Thermo化学发光核酸检测模块试剂盒 分子生物试剂89880

Thermo化学发光核酸检测模块试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  89880
  • 简单描述
  • Thermo化学发光核酸检测模块试剂盒Thermo Scientific Pierce 化学发光核酸检测模块是用于在各种膜印迹应用中检测生物su标记核酸探针的完整系统。
详细介绍

Thermo化学发光核酸检测模块试剂盒

Thermo Scientific Pierce 化学发光核酸检测模块是用于在各种膜印迹应用中检测生物su标记核酸探针的完整系统。

几乎所有基于硝酸纤维素或尼龙膜和生物su化探针的 DNA 或 RNA 方法均可在与传统放射性 (32P) 系统等效的灵敏度下进行检测。该模块包括用于 Thermo Scientific North2South 试剂盒和 ThermoScientific LightShift EMSA 试剂盒的关键检测组分。该系统包括用于辣根过氧化物酶 (HRP) 的增强型鲁米诺底物,具有优化的封闭和洗涤缓冲液,可在膜上或通过 CCD 相机进行快速、无gu障检测。获得具有出色信号和低背景的发表级别印迹。

化学发光核酸检测模块的特点:

快速灵敏—使用 Thermo Scientific North2South 和 LightShift 试剂盒可获得您预期的相同速度和检测水平
通用—试剂盒方案(含)适用于任何含生物su的核酸检测系统:Northern、Southern、EMSA、RPA 和菌落转移
灵活—试剂盒仅含有关键检测组分,适用于具有生物su标记探针和开发的优化杂交方法的人员

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核酸检测封闭缓冲液

Thermo化学发光核酸检测模块试剂盒


规格

产品线
Pierce™
产品类型
核酸检测模块试剂盒
数量
10 份印迹
检测方法
化学发光
产品规格
试剂盒

内容与储存

足够用于:800 cm2 膜(10 微型凝胶印迹)
• 稳定链霉su亲和素-HRP,1.5 mL
• 鲁米诺/增强剂溶液,80 mL
• 稳定的过氧hua氢溶液,80 mL
• 封闭缓冲液(产品编号 89880A),500 mL
• 洗涤缓冲液 (4X),500 mL
• 底物平衡缓冲液,500 mL

在 4°C 下储存。


LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒 分子生物试剂20148

LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  20148
  • 简单描述
  • LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒Thermo Scientific LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒是一种非常可靠、灵敏的电泳迁移率变动实验 (EMSA) 系统,用于鉴定和表征蛋白-DNA 结合相互作用。
详细介绍

LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒

Thermo Scientific LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒是一种非常可靠、灵敏的电泳迁移率变动实验 (EMSA) 系统,用于鉴定和表征蛋白-DNA 结合相互作用。该试剂盒包括用于设置和定制 DNA 结合反应的试剂、用于检测试剂盒系统的一组 DNA 和蛋白提取物、用于生物su标记 DNA 靶标的稳定链霉su亲和素-HRP 偶联物以及用于检测的一种极其灵敏的化学发光底物模块。

LightShift 化学发光 EMSA 试剂盒的特点:

•非常适合检测细胞核提取物中的低丰度蛋白
• 灵敏度超过放射性和di高辛方法
• 与先前为常用 DNA-蛋白相互作用建立的结合条件兼容
• 包括 EBNA 控制系统以帮助新用户开发工作检测方法并了解用于确认结合相互作用特异性的方法

LightShift EMSA 检测的原理类似于 Western 印迹。生物su末端标记的双螺旋 DNA 与细胞核提取物或纯化因子一起孵育并在天然凝胶上电泳。然后快速(30 分钟)将 DNA 转印到阳性尼龙膜上,进行紫外交联,用链霉su亲和素-HRP 偶联物进行探测,并与底物一起孵育。可在一天内完成从标记到得出结果。

蛋白与 DNA 的相互作用是控制许多细胞过程的关键,包括 DNA 复制、重组和修复、转录和病毒组装。研究基因调控和确定蛋白:DNA 相互作用的核心技术是电泳迁移率实验 (EMSA)。

EMSA 技术基于以下观察结果:在进行非变性聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳时,蛋白:DNA 复合物的迁移速度比无 DNA 分子慢。因为 DNA 迁移率会根据蛋白结合率发生偏移或速度减慢,因此,该实验也被称为凝胶偏移或凝胶延迟实验。直至 EMSA 蛋白:DNA 相互作用主要通过硝酸纤维素过滤柱结合试验进行研究。

进行试验所需的全部是纯化的 DNA 靶标,该靶标已用生物su、待测蛋白提取物、尼龙膜和碱性电泳设备进行末端标记。DNA 靶标可以在合成时加上 5' 或 3' 生物su标记,或者在合成后使用 Thermo Scientific 生物su 3' 末端 DNA 标记试剂盒(产品编号 89818)进行标记。细胞核、细胞溶质或全细胞蛋白提取物可以通过多种方法获得,包括 Thermo Scientific NE-PER 核和细胞质提取试剂盒(产品编号 78833)。



LightShift™ 化学发光 EMSA 试剂盒


规格

检测
EMSA 测定
反应次数
100
产品线
LightShift™
产品类型
Protein-DNA binding Interaction Assay Kit
数量
100 Reactions
靶标特异性
无靶标特异性
技术
增强的化学发光、膜印迹、凝胶迁移
检测方法
化学发光
产品规格
Kit


Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠 分子生物试剂26162

Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠 分子生物试剂

  • 产品型号:  26162
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠包被磁石和蛋白的聚合物微珠悬浮在叠氮hua钠水溶液中,浓度为 10 mg/mL。足够用于:用于约 250 次典型 ChIP 检测
详细介绍

Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠

包被磁石和蛋白的聚合物微珠悬浮在叠氮hua钠水溶液中,浓度为 10 mg/mL。足够用于:用于约 250 次典型 ChIP 检测

Thermo Pierce™ ChIP 级蛋白 A/G 磁珠

规格

描述
Pierce ChIP 级蛋白 A/G 磁珠
产品线
Pierce™
Target
抗体
类型
磁珠
配基类型
蛋白 A/G
足够用于
约 250 次检测

内容与储存

储存在原容器中,置于干燥、阴凉且通风良好的区域内,避免阳光直照。

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒 分子生物试剂26157

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  26157
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 试剂盒提供了一种通过免疫沉淀(染色质 IP)高效分离染色质结合 DNA 的便利方法,用于随后通过 PCR 进行定量分析。
详细介绍

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒

Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 试剂盒提供了一种通过免疫沉淀(染色质 IP)高效分离染色质结合 DNA 的便利方法,用于随后通过 PCR 进行定量分析。

磁性 ChIP 试剂盒的特点:

快速— 可在约 8 小时内获得适于进行定量 PCR 的纯化 DNA
高效且可重现—微球菌核酸酶酶切过程和细胞核裂解过程均经高度优化
灵敏—只需 10,000 个细胞 (1 x 10^4) 即可获得结果
低背景—Pierce 蛋白 A/G 磁珠已在不含 DNA 的试剂中进行封闭,可极大限度地降低背景
全面—包括优化的阳性对照试剂:RNA 聚合酶 II 抗体和 GAPDH 启动子 PCR 引物

Pierce 磁性染色质免疫沉淀分析 (ChIP) 试剂盒含有足够的试剂,可使用优化的方案采用适当对照品进行 30 次 ChIP 检测。试剂盒中包含的试剂可用于裂解细胞、捕获蛋白-DNA 复合物,逆转交联以及分离 DNA。封闭 Pierce 蛋白 A/G 磁珠具有ji高的结合容量和较低的非特异性背景,可与很多种抗体一起使用。这些微珠可与磁力架或自动化平台(例如,Thermo Scientific KingFisher 仪器)一起用于手动工作流程。还提供经验证适用于 ChIP 且具备质量保证的抗体,与 Pierce 磁性 ChIP 试剂盒配合使用。

包括:
试剂盒含有用于染色质制备、IP 以及 DNA 纯化的试剂,同时也包含阳性对照品(抗体和引物)

需要:
体内交联剂(如甲醛)、微量吸头超声波仪(如 Misonix™ 超声波仪 3000)、符合 ChIP 要求的首xuan抗体、目标 DNA 序列的 PCR 引物、PCR 预混液(如果需要 qPCR,则含有一种染料,如 SYBR™ Green)和 qPCR 仪器

应用:
• 通过 PCR 或 ChIP-Seq 确定基因组 DNA 上特异性蛋白-DNA 相互作用的位点
• 监测组蛋白修饰或化学制剂对 DNA 结合的影响

要想成功进行 ChIP 检测,需要在检测靶标基因组 DNA 之前执行多个关键步骤(交联、染色质制备、免疫沉淀)。单独来讲,ChIP 实验方案中的每一步在优化时都很费时间。Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 试剂盒简化了 ChIP 流程,可获得准确且可重现的结果。

蛋白-DNA 复合物首先在体内与甲醛交联。试剂盒含有的试剂可以裂解细胞,并可提取和溶解交联复合物。然后,将复合物和特异性抗体放在一起进行孵育,最后用 Pierce 蛋白 A/G 磁珠进行分离。在逆转交联和酶切蛋白后,纯化所得 DNA 片段,然后准备进行标准或定量 PCR。



Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 试剂盒


规格

容量(公制)
4×10^6 个细胞/反应
描述
Pierce 磁性 ChIP 试剂盒
形式
试剂盒
产品线
Pierce™
数量
1 个试剂盒
类型
磁珠 ChIP 试剂盒
足够用于
30 次反应
产品规格
试剂盒

内容与储存

• 甘an酸溶液 (10X),15 mL;在室温下储存
• PBS (20X),15 mL;在 4°C 下储存
• Halt™ 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物,无 EDTA (100X),1 mL;在 4°C 下储存
• 膜提取缓冲液,10 mL;在 4°C 下储存
• MNase 酶切缓冲液,10 mL;在 4°C 下储存
• DTT (7.7 mg),冻干,2 个样品瓶;在室温或 4°C 下储存
• MNase 终止液,1 mL;在 4°C 下储存
• ChIP 级蛋白 A/G 磁珠,0.7 mL;在 4°C 下储存
• IP 稀释/洗涤缓冲液 (5X),40 mL,在 4°C 下储存
• 氯化钠 (5M),6 mL;在 4°C 下储存
• IP 洗脱缓冲液 (2X),4.5 mL;在 4°C 下储存
• 微量离心管,1.5 mL,75 个管;在室温或 4°C 下储存
• DNA 纯化柱和试剂,40 次纯化;在室温或 4°C 下储存
• DNA 纯化柱,40 个柱
• DNA 柱结合溶液,30 mL
• DNA 柱洗涤液,6 mL
• pH 指示剂,0.8 mL
• DNA 柱洗脱液,5 mL
• 微球菌核酸酶(ChIP 级)(10 U/µL),50 µL;在-20°C 下储存
• 抗 RNA 聚合酶 II 抗体,25 µL;在-20°C 下储存
• 正常兔 IgG (1 mg/mL),10 µL;在-20°C 下储存
• 蛋白酶 K (20 mg/mL),0.25 mL;在-20°C 下储存
• ChIP 阳性对照引物(GAPDH 启动子,人特异性),100 µL;在 -20°C 下储存


ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒 分子生物试剂26149

ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  26149
  • 简单描述
  • ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒Thermo Scientific Pierce 免疫共沉淀试剂盒提供共价抗体固定化以及进行适当控制的 co-IP 实验所需的所有组分,成品中无抗体干扰。
详细介绍

ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒

Thermo Scientific Pierce 免疫共沉淀试剂盒提供共价抗体固定化以及进行适当控制的 co-IP 实验所需的所有组分,成品中无抗体干扰。

Co-IP 是研究蛋白:蛋白相互作用的常用方法,其使用抗体对抗原(诱饵蛋白)进行免疫沉淀,对任何相互作用蛋白(猎物蛋白)进行免疫共沉淀。使用蛋白 A 或 G 的传统 co-IP 方法可导致抗体重链和轻链的共洗脱,而这些重链和轻链可能与相关条带共迁移,掩盖了重要的结果。Pierce Co-IP 试剂盒通过将抗体共价偶联至胺反应性树脂上,解决了该问题。该试剂盒包含用于蛋白结合和回收的优化缓冲液、进行对照实验所需的试剂以及高效离心柱和收集管,可缩短方案并尽量减少操作和混合。

免疫共沉淀试剂盒的特点:

适用于任何纯化抗体—使用任何纯化抗体进行 co-IP 实验,无论物种或 Ig 类别(鸡 IgY、人 IgE、小鼠 IgG1、IgM 等)如何;不依赖蛋白 A 和蛋白 G 的亲和结合
• 无抗体干扰—共价结合方法和非还原洗脱系统可以产生纯 co-IP 产品,该产品不会被 IP 抗体污染
• 可重复使用的抗体微珠—共价抗体固定化允许重复使用制备的 IP 树脂,并可能节省昂贵抗体
• 全套试剂盒—所有用于抗体固定和许多 IP 实验的试剂,包括结合和洗涤缓冲液、洗脱缓冲液和便利的微量离心柱,使树脂操作更加简单和高效。
随附对照微珠—提供未衍生化琼脂糖微珠,用作非特异性结合的阴性对照
• 通用—co-IP 方法与任何生理(非变性)蛋白样品缓冲液兼容,缓冲液与特异性抗体抗原和蛋白相互作用复合物兼容。

免疫共沉淀 (Co-IP) 是一种用于发现蛋白相互作用的常用体外方法。Pierce 免疫共沉淀试剂盒经过配置,是有效进行 Co-IP 实验的基本工具,能够产生不含棘手的 IP 抗体的纯 IP 和 co-IP 产物。通过使用可直接且永偶联纯 IP 抗体的 AminoLink Plus 树脂替代蛋白 A/G 琼脂糖微珠,对传统 co-IP 技术实现这种改善。温和(非还原、非变性)洗脱缓冲液可实现在保留琼脂糖微珠上固定化抗体的同时解离 IP 靶标。结果是获得一种可通过 Western 印迹(或甚至测序)进行分析的纯产物,无抗体干扰。

除消除 IP 抗体污染外,构成 Pierce Co-IP 试剂盒的抗体偶联方法还可避免传统蛋白 A 和蛋白 G 方法产生的非特异性结合相互作用和浸出污染。尽管偶联方法要求起始抗体包含在不含 BSA、明胶和其他贮藏蛋白稳定剂的无胺缓冲液中,但其不依赖于蛋白 A 或蛋白 G 这一事实意味着任何抗体种类或类别均可用于 IP(例如,IgM 和鸡 IgY)。实际上,任何纯化的蛋白都可以固定化用于结合配偶体的亲和纯化。



ThermoPierce™ 免疫共沉淀试剂盒


规格

检测
亲和纯化
适用于(设备)
微型离心机
形式
试剂盒
产品线
Pierce™
数量
1 个试剂盒
适用于(应用)
免疫沉淀(IP)
Target
无靶标特异性
类型
免疫沉淀试剂盒
足够用于
50 次反应
产品规格
试剂盒

内容与储存

足够用于:准备并进行 50 次 co-IP 反应,每次使用 25 µL 树脂
• AminoLink Plus 偶联树脂,2 mL
• 偶联缓冲液 (20X),25 mL
• 氰基peng氢化钠溶液 (5M),0.5 mL
• 淬灭缓冲液,50 mL
• 洗涤液,60 mL
• IP 裂解/洗涤缓冲液,2 x 50 mL
• 改良 Dulbecco PBS (20X),25 mL
• 调节缓冲液 (100X),5 mL
• 洗脱缓冲液,50 mL
• 泳道标志物样品缓冲液 (5X),5 mL
• Pierce 离心柱,螺旋盖,50 根柱
• 微量离心机收集管,2 mL,100 支管
• 微量离心机收集管,1.5 mL,50 支管
• Pierce 对照琼脂糖树脂,2 mL

储存在 4°C 下。


Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒 分子生物试剂88805

Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  88805
  • 简单描述
  • Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒Thermo Scientific Pierce 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒使用交联化学方法将 IP 抗体共价固定在优质蛋白 A/G 磁珠上,以实现有效的免疫沉淀和免疫共沉淀
详细介绍

Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒

Thermo Scientific Pierce 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒使用交联化学方法将 IP 抗体共价固定在优质蛋白 A/G 磁珠上,以实现有效的免疫沉淀和免疫共沉淀。

因为该磁性 IP 程序涉及用于免疫沉淀的特异性抗体的共价结合,所以可在不使用抗体片段的情况下洗脱和分析靶蛋白或 co-IP 蛋白复合物,原因是该抗体仍黏附在微珠上。该试剂盒包含优化的方案以及使用与蛋白 A/G 结合的抗体和手动或自动磁性分离工具用于获得高得率 IP 或 co-IP 所必需的所有缓冲液和试剂。

交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒的特点:

无抗体 IP—抗体与磁珠不可逆地连接,使得完整抗体或含有纯化抗原的重链和轻链的共洗脱可忽略不计
便利—IP/co-IP 试剂盒包含磁珠以及所有用于理想免疫沉淀所必需的缓冲液
快速—可在 3 小时内完成交联和免疫沉淀
高效—与其他磁珠相比,使用一半推荐体积的磁粒子进行免疫沉淀
兼容—与蛋白 A/G 重组蛋白偶联的磁珠可确保与大多数一抗(无论来自小鼠还是兔)兼容
可扩展—仅需使用少量抗体即可进行单次 IP 实验或制备更大数量的抗体交联磁珠进行多次实验

Pierce 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒的方案为使 IP 抗体与蛋白 A/G 磁性微珠结合,然后使用辛二酸二琥珀酰亚胺酯 (DSS) 将抗体共价交联至微珠。然后将抗体交联微珠与含有目标蛋白抗原的细胞裂解物或组织提取物一起孵育,使得抗原:抗体复合物可以形成。洗涤微珠以去除未结合的材料,并使用低 pH 值洗脱缓冲液从抗体-交联微珠分离结合的抗原。包括中和缓冲液,以防止分离抗原沉淀,并确保下游应用中的蛋白活性。包含用于制备 SDS-PAGE 分析样品的泳道标志物样品缓冲液。该方案针对 2 至 10 µg IP 抗体进行了优化。为获得较佳 co-IP 得率,使用 5 至 10 µg 抗体。使用磁力架手动从溶液中取出磁珠或者使用 Thermo Scientific KingFisher Flex 仪器等仪器通过自动化操作从溶液中取出磁珠。

传统 IP(无共价抗体连接)的抗原得率通常高于使用交联的 IP 方案。这是因为交联过程不可避免地会引起一些功能性抗体结合位点的损失。为了克服交联方法的这一限制,在交联 IP 方法中需要使用的 IP 抗体量可能多于等效传统 IP 程序。当然,交联免疫沉淀程序的优势在于 Western 印迹无干扰抗体条带。

方案总结
1:用 1X 偶联缓冲液预洗微珠。
2:使抗体与蛋白 A/G 磁珠结合 15 分钟。
3:用 1X 偶联缓冲液洗涤微珠三次。
4:使用 DSS 将抗体交联至微珠,持续 30 分钟。
5:用洗脱缓冲液洗涤微珠三次,然后用 IP 裂解/洗涤缓冲液洗涤两次。
6:将细胞裂解物与制备的微珠在室温下孵育 1-2 小时或在 4°C 下过夜孵育。
7:用 IP 裂解/洗涤缓冲液洗涤微珠两次,然后用纯化水洗涤一次。
8:洗脱结合抗原。



Pierce™ 交联磁性 IP/Co-IP 试剂盒


规格

检测
亲和纯化
适用于(设备)
KingFisher™ Flex 磁颗粒物处理器、磁力架
形式
试剂盒
产品线
Pierce™
数量
1 个试剂盒
适用于(应用)
免疫沉淀(IP)
Target
无靶标特异性
类型
IP/Co-IP 试剂盒
足够用于
40 次反应
产品规格
试剂盒

内容与储存

足够用于:进行 40 次 IP 反应(使用 25 µL 微珠)
•Pierce 蛋白 A/G 磁珠,1 mL
• IP 裂解/洗涤缓冲液,2 x 50 mL
• 偶联缓冲液 (20X),25 mL
• DSS 交联剂,8 x 2 mg
• 泳道标志物样品缓冲液 (5X),5 mL
• 洗脱缓冲液,25 mL
• 中和缓冲液,1 mL
• 泳道标志物样品缓冲液 (5X),5 mL

在 4°C 下储存。在 4°C 下干燥储存 DSS。


Pierce™ 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒 分子生物试剂88804

Pierce™ 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  88804
  • 简单描述
  • Pierce™ 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒Thermo Scientific Pierce 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒使用不到 10 µg 的抗体和磁性分离器可高度有效且高效地对抗原和蛋白复合物进行免疫沉淀 (IP) 和免疫共沉淀 (co-IP)。
详细介绍

Pierce™ 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒

Thermo Scientific Pierce 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒使用不到 10 µg 的抗体和磁性分离器可高度有效且高效地对抗原和蛋白复合物进行免疫沉淀 (IP) 和免疫共沉淀 (co-IP)。

经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒的特点:

兼容—基于蛋白 A/G 重组蛋白的磁珠可确保与大多数一抗(无论来自小鼠还是兔)兼容
• 快速—免疫沉淀短至 30 分钟,以降低背景并提高瞬时蛋白复合物的捕获水平
• 洁净—固定您的抗体,以防止洗脱液受到污染
• 耐受性—在存在去污剂、低 pH 值缓冲液或常见质谱溶剂的情况下,不会浸出蛋白 A/G
• 高效—与其他磁珠相比,使用一半推荐体积的磁粒子进行免疫沉淀
• 便利—综合 Co-IP 试剂盒包含磁珠和完整免疫沉淀实验所需的所有必要缓冲液

本免疫沉淀试剂盒使用高质量 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠以及优化的缓冲液和灵活的实验方案以获得高得率 IP 或 co-IP,其可使用手动或自动磁性分离工具。优化的裂解/洗涤缓冲液优化了抗体-抗原的得率和高效结合以及 co-IP 相互作用。相对温和的低 pH 值洗脱缓冲液可使结合的免疫复合物与蛋白 A/G 分离。或者,内含的泳道标志物样品缓冲液提供了快速的变性洗脱,用于 IP 产物的直接 SDS-PAGE 分析。

包括:
Pierce 蛋白 A/G 磁珠、裂解/洗涤缓冲液、洗脱缓冲液、中和缓冲液及上样缓冲液

使用磁粒子进行免疫沉淀与微珠状琼脂糖 IP 非常相似,只是使用磁铁而非通过离心进行分离。首先将特异性抗体加入到样品中,形成一种免疫复合物,然后与磁珠结合。洗涤复合物以去除未结合的材料,低 pH 值洗脱缓冲液可使结合的免疫复合物与蛋白 A/G 分离。或者,包括泳道标志物样品缓冲液,用于使用变性条件进行解离或者用于 SDS-PAGE 分析的下游样品制备。该试剂盒包含 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠(用于快速方便地对抗原进行磁性分离)以及优化的缓冲液(用于提高抗原得率)。使用磁力架手动从溶液中取出磁珠或者使用 Thermo Scientific KingFisher Flex 仪器等仪器通过自动化操作从溶液中取出磁珠。

通常已知更长时间的抗体-样品孵育(2 小时到过夜)通常在 IP 测定中具有更高的得率。人们通常认为这种更高的得率与增加的背景有关。我们的研究人员发现过夜抗体-样品结合然后使用 Pierce 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒进行免疫沉淀,通常会提高得率,但不会增加背景。因此,我们建议研究人员尽可能在至少 1 个小时内执行该结合步骤。

方案总结
• 将细胞裂解物与 IP 抗体在室温下孵育 1 至 2 小时或在 4ºC 下过夜孵育。
• 使抗原-抗体复合物与蛋白 A/G 磁珠在室温下结合 1 小时。
•使用 IP 裂解/洗涤缓冲液洗涤微珠两次,并用纯化水洗涤一次。
•洗脱抗原/抗体复合物。



Pierce™ 经典磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒


规格

检测
亲和纯化
适用于(设备)
KingFisher™ Flex,磁力架
形式
试剂盒
产品线
Pierce™
数量
1 个试剂盒
适用于(应用)
免疫沉淀(IP)
Target
无靶标特异性
类型
IP/Co-IP 试剂盒
足够用于
40 次反应
产品规格
试剂盒

内容与储存

足够用于:40 使用 25 µL 的微珠进行 IP 反应
• Pierce 蛋白 A/G 磁珠,1 mL
• Pierce IP 裂解/洗涤缓冲液,2 x 50 mL
• 泳道标志物样品缓冲液 (5X),5 mL
• 洗脱缓冲液,5 mL
• 中和缓冲液,0.5 mL

在 4°C 下储存。


Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠 分子生物试剂88831

Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠 分子生物试剂

  • 产品型号:  88831
  • 简单描述
  • Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠Thermo Scientific HisPur Ni-NTA 磁珠为高容量镍-IMAC 微珠,用于亲和纯化 His 标签融合蛋白(手动或自动模式)。
详细介绍

Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA 磁珠为高容量镍-IMAC 微珠,用于亲和纯化 His 标签融合蛋白(手动或自动模式)。

HisPur Ni-NTA 磁珠的特点:

高容量— 结合容量与其他供应商的 Ni-NTA 磁珠相当或高于后者
低非特异性结合— 对微珠表面进行预封闭,方案提供经优化的缓冲液用于纯化
快速— 方案可在 1 小时内完成
可扩展— 可处理微升至毫升级的样品体积
通用— 可在天然或变性条件下纯化蛋白
试剂兼容— 可与常见细胞裂解试剂和各种缓冲液添加剂配合使用
多种规格— 微珠偶联蛋白和下游应用可通过手动方式或在自动化平台(例如,Thermo Scientific KingFisher 仪器)上进行

封闭磁珠表面使用次氮基三乙酸 (NTA) 螯合基团进行衍生化,并带有二价镍离子 (Ni2+)。固定化金属亲和色谱 (IMAC) 微珠可提供高结合容量和极低的背景。HisPur Ni-NTA 磁珠可与磁力架配合用于手动操作,亦可用于自动化平台,如 Thermo Scientific KingFisher 仪器,以适应高通量需求。

HisPur Ni-NTA 用于重组 His 标签蛋白的小规模亲和纯化和高通量筛选。多聚组an酸标签是极为常用的亲和标签,通常由 6 个连续组an酸残基 (6xHis) 组成。这些标签蛋白在许多不同系统(极常见于细菌)中过表达,纯化自细胞裂解物(如使用 B-PER 细菌蛋白提取试剂所制备的细胞裂解物)。采用带有镍离子的 NTA 螯合物(与组an酸侧链相匹配)对 His 标签蛋白进行纯化。NTA 螯合物含有四个金属结合位点,可提供低金属离子浸出率和高结合容量。HisPur Ni-NTA 磁珠的实验方案已经过优化,以提供高纯度分离的 His 标签蛋白。性能与其他供应商所提供的 Ni-NTA 磁珠相当或高于后者。

Thermo HisPur™ Ni-NTA 磁珠


规格

形式
液体
产品线
HisPur™
数量
2 mL
蛋白质形式
重组
Target
His
类型
磁珠
配基类型
镍-NTA

内容与储存

在 4°C 下储存


Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂 分子生物试剂88221

Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂 分子生物试剂

  • 产品型号:  88221
  • 简单描述
  • Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂Thermo Scientific HisPur Ni-NTA 树脂是高容量、高性能镍-IMAC 树脂,用于常规亲和纯化 His 标签融合蛋白。
详细介绍

Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂

Thermo Scientific HisPur Ni-NTA 树脂是高容量、高性能镍-IMAC 树脂,用于常规亲和纯化 His 标签融合蛋白。

HisPur Ni-NTA 树脂的特点:

高容量—每毫升树脂可结合高达 60 mg 的 6xHis-标签蛋白
• 通用—可在天然或变性条件下纯化蛋白
• 兼容—与 Thermo Scientific 细胞裂解试剂和各种缓冲液添加剂配合使用
• 高性价比—一批树脂可重复使用至少五次
• 易于使用—试剂盒规格提供预配制缓冲液
• 灵活—具有多种形式,包括散装树脂、离心柱、色谱纯化柱和 96 孔过滤板

特殊制备的支持物含有微珠状琼脂糖,使用次氮基三乙酸 (NTA) 螯合部分进行衍生化,并带有螯合二价镍离子 (Ni2+)。固定化金属亲和色谱 (IMAC) 树脂拥有用于重组 His 标签蛋白纯化的绝jia结合容量和性能。

重组蛋白的表达和纯化对于蛋白调节、结构和功能研究至关重要。大部分的重组蛋白都以短亲和标记的融合表达,zui流行的是聚组an酸(6xHis)标记。用于纯化重组 His 标签蛋白的方法是固定化金属亲和色谱 (IMAC),由带镍或钴离子的螯合树脂组成,镍或钴离子与组an酸侧链配位。

HisPur Ni-NTA 树脂能从细菌裂解物(如使用 Thermo Scientific B-PER 细菌蛋白提取试剂获得的裂解物)中有效纯化高水平过表达 His 标签融合蛋白。该树脂在各种容量的批连结和离心柱程序中表现很好。性能等同于或超过来自其他供应商的各种常用镍-NTA树脂。HisPur镍-NTA树脂是一种高品质、稳定而有弹性的亲和载体。各种试验证实在至少五次重复使用后,其性能不会降低。这些数据显示在正常使用中,该树脂能高度抵抗结构降解或镍离子浸出。

HisPur Ni-NTA 树脂和 HisPur 钴树脂是 IMAC 的替代形式,前者使用镍,后者使用钴作为负责 His-标签结合的螯合金属离子。由于其在螯合上的四个能高蛋白连结和低金属离子滤去的金属连结点,镍-NTA树脂已经成为6xHis标记蛋白纯化zui常用的IMAC树脂选择。钴连结不太强健,因此更有区分性,使其在 His 标签蛋白纯化中有更高的纯度但常常更低的得率。

可用形式:
树脂浆—交联 6% 微珠状琼脂糖;10 mL、100 mL、500 mL 瓶
离心柱— 0.2 mL(微量离心机)、1 mL 和 3 mL 离心柱
纯化试剂盒—所有三种柱规格的全套试剂盒



Thermo HisPur™ 镍-NTA树脂


规格

容量(公制)
结合多达 60 mg 6xHis 标签蛋白/mL 树脂
描述
HisPur 镍-NTA树脂
形式
悬浮液
色谱柱类型
亲和,琼脂糖树脂
产品线
HisPur™
数量
10 mL
Target
His 标签蛋白
类型
树脂
固定相
二价镍、金属螯合物
产品规格
瓶装

内容与储存

在4°C条件下储存


Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖 分子生物试剂20421

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖 分子生物试剂

  • 产品型号:  20421
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖该 Thermo Scientific NAb 蛋白 A/G 离心试剂盒便于对各种样品类型中的抗体进行快速、小规模亲和纯化。每个试剂盒都包括足够用于纯化至少 2 份抗体样品的 NAb 蛋白 A/G 离心柱、收集管、缓冲液和简化方案
详细介绍

Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖

该 Thermo Scientific NAb 蛋白 A/G 离心试剂盒便于对各种样品类型中的抗体进行快速、小规模亲和纯化。每个试剂盒都包括足够用于纯化至少 2 份抗体样品的 NAb 蛋白 A/G 离心柱、收集管、缓冲液和简化方案。

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖的特点:

蛋白 A/G – 蛋白 A 和蛋白 G 的抗体结合结构域的固定化重组融合蛋白可对几乎任何哺乳动物物种进行多克隆 IgG 纯化
• 琼脂糖树脂 – 支持物为交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B),这是蛋白亲和纯化方法的较常用树脂
• 惰性且稳定 – 优越的生产方法通过不带电荷的抗浸出性共价键固定蛋白 A/G,因此非特异性结合较低且能够多次使用而不降低得率
• 标准容量 – Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖包含正常上样量的固定化蛋白 A/G,提供大于 7 mg 人 IgG/mL 树脂的结合容量

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖包含已共价固定至高质量交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 上的纯化蛋白 A/G 重组融合蛋白。该特殊种类的树脂可提供通用的色谱特点组合,用于从哺乳动物血清样品中获得高得率的全 IgG 和对全 IgG 进行高纯度纯化。琼脂糖微珠的物理和化学特性适用于许多亲和纯化系统。

蛋白 A/G 是一种基因工程化蛋白,结合了蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 结合结构域。该融合蛋白在大肠杆菌中表达。蛋白A/G含有蛋白A的四个Fc结合结构域和蛋白G的两个Fc结合结构域,最终分子量为50,460道尔顿(SDS-PAGE中测得为40至45kDa)。蛋白 A/G 的 pH 值依赖性低于单独的蛋白 A,但具备蛋白 A 和 G 的累加特性。

蛋白 A/G 可与所有的人 IgG 亚类结合,因此是用于纯化尚未确定亚类的多克隆或单克隆 IgG 抗体的理想选择。此外,它还可结合IgA、IgE、IgM和IgD(后者结合力较弱)。蛋白A/G还可与小鼠所有IgG亚类结合,但不结合小鼠IgA、IgM或血清白蛋白。因此,蛋白A/G是纯化和检测小鼠IgG各亚类单克隆抗体的选择,避免了IgA、IgM和小鼠血清白蛋白的干扰。小鼠单克隆的个别亚类与嵌合蛋白 A/G 的亲和力很可能强于与蛋白 A 或蛋白 G 的亲和力。


Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶联化学法制备,该方法与传统配体固定方法相比具有多项优势。AminoLink 固定后,琼脂糖珠的糖单体与蛋白 A 上的天然赖氨酸残基通过简单的酰胺键结合。与典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化学基团,从而避免了可能导致的非特异性结合,并且形成基本不可逆的稳定结合。所得的高结合能力树脂在多轮抗体纯化之后仍然能保留功能性固定化蛋白 A/G。

Pierce 蛋白 A/G 琼脂糖可结合血清、腹水、细胞培养上清液和其他抗体样品中几乎所有同种型和哺乳动物物种的 IgG,从而实现高效抗体纯化。由于固定化蛋白 A/G 结合了蛋白 A 和蛋白 G 的免疫球蛋白结合结构域,该树脂可有效进行多种哺乳动物宿主物种中 IgG 抗体的亲和纯化。

交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 的特性:
•支持 pH 值稳定性:2 至 14(短期);3 至 13(长期)
• 平均粒径:45 至 165 微米
• 排阻极限:10,000至4,000,000 道尔顿
•体积流速:约1 mL/分钟(对于1 cm 直径柱)
•线性速度:30 cm/h
• 压力:低于 25psi (1.5 bar);定义为树脂可承受的跨色谱柱压降(注:液相色谱装置的指示表压可能测量的是总系统压力,而不是跨色谱柱压降。)


Thermo Pierce™ 蛋白 A/G 琼脂糖


规格

描述
Pierce蛋白A/G琼脂糖
纯化目标
IgG 抗体
数量
3 mL
色谱柱类型
琼脂糖树脂,亲和
产品规格
瓶装
产品线
Pierce™
产品类型
琼脂糖
固定相
蛋白 A/G

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存产品。产品使用湿冰袋运输。


Thermo Pierce™ IP 裂解缓冲液 分子生物试剂87787

Thermo Pierce™ IP 裂解缓冲液 分子生物试剂

  • 产品型号:  87787
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ IP 裂解缓冲液Thermo Scientific Pierce IP 裂解缓冲液针对细胞裂解物的产量、纯度以及与免疫沉淀(IP 和 Co-IP)(作为与细胞裂解物相关的下游应用)的兼容性进行了优化。
详细介绍

Thermo Pierce™ IP 裂解缓冲液

Thermo Scientific Pierce IP 裂解缓冲液针对细胞裂解物的产量、纯度以及与免疫沉淀(IP 和 Co-IP)(作为与细胞裂解物相关的下游应用)的兼容性进行了优化。

IP 裂解缓冲液的特点:

•经过优化,可与各种免疫沉淀和牵出测定兼容
• 与各种蛋白测定、报告基因测定和免疫检测程序兼容
• 现成的配方,可有效提取细胞质、细胞膜和细胞核蛋白
• 温和的配方可帮助保持蛋白复合物用于免疫共沉淀
• 不会释放可导致样品高粘性的基因组 DNA

IP 裂解缓冲液是一种基于改良 RIPA 缓冲液配方(不含 SDS)的哺乳动物全细胞裂解试剂。这种中等强度裂解缓冲液可高效溶解细胞蛋白,但不会像一般 RIPA 缓冲液那样释放染色体组 DNA 或破坏蛋白复合物。Pierce IP 裂解缓冲液经过特殊配方,可用于各种牵出测定和免疫沉淀检测。

Pierce IP 裂解缓冲液可从孔板细胞和经悬浮培养液粒化的细胞中有效裂解出培养的哺乳动物细胞。该裂解缓冲液经过优化可用于各种牵出测定和免疫沉淀检测,还可与很多其他应用兼容,包括 Thermo Scientific Pierce BCA 和 660 nm 蛋白测定、蛋白纯化和各种免疫检测(如 ELISA、Western 印迹)。

Pierce IP 裂解缓冲液由 25 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1% NP-40 和 5% 甘油组成。该缓冲液不含蛋白酶或磷酸酶抑制剂;但是如果需要,可在使用前添加各种抑制剂,如 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物或磷酸酶抑制剂混合物,以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化。



Thermo Pierce™ IP 裂解缓冲液


规格

产品线
Pierce™
数量
100 mL
产品规格
液体
产品类型
IP 裂解液
容积(公制)
100 mL

内容与储存

接收后,在 4° C 下储存。


Thermo 培养细胞亚细胞蛋白分离试剂盒 分子生物试剂78840

Thermo 培养细胞亚细胞蛋白分离试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  78840
  • 简单描述
  • Thermo 培养细胞亚细胞蛋白分离试剂盒用于培养细胞的 Thermo Scientific 亚细胞蛋白分离试剂盒可从 5 个不同的细胞区室中分离和富集蛋白。
详细介绍

Thermo 培养细胞亚细胞蛋白分离试剂盒

用于培养细胞的 Thermo Scientific 亚细胞蛋白分离试剂盒可从 5 个不同的细胞区室中分离和富集蛋白。

用于培养细胞的亚细胞蛋白分离试剂盒的特点:

简明 — 在不到 3 小时内从哺乳动物培养细胞中提取功能性细胞质、膜、可溶性核、染色质结合和细胞骨架蛋白组分
• 便利 — 无需使用梯度超速离心即可执行简单程序
• 全套 — 使用单一试剂盒获得细胞质、膜、可溶性核、染色质结合和细胞骨架蛋白组分
• 培养细胞 — 经开发和优化,配合培养的哺乳动物细胞使用;对于组织样品,使用用于组织的亚细胞分离试剂盒
• 兼容 — 将提取物用于下游应用,如蛋白检测、Western 印迹、蛋白检测、电泳迁移率变动实验、报告基因和酶活性检测。

亚细胞组分的应用:
• 从不同细胞区室中提取和富集蛋白
• 从相同细胞中分离细胞质、核、膜和细胞骨架蛋白
• 分析细胞质、核、膜和细胞骨架中的蛋白
• 研究蛋白转位

亚细胞蛋白分离使得可从特定细胞区室进行蛋白定位评估和蛋白富集。Thermo Scientific 亚细胞蛋白分离试剂盒含有各种试剂,可按步骤在不到 3 小时内将细胞裂解为功能性细胞质、膜、可溶性核、染色质结合和细胞骨架蛋白组分。从每个亚细胞区室获得的提取物通常在各组分间有低于 15% 的污染,该纯度对于大多数研究蛋白定位和再分布的实验而言已足够。

用于培养细胞的亚细胞蛋白分离试剂盒含有 4 种提取缓冲液、一种稳定的核酸酶和 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物。每个试剂盒有足以分离 50 个 20 µL 细胞团块(相当于约 2 g 的细胞团)的试剂。(对于组织样品,使用我们的用于组织的亚细胞蛋白分离试剂盒。)

添加至细胞团块中的种试剂盒试剂会导致选择性膜透化,释放可溶性细胞质内容物。第二种试剂可溶解血浆、线粒体和 ER-高尔基体膜,但不能溶解核膜。在通过离心回收完整的细胞核后,第三种试剂产出可溶的细胞核抽提物。使用微球菌核酸酶进行一次额外的细胞核抽提,以释放染色质连结细胞核蛋白。然后使用最后一种试剂提取回收的不溶性团块以分离细胞骨架蛋白。


Thermo 培养细胞亚细胞蛋白分离试剂盒


规格

数量
1 个试剂盒
足够用于
50 份样品
Buffer
裂解缓冲液
形式
液体
试剂类型
细胞裂解缓冲液、去污剂溶液、亚细胞分离
产品类型
亚细胞蛋白分离试剂盒

内容与储存

接收后,在 -20°C 下储存试剂盒或按上文所述储存单一组分。试剂盒在干冰上运输。


Thermo Pierce™ 细胞表面蛋白分离试剂盒 分子生物试剂89881

Thermo Pierce™ 细胞表面蛋白分离试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  89881
  • 简单描述
  • Thermo Pierce™ 细胞表面蛋白分离试剂盒Thermo Scientific 细胞表面蛋白分离试剂盒是一整套试剂,用于对哺乳动物细胞蛋白进行选择性生wu素化,并随后进行纯化,以排除细胞内蛋白。
详细介绍

Thermo Pierce™ 细胞表面蛋白分离试剂盒


Thermo Scientific 细胞表面蛋白分离试剂盒是一整套试剂,用于对哺乳动物细胞蛋白进行选择性生wu素化,并随后进行纯化,以排除细胞内蛋白。

细胞表面蛋白分离试剂盒的特点:

分离细胞表面蛋白—降低总细胞蛋白复杂性
高效回收标记蛋白—通过可裂解生wu素,可几乎回收分离的细胞表面蛋白
便利—一个试剂盒中提供了所有试剂以及细胞表面膜蛋白标记、细胞裂解和纯化的完整说明
Western 印迹应用—在 SDS-PAGE 缓冲液中回收的蛋白可直接上样至聚丙烯酰胺凝胶
稳健的系统—方案设计用于多种细胞系,包括 NIH 3T3、HeLa、C6 和 A431

该试剂盒可高效标记具有可获取赖氨酸残基和充分细胞外暴露的蛋白。分离程序使用不可透过细胞的可裂解生wu素化试剂(Sulfo-NHS-SS-生wu素)来标记完整贴壁或悬浮细胞表面的蛋白上暴露的伯胺。之后收获并水解经处理的细胞,并使用 Thermo Scientific NeutrAvidin 琼脂糖树脂对标记的表面蛋白进行亲和纯化。分离出的细胞表面蛋白含一个原来标记伯胺、但不再生wu素化(生wu素保持连结至树脂)的小型、非反应标记。该试剂盒含足以进行八次实验的试剂,每次实验涉及装有融合细胞的四个 T75 瓶。

细胞表面蛋白分离试剂盒已成功用于标记和纯化细胞表面蛋白。在一次实验中,使用或不使用 Sulfo-NHS-SS-生wu素处理 HeLa 细胞,并根据试剂盒程序对细胞进行处理。通过 Western 印迹分析收集的组分,包括洗脱、流过物和洗脱后凝胶。在用生wu素标记处理的细胞的洗脱组分中鉴定出四种细胞表面蛋白。这些蛋白包括表皮生长因子受体 (EGFR)、胰岛素样生长因子-1 受体 β IGF (IGF-1β)、整合素 1 和整合素 5。与之形成鲜明对比的是,在未标记细胞的洗脱组分中未鉴定出这些蛋白;未标记蛋白仅在流过物中发现。此外,还在来自标记细胞的流过物组分中鉴定出一些细胞表面蛋白。由于空间位阻,这些蛋白很可能未被标记。洗脱后凝胶组分中存在的已捕获蛋白量可忽略不计,表明已捕获蛋白回收率将近 。在所有检测样品的洗脱组分中检测到了痕量热休克蛋白 90 (Hsp90),表明细胞表面与细胞内蛋白标记具有特异性。



Thermo Pierce™ 细胞表面蛋白分离试剂盒



规格

数量
1 个试剂盒
足够用于
8 次反应
Buffer
裂解缓冲液
形式
液体、粉末
产品线
Pierce™
试剂类型
细胞裂解缓冲液、去污剂溶液、亚细胞分离
产品类型
分离试剂盒

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存试剂盒。产品在环境温度下运输。

Thermo 培养细胞线粒体分离试剂盒 分子生物试剂89874

Thermo 培养细胞线粒体分离试剂盒 分子生物试剂

  • 产品型号:  89874
  • 简单描述
  • Thermo 培养细胞线粒体分离试剂盒Thermo Scientific 培养细胞线粒体分离试剂盒提供了一种通用的微量离心管方法,用于在约 40 分钟内从培养的哺乳动物细胞样本中分离完整的线粒体。
详细介绍

Thermo  培养细胞线粒体分离试剂盒



Thermo Scientific 培养细胞线粒体分离试剂盒提供了一种通用的微量离心管方法,用于在约 40 分钟内从培养的哺乳动物细胞样本中分离完整的线粒体。

培养细胞线粒体分离试剂盒的特点:

快速—可在约 40 分钟内(细胞收获后)从 20 百万个细胞中分离完整线粒体
• 灵活—使用基于试剂的方法同时处理多份样品,或采用杜恩斯均质化方法获得可能的较高得率
• 可优化—提供使用基于试剂的方法优化纯度和得率的指南
• 台式-简便—在微量离心管中进行分离
• 兼容—分离出的线粒体可用去污剂裂解或加以处理用于几乎任何下游应用(包括 2D 电泳)

线粒体分离通常是一个繁琐的过程,需要采用杜恩斯均质化法进行单一样品处理。线粒体分离试剂盒使用一种非机械、以试剂为基础的方法,可在大约 40 分钟内同时处理多份(6 份)培养细胞样本。使用专有制剂轻轻溶解培养的哺乳动物细胞沉淀,该制剂可在尽量避免损害完整性的情况下获得线粒体得率。

产品说明描述了纯度与得率参数的优化指南。该试剂盒还提供一项优化的杜恩斯匀质化程序,可实现比以试剂为基础的方法高两倍的线粒体回收率。两种方法用一台台式微量离心机的不同离心速度分离线粒体和细胞质部分,并在大约 40 分钟内完成(细胞后收获)。一旦分离,线粒体可用于下游应用(如细胞凋亡、信号转导和代谢研究)以及促进线粒体蛋白质组学工作。



Thermo  培养细胞线粒体分离试剂盒

规格

数量
115 mL
足够用于
50 次分离
形式
液体
试剂类型
细胞器分离、亚细胞分离
产品类型
线粒体分离试剂盒

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存试剂盒。产品在环境温度下运输。

Thermo NE-PER™ 细胞核和细胞质提取试剂 分子生物试剂78833

Thermo NE-PER™ 细胞核和细胞质提取试剂 分子生物试剂

  • 产品型号:  78833
  • 简单描述
  • Thermo NE-PER™ 细胞核和细胞质提取试剂Thermo Scientific NE-PER 细胞核和细胞质提取试剂盒可在不到两小时内高效裂解细胞并提取单独的细胞质和细胞核蛋白组分。
详细介绍

Thermo NE-PER™ 细胞核和细胞质提取试剂


Thermo Scientific NE-PER 细胞核和细胞质提取试剂盒可在不到两小时内高效裂解细胞并提取单独的细胞质和细胞核蛋白组分。

NE-PER 细胞核和细胞质提取试剂盒的特点:

快速 — 可在不到两小时内获得细胞核和细胞质组分
经验证 — NE-PER 试剂盒已在超过950种zhi名出版物中引用
通用 – 来自培养细胞或组织的细胞核蛋白(仅适用于新鲜样品)
可扩展 — 具有两种试剂盒规格,用于从细胞和组织中生成提取物
便利 — 指示简单,无需梯度超速离心
可兼容 — 可用于下游测定,包括 Western 免疫印迹、凝胶迁移率测定、蛋白测定、报告基因测定和酶活性测定

NE-PER 试剂盒是一种核蛋白提取方法,涉及简单、逐步裂解细胞并离心分离细胞核和细胞质蛋白组分。只需要使用台式微量离心机、试管和移液器工具。NE-PER 试剂可将各种细胞质和细胞核蛋白高效溶解并分离为小份,使基因组 DNA 和 mRNA 的交叉污染或干扰极少。脱盐或稀释后,分离的蛋白可用于进行免疫检测以及蛋白相互作用实验,如迁移率变动分析 (EMSA)、免疫共沉淀 (Co-IP) 和沉淀分析。

有多种方法可用于分离细胞核并制备细胞核蛋白提取物。大多数制备细胞核提取物的方法都是繁琐的流程,需要可能影响细胞核蛋白完整性的机械均质化、冻/融循环、广泛的离心或透析步骤。NE-PER 细胞核和细胞质提取试剂盒是一种基于试剂的方案,可逐步裂解细胞、从完整的细胞核中分离细胞质,然后从基因组 DNA 和 mRNA 中提取出细胞核蛋白。在使用培养细胞时,这一温和的流程只需不到两小时并且只需要一台标准的台式离心机。此外,可以从同一细胞培养或组织样品中回收活性细胞核蛋白和细胞质蛋白。

该试剂盒通常可从200万个细胞中产生 200-500 µg 细胞质蛋白和 100-200 µg 细胞核蛋白(浓度为 1 mg/mL)。细胞溶质和细胞核部分间的典型交叉污染率为大约 10%。该方法主要从细胞核中回收可溶性蛋白,而不是在染色质中结合的蛋白或细胞核包膜的整合膜蛋白。细胞核提取物的蛋白浓度可通过在提取中采用不同体积的细胞核提取试剂 (NER) 很容易的进行控制,提取效率不会有任何重大损失。从细胞中特定提取各种细胞核蛋白对于很多基因调控研究的成功非常重要。尽管有多种方法可用于分离细胞核并制备细胞核蛋白提取物,但这些方法的大多数都很繁琐,需要采用可能影响很多脆弱细胞核蛋白完整性的机械均质化、冻/融循环、广泛的离心或透析步骤。NE-PER 试剂盒克服了这些问题,可为 EMSA 和其他分析技术提供高质量、浓缩的细胞核蛋白提取物。



Thermo NE-PER™ 细胞核和细胞质提取试剂


规格

数量
15 mL
运输条件
环境
Buffer
裂解缓冲液
形式
液体
产品线
NE-PER™
试剂类型
细胞裂解缓冲液、去污剂溶液、亚细胞分离
产品类型
细胞核和细胞质提取试剂

内容与储存

接收后,试剂盒组分在 4°C 下储存。


蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物无EDTA 分子生物试剂78443

蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物无EDTA 分子生物试剂

  • 产品型号:  78443
  • 简单描述
  • 蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物无EDTAThermo Scientific Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂一次性混合物(100X)可通过单一溶液为细胞和组织裂解产物提供蛋白样品保护。
详细介绍

蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物无EDTA


Thermo Scientific Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂一次性混合物(100X)可通过单一溶液为细胞和组织裂解产物提供蛋白样品保护。

Halt蛋白酶及磷酸酶抑制剂一次性混合物(100X)的特点:

• 全面保护— 多功能混合物,包含蛋白酶和磷酸酶抑制剂
• 多种包装规格— 可方便地在四种规格中进行选择,符合几乎所有与规模实验的要求
• 便捷—100x液体配方远比单片抑制剂或其他形式更加易用和高效
• 易于储存—与基于DMSO的混合物相比,水相基础的形式便于储存于冷藏室中,而且不需要冷冻
• 兼容性强— 因不含会导致峰值偏移的 AEBSF 物质,可与质谱分析(MS)兼容
• 经验证— 与Thermo Scientific Pierce细胞裂解缓冲液wan全兼容

Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物经过了专门的优化,可以在抽提和纯化过程中保护蛋白质免受降解。该混合物包含主要类别的氨肽酶、半胱an酸和丝an酸蛋白酶、丝an酸/苏an酸以及酪an酸蛋白磷酸酶抑制成分。


蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物无EDTA


规格

抑制剂
蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂
数量
24 x 100μL
Buffer
裂解缓冲液
形式
液体
产品线
Halt™
试剂类型
蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂
描述
Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物,不含EDTA
产品类型
抑制剂混合物

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存


Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物 分子生物试剂78442

Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物 分子生物试剂

  • 产品型号:  78442
  • 简单描述
  • Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物 一体式 Thermo Scientific™ Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物可便利的对单一溶液提供全面的样本保护。
详细介绍

Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物 

规格

抑制剂
蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂
数量
24 x 100μL
Buffer
裂解缓冲液
形式
液体
产品线
Halt™
试剂类型
蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂
描述
Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物
产品类型
抑制剂混合物

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存

Halt蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物 

一体式 Thermo Scientific™ Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物可便利的对单一溶液提供全面的样本保护。


其他信息和在线订购»

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

Thermo Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 (100X) 分子生物试剂78430

Thermo Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 (100X) 分子生物试剂

  • 产品型号:  78430
  • 简单描述
  • Thermo Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 (100X)Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物 (100X) 是一种即用型蛋白酶抑制剂浓缩储备液,可添加至样品中以防止细胞裂解和蛋白提取期间的蛋白水解降解。
详细介绍

Thermo Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 (100X)


Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物 (100X) 是一种即用型蛋白酶抑制剂浓缩储备液,可添加至样品中以防止细胞裂解和蛋白提取期间的蛋白水解降解。

Halt 蛋白酶抑制剂混合物 (100X) 的特点:

便利—冰箱冷藏稳定的 100X 液体剂型比单独的抑制剂或其他规格更有效和更易于使用;只需准确量取您所需量即可
无专有原料—wan全公开的配方含有优化浓度的在高质量二甲亚砜 (DMSO) 中稳定的六种广谱蛋白酶抑制剂 AEBSF、yi肽酶、苯丁抑制素、E-64、亮肽素和抑胃肽 A
多种包装尺寸—可选择多种包装尺寸,包括可保持蛋白酶抑制剂新鲜并降低试剂污染风险的单次使用微管
常规配方—包括用于可选金属蛋白酶抑制的单独小瓶装 EDTA 溶液
裂解缓冲液兼容—与 Thermo Scientific Pierce 细胞裂解缓冲液或几乎任何其他市售或自制基于去污剂的裂解试剂配合使用。添加 10 µL 浓缩混合物/1 mL 裂解缓冲液以确保wan全保护所得蛋白提取物。

应用:
•保护完整的活性细胞蛋白免受内源性蛋白酶的降解
•抑制由多种方法产生的裂解液的蛋白酶活性,包括 Thermo Scientific Pierce 细胞裂解试剂、其他商业配制的细胞或组织裂解产物、超声处理、法压壶、混合器均质化或重复冻融循环
•提取物蛋白水解活性筛查
•研究细胞过程调节中的蛋白水解

蛋白酶构成了一大类酶,包括在多种细胞和组织类型中催化蛋白水解分解成肽或氨基酸的肽链内切酶和肽链外切酶。在活细胞中调节并划分各种蛋白酶,但细胞裂解将其释放并与其他抽提的蛋白混合。因此他们的活性会导致大量有价值蛋白的损失,对下游应用造成负面影响。因此,常见的做法是用已知的化合物混合物穿刺细胞裂解缓冲液或细胞抽提物以灭活或抑制各种蛋白酶。Halt 蛋白酶抑制剂混合物可有效抑制细胞裂解物样品中通常存在的丝an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和氨基肽酶。常规和无 EDTA 配方可分别抑制各种金属蛋白酶和兼容 2D 电泳。


Thermo Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 (100X)


规格

抑制剂
蛋白酶抑制剂
数量
24 x 100μL
足够用于
240 mL 样品
Buffer
裂解缓冲液
形式
液体
产品线
Halt™
试剂类型
蛋白酶抑制剂
描述
Halt Protease Inhibitor Cocktail
产品类型
抑制剂混合物

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存


Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 无 EDTA (100X) 分子生物试剂78425

Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 无 EDTA (100X) 分子生物试剂

  • 产品型号:  78425
  • 简单描述
  • Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 无 EDTA (100X)Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物(无 EDTA)(100X) 是一种即用型蛋白酶抑制剂浓缩储备液,可添加至样品中以防止细胞裂解和蛋白提取期间的蛋白水解降解。
详细介绍

Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 无 EDTA (100X)


特点:

便利—冰箱冷藏稳定的 100X 液体规格比单独的抑制剂或其他规格更有效和更易于使用;只需准确量取您所需量即可
无专有原料—wan全公开的配方含有优化浓度的六种广谱蛋白酶抑制剂 AEBSF、yi肽酶、苯丁抑制素、E-64、亮肽素和抑胃肽 A,在高质量二甲亚砜 (DMSO) 中稳定
多种包装尺寸—可选择多种包装尺寸,包括可保持蛋白酶抑制剂新鲜并降低试剂污染风险的单次使用微管
无 EDTA 配方—确保与等电聚焦兼容
裂解缓冲液兼容—与 Thermo Scientific Pierce 细胞裂解缓冲液或几乎任何其他市售或自制基于去污剂的裂解试剂配合使用。添加 10 µL 浓缩混合物/1 mL 裂解缓冲液以确保wan全保护所得蛋白提取物。

应用:
•保护完整的活性细胞蛋白免受内源性蛋白酶的降解
•抑制由多种方法产生的裂解液的蛋白酶活性,包括 Thermo Scientific Pierce 细胞裂解试剂、其他商业配制的细胞或组织裂解产物、超声处理、法压壶、混合器均质化或重复冻融循环
•提取物蛋白水解活性筛查
•研究细胞过程调节中的蛋白水解

蛋白酶构成了一大类酶,包括在多种细胞和组织类型中催化蛋白水解分解成肽或氨基酸的肽链内切酶和肽链外切酶。在活细胞中调节并划分各种蛋白酶,但细胞裂解将其释放并与其他抽提的蛋白混合。因此他们的活性会导致大量有价值蛋白的损失,对下游应用造成负面影响。因此,常见的做法是用已知的化合物混合物穿刺细胞裂解缓冲液或细胞抽提物以灭活或抑制各种蛋白酶。Halt 蛋白酶抑制剂混合物可有效抑制细胞裂解物样品中通常存在的丝an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和氨基肽酶。常规和无 EDTA 配方可分别抑制各种金属蛋白酶和兼容 2D 电泳。


Halt™ 蛋白酶抑制剂混合物 无 EDTA (100X)


规格

抑制剂
蛋白酶抑制剂
数量
24 x 100μL
Buffer
裂解缓冲液
形式
液体
产品线
Halt™
试剂类型
蛋白酶抑制剂
描述
Halt 蛋白酶抑制剂混合物,不含EDTA
产品类型
抑制剂混合物

内容与储存

接收后,在 4°C 下储存


ThermoPierce™ 蛋白酶抑制剂片剂,无 EDTA 分子生物试剂A32965

ThermoPierce™ 蛋白酶抑制剂片剂,无 EDTA 分子生物试剂

  • 产品型号:  A32965
  • 简单描述
  • ThermoPierce™ 蛋白酶抑制剂片剂,无 EDTAThermo Scientific Pierce 蛋白酶抑制剂片剂,无 EDTA,含有可高效防止细胞裂解和蛋白提取实验中蛋白水解降解的广谱蛋白酶抑制剂。
详细介绍

ThermoPierce™ 蛋白酶抑制剂片剂,无 EDTA


Thermo Scientific Pierce 蛋白酶抑制剂片剂,无 EDTA,含有可高效防止细胞裂解和蛋白提取实验中蛋白水解降解的广谱蛋白酶抑制剂。

无 EDTA 蛋白酶抑制剂片剂的特点:
制剂改进—片剂快速溶解成澄清溶液
• 经济实惠—相同体积的情况下,比其他市售制剂的性价比更高
• 便利—即用型、wan全披露、广谱制剂
• 兼容—直接与 Pierce BCA 检测配合使用
• 无 EDTA—无 EDTA 配方,金属蛋白酶抑制剂(仅适用于无 EDTA 配方)

Pierce 蛋白酶抑制剂片剂通过抑制细胞裂解物样品中通常存在的丝an酸蛋白酶、半胱an酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶及氨基肽酶来防止蛋白发生蛋白水解降解。该片剂含有 AEBSF、yi肽酶、苯丁抑制素、E-64、亮肽素和抑胃肽 A。在 4°C 下储存时可保持稳定长达 12 个月,每粒片剂足以处理 50 mL 溶液,它适用于从组织和培养细胞中提取蛋白之前的试剂制备。

蛋白酶构成一大类酶,包括肽链内切酶和肽链外切酶,它们催化蛋白水解分解为肽或氨基酸。蛋白酶存在于细胞区室内,但细胞裂解后蛋白酶释放,从而导致有价值的蛋白降解。因此,通常需要添加多种已知化合物以灭活或抑制细胞裂解缓冲液或细胞提取物中的蛋白酶。

要使用 Pierce 蛋白酶抑制剂片剂,只需将 1 粒片剂溶解于 50 mL 缓冲液或裂解物。蛋白酶抑制剂制剂兼容大多数基于去污剂的细胞裂解试剂,包括 Pierce 细胞裂解液。Pierce 蛋白酶抑制剂片剂不含磷酸酶抑制剂。如有必要,磷酸酶抑制剂(如 Pierce 磷酸酶抑制剂 迷你片剂)可与蛋白酶抑制剂片剂一起添加。


ThermoPierce™ 蛋白酶抑制剂片剂,无 EDTA


规格

抑制剂
蛋白酶抑制剂
数量
20 片
运输条件
室温
足够用于
10 mL 溶液
形式
实心
产品线
Pierce™
产品类型
抑制剂

内容与储存

1小瓶,在 2°C 至 8°C 下储存