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AcGFP 和 mCherry 流式细胞分析仪校准微球酶试剂盒Takara

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AcGFP 和 mCherry 流式细胞分析仪校准微球
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632594 AcGFP Flow Cytometer Calibration Beads 20 Assays ￥3,669 AcGFP 和 mCherry 流式细胞分析仪校准微球 AcGFP 和 mCherry 流式细胞分析仪校准微球 AcGFP 和 mCherry 流式细胞分析仪校准微球
Clontech 632595 mCherry Flow Cytometer Calibration Beads 20 Assays ￥3,669 AcGFP 和 mCherry 流式细胞分析仪校准微球 AcGFP 和 mCherry 流式细胞分析仪校准微球 AcGFP 和 mCherry 流式细胞分析仪校准微球
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Q5® 定点突变试剂盒 货 号 E0554SNEB酶试剂 New England Biolabs

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Q5® 定点突变试剂盒                              收藏

Q5® 定点突变试剂盒 货 号 E0554S

货 号
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#E0554S
10 次反应
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相关产品

NEB PCR 克隆试剂盒
NEB PCR 克隆试剂盒（不含感受态细胞）
KLD 酶混合液

 

特性

Q5® 定点突变试剂盒 货 号 E0554S 

概述

Q5 定点突变试剂盒可以在 2 小时内快速对双链质粒 DNA 进行定点突变，该试剂盒使用稳定
的 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶，结合客户自行设计的引物，在各种质粒中引入替换、缺失和
插入突变。为保证效率，将产物转入试剂盒提供的高效级 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞，质粒
长度可达 14.3 kb。

应用

• 在质粒 DNA 上产生替换、插入、缺失突变

 

Q5® 定点突变试剂盒 货 号 E0554S

Q5定点突变试剂盒包含

– Q5 热启动超保真预混液（2X）
 
– KLD 酶混合液（10X）和反应缓冲液（2X）
 
– 对照引物混合液（各 10 μM）和 DNA 模板（5 ng/μl）
 
– NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞（高效级）
 
– pUC19 转化对照质粒（5 pg/μl）
 
– SOC Outgrowth 培养基

质保声明

Q5 定点突变试剂盒经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请
登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。

β-半乳糖苷酶酶试剂盒Takara

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β-半乳糖苷酶
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631780 Beta-Galactosidase Staining Kit 120 Rxns ￥2,824 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶
Clontech 631712 Luminescent β-galactosidase Detection Kit II 300 Rxns ￥6,140 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶
Clontech 631713 Luminescent β-galactosidase Reporter System 3 Each ￥9,695 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶
Clontech 631719 pCMV-LacZ Vector 25 μg ￥6,809 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶
Clontech 631707 pLacZ-Basic Vector 20 μg ￥6,493 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶
Clontech 631709 pLacZ-Control Vector 20 μg ￥6,493 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶 β-半乳糖苷酶
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Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555LNEB酶试剂 New England Biolabs

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Q5® 超保真 PCR 试剂盒                              收藏

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L

货 号
规 格
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#E0555L
200 次反应（50 μl 反应体系）
2,799.00
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#E0555S
50 次反应（50 μl 反应体系）
919.00
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 Q5 超保真 DNA 聚合酶

Q5 超保真 2X 预混液

Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶

Q5 热启动超保真 2X 预混液

Q5 超保真 PCR 试剂盒

Q5 定点突变试剂盒

Q5 定点突变试剂盒(不含感受态细胞) 

Q5 聚合酶信息

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L

概述

Q5 超保真 DNA 聚合酶，以其无与伦比的扩增保真性（＞ Taq 酶的 100 倍）及其超低的错配率，建立了高保真聚合酶的新标准。Q5 DNA 聚合酶是一种新型聚合酶，携带具有持续合成能力的 Sso7d DNA
结合域，能够提高反应速度、保真度和稳定性。
Q5 反应缓冲液系统使扩增范围更广泛，无论模板 GC 含量的高低，Q5 超保真 DNA 聚合酶均以最少的优化，表现出卓越的扩增能力。对于常规或 GC 含量 ≤ 65% 的复杂模板，使用 Q5 反应缓冲液可以进行可靠的、超强的扩增；对于高 GC 含量的模板（＞ 65%），添加 Q5 High GC Enhancer 确保最大的扩增性能。

Q5 热启动 DNA 聚合酶

与化学修饰或基于抗体结合的热启动机制相比，NEB 的 Q5 采用了独特的核酸适配体修饰的热启动方式。该核酸适配体结构通过非共价键作用与聚合酶结合，在建立反应时可有效封闭聚合酶活性。Q5 热启动聚合酶在常规热循环条件下才能发挥作用，因此可在室温条件下建立反应体系。Q5 热启动 DNA 聚合酶无需额外的高温激活
步骤，从而减少了样品降解的可能性，缩短了反应时间，使操作更为简便。无论 GC 含量高低，Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶都能表现出高特异性扩增性能和广泛的模板适应性，是您理想的选择。为了加样方便，Q5 和 Q5 热启动 DNA 聚合酶均有单酶或预混液剂型可供选择。预混液中包含 dNTPs、Mg++ 和所有必需的缓冲液组份。

其它剂型

为了加样方便，Q5 DNA 聚合酶有预混液或试剂盒剂型可供选择。Q5 超保真 PCR 试剂盒包含 Q5 超保真 2X Master Mix、无核酸酶污染的水、Quick-Load 紫色 2-Log DNA Ladder。关于 Q5 定点突变试剂盒（包含或不包含感受态细胞）的详细信息见 104 页。

浓度

2,000 units/ml。

更多信息请登陆 www.Q5PCR.com

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L
Q5 (A) 和 Q5 热启动 (B) 超保真 DNA 聚合酶具有超强扩增能力，可用于任何 GC 含量的扩增。使用 Q5 或 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶扩增从低到高不同 GC 含量的人类基因组 DNA。使用 Q5 热启动的反应在室温下建立，所有的反应均为 30 个循环并用微流控芯片技术（microfluidic LabChip® analysis）检测。

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L
单酶附带反应缓冲液，可以对富含 AT 和常规的模板进行超强扩增。加入 High GC Enhancer 可以对富含 GC 和复杂的模板进行扩增。为了加样方便，预混液可对多种模板进行超强扩增。

Q5® 超保真 PCR 试剂盒 货 号 E0555L

分泌型荧光素酶酶试剂盒Takara

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分泌型荧光素酶
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631740 Ready-To-Glow Automation Kit 5,000 Rxns ￥22,520 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶
Clontech 631734 Ready-To-Glow Dual Secreted Reporter Assay 500 Rxns ￥9,354 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶
Clontech 631781 Ready-To-Glow MetLuc Monoclonal Antibody 50 μg ￥5,952 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶
Clontech 631727 Ready-To-Glow Secreted Luciferase Reporter Assay 500 Rxns ￥4,785 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶
Clontech 631726 Ready-To-Glow Secreted Luciferase Reporter Assay 100 Rxns ￥1,372 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶
Clontech 631728 Ready-To-Glow Secreted Luciferase Reporter Assay 1,000 Rxns ￥6,740 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶 分泌型荧光素酶
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LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 货 号 E1555LNEB酶试剂 New England Biolabs

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LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒                              收藏

货 号
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#E1555L
250 reactions
9,629.00
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#E1555S
50 reactions
2,479.00
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产品特性

·有独特的 Luna WarmStart 反转录酶和 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶
·可检测低至 0.01 pg 的人总 RNA
·多重检测能力适用于 ARTIC 测序方案
·适配体酶控技术为室温下建立反应体系及保持 24 小时的持久稳定打下基础
·在单独的闭合试管中一步完成 RT-PCR，即能节省时间、减少塑料用量，又能最大限度地减少污染。

产品概述

 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒为 cDNA 合成和 PCR 扩增提供了简化方案。其中的 5X 反应预混液含有 dNTPs，经优化适用于多重靶标检测，且操作便捷。其中的 25X 酶预混液含有 Luna WarmStart 反转录酶和 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶。适配体抑制酶活技术可对上述两种酶活进行双重温控，因此可室温建立反应体系，且预混体系可室温稳定保存 24 小时。该试剂盒具备强大的多重靶标扩增能力，适用于诊断、病原体检、病毒基因组测序等多种应用（例如：ARTIC SARS-CoV-2 测序方案，每个反应扩增 ~50 个扩增子）。

 
图 1：在单个 RT-PCR 反应中进行多重 RNA 靶标检测和鉴定
LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 货 号 E1555L
LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 仅需添加 RNA 模板和基因特异性引物，即可在一次反应中对多个 cDNA 靶标进行合成和扩增。扩增后的 cDNA 产物可通过下游应用进行检测或鉴定，包括：二代测序、DNA 芯片、片段分析、电泳和传统的克隆/测序。
 
图 2：LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒的灵敏度和多重检测性能卓越
LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 货 号 E1555L
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 或 SuperScript IV One-Step RT-PCR System (Thermo Fisher Scientific) 对人脾总 RNA 的 7 个靶标（185–776 bp）进行扩增。取 40% 的 RT-PCR 反应产物进行琼脂糖凝胶（2%）电泳检测。LunaScript 使用标准反应条件：引物终浓度为 1 μM，退火时间为 1 分钟。SSIV 使用推荐反应条件无法扩增所有条带，因此还测试了其它关键参数：改变引物浓度和退火时间。结果显示：LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒可成功扩增不同起始量 RNA 模板中的所有 7 个靶标，但 SuperScript IV One-Step RT-PCR System 经调整反应条件，甚至增模板量，都无法扩增所有靶标。
 
图 3：LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒可完成 ARTIC SARS-CoV-2 测序方案
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 货 号 E1555L
 使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒和来自 NEB (A) 或 IDT (B) ARTIC V3 引物进行多重扩增，扩增模板为 1000 拷贝 SARS-CoV-2 病毒 gRNA (ATCC VR-1986)，该模板掺入到 100 ng 通用人类参考 RNA（Thermo Fisher Scientific®，QS0639）中使用。将 cDNA 合成体系一式两份成 12.5 μl 体系，分别使用引物库 1 和 2 进行扩增。反应条件为：55℃ 20 分钟（反转录），98℃ 1 分钟（RT 灭活/初始变性），之后进行 35 个循环的扩增：95℃ 15 秒，63℃ 5 分钟（退火和延伸）。

使用 NEBNext® ARTIC SARS-CoV-2 FS 文库制备试剂盒（适用于 Illumina 平台）和 1.3 μl 的上述扩增产物进行文库构建，使用 MiSeq® 仪器 (2X75 bp) 测序。为每个文库绘制每个扩增子的测序  Reads。使用 seqtk（250,000 read pairs）向下抽样 Reads 数，并使用 Bowtie 2 比对至 SARS-CoV-2 参考基因组（NCBI，NC_045512）。参考线表示 100 reads 的典型质量阈值。
 
图 4：试剂可室温放置长达 24 小时，RNA 的检测效果仍然灵敏和稳健
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 货 号 E1555L
使用 LunaScript 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 (NEB #E1555) 对 GAPDH 靶标（570 bp）进行扩增，样品为 0.01 ng-10 ng 的 Jurkat 总 RNA。反应体系在冰上建立并立即运行（对照）或在热循环前室温放置 1、4 或 24 小时。每种条件下都设有无模板对照（NTC）。结果显示：所有上样量均完成了高度灵敏和特异的靶标扩增，预混体系室温放置长达 24 小时后也达到了同样的效果。
 
图 5：LunaScript 与 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的比较
 
 LunaScript® 一步法多重 RT-PCR 试剂盒 货 号 E1555L

 

 

分泌型碱性磷酸酶酶试剂盒Takara

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分泌型碱性磷酸酶
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631736 Great EscAPe SEAP Chemiluminescence Kit 2.0 50 Rxns ￥3,027 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶
Clontech 631737 Great EscAPe SEAP Chemiluminescence Kit 2.0 300 Rxns ￥6,844 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶
Clontech 631738 Great EscAPe SEAP Chemiluminescence Kit 2.0 1,000 Rxns ￥12,220 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶
Clontech 631704 Great EscAPe SEAP Fluorescence Detection Kit 300 Rxns ￥5,952 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶
Clontech 631734 Ready-To-Glow Dual Secreted Reporter Assay 500 Rxns ￥9,354 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶
Clontech 631715 pSEAP2-Basic Vector 20 μg ￥6,745 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶
Clontech 631717 pSEAP2-Control Vector 20 μg ￥6,745 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶 分泌型碱性磷酸酶
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WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒 货 号 E1700LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒                              收藏

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#E1700L
500次反应
10,419.00
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#E1700S
100次反应
2,609.00
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特性

·RNA 和 DNA 模板的 LAMP 扩增反应
·优化预混液，提高了 LAMP 反应的特异性和灵敏性
·独特的双热启动机制支持室温建立反应体系
·适用多种检测方法：荧光检测、浊度分析、变色检测和电泳检测等

概述

（LAMP）环介导等温扩增反应是一种核酸扩增技术，广泛用于目标 DNA 或 RNA 的检测。WarmStart LAMP 试剂盒（DNA & RNA）环介导等温扩增反应提供简单、一步解决方案，适用于检测 DNA 和 RNA 的 LAMP 和 RT-LAMP 实验。LAMP和 RT-LAMP 是常见的等温扩增技术，使用 LAMP 特异性引物（用户自己提供）和链置换聚合酶快速检测目标核酸。该试剂盒是 WarmStart LAMP 2X 预混液，包含 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶、WarmStartRTx 反转录酶和优化的 LAMP 缓冲液。经基因工程改造，显著提高了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和WarmStart RTx 反转录酶在 LAMP 和 RT-LAMP 实验中的扩增能力。同时提供荧光染料，用于实时定量荧光检测。WarmStart LAMP 试剂盒可以兼容多种检测方法，包括浊度检测、实时荧光检测（当使用LAMP 荧光染料时）和反应结束可视法。
 
WarmStart LAMP 试剂盒组成：
– WarmStart LAMP 2X 预混液
– LAMP 荧光染料（50X）

sgRNA体外转录和筛选酶试剂盒Takara

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sgRNA体外转录和筛选
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632635 Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit 50 Rxns ￥8,771
￥7,017 		sgRNA体外转录和筛选 sgRNA体外转录和筛选 sgRNA体外转录和筛选
Clontech 632636 Guide-it Complete sgRNA Screening System 50 Rxns ￥10,701
￥8,561 		sgRNA体外转录和筛选 sgRNA体外转录和筛选 sgRNA体外转录和筛选
Clontech 632639 Guide-it sgRNA Screening Kit 50 Rxns ￥4,810
￥3,848 		sgRNA体外转录和筛选 sgRNA体外转录和筛选 sgRNA体外转录和筛选
Clontech 632638 Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit 50 Rxns ￥4,439 sgRNA体外转录和筛选 sgRNA体外转录和筛选 sgRNA体外转录和筛选

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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sgRNA体外转录和筛选 → sgRNA体外转录和筛选 → sgRNA体外转录和筛选            
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          ↘ sgRNA体外转录和筛选        
 
 
sgRNA的体外转录和筛选试剂盒
In Vitro Transcription and Screening Kits for sgRNA
我们的Guide-it in vitro transcription and screening kits for sgRNA 包括四个试剂盒，用于CRISPR/Cas9 研究中单链向导RNAs(single guide RNAs ,sgRNAs)的简单制备、清理和评价。每个试剂盒提供足够 50次反应的材料。
· Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635) 被用于通过体外转录制备大量的 sgRNAs。这个试剂盒同样包括Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit (Code No. 632638), 被用于快速纯化参与体外转录（vitro transcription，IVT) 反应的sgRNA。从这个试剂盒纯化后的 sgRNA 可以直接被用于转染、电穿孔以及体外剪切实验。
· Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639) 可以在Cas9介导的基因编辑相关研究前，先在体外检测不同sgRNAs的效率，这样就不必浪费时间将无效的sgRNAs转入您的细胞了。使用这个试剂盒，首先通过PCR产生包含sgRNA靶点的模板，随后再与您想测试的sgRNA以及重组Cas9核酸酶结合。Cas9 核酸酶剪切模板的效率可以通过使用琼脂糖凝胶电泳检测。
· Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code No. 632636) 包含以上提到的全部试剂盒组分，可以被用来合成和检测sgRNAs效率。该试剂盒包含了用于体外转录和纯化sgRNAs，以及检测重组Cas9核酸酶对PCR靶向片段剪切效率的所有试剂。
 
■ 产品特点
· 共有4个试剂盒，可用于Cas9介导的基因编辑研究中sgRNA (single guide RNA)的简单制备、清洁以及效率评价。
· Lenti-X Packaging Single Shots易于产生高滴度病毒。
· 使用Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635; 包括Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit, Code No. 632638)体外转录和纯化大量sgRNA，用于转染或体外筛选。
· 使用Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit (Code No. 632638) 对IVT 反应后sgRNA的快速纯化，直接用于转染、电穿孔以及体外剪切试验。
· Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639)包含高质量的重组Cas9蛋白质。
· Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code No. 632636)是Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635) 和 Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639)的组合，允许您进行sgRNA制备和对预设靶点体外剪切能力的测试。
 
■ 实验例
sgRNA体外转录和筛选
图1. Guide-it sgRNA In Vitro Transcription and Screening System试剂盒组成和操作流程
 
sgRNA体外转录和筛选
图2. 采用Guide-it试剂盒制备高产量single guide RNA (sgRNA)和重组Cas9蛋白质剪切靶位点检测sgRNA剪切效率操作步骤概要
 
sgRNA体外转录和筛选
图3. Guide-it试剂和同类产品所制备的sgRNA品质比较
采用Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit制备的所有sgRNAs均为单一条带，而其他公司同类产品制备的sgRNAs均可观察到杂带，因此Guide-it试剂盒所制备的sgRNAs品质更高。
* 比较结果来自于Takara Bio USA, Inc.
 
sgRNA体外转录和筛选
图4. 以不同基因为靶标制备的sgRNA产量和品质比较
采用Guide-it Complete sgRNA Screening System以多个基因为靶基因制备sgRNA。
Panel A. 将20 μl sgRNA体外转录（IVT）反应液置于37°C孵育4 hr，采用NanoDrop分光光度计检测所制备产生的sgRNA产量。
Panel B. 采用安捷伦生物分析仪分析分析每一个sgRNA IVT反应液，检测sgRNA质量。
 
■ 产品组份
Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635; 50 rxns)
· 1 each Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Components v2 (Code No. 632637; 50 rxns; Not sold separately)
    ○ 50 μl Guide-it Scaffold Template (1 ng/μl)
    ○ 350 μl Guide-it In Vitro Transcription Buffer
    ○ 1 ml RNase Free Water
    ○ 500 μl RNase Free Water
    ○ 150 μl Guide-it T7 Polymerase Mix (33 U/μl)
    ○ 625 μl PrimeSTAR Max Premix (2X)
    ○ 100 μl Recombinant DNase I (RNase-Free) (5 U/μl)
· 1 each Guide-it IVT RNA Clean-Up Kit (Code No. 632638; 50 rxns)
    ○ 13 ml RNase Free Water
    ○ 3 ml IVT Binding Buffer
    ○ 50 IVT RNA Clean-Up Spin Columns
    ○ 2 x 6 ml IVT Wash Buffer
    ○ 50 Collection Tubes (2 ml)

Guide-it sgRNA Clean-Up Kit (Code No. 632638; 50 rxns)
· 13 ml RNase Free Water
· 3 ml IVT Binding Buffer
· 50 IVT RNA Clean-Up Spin Columns
· 2 x 6 ml IVT Wash Buffer
· 50 Collection Tubes (2 ml)

Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639; 50 rxns)
· 25 μl Guide-it Recombinant Cas9 Nuclease (500 ng/μl)
· 50 μl 15X Cas9 Reaction Buffer
· 50 μl 15X BSA
· 5 μl Control sgRNA (50 ng/μl)
· 25 μl Control Fragment (20 ng/μl)
· 50 μl Terra PCR Direct Polymerase Mix (1.25 U/μl)
· 1.25 ml 2X Terra PCR Direct Buffer (with Mg2+, dNTP)
· 5 ml RNase Free Water
· 5 ml Extraction Buffer 1
· 0.5 ml Extraction Buffer 2

Guide-it Complete sgRNA Screening System (Code No. 632636; 50 rxns)
· Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit (Code No. 632635)
· Guide-it sgRNA Screening Kit (Code No. 632639)

 
 
 
■ 关联资料
点击查看Guide-it™ sgRNA体外转录和筛选系统宣传页 sgRNA体外转录和筛选
 
 
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Whatman1091-165Grade 91湿强定性滤纸 GR 91 16.5CM 1000/PK

发表于由

【简单介绍】

Whatman定性滤纸用于定性分析技术中鉴定物质的性质。折叠好的定性滤纸与相同型号平整的滤纸相比，加快了流速和增加了负载力,定性滤纸―标准级,Wet Strengthened Grades湿强定性滤纸。湿强定性滤纸含有少量的化学稳定树脂，因而增强了湿强度。这不会因此引入任何明显的杂质到滤液中。但因树脂含氮，这些级别的滤纸不能用于凯氏定氮测定。

【简单介绍】

Whatman定性滤纸用于定性分析技术中鉴定物质的性质。折叠好的定性滤纸与相同型号平整的滤纸相比，加快了流速和增加了负载力,定性滤纸―标准级,Wet Strengthened Grades湿强定性滤纸。湿强定性滤纸含有少量的化学稳定树脂，因而增强了湿强度。这不会因此引入任何明显的杂质到滤液中。但因树脂含氮，这些级别的滤纸不能用于凯氏定氮测定。

【详细说明】

原装进口英国Whatman1091-165 Grade 91湿强定性滤纸 GR 91 16.5CM 1000/PK

英国Whatman1091-165Grade 91湿强定性滤纸 GR 91 16.5CM 1000/PK

简单介绍：

Whatman定性滤纸用于定性分析技术中鉴定物质的性质。折叠好的定性滤纸与相同型号平整的滤纸相比，加快了流速和增加了负载力,定性滤纸―标准级,Wet Strengthened Grades湿强定性滤纸。湿强定性滤纸含有少量的化学稳定树脂，因而增强了湿强度。这不会因此引入任何明显的杂质到滤液中。但因树脂含氮，这些级别的滤纸不能用于凯氏定氮测定。

Whatman定性滤纸的详细介绍：

Whatman定性滤纸Grade1/Grade2/Grade3/Grade4/Grade5/Grade6

Whatman定性滤纸用于定性分析技术中鉴定物质的性质。折叠好的定性滤纸与相同型号平整的滤纸相比，加快了流速和增加了负载力。

Wet Strengthened Grades 湿强定性滤纸

湿强定性滤纸含有少量的化学稳定树脂，因而增强了湿强度。这不会因此引入任可明显的杂质到滤液中。但因树脂含氮，这些级别的滤纸不能用于凯氏定氮测定。

Grade 91：10μm 普通皱纹纸。广泛用于甘蔗的蔗糖（含量）分析和药厂实验室常规样品过滤。

Grade 113：30μm 高载力。与其他滤纸相比厚度最高强度极好流速最快的皱纹纸。是过滤粗制品或凝胶状沉淀物的理想产品。已折叠好的为Grade 113V。

Grade 114：25μm 厚度是Grade 113的一半。但强度非常高的滤纸。表面光洁。易于沉淀物的收集。适合粗制品或凝胶状沉淀物的过滤。已折叠好的为Grade 114V。

Grade521 bll：15-19μm 有很高湿强度的厚滤纸，流速非常快。

已折叠好的为Grade521 bll 1/2。

Grade2294：8-15μm 高湿强度而非常厚的滤纸，流速非常快，粗糙颗粒的保留力中等。

Grade2589：6-12μm 高湿强度，中等保留度。中至高流速。

Grade2589 c：4-8μm 高湿强度慢至中等流速的厚滤纸。细小颗粒的保留度很高。

Grade2589 d：2-6μm 湿强度高的非常厚滤纸。慢至中等的流速和非常细小沉淀物的保留度。

Grade2411：9-11μm 中等保留力快流速高湿强度的滤纸。通常作为过滤中的保护用纸。

学生级/Grade93 为教学而设计的，这种滤纸的流速和保留力介于1号和4号纸之间。学生级截留那些大多数经常在学生实验中遇到的絮凝状的中等沉淀物。

订货信息-湿强定性滤纸

直径（mm）

Grade 91

Grade 93

Grade 113

Grade 114

数量/包装

90

–

1113-090

1114-090

100

110

1091-110*

1093-111**

1113-110

–

100

125

1091-125*

1093-126**

1113-125

1114-125

100

150

1091-150***

–

1113-150

1114-150

100

185

1091-185***

–

1113-185

1114-185

100

190

1091-190

–

–

–

100

240

1091-240***

–

1113-240

1114-240

100

270

–

–

–

1114-270

100

320

–

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1113-320

–

100

400

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1114-400

100

500

–

–

1113-500

–

100

FilterCup70***

–

–

1600-113

25

注： 1圆片中心有孔

*100强1小包，4000张1大包 ***100张1小包，1000张1大包

**每25张1小包，50张1大包 ****一次性购买带橡胶塞过滤杯底座-货号1600-900

上海金畔生物科技有限公司

文章号20333631-20333631

WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG） 货 号 E1708LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG）                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#E1708L
500 rxns
13,099.00
无
无
无
无
无

#E1708S
100 rxns
3,279.00
无
无
无
无
无

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产品特点

 设计 LAMP 引物，请使用 NEB LAMP Primer Design Tool

·为环介导等温扩增（LAMP）提供便捷的一步法解决方案，可用于 DNA 或 RNA（RT-LAMP）样品
·预混液含热敏 UDG 和 dUTP，降低残留污染风险
·包含荧光染料，可对 LAMP/RT-LAMP 反应进行实时荧光测量
·温启动技术可在室温下抑制酶活性
·如需了解使用 RT-LAMP 进行 COVID-19 快速筛查，请点击 Learn more
·试剂盒中的预混液（NEB #M1708）和 LAMP 荧光染料（NEB #B1700）可单独提供
 

产品描述

 WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG）为 LAMP/RT-LAMP 的实时荧光检测提供了便捷的一步法解决方案。LAMP 和 RT-LAMP 是一种常用等温扩增技术，通过使用 LAMP 特异性引物（用户自备）和链置换 DNA 聚合酶进行靶标核酸的快速检测。该试剂盒包含的 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）（NEB #M1708），是在优化后 LAMP 缓冲液中混入了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶均经过基因工程改造，提高了在 LAMP 和 RT-LAMP 反应中的性能。试剂盒还提供 50X LAMP 荧光染料，用于实时荧光检测。

 
由于先前扩增的产物会无意中成为后续反应的底物造成污染，因此预混液中的 dUTP 和热敏 UDG 可有效降低残留污染风险。热敏 UDG 在温度＞50℃时可完全失活，因此对反应没有影响。
 
图 1：LAMP/RT-LAMP 预混液和适用样品类型
 
WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG） 货 号 E1708L
NEB 基于 pH 变化的 WarmStart 变色LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含/不含 UDG）（NEB #M1804）（NEB# M1800）缓冲力低，因此可使用 pH 敏感染料进行可视化扩增检测。基于 pH 值改变而产生的颜色变化（如粉红变黄色）所需缓冲力要低，高缓冲力样品或酸性样品可能会影响颜色变化，因此，这种方法限制了检测样品的种类。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含/不含 UDG）（NEB #M1708，NEB #E1708）（NEB #E1700）是完全缓冲的，可检测所有样品类型，适用于多种检测方法，包括荧光或其它变色染料（例如：羟基萘酚蓝）
 
图 2：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）对人 DNA 和 RNA 靶标进行稳健检测
 
WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG） 货 号 E1708L
 
 使用 WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（不含 dUTP/UDG）（NEB #M1700 试剂盒中的组分）和 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）（NEB #M1708）进行 RT-LAMP（RNA 靶标）或 LAMP（DNA 靶标）实验。反应加入 1X LAMP 引物和 1X LAMP 荧光染料后，分别加入三个数量级的 Jurkat RNA 或 Jurkat DNA （10 ng-0.1 ng）和无模板对照（NTC），每个样品做 4 个重复，形成 25 µl 反应体系，置于 96 孔板中 65℃孵育 40 分钟。使用实时热循环仪（Bio-Rad® CFX96）中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外，每个样品都检测到所有 4 个重复（注：如果各重复的检测时间相似，则检测点重叠）。总体而言，各样品检测结果显示：NEB #M1700 和 NEB #M1708 性能一致。无模板对照均无扩增。
 
图 3：WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液（含 UDG）与自动化反应装置兼容
 
WarmStart® 荧光 LAMP/RT-LAMP 试剂盒（含 UDG） 货 号 E1708L
通过手动或 TEMPEST® 自动化液体处理工作站（96 孔，25 µl 反应）建立针对于合成 SARS-CoV-2 RNA 样品的 LAMP 检测体系。检测样品为：阳性样品（人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA）或无模板对照（NTCs）。经 65℃ 孵育 40 分钟，使用 1X LAMP 荧光染料在实时荧光仪器（Bio-Rad CFX96）中的 SYBR/FAM 通道检测。结果显示：两种体系的检测时间和最低检出限（LOD）结果一致。
 

重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)酶试剂盒Takara

发表于由

重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632640 Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) 3 × 100 μg ￥6,845 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
Clontech 632641 Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) 100 μg ￥2,701 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
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Guide-it Recombinant Cas9 (Electroporation Ready)（Code No. 632641/632640）产品名称变更为Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl) ，产品内容没有发生变化。（2021年5月）
 
 
          基因敲除    
          ↗ 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) → 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) → 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) → 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl) → 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)            
  基因敲入        
          ↘ 重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)        
 
 
降低脱靶效应，可用于in vivo基因编辑实验
Guide-it™ Recombinant Cas9 (3 μg/μl)
· 适用于电穿孔方法的低甘油含量、高浓度的Cas9蛋白质溶液
· 与质粒导入系统相比较，脱靶效应受到明显抑制
· NLS（核定位信号）有助于实现快速高效突变导入
· 与Guide-it Complete sgRNA Screening System组合使用实现高效率的基因编辑
 
■ 产品说明：
Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）是来源于野生型酿脓链球菌Streptococcus pyogenes，适用于CRISPR/Cas9基因编辑实验的重组Cas9蛋白质溶液。
高浓度Cas9蛋白质溶液中甘油浓度比其他公司低，特别适用于电穿孔导入方法。与借助质粒导入Cas9基因序列方法相比较，避免了残留Cas9基因的持续表达，有效抑制了脱靶效应。
无需经过蛋白质转录·翻译·表达过程，C末端的NLS（核定位信号）可以实现快速有效的突变导入。
Cas9导入细胞首先需要形成Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物，sgRNA制备推荐使用Guide-it sgRNA In VitroTranscription Kit（Code No. 632635）或者Guide-it Complete sgRNA Screening System（Code No. 632636）。
 
■ 实验例：
重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
图1. AAVS1或者CXCR4基因同源重组修复（HDR）效率
Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）和修复模板复合物通过电穿孔的方式导入至CD34＋造血干细胞中检测同源重组修复（HDR）效率。将包含Hind III酶切位点的修复模板插入至AAVS1 基因中，包含Hind III和BamH I酶切位点的修复模板插入至CXCR4基因中。之后通过对细胞内靶基因进行PCR扩增和限制酶剪切分析，确认突变导入效率。基因编辑效率标注在凝胶阳性孔处。在基因编辑前野生型CXCR4基因已包含1处BamH I位点，因此BamH I剪切CXCR4基因后额外多显示一条条带。
 
重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
图2. 不同公司Cas9产品在hiPS細胞中基因敲除效率比较
剪切后电泳条带的强弱可以半定量估计发生基因编辑细胞的百分数。Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）与Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit制备的sgRNA相结合，通过电穿孔的方法导入Cellartis hiPSC-18细胞，采用Guide-it Mutation Detection Kit（Code No. 631448）确认突变导入效率，％即表示基因编辑效率。如图所示，Guide-it Recombinant Cas9（3 μg/μl）在多数靶基因位点均显示有效的基因编辑。
  * 比较结果来自于Takara Bio USA, Inc.
 
 
■ 浓度
3 μg/μl
 
■ 保存
－70℃
（注意）避免反复冻融。首次溶解之后，建议按照使用量分装保存。
 
■ 所需要的其它产品（主要产品）
· 电穿孔装置：
Neon Transfection System（Thermo Fisher Scientific）或者 4-D Nucleofector System（Lonza）
*各装置的导入条件请阅读使用说明书。

· sgRNA制备及筛选
Guide-it sgRNA In Vitro Transcription Kit（Code No. 632635）：用于sgRNA制备及纯化
Guide-it Complete sgRNA Screening System（Code No. 632636）：用于确认制备的sgRNA的有效性
 
 
产品详情请点击：重组Cas9蛋白质 (3 μg/μl)
 
 
■ 关联资料
相关资料：
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页面更新：2021-07-19 12:52:26

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3005ENEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒                              收藏

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3005E Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3005E

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#E3005E
2500次反应
20,609.00
无
无
无
无
无

#E3005L
500次反应
5,349.00
有
无
有
无
无

#E3005S
200次反应
2,379.00
有
无
有
无
无

#E3005X
1000次反应
9,269.00
无
无
无
无
无

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相关产品

南极热敏 UDG

特性

Luna® 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3005E

概述

一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了方便、强大的方法。首先，RNA 在反转录酶的作用下被反转录为 cDNA，然后 cDNA 在 DNA 聚合酶的扩增作用下通过 qPCR 完成定量检测，而这一切都是在一管内完成。
Luna RT-qPCR 试剂盒包含一种新型的、应用核酸适配体技术设计的反转录酶，经基因工程改造提高其反应能力。Luna 温启动反转录酶及 Taq 热启动 DNA 聚合酶以及其试剂盒利用一种对温度敏感、可逆的适配体，在低于 45℃ 条件下，抑制其活性。因此，可以在室温下建立反应并抑制非特异性扩增。此外，温启动反转录酶具有更高的热稳定性，提升了在高温中的反应性能。
NEB Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，可以对目标 RNA 序列进行染料法实时荧光定量检测，该试剂盒适用于具有 SYBR/FAM 通道的大部分 qPCR 仪器。
NEB Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，使用水解探针法对目标 RNA 序列进行实时荧光定量检测。
Luna RT-qPCR 试剂盒中含有热启动 Taq DNA 聚合酶及独特校正染料，与多种 qPCR 仪器兼容，包括需要 ROX 校正的仪器，实验操作过程中不需要额外添加染料。预混液中包含 dUTP，qPCR 前使用NEB 的南极热敏 UDG 进行预处理以防止产物残留污染。预混液中还加有肉眼可见的蓝色染料，在向透明多孔 PCR 板中加样时起指示作用。快速、灵敏、精确的 Luna qPCR 产品必将成为您实时定
量实验的首选。

 

Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒组成：

Luna 通用一步法反应混合液
– Luna WarmStart 反转录酶混合液
– 无核酸酶污染的水

重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）酶试剂盒Takara

发表于由

重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632678 Guide-it™ Recombinant Cas9 (10 μg/μl) 200 μg ￥4,755
￥3,804 		重组Cas9蛋白质（10 μg/μl） 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl） 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
Clontech 632679 Guide-it™ Recombinant Cas9 (10 μg/μl) 500 μg ￥8,868
￥7,094 		重组Cas9蛋白质（10 μg/μl） 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl） 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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          基因敲除    
          ↗ 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl） → 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl） → 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
重组Cas9蛋白质（10 μg/μl） → 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl） → 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）            
  基因敲入        
          ↘ 重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）        
 
 
Guide-it Recombinant Cas9是一种重组野生型酿脓链球菌Cas9核酸酶，在C-端进行了核定位信号(NLS)修饰，可用于CRISPR/Cas9介导的基因编辑实验。通过电穿孔的方式将Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物导入至哺乳动物细胞，在使脱靶效应最小化的同时，更容易实现高效率的基因编辑实验。
 
Guide-it Recombinant Cas9 (10 μg/μl)甘油含量为50%，这款Cas9蛋白质溶液已被证实是无菌的，并且无论是和单向导RNA（sgRNA）形成核糖核蛋白复合物（RNP）通过电穿孔的方式导入用于基因敲除实验，还是作为RNP与供体修复模板一起导入用于基因敲入实验，都具有良好的哺乳动物细胞耐受性。
 
sgRNA制备推荐使用Guide-it sgRNA In VitroTranscription Kit（Code No. 632635）或者Guide-it Complete sgRNA Screening System（Code No. 632636）。
 
GMP级别的重组Cas9蛋白质Recombinant Cas9 Protein GMP grade（Code No. T230）请点击这里查看。
 
■ 概览
· 这款Cas9蛋白质溶液是无菌的，且哺乳动物细胞耐受性良好
· 与Guide-it Complete sgRNA Screening System配合使用可实现高效率编辑
· 优于质粒导入系统，脱靶效应更低
· 对难转染细胞系效果好
 
■ 实验例：
重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
人诱导多能干细胞（hiPSC）CD81基因敲除效果。在本实验中，将Cas9-sgRNA RNP复合物通过电穿孔方式导入至hiPSC-18 和hiPSC-22两种诱导多能干细胞中敲除CD81基因。CD81抗体染色后流式细胞术检测结果显示，电穿孔10天后hiPSC-18的敲除效率为91％，hiPSC-22的敲除效率为85％，显示出非常高的基因编辑效率。
 
重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
AAVS1和CXCR4基因同源定向修复。Panel A. 这些图表展示了CD34+造血干细胞的HDR实验是如何完成的。将含有Hind III酶切位点的ssDNA模板插入AAVS1基因中，将同时含有Hind III和Bam HI酶切位点的模板插入CXCR4基因中。每侧同源臂长度为90 bp。Panel B. 将修复模板和Cas9/sgRNA RNPs通过电穿孔导入后，用PCR扩增靶细胞中各目标基因，并进行酶切分析。编辑效率显示在凝胶上每个阳性孔上面。CXCR4基因经过BamH I酶切后显示出一条额外条带，原因是基因编辑前野生型基因中已经存在一个BamH I位点了。基因编辑5天后，我们证实98%的造血干细胞CD34+染色阳性。
 
重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
数据来源于Takara Bio USA, Inc.
Cellartis hiPSC-18细胞系基因敲除。通过剪切后条带的强度可以对编辑细胞所占的百分比进行半定量估计。与其他品牌推荐的制备向导RNA的方法相比，Guide-it Recombinant Cas9与Guide-it In Vitro Transcription Kit制备的sgRNA结合使用，可以为许多靶点提供一致且有效的基因编辑。凝胶底部的每个数字代表所示RNP的基因编辑效率（以百分比表示）。
 
重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
CD3+ Pan T细胞治疗相关基因的敲除。在本实验中，电穿孔导入Cas9/sgRNA RNPs至 CD3+Pan T细胞进行单基因敲除（B2M或PD-1）或双基因敲除（B2M+PD-1或TRAC+TRBC）。细胞解冻后，在LymphoONE培养基中生长，并用ImmunoCult人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂激活处理3天。然后按照Guide-it Recombinant Cas9（10 μg/μl）操作指南，将RNP复合物通过电穿孔方式导入至细胞，设置3个平行实验组。对于双基因敲除，单独制备靶向各目标基因的RNP复合物，然后与细胞混合进行电穿孔。电穿孔7天后，使用流式细胞仪检测基因敲除频率。
 
重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
CD3+ Pan T细胞中B2M基因的敲除。在本实验中，将Cas9/sgRNA RNPs通过电穿孔导入至CD3+ Pan T细胞中，以敲除B2M基因。细胞解冻后，在LymphoONE培养基中生长，并用ImmunoCult人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂激活处理3天。然后按照Guide-it Recombinant Cas9（10 μg/μl）操作指南，将RNP复合物通过电穿孔导入至细胞，设置3个平行实验组。电穿孔7天后，用流式细胞仪检测基因敲除频率和细胞活力。
 
Technical Notes
Improved CRISPR/Cas9 genome editing in hard-to-transfect mammalian cells using AAV
 
Guide-it™ Recombinant
Cas9（10 μg/μl）
重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
 
产品详情请点击：重组Cas9蛋白质（10 μg/μl）
 
 

 

页面更新：2021-08-16 10:56:34

Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3006ENEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

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Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒                              收藏

Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3006E Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3006E Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3006E Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3006E Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3006E

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#E3006E
2500次反应
18,579.00
有
无
无
无
无

#E3006L
500次反应
4,819.00
有
无
无
无
无

#E3006S
200次反应
2,149.00
有
有
有
无
无

#E3006X
1000次反应
8,449.00
无
无
无
无
无

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性能与使用

Luna® 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒 货 号 E3006E

概述

一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了方便、强大的方法。首先，RNA 在反转录酶的作用下被反转录为 cDNA，然后 cDNA 在 DNA 聚合酶的扩增作用下通过 qPCR 完成定量检测，而这一切都是在一管内完成。
Luna RT-qPCR 试剂盒包含一种新型的、应用核酸适配体技术设计的反转录酶，经基因工程改造提高其反应能力。Luna 温启动反转录酶及 Taq 热启动 DNA 聚合酶以及其试剂盒利用一种对温度敏感、可逆的适配体，在低于 45℃ 条件下，抑制其活性。因此，可以在室温下建立反应并抑制非特异性扩增。此外，温启动反转录酶具有更高的热稳定性，提升了在高温中的反应性能。
NEB Luna 通用一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，可以对目标 RNA 序列进行染料法实时荧光定量检测，该试剂盒适用于具有 SYBR/FAM 通道的大部分 qPCR 仪器。
NEB Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒经过优化，使用水解探针法对目标 RNA 序列进行实时荧光定量检测。
Luna RT-qPCR 试剂盒中含有热启动 Taq DNA 聚合酶及独特校正染料，与多种 qPCR 仪器兼容，包括需要 ROX 校正的仪器，实验操作过程中不需要额外添加染料。预混液中包含 dUTP，qPCR 前使用NEB 的南极热敏 UDG 进行预处理以防止产物残留污染。预混液中还加有肉眼可见的蓝色染料，在向透明多孔 PCR 板中加样时起指示作用。快速、灵敏、精确的 Luna qPCR 产品必将成为您实时定
量实验的首选。

Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒组成：

– Luna 一步法酶混合液

– Luna 一步法反应混合液
– 无核酸酶污染的水

GMP级别重组Cas9蛋白质酶试剂盒Takara

发表于由

GMP级别重组Cas9蛋白质
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara T230 Recombinant Cas9 Protein GMP grade 0.6 mg 询价 GMP级别重组Cas9蛋白质 GMP级别重组Cas9蛋白质 GMP级别重组Cas9蛋白质
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■ 制品内容
0.2 ml溶液中含有0.6 mg蛋白质，保存在1 ml冻存管中
 
浓度：3 mg/ml
体积：200 μl
 
■ 制品说明
Recombinant Cas9 Protein GMP grade是一种重组的野生型酿脓链球菌（Streptococcus pyogenes）来源的Cas9蛋白质（SpCas9），其C端携带猿猴病毒40（SV40）核定位信号（NLS：nuclear-localization signal）。 SpCas9与来源于同种细菌的特定基因座（CRISPR：Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）所转录的短RNA（gRNA：向导RNA）形成核糖核蛋白（RNP：Ribonucleoprotein）复合物，这种RNP复合物可以序列特异性切断双链DNA（*参考文献1），被广泛用于包括哺乳动物细胞在内的各种细胞的基因组编辑（*参考文献2，3）。
本Cas9蛋白质溶液成分经过了优化，对哺乳动物细胞具有良好的耐受性，可降低导入哺乳动物细胞时所造成的细胞损伤。将此Cas9蛋白质和gRNA制备的RNP复合物，通过电穿孔、显微注射等方式导入至靶细胞进行敲除实验，经验证该Cas9蛋白质溶液对哺乳动物细胞具有良好的耐受性。
本制品生产符合GMP（药品生产质量管理规范）标准，确保了高品质。
※ 本制品的关联制品Guide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl)（Code No. 632641/632640），其缓冲液成分与本制品相同，经确认可以达到相同的基因组编辑效率。
 
订购本制品请填写并提供此表。
 
Cas9蛋白质产品定制，请通过当地代理商或者以下联系方式联络我们。
TEL：010-80720985/86
 
■ 保存
－70℃及以下
（注意）避免反复冻融。
※一经开封，其制品品质将不在本公司GMP质量标准保证范围内；在没有开封的情况下，至多可以反复冻融5次，制品性能不会明显下降。
 
■ 分子量
159,665（根据氨基酸序列计算，1380个氨基酸）
 
■ 起源
E. coli expressing recombinant wild-type Streptococcus pyogenes Cas9 nuclease with a C-terminal nuclear localization signal(NLS) artificially synthesized based on Simian virus 40.
 
■ 纯度
HPLC纯度≥90％
 
■ 品质
·本制品符合GMP标准，并在该标准下进行制造和品质管理。
·本制品不含人源或动物源成分。
 
 
 
 
 

页面更新：2022-04-29 16:42:35

Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 货 号 E3007ENEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
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#E3007E
2,500 rxns
22,889.00
无
无
无
无
无

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特性

 使用探针法 qPCR，快速、灵敏、精准的对目标 RNA 进行检测和定量

 选择更简单
 ·适用于不需要 ROX 染料校正的仪器
 ·预混液试剂和便捷的操作的流程使反应体系的建立更便捷
 ·无干扰的可见示踪染料可避免加样错误
     
        产品性能优异

 · Luna® 系列产品均经过严格测试，以优化产品的特异性、灵敏度、准确性和重复性
 · 该产品对于不同来源的样品性能稳定
 · 通过与市面上其它 qPCR 和 RT-qPCR 试剂的综合评测，展现了 Luna 产品的卓越性能
 
        使用 Luna 温启动反转录酶优化您的 RT-qPCR 实验
 · 新型、热稳定反转录酶（RT）有效改善实验表现
 · 温启动反转录酶和热启动 Taq 酶共同提升反应特异性和功效

 

概述

 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）经过优化，适用于水解探针法的 RNA 实时定量。一步法 RT-qPCR 为 RNA 检测和定量提供了一种便捷、强大的方法。在同一管中，RNA 首先由反转录酶转化为 cDNA，然后使用 DNA 依赖型 DNA 聚合酶扩增 cDNA，从而可以进行 qPCR 定量。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性，将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光，并实时监测荧光值的增加，以测量 PCR 每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置，可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度，通过已知稀释浓度样品的标准曲线，可对靶基因进行绝对定量。

 
在 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）中，热启动 Taq DNA 聚合酶与新型温启动反转录酶联合使用，利用可逆结合的核酸适配体抑制剂控制这两种酶的活性。这种温度依赖型激活可避免热循环之前的非特异性扩增，从而可以放心的在室温下建立反应体系。改造过的 Luna 温启动反转录酶的热稳定性比许多其它反转录酶更高，其最佳反应温度为 55℃。对于困难模板，可以升高反应温度至 60°C，且不会影响 Luna 性能。
 
注意：为确保 Luna 温启动反转录酶的完全激活，建议孵育温度不低于 50℃
 
Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）浓度为 2×，包含热启动 Taq DNA聚合酶、dNTP 和所有必需的缓冲液成分。配方中不含校正染料，与不需要 ROX 校正的仪器兼容（如果需要 ROX 校正，可自行添加 ROX 染料）。反应预混液中的 dUTP 用于防止模板残留污染，非荧光可见示踪染料让反应的建立可视化。该可见染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠，因此不会干扰 qPCR 检测。
 
Luna 温启动反转录酶预混液的浓度为 20×，其中包含 Luna 温启动反转录酶以及用于防止 RNA 降解的小鼠 RNase 抑制剂（详情请见产品手册中的模板制备）。适用于各种 RNA 样品类型（总 RNA，poly（A）-RNA 等）和来源
 
图 1：Luna RT-qPCR 产品具有更高灵敏度、可重复性及更优异的表现。
 

 Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 货 号 E3007E
使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 产品检测人 GAPDH 基因，模板为 8 个 10 倍梯度稀释的
Jurkat 总 RNA（1 μg– 0.1 pg），每个浓度的样品做 8 个重复。实验按照试剂盒建议的操作流程进行，反应中包含一个 55℃ 温育 10 分钟的反转录步骤以便于 Luna WarmStart 反转录酶发挥作用。NTC = 无模板对照。
 
图 2：NEB 的 Luna RT-qPCR 产品在多重检测中功效强大
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 货 号 E3007E
 使用 Luna Universal Probe One-Step RT-qPCR Kit 分别检测 GAPDH 基因、核糖体蛋白 L32g 和 PI-3 激酶相关的 SMG1 基因的表达情况。模板为 7 个分别 10 倍稀释的 Jurkat 总 RNA （1 μg – 1 pg），每个浓度的样品做 4 个重复。实验结果如上图所示，左边是叠加的结果，右边是每个基因单独的检测结果。无论是单重还是多重 qPCR，低拷贝的模板（SMG1）使用的引物浓度为 0.4 μM，高拷贝的模板（L32G 和 GAPDH）使用的引物浓度为 0.2 μM。单重 qPCR 可以直接比较，多重 qPCR 可以比较拷贝数的差异。NTC = 阴性对照
 
图 3：通过与市场上探针法 RT-qPCR 试剂相比，Luna 产品展现出更好的稳定性和特异性
Luna® 探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX） 货 号 E3007E
使用市售的 RT-qPCR 试剂对 7 个靶标（丰度、长度和 GC 含量不同）进行测试。测试均根据产品说明书进行，数据来源于两个实验人员。实验结果对扩增效率、低起始量和缺乏无模板对照的扩增进行了评估（ΔCq = 无模板对照的平均 Cq – 最低起始量的平均 Cq）。此外，还评估了稳定性、可重复性、所有扩增曲线质量（质量分数）。柱状图展示了达到可接受的性能标准的目标百分比。图中展示了 NEB 和其它供应商的结果：Quanta，qScript™ XLT 1-Step RT-qPCR ToughMix®；ABI，TaqMan® RNA-to-Ct 1-Step Kit；QIAGEN，QuantiFast® Probe RT-PCR Kit；Bio-Rad，iTaq™ Universal Probes One-Step Kit；Promega®，GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR System。NEB 的 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒*性能优于其它测试试剂。


*数据来源于 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（NEB #E3006）。Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 试剂盒（无 ROX）（NEB #E3007）的性能与之相同

 

试剂盒组分

 以下试剂随产品提供

 

储存温度 （°C）

浓度

Luna® Probe One-Step Reaction Mix （No ROX）

-20

2 X

Luna® WarmStart® RT Enzyme Mix

-20

20 X

Nuclease-free Water

-20

  

储存温度

 -20°C

基因编辑后突变检测酶试剂盒Takara

发表于由

基因编辑后突变检测
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 631443 Guide-it Mutation Detection Kit 100 Rxns ￥5,771
￥4,617 		基因编辑后突变检测 基因编辑后突变检测 基因编辑后突变检测
Clontech 631448 Guide-it Mutation Detection Kit 25 Rxns ￥2,609
￥2,087 		基因编辑后突变检测 基因编辑后突变检测 基因编辑后突变检测

*红字为促销价格，促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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          基因敲除    
          ↗ 基因编辑后突变检测 → 基因编辑后突变检测 → 基因编辑后突变检测
基因编辑后突变检测 → 基因编辑后突变检测 → 基因编辑后突变检测            
  基因敲入        
          ↘ 基因编辑后突变检测        
 
 
Guide-it™突变检测试剂盒可以用于确认由CRISPR/Cas9、锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)等工程核酸酶所导入的基因突变。本试剂盒采用简单的PCR方法即可简便快速地检测出基因突变。性能卓越的 Terra™ PCR Direct Polymerase Mix可直接以细胞为起始进行扩增，无需提取基因组DNA。扩增产物经过变性及退火处理后形成不完全匹配DNA，Guide-it解离酶会剪切错配DNA部分，之后通过琼脂糖凝胶电泳确认剪切产物。
 
■ 特点
· 识别哺乳动物细胞中插入或者缺失突变的简便方法
· 可直接以细胞为起始进行PCR扩增，与同类产品相比较更为快速有效
· 完整试剂盒: 包含Guide-it Resolvase、Terra PCR Direct Polymerase和所有缓冲液
· 规格: 可提供100次和25次反应规格，25次反应规格可用于小规模基因编辑实验
· 可用于CRISPR/Cas9、ZFNs、TALENs下游研究突变序列确认
 
■ 操作流程
基因编辑后突变检测
 
■ 实验例
基因编辑后突变检测
 

图1. 比较Guide-it和Surveyor方法。转染表达Cas9核酸酶的质粒和特异作用于AAVS1位点的sgRNA至293T细胞，转染48 hr 后收集细胞，将其与未经转染的细胞按照不同比例*进行混合，分别进行突变导入检测。采用Terra PCR Direct Polymerase Mix扩增含有AAVS1位点的目的片段并纯化其产物，之后分别采用Guide-it解离酶和Cel1酶（Surveyor assay）进行剪切。采用Guide-it解离酶剪切后条带清新易于识别，而Surveyor assay剪切后则显示明显的弥散，这样使得不容易测定突变效率并且低水平突变导入很难检测得到。*泳道1-6 : 100％, 80％, 60％, 40％, 20％, 0％（转染细胞的比例）
 
 
■ 产品组份
  100 次（产品编号 631443） 25 次（产品编号 631448）
 Extraction Buffer 1 5 ml × 4    5 ml
 Extraction Buffer 2      2 ml 500 μl
 Guide-it Resolvase   100 μl  25 μl
 Terra PCR Direct Polymerase Mix (1.25 U/μl)   100 μl  25 μl
 2 × Terra PCR Direct Buffer (with Mg2+, dNTP) 1 ml × 3 750 μl
  PCR-Grade Water 1 ml × 5    1 ml
 
■ 保存
－20℃
 
 
产品详情请点击：基因编辑后突变检测
 
 
■ 关联资料
Guide-it™ 突变检测试剂盒宣传页：
点击图片下载		 基因编辑后突变检测
 

页面更新：2021-03-11 09:21:22

LunaScript® 反转录 SuperMix 试剂盒 货 号 E3010LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

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LunaScript® 反转录 SuperMix 试剂盒                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
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上海库存
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成都库存
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#E3010L
100 rxns
4,259.00
有
无
无
无
无

#E3010S
25 rxns
1,379.00
有
无
有
无
无

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相关产品

Luna 通用 qPCR 预混液

Luna 通用探针法 qPCR 预混液

特性

·15 分钟内完成 cDNA 第一链的合成

·与 Luna qPCR 预混液搭配使用，RT-qPCR 效果更优异

 

概述:

  LunaScript SuperMix 反转录试剂盒是经过优化的预混液，用于两步法 RT–qPCR 的第一步 cDNA 第一链合成。该预混液最具特色的是采用了耐热 Luna 反转录酶，可在高温下合成 cDNA。预混液中的小鼠 RNase 抑制剂可保护模板 RNA 不被降解。在预混液中同时含有 6 碱基随机引物和 poly-dT 引物，可覆盖全长目标 RNA。


此外，LunaScript SuperMix 反转录试剂盒含有可视蓝色示踪染料，在两步法 RT–qPCR 实验中起到提示作用。无论起始量是高达 1 μg 的总 RNA，还是低到单拷贝的总 RNA，使用该试剂盒进行反转录，都能获得稳定的、线性的和高灵敏度的检测结果。

LunaScript SuperMix 反转录试剂盒组分

–  LunaScript RT SurperMix

–  无反转录酶对照预混液 
–  无核酸酶水
 

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于由

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#E3019L
480 rnxs
15,459.00
无
无
无
无
无

#E3019S
96 rxns
3,539.00
无
无
无
无
无

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特性

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒用于 SARS-CoV-2 的实时 RT-PCR 检测

Ÿ   对 2019-nCoV_N1 和 2019-nCoV_N2 靶标以及人源 RNase P 基因进行多重检测，支持高通量检测流程

Ÿ   通过将 RNase P 内标的反向引物设计为跨外显子序列，降低基因组 DNA 的扩增背景

Ÿ   4X 浓度的 RT-qPCR 预混液支持更大的上样量，提高检测灵敏度

Ÿ   Luna 温启动反转录酶和热启动 Taq 酶共同提升反应特异性和功效，可在室温条件下建立体系

Ÿ   预混液中包含热敏 UDG 和 dUTP，防止残留污染

Ÿ   支持混合样品池检测，且不影响灵敏度

Ÿ   欲了解 NEB 如何支持 COVID-19 研究，请点击 COVID-19 research，其中详述了多种 RT-qPCR 病毒检测方案

产品说明

 Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019L

使用 Luna SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒，在 96 孔板上检测 94 个不同的样本。结果通过荧光通道显示。 

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒经过优化，适用于水解探针法的 SARS-CoV-2 实时 RT-PCR 检测。在同一管中，RNA 首先由反转录酶转化为 cDNA，然后使用 DNA 依赖型 DNA 聚合酶扩增 cDNA，从而可以进行 qPCR 定量。基于探针法的 qPCR / RT-qPCR 原理是利用聚合酶的 5´ → 3´ 外切酶活性，将淬灭的目标特异性探针切断发出荧光，并实时监测荧光值的增加，以测量 PCR 每个循环中的 DNA 扩增。在荧光信号显著超过背景荧光的位置，可以确定 Cq 值。Cq 值可用于评估两个或多个样品的靶基因相对丰度。

图 1：Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒组分

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019L

图 2：Luna SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒可在一个反应中同时检测两个 N 基因位点和人源 RNase P 基因

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019L

A. SARS-CoV-2 的两组引物探针序列源于 CDC 提供，其中探针改为两种荧光标记（N1: HEX, N2: FAM）。

B. RNase P 内标包含 Cy5 标记的探针和重新设计的反向引物。该引物的跨外显子设计，避免了人基因组 DNA（含有 2.4 kb 内含子）的扩增干扰。


SARS-CoV-2 引物/探针混合物包含 SARS-CoV-2 病毒中 N 基因两个区域的引物和探针 [基于美国疾病控制与预防中心（CDC）提供的序列]。两条探针带有不同的荧光标记（N1: HEX;N2: FAM），可在 qPCR 仪器的两个不同通道中同时观测。为了确保检测样品的完整性和无抑制物，还包含一套用于扩增人源 RNase P 基因的内标（IC）引物和探针。该靶基因的反向引物与 CDC 的设计不同，修改为跨外显子序列，以降低残留基因组 DNA 的扩增背景。IC 的扩增可在 Cy5 通道观测。产品同时还提供阳性对照（PC）（含有 SARS-CoV-2 N 基因的质粒）。


该试剂盒包含 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG（NEB #M3019），支持更大的上样量和混合样品池检测，对灵敏度和特异性的影响极小。该预混液包含一步法 RT-qPCR 的所有组分，和独特校对参比染料，可与多种 qPCR 仪器兼容，包括需要高 ROX 或低 ROX 参比信号的仪器。独具特色的是：预混液还包含防止残留污染的热敏 UDG 和 dUTP，以及有助于体系建立的无荧光可见示踪染料。该示踪染料与 qPCR 常用荧光基团的光谱没有重叠，因此不会干扰实时检测。

 

图 3：Luna SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒的检测下限比 TaqPath™1-Step RT-qPCR Master Mix, CG 更低

 Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019L

将下述两种试剂盒进行检测下限（LOD）比较：使用 Luna SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒对 2019-nCoV_N1（HEX）和 2019-nCoV_N2（FAM）进行多重 RT-qPCR 检测，实验设置参照 E3019 产品说明书；使用 TaqPath 1-Step RT-qPCR Master Mix, CG 对 2019-nCoV_ N1（FAM）和 2019-nCoV_N2（FAM）进行单重 RT-qPCR 检测，实验设置参照美国疾控中心 2019-nCoV 实时 RT-PCR 诊断指南。实验样品：将 Twist 公司合成的 SARS-CoV-2 RNA 对照 2 掺入到 10 ng Jurkat 总 RNA 中。实验仪器为 Applied Biosystems® 7500 Fast 实时荧光定量仪 （96 孔板，20 µl 反应体系）。结果显示 Luna 试剂盒对两个靶标的检测下限为 5 拷贝/反应，而 TaqPath 为 10 拷贝/反应。

 

图 4：Luna SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒适用于纯化 RNA 的混合样品池检测

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019L

通过将一份 2 µl 的模拟阳性样品（10 拷贝的 Twist 合成 SARS-CoV-2 RNA 对照 2 掺入到 10 ng Jurkat 总 RNA）与四份 2 µl 的模拟阴性样品（仅含 10 ng Jurkat 总 RNA）混合，制备出包含五份样品的混合样品池。将混合样品池（10 µl）与单独样品（2 µl，含 10 拷贝 N 基因和 10 ng Jurkat 总 RNA）进行性能比较。实验仪器为 Applied Biosystems® 7500 Fast 实时荧光定量仪（96 孔板，20 µl 反应体系）。N1 和 N2 靶标的扩增曲线显示，单独和掺入混合样品池的阳性样品 Cq 值相似。由于混合样品池中人源总 RNA 量是单独样品的 5 倍，因此正如预期，混合样品池 RNase P 基因的 Cq 值更小。

图 5：Luna SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒的检测下限（LOD）

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019L 

 通过 Luna SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒对多种 SARS-CoV-2 RNA 对照样品中的 2019-nCoV_N1（HEX）和 2019-nCoV_N2（FAM）靶标进行多重 RT-qPCR 检测，获得该试剂盒的检测下限（LOD）。实验样品：将 Twist 公司合成的 SARS-CoV-2 RNA 对照 2 掺入到 10 ng Jurkat 总 RNA 中（图 A）。两位实验人员同时使用三种仪器进行平行测试（96 孔板，20 µl 反应体系）：Applied Biosystems（ABI）7500 Fast Real-Time instrument、ABI QuantStudio™ 6 Flex Real-Time PCR system，以及 Bio-Rad CFX instrument。结果显示：Twist RNA 的检测下限均为 5 拷贝/反应。此外还测试了其它样品类型（图 B）：SARS-CoV-2 基因组 RNA 源自 ATCC（ATCC® VR-1986D™）、NIST（Fragment 1 – Includes SARS-CoV-2 sequence: 25949-29698 of isolate USA-WA1/2020），以及 SeraCare AccuPlex™ SARS-CoV-2 Verification Panel V2（0505-0132）。上述 RNA 均由 Monarch 总 RNA 小量提取试剂盒（NEB# T2010）提取。所有 RNA 样品均掺入到 10 ng Jurkat 总 RNA，使用 ABI 7500 Fast Real-Time instrument 检测。假设 RNA 提取的回收率为 100%，则各样品检测下限为：ATCC 的 SARS-CoV-2 基因组 RNA 为 2.5 GE（genomic copy equivalent）、NIST SARS-CoV-2 测试样品为 1×107 倍稀释、SeraCare AccuPlex 样品为 15 拷贝。


图 6：与 TaqPath 1-Step RT-qPCR Master Mix CG相比，Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG 对 SARS-CoV-2 N2 靶标的检测性能更好

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019L 

 

A. 使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG 对 2019-nCoV_1（HEX）和 2019-nCoV_N2（FAM）进行单重 RT-qPCR，实验设置参照 E3019 产品说明书。B. 使用 TaqPath 1-Step RT-qPCR Master Mix, CG 对 2019-nCoV_N1（FAM）和 2019-nCoV_N2（FAM）进行单重 RT-qPCR，实验设置参照美国疾控中心 2019-nCoV 实时 RT-PCR 诊断指南。实验样品：将 Twist 公司合成的 SARS-CoV-2 RNA 对照 2 掺入到 10 ng Jurkat 总 RNA 中，实验评估了样品 5-log 浓度范围扩增结果。实验仪器为 Applied Biosystems® 7500 Fast 实时荧光定量仪（96 孔板，20 µl 反应体系）。在上述条件下，Luna 和 TaqPath 对 N1 靶标的扩增结果都很好。对于 N2 靶标，尽管 TaqPath 可检测 10 个拷贝样品，但线性度并不理想，而 Luna 线性度更好，且 Cq 值出现更早。

 


Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG 结合了热启动 Taq DNA 聚合酶和具有新型温启动活性的反转录酶，可通过基于适配体的可逆抑制来双重控制酶的活性，这种温控活化机制可避免热循环前的非特异引物结合和扩增，从而让室温建立体系更安全。经改造的 Luna 温启动反转录酶具有更高的热稳定性，最佳反应温度为 55°C。


图 7：Luna RT-qPCR 预混液的室温稳定性让实验流程更灵活

 

Luna® SARS-CoV-2 多重 RT-qPCR 检测试剂盒 货 号 E3019L

使用 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 4X 预混液，含 UDG 对2019-nCoV_N1（HEX）和 2019-nCoV_N2（FAM）进行单重（SP）和多重（MP）RT-qPCR，实验设置参照 E3019 产品说明书。使用 TaqPath 1-Step RT-qPCR Master Mix, CG 对 2019-nCoV_N1（FAM）和 2019-nCoV_N2（FAM）进行单重 RT-qPCR，实验设置参照美国疾控中心 2019-nCoV 实时 RT-PCR 诊断指南。实验样品：将 Twist 公司合成的 SARS-CoV-2 RNA 对照 2 掺入到 10 ng Jurkat 总 RNA 中，实验评估了样品 5-log 浓度范围（100,000-10 拷贝）的扩增结果。上机前，将 RT-qPCR 反应体系分别室温孵育 0、2、5、24 小时。实验仪器为 Applied Biosystems® 7500 Fast 实时荧光定量仪（96 孔板，20 µl 反应体系）。结果显示 Luna 通用探针一步法 RT-qPCR 预混液孵育 0-24 小时的实验结果一致，而 TaqPath 孵育 2 小时后，Cq值延迟≥1，实验效果随孵育时间的延长而下降。