标签归档：基转移酶

EcoRI 甲基转移酶 货 号 #M0211SNEB酶试剂 New England Biolabs

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EcoRI 甲基转移酶 货 号 #M0211S

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概述

EcoRI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从 E. coli RY 13（R.N. Yoshimori）克隆 EcoRI 修饰基因。 

反应条件

1X EcoRI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），10 mM EDTA]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温
育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 EcoRI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

40,000 units/ml。 

注意事项

MgCl2 抑制 EcoRI 甲基转移酶活性。在存在 4 mM MgCl2 条件下，酶活只保留 50%。 

HpaII 甲基转移酶 货 号 #M0214SNEB酶试剂 New England Biolabs

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HpaII 甲基转移酶 货 号 #M0214S

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概述

HpaII 甲基转移酶与 MspI 甲基转移酶识别序列相同，但对左侧序列中的内侧胞嘧啶（C5）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从副流感嗜血杆菌（Haemophilus parainfluenzae）（ATCC 49669）克隆的 HpaII 修饰基因。 

反应条件

1X HpaII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HpaII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

MspI 甲基转移酶 货 号 #M0215SNEB酶试剂 New England Biolabs

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MspI 甲基转移酶 货 号 #M0215S

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概述

MspI 甲基转移酶与 HpaII 甲基转移酶识别序列相同，但对左侧识别序列外侧胞嘧啶（C5）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从莫拉氏菌属（Moraxella species）（ATCC 49670）克隆的 MspI 修饰基因。 

反应条件

1X MspI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[100 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MspI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217SNEB酶试剂 New England Biolabs

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HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S

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HhaI 甲基转移酶 货 号 #M0217S

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概述

HhaI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基（C5）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从溶血嗜血杆菌（Haemophilus haemolyticus） （ATCC 10014）克隆的 HhaI 修饰基因。 

反应条件

1X HhaI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HhaI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

25,000 units/ml。 

TaqI 甲基转移酶 货 号 #M0219SNEB酶试剂 New England Biolabs

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TaqI 甲基转移酶 货 号 #M0219S

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概述

Taq I 甲基转移酶对左侧序列中的腺嘌呤残基（N6）进行甲基化。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从水栖高温菌（Thermus aquatics）克隆的 Taq I 修饰基因。 

反应条件

1X CutSmart Buffer + SAM
[50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃）]。加入 80 μM SAM（随酶提供），65℃ 温育。 

注意事项

37℃ 条件下的活性为 25%。 

单位定义

1 单位指在 20 μl 反应体系中，65℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 Taq I 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220SNEB酶试剂 New England Biolabs

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AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S

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AluI 甲基转移酶 货 号 #M0220S

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概述

AluI 甲基转移酶能对左侧序列中的胞嘧啶残基（C5）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从藤黄节杆菌（Arthrobacter luteus）（ATCC 21606）克隆的 AluI 修饰基因。 

反应条件

1X AluI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 AluI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

5,000 units/ml。 

dam 甲基转移酶 货 号 #M0222LNEB酶试剂 New England Biolabs

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dam 甲基转移酶 货 号 #M0222L

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概述

dam 甲基转移酶能对左侧序列中的腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有 pTP166 载体，该载体含有从 E. coli（M. Marinus）克隆的 dam 修饰基因。 

反应条件

1X dam 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5mM 2-巯基乙醇]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

8,000 units/ml。 

BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223LNEB酶试剂 New England Biolabs

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BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L

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BamHI 甲基转移酶 货 号 #M0223L

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概述

BamHI 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基（N4）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从解淀粉芽孢杆菌 H（Bacillus amyloliquefaciens）（ATCC 49763）克隆的 BamHI 修饰基因。 

反应条件

1X BamHI 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM Tris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），10 mM EDTA，5 mM DTT]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BamHI 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml。 

HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224SNEB酶试剂 New England Biolabs

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HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S

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500 units
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HaeIII 甲基转移酶 货 号 #M0224S

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概述

HaeIII 甲基转移酶能对左侧序列中的内侧胞嘧啶残基（C5）进行甲基化修饰。 

来源

重组 E. coli 菌株，携带有从埃及嗜血杆菌（Haemophilus aegyptius）（ATCC 11116）克隆的 HaeIII 修饰基因。 

反应条件

1X HaeIII 甲基转移酶缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl（pH 8.5 @ 25℃），10 mM DTT]。加入 80 μM SAM（随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

HaeIII 甲基转移酶能保护 DNA 不被 NotI切割。 

CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226LNEB酶试剂 New England Biolabs

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CpG 甲基转移酶 (M.SssI)                              收藏

CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L

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#M0226L
500 units
3,409.00
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#M0226M
（高浓度5X）500 units
3,409.00
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#M0226S
100 units
849.00
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#M0226V
50 units
449.00
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无
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无
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CpG 甲基转移酶 (M.SssI) 货 号 #M0226L

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特性

 阻止限制性内切酶的切割
 CpG 甲基化依赖性基因表达的研究
 研究探针序列特异性与 DNA 大沟的相互作用
 改变 DNA 的物理特性
 对 DNA 统一进行 [3H] 标记
 减少限制性内切酶的酶切位点数目，提高限制性内切酶的特异性 

概述

CpG 甲基转移酶（M.SssI）能将双链二核苷酸识别序列 5´ …CG…3´ 中所有胞嘧啶残基（C5）甲基化。 

来源

分离自重组的 E. coli 菌株，该菌株克隆有桑皱褶螺原体（Spiroplasma sp.）MQ1 菌株的 CpG 甲基转移酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2 + SAM
[50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸（SAM，随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

注意

MgCl2 并不是必需的辅因子。Mg2+ 存在时，M.SssI 更倾向于分散甲基化，而不是连续甲基化，同时，会出现具有拓扑异构酶的活性。 

质保声明

CpG 甲基转移酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 个酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 BstUI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度

4,000 units/ml 和 20,000 units/ml（通过 λDNA检测）。 

注意事项

CpG 甲基转移酶（M.SssI）可以特异性地模拟高等真核生物基因组的修饰模式，因而可用于研究高等真核生物体内胞嘧啶甲基化的功能。与哺乳动物甲基转移酶不同，CpG 甲基转移酶对未甲基化和半甲基化的 DNA 底物的甲基化效率相同，因此该酶是更为有效的 DNA 修饰工具。
只要限制性内切酶的识别位点含有 CG 序列或此二核苷酸的重叠序列，CpG 甲基转移酶均能有效地阻止其发挥切割活性。需要注意的是，CpG 甲基转移酶使 DNA 甲基化，而 E. coli 中的 Mcr 和 Mrr 的限制作用不受甲基化影响（详见 315-317 页），故应使用 Mcr–、Mrr– 的 E. coli 菌株（例如，NEB #C2925）作为转化的宿主菌。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 货 号 #M0227LNEB酶试剂 New England Biolabs

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GpC 甲基转移酶 (M.CviPI)                              收藏

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 货 号 #M0227L GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 货 号 #M0227L GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 货 号 #M0227L GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 货 号 #M0227L

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1,000 units
3,539.00
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#M0227S
200 units
879.00
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GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 货 号 #M0227L

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特性

 阻止限制性内切酶的切割
 改变 DNA 的物理特性
 对 DNA 统一进行 [3H] 标记 

GpC 甲基转移酶 (M.CviPI) 货 号 #M0227L

概述

GpC 甲基转移酶（M.CviPI）能将双链二核苷酸识别序列 5´ …GC…3´ 中所有胞嘧啶残基（C5）甲基化。 

来源

分离自重组的 E. coli 菌株，该菌株表达小球藻病毒（Chlorella virus）的甲基转移酶，该酶与麦芽糖结合蛋白（MBP）组成融合蛋白。 

反应条件

1X GC 反应缓冲液 + SAM
[50 mM NaCl，50 mM Tris-HCl，10 mM DTT（pH 8.5 @ 25℃）]。加入 160 μM S-腺苷甲硫氨酸（SAM，随酶提供），37℃ 温育。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。 

注意

MgCl2 并不是必需的辅因子。 

质保声明

GpC 甲基转移酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

单位定义

1 酶活单位定义为在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时能保护 1 μg λDNA 不被 HaeIII 限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。 

浓度

4,000 units/ml，通过 λDNA 检测。 

注意事项

胞嘧啶残基被甲基化后，可影响 DNA 的物理特性，如：降低 Z-DNA 形成的自由能，增加 DNA 的螺旋程度，改变 DNA 十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联氨的反应性降低，5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230LNEB酶试剂 New England Biolabs

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人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1）                              收藏

人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L

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#M0230L
250 units
5,499.00
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#M0230S
50 units
1,379.00
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人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L

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停产通知

 停产通知：该产品于2021年12月15日停产。

概述

Dnmt1 在半甲基化 DNA 的 5´…CG…3´ 位点甲基化胞嘧啶残基。现认为哺乳动物 Dnmt1 与癌症发生、胚胎发育和几种其它生物功能有关。在细胞循环 S 期的 DNA 复制阶段发生大量的甲基化。 

来源

用杆状病毒表达系统表达人 Dnmt1 cDNA。 

反应条件

1X Dnmt1 反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.8), 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 5% 甘油]，加入 100 μg/ml BSA 和 160 μM SAM, 37℃温育。热失活：65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X Dnmt1 反应缓冲液
100X BSA
32 mM S-腺苷甲硫氨酸（SAM）

质保声明

未检测到核酸内切酶、外切酶污染。 

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系中，37℃ 条件下 30 分钟催化 1 pmol 的甲基基团转移到多聚 dI.dC 底物上所需要的酶量。 

浓度

2,000 units/ml 

注意事项

议选用 M.Sssl（NEB #M0226）修饰和保护DNA，因该酶能同时有效地对未甲基化和半甲基化的底物 DNA 进行甲基化。 

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。 

EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603SNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 甲基转移酶

EcoGII 甲基转移酶                              收藏

EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603S EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603S EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603S EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603S EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603S EcoGII 甲基转移酶 货 号 #M0603S

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概述：

 EcoGII 甲基转移酶是非特异甲基转移酶，能对序列中任意腺嘌呤残基（N6）进行甲基化修饰。

来源：

 重组 E. coli 菌株，该载体含有从 E. coliC227-11 克隆的 EcoGII 修饰基因。

反应条件：

 1X CutSmart 缓冲液 + SAM [50 mM KAc，20 mM Tris-Ac，10 mM Mg(Ac)2，100 μg/ml BSA（pH 7.9 @ 25℃）]，加入 160 μMSAM（随酶提供），37℃ 温育。

热失活：65℃ 加热 10 分钟。

单位定义：

 1 单位指在 20 μl 反应体系中，37℃ 条件下，30 分钟能保护 100 ng FAM 标记 dsDNA 不被MboI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

浓度：

 5,000 units/ml

注意事项：

 SAM 在 37℃（pH 7.5）条件下不稳定，温育超过 4 个小时需要补充新的 SAM。甲基化反应中，SAM 以 1:200 的比例稀释到终浓度为 160μM。EcoGII 甲基转移酶对盐敏感。确保 DNA 溶液的盐浓度很低或者确保总反应体系中 DNA 溶液仅占很低的比例。

mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶 货 号 #M0366SNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

mRNA 帽结构 2′-O-甲基转移酶                              收藏

mRNA 帽结构 2 mRNA 帽结构 2

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#M0366S
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特性

 提高 RNA 的翻译效率
 改善 mRNA 在显微注射和转染后的表达 

概述

该酶能在 RNA 5´ 末端紧邻帽结构的第一个核苷酸的 2´ -O 上添加甲基基团。利用 S-腺苷甲硫氨酸（SAM）作为甲基供体，使带帽 Cap O 甲基化为 Cap 1。 

来源

纯化自携带牛痘病毒 mRNA 帽结构 2´ –O-甲基转移酶基因的 E. coli 菌株。 

反应条件

1X 加帽缓冲液
[50 mM Tris-HCl，5 mM KCl，1 mM DTT，1 mM MgCl2，(pH 8.0 @ 25℃)]，37℃ 温育。 

单位定义

1 单位是指在 37℃ 的条件下，1 小时内将 10 pmol 80 nt 的带帽 RNA 转录子甲基化所需酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品性能和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。 

人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 表观遗传学 – 组蛋白/DNA 甲基转移酶

人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1）                              收藏

人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L 人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L

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#M0230L
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5,499.00
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#M0230S
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停产通知

 停产通知：该产品于2021年12月15日停产。

识别位点

人 DNA（胞嘧啶-5）甲基转移酶（Dnmt1） 货 号 #M0230L

概述

Dnmt1 在半甲基化 DNA 的 5´…CG…3´ 位点甲基化胞嘧啶残基。现认为哺乳动物 Dnmt1 与癌症发生、胚胎发育和几种其它生物功能有关。在细胞循环 S 期的 DNA 复制阶段发生大量的甲基化。

来源

用杆状病毒表达系统表达人 Dnmt1 cDNA。

反应条件

1X Dnmt1 反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.8), 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 5%甘油]，加入 100 μg/ml BSA 和 160 μM SAM, 37℃温育。
热失活：65℃ 20 分钟。

随酶提供的试剂

10X Dnmt1 反应缓冲液
100X BSA
32 mM S-腺苷甲硫氨酸（SAM）

质保声明

未检测到核酸内切酶、外切酶污染。

单位定义

1 单位指在 25 μl 反应体系中，37℃ 条件下 30 分钟催化 1 pmol 的甲基基团转移到多聚dI.dC 底物上所需要的酶量。

浓度

2,000 units/ml

注意事项

建议选用 M.Sssl（NEB #M0226）修饰和保护DNA，因该酶能同时有效地对未甲基化和半甲基化的底物    DNA 进行甲基化。

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。