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日本同仁化学内体-外泌体 外泌体(Exosomes)提取试剂盒—ExoIsolator Exosome Isolation Kit EX10- DOJINDO
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内体-外泌体
品名货号用途
外泌体(Exosomes)提取试剂盒—ExoIsolator Exosome Isolation Kit | EX10 | 外泌体提取 |
ExoIsolator Isolation Filter | EX11 | 外泌体提取 |
ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green试剂盒 | EX01 | 外泌体膜检测 |
ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red试剂盒 | EX02 | 外泌体膜检测 |
ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red试剂盒 | EX03 | 外泌体膜检测 |
ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green试剂盒 | EX04 | 外泌体蛋白检测 |
ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒 | EX05 | 外泌体蛋白检测 |
ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red试剂盒 | EX06 | 外泌体蛋白检测 |
AcidSensor Labeling Kit – Endocytic Internalization Assay 细胞内吞作用的内化过程检测 | A558 | 细胞内吞作用的内化过程检测 |
ECGreen-Endocytosis Detection试剂盒 | E296 | 细胞内吞作用 |
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> 外泌体提取操作视频
> 细胞摄取外泌体研究
染色后的外泌体的应用
近年来研究发现,外泌体作为细胞外囊泡(Extracellular vesicle; EV)的一种,与癌症的恶化与转移密切相关,外泌体相关的研究也逐渐成为了关注的热点。
为了研究通过外泌体的细胞间通信,细胞摄入外泌体时的示踪技术非常重要,因此细胞外囊泡的磷脂双分子层或蛋白质的荧光染色试剂被广泛应用。
同仁化学外泌体膜染色试剂的独特优势
同仁化学外泌体膜染色试剂盒与其他同类染色试剂相比,具有背景低,无团聚,不影响外泌体性质等独特优势。
外泌体的标记和纯化一步到位
ExoSparkler系列已经对外泌体标记的最佳条件进行摸索并做成了操作手册,试剂盒内包含纯化所需的过滤管,可以简单快捷的进行外泌体的标记和纯化。
多种颜色选择
ExoSparkler系列包括膜 (Mem Dye)和蛋白质 (Protein Dye)荧光染色试剂,各三种颜色 (Green, Red, Deep Red)。
■ 实验条件
高速离心法纯化的外泌体 (蛋白质的量为10 μg)经过各试剂染色后,与HeLa细胞(1.25×104 cells)一起培养24 h,清洗后进行荧光观察。
■ 观察条件
Green:
Ex 488 nm/ Em 490-540 nm
Red:
Ex 561 nm/ Em 570-640 nm
Deep Red:
Ex 640 nm/ Em 640-760 nm
qiagen外泌体分离纯化试剂盒exoEasy Maxi Kit76064
qiagen外泌体分离纯化试剂盒exoEasy Maxi Kit
- 产品型号: 76064
- 简单描述
- qiagen外泌体分离纯化试剂盒exoEasy Maxi Kit从血浆、血清及细胞培养上清中纯化外泌小体及其他细胞外囊泡(EV)可分离获得完整的exosome及其他细胞外囊泡适用于功能性检测及物理和生化分析可在25分钟内纯化获得exosome及其他细胞外囊泡可通过简单的离心柱实验方案平行处理多个样品可提取高达4 ml的血浆或血清,或者32 ml的细胞培养上清
qiagen外泌体分离纯化试剂盒exoEasy Maxi Kit
exoEasy Maxi Kit使用了膜亲和离心柱来高效地从血浆、血清、细胞培养上清及其他生物液体中提取获得exosome及其他细胞外囊泡。Maxi规格的离心柱可允许处理大体积的样品,包括高达4 ml的血浆或血清,或者32 ml的细胞培养上清。实验流程非常快速*,非常适用于提取EV进行exosome及其他细胞外囊泡的功能性分析。
qiagen外泌体分离纯化试剂盒exoEasy Maxi Kit
exoEasy Maxi Kit – 25分钟内完成外泌小体纯化。
exoEasy Maxi Kit可从预过滤的血清、血浆或细胞培养上清中在25分钟内提取获得细胞外囊泡。洗脱下来的囊泡可即用于物理或生化性质分析,或可进行缓冲液交换及浓缩,可使用如超滤技术等方法。
Performance
用于纯化外泌小体及其他细胞外囊泡的exoEasy实验方案不仅比超速离心更加快捷,而且可获得更洁净的纯化产物。扫描电子显微镜显示两种技术均可提供完整的预期尺寸的囊泡,不过通过超速离心法制得的样品中还含有一些并不符合EV尺寸或外形的更小的结构。
提取获得的囊泡具有完整的功能,可用于多种下游应用,包括细胞培养等工作。洗脱的囊泡的性质和数量可通过多种不同的方法进行测定。其中包括电子显微镜、物理特征描述(例如,纳米颗粒追踪分析(NTA),或可调电阻脉冲感应(TRPS))、微粒分子成分分析(例如蛋白质、核酸或脂类)等。由于如NTA或TRPS等微粒计数方法无法将囊泡与其他悬浮颗粒区分开,使用未经处理的生物液体或仍含有其他颗粒物(例如,蛋白复合物)的粗制备样品进行颗粒计数可能会明显地高估囊泡数目。
Principle
exoEasy Kit在传统的超速离心exosome或微泡提取方法的基础上进行了改进,可在25分钟内获得纯化的细胞外囊泡。
exoEasy Maxi Kit使用了膜亲和结合步骤来从血浆、及血清或细胞培养上清中分离exosome及其他EV。这种方法无法通过大小或细胞来源对EV进行区分,也不依赖于是否存在微粒表位。它运用了囊泡的通用生化特性来提取样品中的所有细胞外囊泡(参见图片使用NTA对由exoEasy Maxi Kit提取获得的细胞外囊泡进行性质分析)。因此,必须*去除细胞、细胞碎片、凋亡小体等组分,可在开始提取步骤前对样品进行离心或过滤等操作。
Exosome Diagnostics, Inc.开发的技术使用了离心柱及专门的缓冲液来从预过滤的生物液体中纯化exosome;可处理高达4 ml的血浆或血清。对于细胞培养上清,经试验验证可从高达32 ml的样品中成功提取外泌小体(4次离心柱上样步骤)。不过,上清中的囊泡浓度非常依赖于细胞类型及培养条件;因此我们建议,对于未经过该试剂盒测试样品材料,起始上清体积不要超过16 ml。更高的样品体积可能导致囊泡的回收率降低。实验流程非常快速*,非常适用于exosome及其他细胞外囊泡的功能性分析。除囊泡之外的悬浮颗粒绝大部分可在结合及清洗步骤中被去除,这种颗粒包括了大体积的蛋白复合物,其在血浆及血清中含量很高。
Procedure
提取细胞外囊泡的总流程仅需要25分钟。将预先过滤过的血浆、血清或细胞培养上清(去除了尺寸大于0.8 μm的颗粒)与Buffer XBP进行混合并结合在exoEasy膜亲和离心柱上。对结合的外泌小体使用Buffer XWP进行清洗,并随后使用400 µl Buffer XE(主要含无机盐的水缓冲液)进行洗脱,随后即可用于物理或生化分析。对于特定应用,如生物检测等,可能需要进行额外的浓缩或缓冲液置换步骤。此步骤可通过孔径尺寸为100 kDa或更小的超滤方法来实现。
Applications
exoEasy Kit非常适合于从血浆、血清、细胞培养上清及其他生物液体中提取微囊泡。提取获得的囊泡可用于如下应用进行分析:
• 物理性质分析(例如,NTA,TRPS)
• 电子显微镜
• 提取并分析DNA、RNA*、蛋白质、脂类及其他成分
• 流式细胞术
• 抗体或荧光染料标记
• 受体细胞的摄取
*如需提取囊泡RNA,我们推荐使用exoRNeasy试剂盒。
订购信息:
Cat No./ID: 76064 exoEasy Maxi Kit (20) $663.00 Order Product For 20 vesicle preps: 20 exoEasy Maxi Spin Columns, Collection Tubes (50 ml), Reagents and Buffers |
Cat No./ID: 76204 Buffer XBP (250 ml) $78.60 Order Product 250 ml Binding Buffer |