当线粒体发生去极化,红/绿荧光强度比值降低。 由于膜电位,细胞渗透性荧光染料在完整的线粒体中积累。MT-1具有极强的光稳定性,比JC-1更灵敏,可以提供与TMRE相当的检测灵敏度。 该试剂是细胞渗透性荧光染料,由于膜电位在完整的线粒体中积累。探针扩散发生在膜电位降低的受损线粒体中。
固定细胞染色
活细胞染色 Yes Yes Yes
活细胞染色后固定 Yes
染色时间 10- 60 min 30 min 30- 60 min
Ex/Em Monomer:514/529

J-aggregation: 585/590

530-560 / 570-640 550/575
产品货号 MT09 MT13

JC-1、TMRE和TMRM广泛用于监测线粒体膜电位。然而,这些染料具有局限性,例如光稳定性低和醛固定后的保留性差。这些限制导致实验再现性差。

MT-1 MitoMP检测试剂盒具有高光稳定性,即使在染色后用多聚甲醛固定的细胞中。这些特征使得MT-1试剂盒能够产生高度可重复的结果。

此外,该试剂盒中包含的成像缓冲液使背景荧光最小化,并在进行测定时保持细胞活力。

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线粒体金属离子检测

Iron ion (Fe2+)

亚铁离子

Calcium ion (Ca2+)

钙离子

试剂 Mito-FerroGreen Rhod 2-AM
原理 该试剂是一种细胞通透性探针,其积累在线粒体中,并与线粒体中的亚铁离子发生特异性反应,发出绿色荧光。 该试剂是一种细胞通透性探针,该探针积聚在线粒体中,并与线粒体中的钙离子发生特异性反应,发出红色荧光。
固定细胞染色
活细胞染色 Yes Yes
活细胞染色后固定
染色时间 30 min 30-60 min
Ex/Em 505/535 553/576
产品货号 M489 R002

线粒体荧光染色

Mitochondria staining

线粒体染色

试剂 MitoBright LT series MitoBright IM Red MitoTracker series
原理 细胞渗透性荧光染料,基于线粒体膜电位而在完整的线粒体中积累。 细胞渗透性荧光染料,由于膜电位而聚集在完整的线粒体中,并与蛋白质和其他生物分子共价结合。 细胞渗透性荧光染料,基于线粒体膜电位而在完整的线粒体中积累。
固定细胞染色
活细胞染色 Yes Yes Yes
活细胞染色后固定 Yes
染色时间 >10 min 30 min 15 -45 min
Ex/Em 493/508,547/563, 643/663 548/566 490/516~644/665
产品货号 MT10MT11MT12 MT15

在HeLa细胞中4天后,MitoBright LT仍被证实保留在线粒体中。

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