α-突触核蛋白聚集检测试剂盒

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒
(ALPHA)-Synuclein Aggregation Assay Kit

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α-突触核蛋白聚集检测试剂盒α-突触核蛋白聚集检测试剂盒 
(ALPHA)-Synuclein Aggregation Assay Kit    



  α-突触核蛋白聚集检测试剂盒模拟在路易体痴呆、帕金森病、多系统萎缩中发现的细胞内α-突触核蛋白聚集。

  本试剂盒可用于在细胞培养水平上,检测目标活性物质对细胞聚集的抑制和/或预防作用。

◆背景

  

痴呆症是导致记忆和辨别能力退化的疾病,还没有根治的方

法。经过多年的科学研究证实,许多神经变性病(包括痴呆

症)的大脑退化部位会发生蛋白凝聚,表明这种聚集的出现与

这些疾病的发生和发展密切相关。

正常蛋白形式因特定原因形成异常结构并在细胞中积累时,会发生蛋白聚集,每种疾病有不同的聚集蛋白。目前已知在帕金森病、路易体痴呆、多系统萎缩病人脑内,α-突触核蛋白结构形成异常结构。

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒模拟细胞内“α-突触核蛋

白”的聚集情况,可用于在体外筛选活性成分。


α-突触核蛋白聚集检测试剂盒

◆试剂盒组成


组成 容量 规格 保存
pCMV-SNCA (α – Synuclein 表达质粒, 红盖) 
(浓度1.25 μg/μL)
32 μL 1 小瓶 4°C
不冻结
pCMV-NC(阴性对照, 绿盖)
(浓度1.25 μg/μL)
5 μL 1 小瓶
pCMV-dGFP(dGFP 表达质粒, 蓝盖)
(浓度1.25 μg/μL)
5 μL 1 小瓶
20 mM Tris-HCl Buffer (pH 7.4) 10 mL 1 瓶
F-αSyn (α – Synuclein 纤维, 黄盖)
(浓度1 μg/μL)
32 μL 1 小瓶
Multifectam (基因转染试剂) 0.33 mg 1 瓶

◆检测流程


α-突触核蛋白聚集检测试剂盒

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒

◆实例

一  免疫印迹法Western blotting (使用各种突触核蛋白抗体)

1、除去培养基。

2、每个孔添加 1 mL PBS, 用移液器收集细胞。

3、离心 (4,500 rpm [1,800 x g], 5 分钟,室温), 收集沉淀。

4、添加 0.1 mL 裂解缓冲液(10 mM Tris-HCl, pH 7.5 含 0.8 M NaCl, 1 mM乙二醇双(2-胺基乙基醚)-

   N,N,N,N-四乙酸 (EGTA), 1 mM DTT 和 1% N-月桂酰肌氨酸钠), 超声波混合。

5、离心 (50,000 rpm [100,000 x g], 20 分钟, 室温)。

6、添加 40 µL 2 x SDS Buffer (0.125 M Tris-HCl pH6.8, 200 mM 1,4二硫苏糖醇(DTT), 4% 十二烷基硫酸钠

   (SDS) , 10%蔗糖, 0.01% BPB) 至颗粒中,超声波混合, 加热 (100 °C,5 分钟), 进行 10 µL/well 的免疫印迹。

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒


突触核蛋白抗体详情请点击此处

二  淀粉样蛋白/物质荧光染色试剂盒

  使用淀粉样蛋白/物质荧光染色试剂盒(Cosmo Bio,产品编号:CSR-SYN02-COS),可对已发生聚集的α-突触核蛋白和核仁进行双重染色。


阴性对照载体(pCMV-NC)

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒
相位图
核染色
突触核蛋白聚集


使用α-突触核蛋白(pCMV-SNCA+F-α Syn)

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒
相位图
核染色
突触核蛋白聚集


仅用于研究。不得用于人类基因治疗或临床诊断。

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒

α-突触核蛋白聚集检测试剂盒

参考文献

 Nonaka T. et al. J Biol Chem. 2010 Nov 5;285(45):34885-98.

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
CSR-SYN01-COS (ALPHA)-Synuclein Aggregation Assay Kit, 300 tests  1 kit
CSR-SYN02-COS Amyloid Fluorescent Staining Kit, 100 tests  1 kit
CSR-SYN03-COS (ALPHA)-Synuclein Fibrils 0.1 mg
CSR-SYN04-COS-C100 (ALPHA)-Synuclein  0.1 mg
CSR-SYN04-COS-M001 (ALPHA)-Synuclein  1 mg
CSR-SYN02-COS Amyloid Fluorescent Staining Kit, 100 tests 
淀粉样蛋白荧光染色试剂盒
1 kit

人重组突触核蛋白

人重组突触核蛋白
突触核蛋白Synuclein

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人重组突触核蛋白人重组突触核蛋白
 

◆原理


突触核蛋白是神经细胞里高表达的可溶性蛋白,分别有α、β、γ这三种类型。

α-突触核蛋白一般被认为与突触小泡的传达控制有关。因为它是帕金森氏病、路易体痴呆症等神经退行性疾病中聚集在神经细胞内的路易体的主要组成成分;在路易小体内多数的α-突触核蛋白已被磷酸化。

β-突触核蛋白对防止α-突触核蛋白的凝聚起一定的作用。有报告指出β-突触核蛋白的变异体与帕金森氏病、路易体痴呆症等神经退行性疾病有关。
γ-突触核蛋白能高表达于周围神经系统,其生理作用暂不明确。

 
规格

● 形状:冻干品

● 冻干前缓冲液:20mmol/l 碳酸氢铵

● 宿主:大肠杆菌

● 溶解性:20mmol/l碳酸氢铵(2.5mg/ml)
                10mmol/l磷酸缓冲液 (pH 7.4), 50mmol/l NaCl(2.5mg/ml)

● 附注:添加6×His标签

 

◆氨基酸序列

α- Synuclein

AHHHHHH+MDVFMKGLSKAKEGVVAAAEKTKQGVAEAAGKTKEGVLYVGSKTKEGVVHGVATVAEKTKEQVTNVG

GAVVTGVTAVAQKTVEGAGSIAAATGFVKKDQLGKNEEGAPQEGILEDMPVDPDNEAYEMPSEEGYQDYEPEA

β-Synuclein

AHHHHHH+MDVFMKGLSMAKEGVVAAAEKTKQGVTEAAEKTKEGVLYVGSKTREGVVQGVASVAEKTKEQASHLG

GAVFSGAGNIAAATGLVKREEFPTDLKPEEVAQEAAEEPLIEPLMEPEGESYEDPPQEEYQEYEPEA

γ-Synuclein

AHHHHHH+MDVFKKGFSIAKEGVVGAVEKTKQGVTEAAEKTKEGVMYVGAKTKENVVQSVTSVAEKTKEQANAVSE

AVVSSVNTVATKTVEEAENIAVTSGVVRKEDLRPSAPQQEGEASKEKEEVAEEAQSGGD

*标签  AHHHHHH:6×His

相关产品


产品编号

产品名称

包装

磷酸化α-Synuclein抗体

015-25191

Anti Phosphorylated   α-Synuclein, Monoclonal Antibody (pSyn#64)

50μl

柏金森氏病模型动物专用试剂

136-16381

1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine   Hydrochloride 【MPTP】

10mg

柏金森氏病治疗药物有效成分

017-08051

1-Adamantanamine   Hydrochloride

10g

047-30561

3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-L-alanine

100mg

043-30563

1g

041-30564

5g

045-30562

25g

041-32801

Droxidopa

10mg

047-32803

50mg

166-25691

Pergolide Mesylate

100mg

162-25693

250mg

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
190-17941 α-Synuclein, Human, recombinant 0.5mg 细胞生物学用
197-17951 β-Synuclein, Human, recombinan 0.5mg 细胞生物学用
194-17961 γ-Synuclein, Human, recombinant 0.5mg 细胞生物学用