日本同仁化学MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口- DOJINDO

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MitoBright LT Green试剂货号:MT10

线粒体长效荧光探针-绿色
MitoBright LT Green
商品信息
储存条件:-20度保存
运输条件:室温

特点:

● 荧光持续时间长

● 可在含血清培养基中染色

● 荧光显微镜、流式细胞仪均可检测

选择规格:
20 μl
400 μl

荧光长时间存在

可使用含血清培养基

荧光/流式检测

更多线粒体检测方案(点击查看)

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

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凑单关联产品TOP5

NO.1.    Mitophagy Detection Kit    线粒体自噬检测

NO.2.    FerroOrange    细胞亚铁离子检测

NO.3.    DALGreen – Autophagy Detection    细胞自噬检测

NO.4.    Liperfluo    细胞脂质过氧化物检测

NO.5.    Lactate Assay Kit-WST    酸检测

产品概述

细胞内有各种各样的细胞器,承担着各种各样必须的生命活动。其中线粒体不仅是通过氧化磷酸化反应生成ATP的场所,它还与癌症、细胞衰老、阿尔兹海默症、帕金森综合症等神经退行性疾病紧密相关,因此它是细胞内最重要的细胞器之一。

在对线粒体的形态和动态进行观察以及定量检测时,通常使用小分子荧光探针标记和荧光蛋白的基因转染两种方法。荧光蛋白的基因转染存在转染效率不稳定等情况,因此操作简便的小分子荧光探针的使用更为广泛。现在市面上销售的小分子荧光探针中,多为含有氯甲基的探针,该探针存在观察时间短,染色时不能使用含血清的培养基,染色后荧光背景高等问题。MitoBright LT荧光探针克服了这些问题,可在线粒体内稳定存在一天以上,条件合适的情况下可达到一周。而且与含有氯甲基的探针相比,染色后的荧光强度更高。本品直接采用DMSO溶液包装,可快速方便的进行线粒体染色。荧光颜色有Green, Red, Deep Red等多种选择,可满足多重染色等各种各样的实验要求。

产品特点

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

1.可长时间在细胞内存在

用HBSS清洗HeLa细胞后,分别用MitoBright LT和其他公司的试剂进行染色,更换含血清的培养基,培养4天后观察线粒体染色情况。其他公司的染色试剂在4天后荧光强度大幅降低,而MitoBright LT依然维持着高荧光强度,并且在染色7日后依然可以观察到荧光。

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

<检测条件>

MitoBright LT Green 、(T公司)Green:Ex 488 nm/Em 500–560 nm

MitoBright LT Red 、(T公司)Red:Ex 561 nm/Em 560–620 nm

MitoBright LT Deep Red 、(T公司)Deep Red:Ex 640 nm/Em 650–700 nm

2.可以使用含血清培养基

用MitoBright LT和其他公司试剂,分别用含有血清和不含血清的培养基染色。其他公司试剂在含有血清的培养基染色时,荧光明显减弱,而MitoBright LT在含有血清的培养基条件下,荧光没有减弱,可明显观察到线粒体的染色情况。

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

实验例

实时荧光观察

HeLa细胞用CCCP处理,并与线粒体检测试剂(Mtphagy Dye)和线粒体染色试剂(MitoBright LT Green)共同染色,并经过一段时间(6小时)后进行检测。

<检测条件>

设备:LSM-700 Laser scanning confocal microscope (LSCM)

(Carl Zeiss, Oberkochen, Germany)

激发波长:

MitoBright LT Green 488 nm

Mtphagy Dye      555 nm

物镜:63x

拍摄时间:6小时

拍摄间隔:15秒

用流式细胞仪检测

1. 用RPMI培养基(10% Fetal Bovine Serum, 1% Penicillin-Streptomycin)配制Jurkat细胞悬液(3.2×105cell/ml)接种于5 cm培养皿中,在37℃,5% CO2培养箱内过夜培养。

2. 去除培养基,加入MitoBright LT Working Solution (0.1 μmol/l, 5 ml), 在37℃培养30分钟。

3. 去除溶液,用 5 ml的PRPMI培养基清洗细胞2 次。

4. 更换RPMI培养基,持续培养细胞,每隔2 天用流式细胞仪检测。

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

 MitoBright LT Green                                   MitoBright LT Red                                     MitoBright LT Deep Red

                        Excitation: 488 nm                                      Excitation: 488 nm                                     Excitation: 633 nm      

                        Emission: 515-545 nm                                Emission: 564-604 nm                               Emission: 650-670 nm

在胶原蛋白涂覆玻璃板上观察线粒体荧光成像

胶原蛋白涂覆玻璃板通常用于线粒体形态的高倍放大观察。

现有的线粒体染色试剂存在吸附胶原蛋白和升高背景的问题,但是MitoBright LT系列可以在不受背景影响的情况下清楚地对线粒体进行染色。

<染色条件>

将HeLa细胞接种在胶原蛋白涂覆玻璃板上,培养24小时,提取上清液并用HBSS洗涤。

加入100 nmol/l的MitoBright LT Green工作溶液,培养30分钟后,提取上清液并用HBSS洗涤后用荧光显微镜观察。

<检测条件>

Ex 488 nm,Em 500-560 nm

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

<结果>

现有的线粒体染色剂存在吸附胶原蛋白和升高背景的问题,但是MitoBright  LT系列可以清晰地对线粒体染色,而不受背景影响。

通过超分辨率激光显微镜(STED)观察线粒体内部构造

线粒体疾病致突变的Cybrid细胞用MitoBright-LT-Deep Red染色,用超分辨激光显微镜(STED)观察,证实线粒体嵴结构异常。

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

<实验条件>

色素:MitoBrightLT Deep Red(100 nmol/l)

仪器:Leica超分辨率激光显微镜TCS SP8 STED 3X

Ex. 640 nm / Em. 650-700 nm

STED激光:775nm

<实验步骤>

1将细胞接种在玻璃培养皿中,培养2天(37℃,5% CO2)。

2去除培养基后,加入使用L-15培养基(含10%FBS)制备的MitoBrightLT Deep Red(100 nmol/l)工作液。

3孵育45分钟(37度,5% CO2)。

4去除上清液,用HBSS清洗两次。

5加入L-15培养基(含10%FBS),通过超分辨率激光显微镜(Leica TCS SP8 STED)进行观察。

以上数据由东京都老年学研究所衰老控制研究小组的大澤郁朗博士和藤田泰典博士友情提供。

产品文献

同仁化学研究所开发的线粒体长效染色荧光探针MitoBright LT系列在世界范围内广受科研人员的好评。在上市后的很短时间内,就出现了多篇使用MitoBright LT系列探针的论文,下面收集整理了部分的论文,其中红色字体标记的是使用本产品标记线粒体后,长时间(最长至5天)观察线粒体动态的报道,供感兴趣的科研人员参考。

产品名 检测样品 染色后的
观察时间
检测仪器 发表期刊(含原文链接) 影响因子
MitoBright   LT Green 细胞 (U251) 立即 荧光显微镜 Pharmaceuticals 4.286
MitoBright   LT Green 酵母 (Lipomyces starkeyi) 立即 荧光显微镜 Genes to Cells 1.655
MitoBright   LT Green 细胞 (HeLa) 立即 荧光酶标仪 Biomaterials 10.317
MitoBright   LT Green 细胞 (Naive CD4+ T cells) 立即 荧光显微镜 Cell Reports 9.423
MitoBright   LT Green 细胞 (CT26) 立即 流式细胞仪 Journal of Radiation Research 2.841
MitoBright   LT Green 细胞 (C2C12) 5 天 荧光显微镜 Polymers 4.329
MitoBright   LT Green 细胞 (BMM) 36 小时 or

3 天

荧光显微镜/
流式细胞仪
JCI Insights 8.315
MitoBright   LT Green 细胞 (mouse erythrocytes) 立即 荧光显微镜 Front.   Cell. Infect. Microbiol. 5.293
MitoBright   LT Red 细胞 (SH-SY5Y) 立即 荧光显微镜 Free Radical Biol.   Med. 7.376
MitoBright   LT Red 细胞 (MRC-5) 立即 荧光显微镜 The   FEBS Journal 5.542
MitoBright   LT Red 细胞 (A11   cells/ P29 cells) 3 天 荧光显微镜 BMC Mol. Cell Biol. 5.293
MitoBright   LT Deep Red 细胞 (HT-1080;   MCF-10A; MCF-7; HCT-116 ) 立即 荧光显微镜 Small 13.281
MitoBright   LT Deep Red 细胞 (HT-1080;   MCF-10A; MCF-7 ) 8 小时 荧光显微镜 Advanced Therapeutics
MitoBright   LT Deep Red 细胞 (4T1) 24 小时  荧光显微镜 Advanced Functional Materials 18.808
MitoBright   LT Deep Red 细胞 (SW982) 立即 荧光显微镜 Gene 3.368

 

荧光特性

MitoBright LT 染料的荧光特性

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

常见问题Q&A

Q1:MitoBright LT需要用DMSO溶液配制,反复冻结融化也不会影响试剂质量吗?
A1:我们已经确认可以使用冻融30次的溶液进行染色。
Q2:MitoBright LT和MitoBright的区别。
A2:MitoBright LT是MitoBright具有更强细胞内滞留性性能的产品。另外MitoBright LT是溶于DMSO的产品,可以立即使用,而无需准备染色溶液。

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

 

Q3:用MitoBright LT系列染色后再去极化是否会影响染色效果?

A3:我们确认了去极化和细胞种类对于染色效果的影响,MitoBright LT的每种染料都有不同程度的影响。作为参考,本公司将HeLa细胞用不同的MitoBrightLT试剂进行染色,在以下条件下进行去极化处理,观察荧光染色的变化。

<染色条件>

HeLa细胞用MitoBright LT(100 μmol/l,孵育30分钟)染色,并用HBSS洗涤。

用FCCP(100 μmol/l,孵育60分钟)处理,用HBSS洗涤2次,然后观察荧光。

MitoBright LT Green试剂,MT10,同仁化学Dojindo日本原装进口

 

<检测条件>

MitoBright LT Green         :Ex 488 nm/Em 500–560 nm

MitoBright LT Red            :Ex 561 nm/Em 560–620 nm

MitoBright LT Deep Red     :Ex 640 nm/Em 650–700 nm

规格性状

性状:本品是黄色液体

吸光度:0.600~0.800(490 nm附近)

日本同仁化学MitoBright IM Red for Immunostaining试剂,MT15,Dojindo同仁化学- DOJINDO

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MitoBright IM Red for Immunostaining试剂货号:MT15
免疫荧光用线粒体荧光染料
MitoBright IM Red for Immunostaining
商品信息
储存条件:-20度保存
运输条件:室温

特点:

● 标记稳定性强、特异性高

● 可用于免疫荧光共染色

选择规格:20μl  20μl*3

可在含血清的培养基中染色

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规格性状
产品概述
实验例:与内质网标记物KDEL的共染色
MitoBright IM Red与其他试剂的不同
与传统试剂的对比
可检测的次数
荧光特性
常见问题Q&A

规格性状

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂,MT15,Dojindo同仁化学

产品概述

线粒体不仅是细胞中产生能量的场所,也是与癌症、衰老、神经退行性疾病(例如,阿尔茨海默症、帕金森症)等密切相关的最重要的细胞器之一。

近年来,随着显微镜技术的发展,有关细胞器的研究正在由原来的“单独研究线粒体的机能””逐渐向“线粒体与其他细胞器之间的相互作用”的方向转移。因此,对于线粒体的更详细的形态观察需求越来越大。

MitoBright IM Red克服了其他染料的靶向标记稳定性差的问题,是一种可以用于免疫荧光共染色线粒体荧光探针。

实验例:与内质网标记物KDEL的共染色

用MitoBrightIM Red标记HeLa细胞的线粒体,经固定化和膜透性处理后再用内质网标记物KDEL的抗体进行免疫共染色。并且在左图的箭头所示范围内进行了荧光强度的检测。从荧光图像可以清晰的观察线粒体与附近的内质网的形态。

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂,MT15,Dojindo同仁化学

<检测条件>

MitoBright IM Red (红) Ex: 561 nm,  Em: 560-620 nm

KDEL抗体-Alexa488 (绿) Ex: 488 nm, Em= 490-550 nm

Scale bar: 10 μm

MitoBright IM Red与其他试剂的不同

传统的小分子荧光染料在染色后的固定化操作或透膜剂处理后,往往会失去靶向性。而MitoBright IM Red与其他染料相比,提高了靶向稳定性,可以抑制免疫荧光实验时固定化操作造成的荧光强度减弱等问题。

・荧光强度差的比较

MitoBright IM与(T公司的)传统荧光染料相比,在活细胞线粒体染色后的固定化处理和透膜剂处理后的荧光强度如下图所示。固定化处理和透膜剂处理后,荧光强度都有一定的下降,但是MitoBright IM比传统染料的靶向标记稳定性更高,因此可以观察到更清晰的线粒体染色情况。

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂,MT15,Dojindo同仁化学

<检测条件>

Ex=561 nm; Em= 560-620 nm

・荧光背景的比较

使用线粒体标记物TOM20抗体比较MitoBrightIM和传统试剂的免疫染色后的线粒体定位情况。 用MitoBrightIM和传统试剂对HeLa细胞进行染色,然后用TOM20抗体进行二抗免疫荧光染色。 结果显示, 用MitoBrightIM或现有试剂对HeLa细胞进行染色,然后用TOM20抗体进行二抗染色。 结果显示,传统试剂有扩散到线粒体以外区域的情况,导致背景很高,而MitoBrightIM的背景更低,而且定位与TOM20抗体一致。

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂,MT15,Dojindo同仁化学

<检测条件>

Ex=561 nm; Em= 560-620 n

与传统试剂的对比

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂,MT15,Dojindo同仁化学

可检测的次数

MitoBright IM Red

规格

荧光显微镜
(35 mm dish,  working   solution 2 ml/dish时)
20 μl 10   枚
20 µl x3 30   枚

荧光特性

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂,MT15,Dojindo同仁化学

激发波长(λex) : 548 nm
发射波长(λem) : 566 nm

常见问题Q&A

Q: MitoBright IM Red出厂就是是DMSO溶液状态,反复冻融是否会影响染色结果?
我们做过反复冻融5次的稳定性实验,染色结果正常。如果长时间保存时需要反复冻融,保险起见建议提前分装,分开保存。
Q:先药物刺激再进行MitoBright IM染色时,发现有荧光辉斑产生,请问是否有好的解决办法?
A:请在药物刺激前进行MitoBright IM的染色。      由于本试剂是依靠线粒体膜电位在线粒体处积累的,如果线粒体膜电位大幅降低,会导致试剂无法在线粒体处聚集。

(参考实验)

分别采用“先FCCP刺激后染色” 和“先染色后FCCP刺激” 的方法对HeLa细胞进行实验并观察荧光。

先进行MitoBright IM染色再FCCP刺激的实验组很顺利的观察到了荧光,而相反的实验组没有观察到荧光。

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂,MT15,Dojindo同仁化学

タイトル 同仁化学研究所

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タイトル 同仁化学研究所SulfoBiotics– Protein Redox State Monitoring Kit Plus

02 酸化ストレス関連試薬

SulfoBiotics– Protein Redox State Monitoring Kit Plus

タイトル 同仁化学研究所

  • 酸化ストレス関連試薬

生体硫黄解析用キット

  • 製品コード
    SB12  –SulfoBiotics– Protein Redox State Monitoring Kit Plus
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
20 samples ¥58,500 346-91743
キット内容
20 samples ・Protein-SHifter Plus
・Reaction Buffer
・Reaction Buffer
・lysis Buffer
×20
×4
×4
×4

  • タイトル 同仁化学研究所
試験成績書

SDSダウンロード

  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 タイトル 同仁化学研究所 日本語
    タイトル 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 タイトル 同仁化学研究所 English
    タイトル 同仁化学研究所
  • プロトコル タイトル 同仁化学研究所 タンパク質の SH 基の数を知りたい
    タイトル 同仁化学研究所

技術情報

チオール数が異なるタンパク質の測定例

タイトル 同仁化学研究所

GAPDH(左:チオール数 3個)、TRX(中央:チオール数 5個)、ETHE1(右:チオール数 9個)
  標識試薬:Protein-SHifter Plus (製品:Protein Redox State Monitoring Kit Plus, Code: SB12)
染色試薬:CBB

ラベル化されたタンパク質の電気泳動のバンドが、チオール数に応じてより高分子側にシフトすることが確認された。
タンパク質中に10個以上のチオールが存在する場合、電気泳動のバンドが複雑になり解析が困難になる可能性があるため、タンパク質中のチオール数として1~9個を目安に使用いただきたい。

参考文献

参考文献を表示する

1) S. Hara, T. Nojima, K. Seio, M. Yoshida and T. Hisabori, "DNA-maleimide: An improved maleimide compound for electrophoresis-based titration of reactive thiols in a specific protein" Biochim. Biophys. Acta, 20131830(4), 3077.
2) S. Hara, Y. Tatenaka, Y. Ohuchi and T. Hisabori, "Direct determination of the redox status of cysteine residues in proteins in vivo", Biochem. Biophys. Res. Commun., 2015, 456, (1), 339. タイトル 同仁化学研究所
3) Y. J. Suzuki, L. Marcocci, T. Shimomura, Y. Tatenaka, Y. Ohuchi and T. I. Brelidze, 'Protein Redox State Monitoring Studies of Thiol Reactivity', antioxidant., 2019, 8, (5), 143.

よくある質問

Q

1サンプル当たりの細胞数が5-10×105 cellsを超える場合、どのような問題がありますか?

A

十分にラベル化できない可能性がございます。
また、細胞のペレットをLysis Bufferで溶解後、DNAの影響で溶液がゲル状になることがあります。

推奨範囲を超える場合は、Lysis Bufferで適切な濃度まで希釈してください。

Q

Protein-SHifter Plusは光に不安定だと思いますが、ラベル化、電気泳動は遮光して行う必要がありますか?

A

アルミラミジップから取り出したProtein-SHifter Plusは、蛍光灯下で数時間安定です。

遮光をする必要はありませんが、ラベル化、電気泳動中は直射日光等の強い光は避けてください。

未使用分はアルミラミジップに戻して、口をしっかり閉じてから冷蔵保存してください。

Q

ラベル化したサンプルは保存できますか?

A

精製タンパク質Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenaseをラベル化したサンプルは、
一晩冷凍保管し、結果に影響が出ないことを確認しております。

サンプルによって安定性は変わる可能性がございます。

Q

ラベル化反応を妨害する物質はありますか?

A

アスコルビン酸等の還元剤は、タンパク質の還元状態に影響を与えるため使用できません。

また、チオールを有する化合物はラベル化反応を妨害します。

Q

検出可能なタンパク質中のチオール数の目安はありますか。

A

小社にて、チオール数が9個のタンパク質(ETHE1: ethylmalonic encephalopathy)に適用した実績があります(写真右)。その他、GAPDH(チオール数3個: 写真左)、およびTRX(チオール数5個: 写真中)の測定例は以下の通りです。タンパク質中に10個以上のチオールが存在する場合、電気泳動のバンドが複雑になることで解析が困難になる可能性があるため、タンパク質中のチオール数として1~9個の範囲を目安に使用することをお勧めします。

標識試薬:Protein-SHifter Plus (製品:Protein Redox State Monitoring Kit Plus, Code: SB12)
染色試薬:CBB

タイトル 同仁化学研究所

Q

検出実績のあるサンプルを教えてください。

A

シロイヌナズナ由来のThioredoxin(14k)、ヒト由来のThioredoxin(14k)、大腸菌由来のThioredoxin(14k)、
Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (36k)の精製タンパク質の検出実績がございます。

またHeLa、HL60、K562細胞のライセート中のThioredoxin及びGlyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenaseの検出実績もございます。

Q

光切断に使用可能な機器情報を教えてください。

A

弊社で光切断実績のある機器は下記の2種類です。
実際の光切断は画像を参考ください。

トランスイルミネーター (メーカー:UVP、型番:NTM-15、切断条件:302 nm 15 Wで10分)
ハンディUVランプ (メーカー:アズワン、型番:SLUV-4、切断条件:365 nm 4 Wで30分)

また、254 nmの光照射(ハンディUVランプまたはクリーンベンチの殺菌灯など)では、十分な光切断ができません。

例)光切断時のゲルの置き方
※ゲルが作業中に乾燥しないようガラス板に挟んだ状態で光切断を行ってください。
※光源と直接接触させて切断操作を行ってください。

タイトル 同仁化学研究所 タイトル 同仁化学研究所

          UVトランスイルミネーター                       ハンディUVランプ

Q

使用するサンプルの適切なタンパク質濃度、チオール濃度を教えてください。

A

pH7の緩衝液(100 mmol/L HEPES)中に1%濃度で溶解後、4 ℃で保存した場合、2ヶ月間は安定であることを確認しております。
1) N. Hasegawa, H. Jonotsuka, K. Miki and K. Takeda, "X-ray structure analysis of bacteriorhodopsin at 1.3 A resolution", Scientific Reports., 2018, 8, 13123, DOI:10.1038/s41598-018-31370-0. (膜タンパク質: purple membraneの結晶化, trehalose C16).

100 mg/10 mL(水)

 

タンパク質濃度として0.1~1 mg/mL、チオール濃度として100 μmol/mL以下に合わせてください。

○DTNB(製品コード:D029)を用いたチオール濃度の定量例(96 wellプレート用)は以下をご参考ください。
1. 試薬および溶液調製
・反応用バッファー(100 mmol/L sodium phosphate, pH 8.0, 1 mmol/L EDTA)

・400 μmol/L DTNB溶液
DTNB [5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid), Code: D029] 4 mgを秤量し、反応用バッファー 1 mLで溶解する。(10 mmol/L)
上記溶液を反応用バッファーで25倍希釈する。(400 μmol/L)
※測定に必要なwell数×0.1 mLを調製する。下記の場合は9 wellであるため、約1 mLを調製する

・ L-Cysteine標準液
L-Cysteine 2.42 mgを反応用バッファー 5 mLで溶解し、4 mmol/L L-Cysteine溶液とする。
この溶液100 μLを反応用バッファー 900 μLで希釈し、400 μmol/L L-Cysteine溶液とする。この溶液を順次2倍希釈して、 L-Cysteine標準液 (200, 100, 50, 25, 12.5, 0 μmol/L)とする。

・測定試料
サンプル(細胞溶解液やタンパク質溶液など)を反応用バッファーで希釈したものを数種類準備する。
(N=3で測定するため、350 μL以上調製する。)

2. 操作
1) 測定試料および L-Cysteine標準液を96 wellマイクロプレートの各ウェルに100 μLずつ添加する(図1)。
2) 400 μmol/L DTNB溶液100 μLを添加し、ピペッティングにより混合する。
3) 室温で15分間静置した後、マイクロプレートリーダーで412 nmにおける吸光度を測定する。
4) L-Cysteineの検量線から測定試料中のチオール濃度を算出する(図2)。
※サンプル希釈倍率からサンプル中のチオール濃度を計算する。

タイトル 同仁化学研究所タイトル 同仁化学研究所

           図1.プレート配置例                                                              図2.L-Cysteineの検量線例

タイトル 同仁化学研究所 タイトル 同仁化学研究所

取扱条件

取扱条件
保存条件: 冷蔵 , 取扱条件: 吸湿注意
危険・有害
シンボルマーク
タイトル 同仁化学研究所タイトル 同仁化学研究所
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タイトル 同仁化学研究所

関連製品

この製品に関連する研究では、下記の関連製品も使われています。

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    SulfoBiotics– Biotin-HPDP(WS) solution

遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所

上海金畔生物科技有限公司代理日本同仁化学试剂盒全线产品,欢迎访问日本同仁化学dojindo官网了解更多信息。

遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所HilyMax

03 分子生物学関連試薬

HilyMax

  • 分子生物学関連試薬

遺伝子導入試薬

  • 製品コード
    H357  HilyMax
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
1 ml ¥23,500 342-91103

内容物が微量のため確認しづらい場合があります。
内容物の確認についてはこちら

キット内容
1 ml ・HilyMax Reagent
・lipoform Buffer
1 tube
1.0 ml×1

試験成績書

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  • ご購入方法
  • お問い合わせ

マニュアル

  • 取扱説明書 遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所 日本語
    遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所
  • 取扱説明書 遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所 English
    遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所
  • プロトコル 遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所 遺伝子を導入したい
    遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所

技術情報

他社品との比較例

遺伝子導入試薬 HilyMax 同仁化学研究所

参考文献

参考文献を表示する

1) S. Mima, H. Ushijima, H.-J. Hwang, S. Tsutsumi, M. Makise, Y. Yamaguchi, T. Tsuchiya, H. Mizushima and T. Mizushima, "Identification of theTP01gene in Yeast, and its Human Orthologue TETRAN, which Cause Resistance to NSAIDs",FEBS Lett.,2007,581, 1457.
2) T. Namba, T. Ishihara, K. Tanaka, T. Hoshino and T. Mizushima, "Transcriptional Activation of ATF6 by Endoplasmic Reticulum Stressors",Biochem. Biophys. Res. Commun.,2007,355, 543.
3)H. Nakajima, W. Amano, A. Fujita, A. Fukuhara, Y. Azuma, F. Hata, T. Inui and T. Takeuchi, "The Active Site Cysteine of the Proapoptotic Protein Glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogenase Is Essential in Oxidative Stress-induced Aggregation and Cell Death",J. Biol. Chem.,2007,282(36), 26562.
4) A. Endo, D. Sumi and Y. Kumagai, "1,2-Naphthoquinone Disrupts the Function of cAMP Response Element-binding Protein through Covalent Modification",Biochem. Biophys. Res. Commun.,2007,36(1), 243.

よくある質問

Q

遺伝子導入後の培地交換は必ず行う必要はありますか?

A

低い細胞毒性と高い導入効率を望まれる場合は、培地交換をお勧めします。
しかし、細胞(例:CHO細胞など)によっては、培地交換が毒性や導入率に影響しないものもありすので、細胞系にあわせて行ってください。

Q

導入効率が悪かった場合、どのような点を検討すれば良いでしょうか? (DNA量,HilyMax量,複合体形成比,時間など)

A

<細胞毒性が低い>

 導入効率が極端に低い場合は、DNA量を増やすか、DNA(μg):HilyMax(μL)=1:5~1:9にしてみてください。

 高い導入効率を示す場合があります。

<細胞毒性が高い>

 DNA量またはHilyMax量を減らしてください。

Q

説明書には、保存条件が『冷蔵』と『冷凍』の2つの記載があります。 どのように保存すればよいのでしょうか? 最初から『冷凍』したり、ずっと『冷蔵』ではダメですか?

A

未開封・未使用の場合には『冷蔵保存』、試薬を緩衝液と混合し溶解した後は『冷凍保存』してください。
未開封の状態で『冷凍保存』いただいても品質には問題はありませが、使用時に凍結した[Lipoform Buffer]を融解していただく必要があります。

また、溶解後に関しては、2~3週間以内に使い切る場合であれば『冷蔵保存』いただいても性能に影響はありません。数週間を越える使用の場合には、必ず『冷凍保存』してください。

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取扱条件

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保存条件: 冷蔵
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05 細胞染色用色素

Mtphagy Dye

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  • ミトコンドリア関連

マイトファジー検出試薬

  • 製品コード
    MT02  Mtphagy Dye
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5 μg x 3 ¥88,400 349-92051

マイトファジー検出キット Mitophagy Detection Kitのご確認

初めてMtphagy Dye をご使用の際は、リソソーム染色試薬(Lyso Dye) が同梱された上記製品にて、リソソームとの共染色によりマイトファジーを検出することをお勧めします。

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マニュアル

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技術情報

検出原理

Mtphagy Dyeによるマイトファジー検出機構

マイトファジー検出試薬 Mtphagy Dye 同仁化学研究所

Mtphagy Dyeを用いた実験データは、コチラ[Mitophagy Detection Kit(品コード:MD01)]のページをご覧ください。

参考文献

参考文献を表示する

1) J. Koniga, C. Otta, M. Hugoa, T. Junga, A. L. Bulteaub, T. Grunea and A. Hohna, "Mitochondrial contribution to lipofuscin formation", Redox Biology2017, 11, 673.
2) K. Kameyama, "Induction of mitophagy-mediated antitumor activity with folate-appended methyl-β-cyclodextrin", International Journal of Nanomedicine2017, 12, 3433.
3) E. F. Fang, T. B. Waltz, H. Kassahun, Q. Lu, J. S. Kerr, M. Morevati, E. M. Fivenson, B. N. Wollman, K. Marosi, M. A. Wilson, W. B. Iser, D. M. Eckley, Y. Zhang, E. Lehrmann, I. G. Goldberg, M. S. Knudsen, M. P. Mattson, H. Nilsen, V. A. Bohr and K. G. Becker, "Tomatidine enhances lifespan and healthspan in C. elegans through mitophagy induction via the SKN-1/Nrf2 pathway", Scientific Reports2017, 7, (46208), DOI: 10.1038/srep46208.
4) H. Iwashita, S. Torii, N. Nagahora, M. Ishiyama, K. Shioji, K. Sasamoto, S. Shimizu and K. Okuma, "Live Cell Imaging of Mitochondrial Autophagy with a Novel Fluorescent Small Molecule", ACS Chem. Biol.2017, 12, (10), 2546.
5) Y. Feng, NB. Madungwe, CV. da Cruz Junho and JC. Bopassa, "Activation of G protein-coupled oestrogen receptor 1 at the onset of reperfusion protects the myocardium against ischemia/reperfusion injury by reducing mitochondrial dysfunction and mitophagy.", Br. J. Pharmacol.2017, 174, (23), 4329.
6) K. M. Elamin, K. Motoyama, T. Higashi, Y. Yamashita, A. Tokuda and H. Arima, "Dual targeting system by supramolecular complex of folate-conjugated methyl-β-cyclodextrin with adamantane-grafted hyaluronic acid for the treatment of colorectal cancer.", Int. J. Biol. Macromol.2018, doi: 10.1016/j.ijbiomac.2018.02.149.
7)S. Ikeoka and A. Kiso  , "The Involvement of Mitophagy in the Prevention of UV-B-Induced Damage in Human Epidermal Keratinocytes ", J. Soc. Cosmet. Chem. Jpn., 2020,  54(3), 252.

 

取扱条件

規格
性状: 本品は紫色~赤紫色固体である。
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
保存条件: 冷蔵,遮光 , 取扱条件: 窒素置換,吸湿注意
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キレート試薬 TTHA 同仁化学研究所

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TTHA

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キレート試薬

  • 製品コード
    T031  TTHA
容 量 メーカー希望
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5 g ¥11,000 340-02873

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技術情報

溶解例

1 g/10 mL(1 mol/L-NaOH)→50 mL(水)

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色結晶性粉末で水には溶けにくく、アルカリ水溶液にはよく溶ける。
純度(滴定): 98.0% 以上
アルカリ溶状: 試験適合
強熱残分(硫酸塩): 0.20% 以下
重金属(Pbとして): 0.001% 以下
鉄(Fe): 0.001% 以下
取扱条件
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キレート試薬 0.02M 滴定液 同仁化学研究所

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0.02M 滴定液

  • キレート試薬

キレート試薬

  • 製品コード
    E024  0.02M 滴定液
  • 化学名
    EDTA・2Na solution(0.02mol/l)
容 量 メーカー希望
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500 ml ¥5,900 345-06505

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取扱条件

規格
性状: 本品は、無色液体である。
ファクター(滴定): 1.000~1.001
取扱条件
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キレート試薬 緩衝液 pH10 同仁化学研究所

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緩衝液 pH10

  • キレート試薬

キレート試薬

  • 製品コード
    K004  緩衝液 pH10
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
500 ml ¥6,400 343-01545

キレート試薬 緩衝液 pH10 同仁化学研究所

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取扱条件

規格
性状: 本品は、無色液体である。
pH(2%水溶液,25℃): 9.9~10.5
金属ブランク: 試験適合
取扱条件
危険・有害
シンボルマーク
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キレート試薬 硬度滴定液(B) 同仁化学研究所

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キレート試薬 硬度滴定液(B) 同仁化学研究所硬度滴定液(B)

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硬度滴定液(B)

  • キレート試薬

キレート試薬

  • 製品コード
    K006  硬度滴定液(B)
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
500 ml ¥4,600 347-01565

キレート試薬 硬度滴定液(B) 同仁化学研究所

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よくある質問

Q

水溶液中の硬度(Ca,Mg)を測定したいのですが、『硬度滴定液(B)』だけで 測定することが出来るのでしょうか? その場合は、どのように操作すればよいのでしょうか?

A

 水溶液中の硬度測定は『硬度滴定液(B)』だけでは出来ません。
他に指示薬として『BT』。pH調整として『緩衝液pH10』が必要となります。

『硬度滴定液(B)』は滴定液として使用されるもので、指示薬で水に色をつけておき
変色点までの使用量で硬度を算出することが出来るものとなっております。
【試薬】硬度滴定液(B)
    BT指示薬溶液
    緩衝液(pH10)

【操作】①試料溶液(Ca濃度1 %以下)は必要であればHClまたはNaOHにて中和する。
    ②溶液100 mlにつき緩衝液2 ml,指示薬溶液2~4滴を加え、
     硬度滴定液(B)にて滴定する。
    ③終点の変色は赤→青。赤味の完全に無くなった点を終点とする。

    硬度滴定液(B) 1 ml =1.0 mg CaCO3

キレート試薬 硬度滴定液(B) 同仁化学研究所 キレート試薬 硬度滴定液(B) 同仁化学研究所

取扱条件

規格
性状: 本品は、無色液体である。
ファクター(滴定): 0.9989~0.9993
取扱条件
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    比色試薬/金属指示薬

    BT

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0.01M 滴定液

  • キレート試薬

キレート試薬

  • 製品コード
    T013  0.01M 滴定液
  • 化学名
    EDTA・2Na solution(0.01mol/l)
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
500 ml ¥4,200 342-02615

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取扱条件

規格
性状: 本品は、無色液体である。
ファクター(滴定): 1.000~1.001
取扱条件
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キレート試薬 0.05M 滴定液 同仁化学研究所

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0.05M 滴定液

  • キレート試薬

キレート試薬

  • 製品コード
    T014  0.05M 滴定液
  • 化学名
    EDTA・2Na solution(0.05mol/l)
容 量 メーカー希望
小売価格
富士フイルム
和光純薬
500 ml ¥4,200 349-02625

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取扱条件

規格
性状: 本品は、無色液体である。
ファクター(滴定): 1.000~1.001
取扱条件
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    MX

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0.1M 滴定液

  • キレート試薬

キレート試薬

  • 製品コード
    T015  0.1M 滴定液
  • 化学名
    EDTA・2Na solution(0.1mol/l)
容 量 メーカー希望
小売価格
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和光純薬
500 ml ¥4,200 346-02635

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規格
性状: 本品は、無色液体である。
ファクター(滴定): 1.000~1.001
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    2NA(EDTA・2Na)

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    MX