磁珠法免疫沉淀 Buffer Set酶试剂盒Takara


磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635696 Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set 50 Rxns ¥2,288 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
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Code No. 产品名称
635696   Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set
 
■ 产品描述
本制品由裂解液、洗涤buffer和洗脱buffer组成,适用于磁珠法免疫沉淀蛋白质的纯化,例如我们的Anti-Myc 磁珠和Anti-DYKDDDDK(FLAG)磁珠(已终卖)。
 
■ 应用
免疫沉淀
 
 
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RNase H 货 号 #M0297LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

RNase H                              收藏

RNase H               货   号                  #M0297L RNase H               货   号                  #M0297L RNase H               货   号                  #M0297L

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特性

 重组酶
 除去杂交到 poly(dT) 上的 mRNA poly(A)
 在 cDNA 第二链合成时除去 mRNA 

概述

核糖核酸酶 HRNase H)是一种核糖核酸内切酶,它能够特异性地水解杂交到 DNA 链上RNA 磷酸二酯键。该酶不能消化单链或双链DNA
 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有从 E. coli 中克隆的 RNase H(rnh)基因。 

反应条件

1X RNase H 反应缓冲液 [75 mM KCl,50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃),3 mM MgCl2 和 10 mM DTT],37℃ 温育。热失活:65℃ 20 分钟。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中, 37℃ 条件下, 20 分钟从 20 pmol荧光标记的 50 bp RNA-DNA杂交链中水解生成 1 nmol 核苷酸所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com www.neb.com
 

浓度

5,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。 

c-Myc琼脂糖珠酶试剂盒Takara


c-Myc琼脂糖珠
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Clontech 631208 c-Myc Monoclonal Antibody-Agarose Beads 1 ml ¥7,100 c-Myc琼脂糖珠 c-Myc琼脂糖珠 c-Myc琼脂糖珠
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Code No. 产品名称
631208   c-Myc Monoclonal Antibody-Agarose Beads
 
■ 产品描述
本制品是将能够识别c-Myc标签(人p62-c-Myc蛋白质410-419部分)的单克隆anti-c-Myc抗体(Clone 9E10)交联到固定化proteinA琼脂糖珠的产品。可以用来从细胞裂解液中纯化或免疫沉淀融合了c-Myc标签的蛋白质。琼脂糖珠上交联的抗体量>0.5 mg/ml。
 
■ 应用
Myc标签蛋白质小量纯化
 
■ 实验例
 
c-Myc琼脂糖珠
使用c-Myc单克隆抗体进行免疫共沉淀检测。在HEK293细胞中共表达以GFP变异体为标签的Max蛋白质和带有c-Myc标签的Myc蛋白质,然后使用anti-GFP抗体(泳道2)或anti-Myc 抗体(泳道4)进行免疫沉淀反应,再使用anti-Myc抗体进行Western Blotting检测。泳道2显示Myc蛋白质能够被Max蛋白质pull down。泳道4显示c-Myc单克隆抗体能够有效的pull down Myc蛋白质。泳道1和3是对照。
 
 
产品详情请点击:c-Myc琼脂糖珠
 
 

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DNase I(无 RNase) 货 号 #M0303LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

DNase I(无 RNase)                              收藏

DNase I(无 RNase)                货   号                  #M0303L DNase I(无 RNase)                货   号                  #M0303L DNase I(无 RNase)                货   号                  #M0303L DNase I(无 RNase)                货   号                  #M0303L

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特性

·转录反应后 DNA 模板的降解
·除去 RNA 样品中的基因组 DNA 污染
·DNase I 印迹分析
·切刻平移

概述

DNase I(无 RNase)是一种非特异性核酸内切酶,切割 DNA 产生具有 3´ 羟基和 5´ 磷酸末端的二核苷酸、三核苷酸和寡核苷酸产物。DNase I 可以作用于单链 DNA、双链 DNA、染色质和 RNA:DNA 杂交链。 

来源

重组 E. coli 菌株,含有牛胰腺 DNase I 的 MBP 融合克隆。 

反应条件

1X DNase I 反应缓冲液
[10 mM Tris-HCl (pH 7.6 @ 25℃) ,2.5 mM MgCl2,0.5 mM CaCl2],37℃ 温育。
热失活:75℃ 10 分钟。 

质保声明

无 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,10 分钟完全分解 1 μg pBR322 DNA 所需要的酶量。
完全降解是指绝大多数的 DNA 片段降解成为四核苷酸或更短的核苷酸。 

浓度

2,000 units/ml。 

注意事项

为避免酶失活过程中 RNA 被降解,应添加终浓度为 5 mM 的 EDTA。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

Myc & HA标签抗体酶试剂盒Takara


Myc & HA标签抗体
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631206 c-Myc Monoclonal Antibody 200 μg ¥4,532 Myc & HA标签抗体 Myc & HA标签抗体 Myc & HA标签抗体
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Code No. 产品名称
631206   c-Myc Monoclonal Antibody
 
■ 产品描述
这些抗体对带有表位标签的蛋白质具有高灵敏度和特异性,可用于Western Blotting、ELISA、免疫荧光染色和免疫细胞化学测定实验,以检测融合了Myc或HA标签的重组蛋白质。
 
c-Myc单克隆抗体
c-Myc单克隆鼠源抗体能够识别人p62-c-Myc蛋白质的410-419残基表位,适用于从细胞裂解液中免疫沉淀融合了c-Myc标签的蛋白质、ELISA、对显微注射或转染的细胞进行免疫细胞化学研究,以及对融合了c-Myc标签的蛋白质进行定位。
 
HA-tag多克隆抗体
HA-tag抗体是用合成的HA肽(YPYDVPDYA,人甲型流感病毒血凝素表位)在兔子体内免疫并用protein A纯化而制备的。适用于Western Blotting、免疫沉淀、免疫荧光以及ELISA实验。
 
■ 特点
HA-tag多克隆抗体:
来源:使用KLH共轭的合成HA表位(YPYDVPDYA)免疫兔子,再用protein A进行纯化签
浓度:0.1 mg/ml
 
c-Myc单克隆抗体:
来源:使用合成的人p62-c-Myc蛋白质的408-439残基肽段进行免疫反应制备的IgG1同种型单克隆抗体
浓度:1 mg/ml
 
■ 应用
Western Blotting、IP、IF、ELISA
 
■ 实验例
Myc & HA标签抗体
使用c-Myc单克隆抗体进行免疫共沉淀检测。在HEK293细胞中共表达以GFP变异体为标签的Max蛋白质和带有c-Myc标签的Myc蛋白质,然后使用anti-GFP抗体(泳道2)或anti-Myc 抗体(泳道4)进行免疫沉淀反应,再使用anti-Myc抗体进行Western Blotting检测。泳道2显示Myc蛋白质能够被Max蛋白质pull down。泳道4显示c-Myc单克隆抗体能够有效的pull down Myc蛋白质。泳道1和3是对照。
 
 
产品详情请点击:Myc & HA标签抗体
 
 

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pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装酶试剂盒Takara


pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635689 pCMV-Myc Vector Set Each ¥6,297 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
Clontech 635690 pCMV-HA Vector Set Each ¥6,297 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装 pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
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Code No. 产品名称
635689   pCMV-Myc Vector Set
635690   pCMV-HA Vector Set
 
■ 产品描述
此类哺乳动物表达载体可以表达融合c-Myc或血凝素(HA)标签的目的蛋白质。这两种标签具有良好表征,高免疫反应性,是做免疫共沉淀研究的理想选择,同时也很容易通过Western Blotting实验进行检测。此外,c-Myc和HA是小标签,通常不会影响目的蛋白质的功能。
 
pCMV载体使用的是CMV启动子,可以在广泛来源的哺乳动物细胞中实现高水平的组成型表达。使用anti-myc抗体可以对带有myc标签的目的蛋白质进行Western Blotting或荧光显微镜检测。
 
pCMV-Myc & pCMV-HA载体套装(Code No. 631604)包含c-Myc单克隆抗体和HA标签多克隆抗体,可以用来做Western Blotting、ELISA检测或免疫染色分析。同时套装里还附带一个测序引物,用来确认插入片段是否在正确的阅读框内。
 
HA Tag sequence: ACC ATG TAC CCA TAC GAT GTT CCA GAT TAC GCT
Myc Tag sequence: ATG GCA TCA ATG CAG AAG CTG ATC TCA GAG GAG GAC CTG
 
■ 特点
· 在哺乳动物细胞中免疫共沉淀myc标签和HA标签蛋白质
· 高水平的组成型表达
· 在哺乳动物细胞中确认酵母双杂交相互作用
· Western Blotting实验得到的条带清晰、明亮、背景干净
 
■ 应用
· 免疫共沉淀研究
· 蛋白质互作确认
· Western Blotting
· 表位标签表达
 
■ 载体图谱示意图
 
pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
 
 
产品详情请点击:pCMV-Myc & pCMV-HA 载体套装
 
 

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人胎盘 RNase 抑制剂 货 号 #M0307LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNase 抑制

人胎盘 RNase 抑制剂                              收藏

人胎盘 RNase 抑制剂             货   号                  #M0307L

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特性

 抑制常见的真核 RNase
 与 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶兼容
 在较宽的 pH 范围内均有活性(pH 5-8)
 适用于 cDNA 合成反应
 体外转录/翻译 

概述

RNase 抑制剂是重组人胎盘蛋白质,可以特异性地抑制 RNase A、B、C 活性,但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNase H 和来源于曲霉属的 RNase 无效。此外,与下列聚合酶共同使用时,未观察到其抑制聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶和噬菌体 RNA 聚合酶(SP6、T7 或 T3)。
RNase 抑制剂的分子量为 50 kDa,通过非共价键以 1:1 的比例与 RNase 结合而抑制其酶活,结合常数大于 1014。 

来源

重组 E. coli 菌株,含有来源于人胎盘的 RNase 抑制剂基因。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指抑制 5 ng RNase A 50% 活性所需的 RNase 抑制剂的用量。活性测定是通过抑制 RNase A 对胞嘧啶 2´,3´ -环单磷酸盐的水解来进行的。 

浓度

40,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

p19 siRNA 结合蛋白(停产) 货 号 #M0310SNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

p19 siRNA 结合蛋白(停产)                              收藏

p19 siRNA 结合蛋白(停产)             货   号                  #M0310S

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停产通知

 产品于 2020年 1 月 2 日停产.

相关产品

几丁质树脂 
几丁质磁珠

特性

 与 siRNA 结合效率高
 可通过几丁质磁珠亲和纯化 siRNA 

概述

p19 siRNA 结合蛋白分子量为 19 kDa,来自于植物香石竹意大利环斑病毒(CIRV)。该蛋白与 siRNA 具有纳摩尔级的亲和力,和 3´ 末端有 2 个核苷酸突出、5´ 末端是磷酸基的 21 nt siRNA 结合力高于其它片段。该蛋白是以二聚体的形式与 siRNA 结合,结合力取决 RNA 片段大小,而与 RNA 序列无关。如果 siRNA 的长度增加 4 个碱基,则与蛋白的亲和力会下降约 100 倍。当 p19 siRNA 结合蛋白在植物体内表达时,能抑制 RNAi 作用。 

来源

p19 siRNA 结合蛋白以融合蛋白的形式在大肠杆菌中克隆和表达。其 N 末端带有 MBP(麦芽糖结合蛋白),C 末端带有 CBD(几丁质结合蛋白)。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。产品经纯化,琼脂糖凝胶电泳后 EB 染色检测,无 DNA 或 RNA 污染。 

单位定义

1 单位指 25℃ 条件下,1 小时内结合 10 ng 的 siRNA 所需要的蛋白量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

分子量

67 kDa。 

浓度

10,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

Magnetic Myc IP试剂盒酶试剂盒Takara


Magnetic Myc IP试剂盒
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635698 Magnetic Myc Immunoprecipitation Kit 50 Rxns ¥8,349 Magnetic Myc IP试剂盒 Magnetic Myc IP试剂盒 Magnetic Myc IP试剂盒
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Code No. 产品名称
635698   Magnetic Myc Immunoprecipitation Kit
 
■ 产品描述
Magnetic Myc Immunoprecipitation Kit通过使用交联了anti-Myc单克隆抗体(可识别Myc表位)的磁珠,可以简单、快速地从细胞裂解液中纯化或免疫沉淀Myc标签蛋白质。试剂盒中还包含磁珠法免疫沉淀的Buffer Set(经过优化,背景值非常低)和ProteoGuard Protease Inhibitor Cocktail(有效抑制细胞裂解过程中释放的内源性蛋白酶)。
 
■ 产品特点
· 纯化myc标签蛋白质简单、快速
· 可得到高纯度的变性蛋白质
· 抗体能够高度特异性地结合myc而不与内源蛋白质产生交叉反应
 
■ 应用
· 从细胞裂解液中纯化和免疫沉淀myc标签的蛋白质
· 鉴定myc标签的蛋白质
· 进行高通量蛋白质互做研究
 
 
产品详情请点击:Magnetic Myc IP试剂盒
 
 

页面更新:2019-11-12 10:15:55

小鼠 RNase 抑制剂 货 号 #M0314LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNase 抑制

小鼠 RNase 抑制剂                              收藏

小鼠 RNase 抑制剂             货   号                  #M0314L

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#M0314L
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#M0314S
3,000 units
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特性

 抑制常见真核 RNase
 与 Taq 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶兼容
 适用于 cDNA 合成和 RT-PCR
 体外转录 / 翻译
 酶催化的 RNA 标记反应 

相比起人源和猪源 RNase 抑制剂,小鼠 RNase 抑制剂在抗氧化能力上有显著提升。

概述

小鼠 RNase 抑制剂是鼠源重组蛋白,分子量为 50 kDa,可以特异性抑制 RNase A、B 和 C 活性。它与 RNase 以 1:1 的比例高效非共价结合从而抑制其活性。但对 RNase 1、RNase T1、S1 核酸酶、RNase H 或来源于曲霉属的 RNase 无效。此外,与下列聚合酶共同使用时,该抑制剂不会抑制聚合酶的活性,如:Taq DNA 聚合酶、AMV 或 M-MuLV 反转录酶或噬菌体 RNA 聚合酶(SP6、T7 或 T3)。
重组小鼠 RNase 抑制剂不含有半胱氨酸。已证实,人源中的半胱氨酸对氧化非常敏感并导致抑制剂失活。因此,小鼠 RNase 抑制剂与人/猪 RNase 抑制剂相比,抗氧化能力显著提高,且在 DTT 浓度较低(<1 mM)时更稳定。这使其在不适宜高浓度 DTT 的反应中更具优势,如实时 RT-PCR。 

来源

携带有鼠源 RNase 抑制剂基因的 E. coli 菌株。 

质保声明

无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位指抑制 5 ng RNase A 50% 活性所需要的小鼠 RNase 抑制剂的量。活性测定是通过抑制 RNase A 对胞嘧啶 2´,3´ -环单磷酸盐的水解来进行。 

浓度

40,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 


磁珠法免疫沉淀 Buffer Set酶试剂盒Takara


磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635696 Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set 50 Rxns ¥2,288 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set 磁珠法免疫沉淀 Buffer Set
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Code No. 产品名称
635696   Magnetic Beads Immunoprecipitation Buffer Set
 
■ 产品描述
本制品由裂解液、洗涤buffer和洗脱buffer组成,适用于磁珠法免疫沉淀蛋白质的纯化,例如我们的Anti-Myc 磁珠和Anti-DYKDDDDK(FLAG)磁珠(已终卖)。
 
■ 应用
免疫沉淀
 
 
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5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶 货 号 #M0319LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶                              收藏

5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶               货   号                  #M0319L 5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶               货   号                  #M0319L 5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶               货   号                  #M0319L

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相关产品

通用 miRNA 克隆接头

特性

 二代测序文库构建中连接单链 DNA 和腺苷化的 DNA 接头
 构建 small RNA 二代测序文库时,可在较高温度下连接预腺苷化的接头和 RNA 

概述

5´ App DNA/RNA 热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌(Methanobacterium thermoautotrophicum),RNA 连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该酶连接时不需要 ATP,但需要 预腺苷化的接头才能将其连接到 RNA 或单链 DNA 3´ OH 末端。该酶也可催化 端被 2´ -O-甲基化的 RNA 预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度60-65℃。连接酶的点突变体不能使 RNA 或单DNA 端磷酸腺苷化,因此降低非特异性的串联和环化。

该酶能在 65℃ 反应,此温度下降低了 RNA 二级结构对连接反应的制约。

来源

重组 E. coli 菌株,携带有 His 标签的 5´ AppDNA/RNA 连接酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 1 [10 mM Bis-Tris-Propane-HCl (pH 7.0 @ 25℃),10 mM MgCl2,1 mM DTT],65℃ 温育。 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、核酸外切酶、 RNase 和磷酸酶污染。
 

浓度

20 μM。 

使用注意事项

建议连接单链 DNA 和预腺苷酸化接头时,使用含镁离子的 NEBuffer 1。 

参考文献

有关该产品性质及应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。 

protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara


protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635717 Capturem Protein A Miniprep 12 Columns ¥2,545
2,036(终卖)
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635720 Capturem Protein A Maxiprep 6 Columns ¥3,803
¥3,042
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635731 Capturem Protein A 24-Well Plate 1 × 24-well plate ¥5,777
¥4,622
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635743 Capturem Protein A 24-Well Plate – HC 1 × 24-well plate ¥7,788 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635746 Capturem Protein A Buffer 100 ml ¥934
¥747
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日 *635717从即日起停止销售,推荐使用中等规格纯化柱635720进行替代。

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■ 产品简介
Capturem Protein A 系列产品是基于Protein A* 原理,结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱,特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可,小量纯化仅需5 min,因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造,增加了膜孔表面积,对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小,可在室温下操作,纯化简单快速,可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量(miniprep)、中量(maxiprep)以及高通量(24 well和96 well)四种规格可供选择。
*Protein A是金黄色葡萄球菌的表面蛋白质,对许多物种(如人、大小鼠)的IgG型抗体的Fc片段有很强的亲和力。ProteinA与抗体的结合能力根据抗体同种型(isotype)的不同而不同。
 
■ 产品特点
· 快速方便:从上样到洗脱,室温下操作小量纯化仅需5 min,无需孵育
· 一次性使用:有效减少样品间的交叉污染,受protein A性质影响,纯化抗体的产量因物种
   和抗体同种型的不同而有所差别
· 高质量:样品停留时间短,从而有效地防止了抗体降解及失活,保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度:柱床体积小,带入污染少,可实现大体积洗涤,小体积洗脱
· 高灵活性:可从广泛来源的样品中纯化抗体,如动物血清、腹水、细胞培养基等
注:Capturem Protein A 24-Well Plate-HC(Code No. 635743)经过优化,与旧版本产品(Code No. 635731)相比,收量更高。
 
■ Capturem 膜原理
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
* 注:Maxiprep需要50 ml tube使用的离心机,24 well、96 well 需要24孔板、96孔板使用的离心机或真空过滤装置
 
Capturem Protein A Miniprep与不同物种来源的抗体的结合能力
 
物种 亲和力 (μg/column)*
Goat 100-150
Horse >150
Human >150
Mouse 100-150
Rabbit 50-100
Rat >150
Sheep >150
 
*使用磷酸盐结合缓冲液(pH8.0)对不同物种来源的总血清进行稀释然后经Capturem Protein A Miniprep 纯化,产物的量通过测定其在280 nm处的吸光度进行计算。
 
■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性
Species

Antibody subtype

Protein A Protein G Protein A/G
Human Total lgG +++ +++ +++
lgG1 +++ +++ +++
lgG2 +++ +++ +++
lgG3 + +++ +++
lgG4 +++ +++ +++
lgM + +
lgD
lgA1 + +
lgA2 + +
Fab + + +
scFv + +
Mouse Total lgG +++ +++ +++
lgM
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++ +++
lgG2b +++ +++ +++
lgG3 +++ +++ +++
Rat Total lgG + ++ ++
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++
lgG2b + +
lgG2c +++ +++ +++
Rabbit Total lgG +++ +++ +++
+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
 
■ 操作流程
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品性能
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 实验例
protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
从杂交瘤培养上清液中筛选Cas9的单克隆抗体。所有克隆均是小鼠IgG1同种型,所以使用高盐法进行纯化。选择Capturem Protein A Maxiprep,使用6 ml buffer (配方10 mM sodium borate, pH 8.9, 3 M NaCl)进行平衡,2,000 x g 离心3 min。向抗体上清原液中加入1/10体积的1 M sodium borate(pH8.9)将NaCl浓度调节至3.3 M。取20 ml上清液上样,2,000 x g 离心3 min,流出液重复上样一次,尽可能多的结合抗体。然后使用10 ml wash buffer(配方3 M NaCl, 10 mM sodium borate, pH8.9)洗涤,最后用0.5 ml的elution buffer(配方100 mM glycine, pH3.0)洗脱,收集管中需预先添加有50 μl 的中性buffer(配方1 M tris, pH8.5),使用少量elution buffer洗脱以便获得高浓度抗体产物。图A,SDS-PAGE 凝胶电泳检测纯化产物。图B,将Cas9表达量低(lane #1)和高(lane #2)的细胞裂解液分别进行凝胶电泳并转膜,再使用Capturem Protein A Maxiprep纯化得到的抗体对其进行免疫印迹反应。图C,使用筛选到的抗体,对不同比例稀释(从左至右: 20 ng, 10 ng, 5 ng, 2.5 ng, 1.25 ng, 0.625 ng)的Cas9 蛋白质进行免疫印迹反应
 
 
实验操作视频:
https://www.takarabio.com/learning-centers/protein-research/his-tag-purification/protocols/video-capturem-his-miniprep
 
 
更多产品信息请点击:protein A原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
 

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5´ 去腺苷化酶 货 号 #M0331SNEB酶试剂 New England Biolabs

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5´ 去腺苷化酶                              收藏

5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S 5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S 5´ 去腺苷化酶               货   号                  #M0331S

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2,500 units
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特性

 DNA 和 RNA 5´ 末端的去腺苷化
 Aprataxin 依赖的 DNA 修复检测
 分析双核苷四磷酸

概述

酵母 去腺苷化酶是组氨酸三聚体(HIT家族中的一员,属于组氨酸三聚体核苷结合蛋白Hint)的分支。它是 aprataxin 在酵母中的直系同源物。人 aprataxin 的突变会导致神经系统疾病,如共济失调伴眼动失用症 I。通过从 DNA 端去除 AMPAMP-DNA 水解酶活性),人源 腺苷化酶可以去除未连接中间体,它还可以通过去除 3´ –磷酸和 3´ –磷酸乙醇酸修复 DNA 端损伤。人 aprataxin 作用于小分子,如核苷多磷酸双腺苷四磷酸(AppppA)和 lysyl-AMP

去腺苷化酶是由酿酒酵母(S. cerevisiae)的 HNT3基因编码。 NEB 研究显示该蛋白能从 DNA RNA末端去腺苷化,余下 末端磷酸。它也能切割 AppppA 生成 ATP AMP。未检测出其对 lysylAMP 有作用。

 

来源

从携带编码酿酒酵母 5´ 去腺苷化酶质粒的 E. coli 菌株中纯化而得。 

反应条件

20 μl 反应体系:1X NEBuffer 2 [50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],5–50 pmol 腺苷化 DNA (AMPDNA),30℃ 温育。
热失活:70℃ 20 分钟。 

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下,10 分钟从 5´ 腺苷化 DNA 寡聚体中去除 10 pmol AMP 所需的酶量。 

浓度

50,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。 

抗体纯化树脂-嗜硫树脂酶试剂盒Takara


抗体纯化树脂-嗜硫树脂
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635616 Thiophilic-Superflow Resin 10 ml ¥2,287 抗体纯化树脂-嗜硫树脂 抗体纯化树脂-嗜硫树脂 抗体纯化树脂-嗜硫树脂
Clontech 635617 Thiophilic-Superflow Resin 100 ml ¥17,880 抗体纯化树脂-嗜硫树脂 抗体纯化树脂-嗜硫树脂 抗体纯化树脂-嗜硫树脂
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Code No. 产品名称
635616   Thiophilic-Superflow Resin
635617   Thiophilic-Superflow Resin
 
■ 产品描述
使用嗜硫树脂进行抗体纯化是一种简单有效的方法,也是纯化免疫球蛋白最常用的方法,是Protein A法的经济替代品。尽管Protein A法纯化抗体很常用,但仍有一些种类的抗体,例如单链抗体IgE,IgY和IgM等不能用Protein A的方法纯化,因此嗜硫亲和层析(TAC)就可以作为一种替代方法,是此类抗体以及一般免疫球蛋白(包括IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及C3和C4 补体因子)纯化的理想选择。
 
TAC法可以简单有效地纯化蛋白质,特别适用于免疫球蛋白,可以代替Protein A从血清以及组织培养液中纯化抗体。与Protein A的免疫吸附相比,嗜硫吸附剂对免疫球蛋白有更广泛的亲和力。此外,使用嗜硫吸附剂能达到99%以上的总蛋白质回收率,而使用苯基和辛基琼脂糖吸附剂却只有92%和75%。
 
TAC对广泛物种来源的不同类别和亚类的免疫球蛋白具有广泛的特异性,并且容量与其他亲和方法相似。其优点是样品制备简单,适用于各种来源的材料以及各种浓度表达的蛋白质,洗脱条件温和,不同于洗脱pH比较极端的Protein A/Protein G分离法,可能影响抗体的稳定性。
 
■ 基本结构
 
抗体纯化树脂-嗜硫树脂
 
■ 产品特点
Thiophilic-Superflow Resin基于嗜硫亲和层析技术,通过砜硫醚配基吸附蛋白质。树脂对于不同蛋白质的吸附能力可以通过向混合物中加入不同的盐来操控,改变加入的盐浓度能够影响IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及 C3和C4 补体因子的亲和吸附能力。
与Protein A法相比,使用Thiophilic-Superflow Resin用于免疫球蛋白纯化有如下优势:
· 中性pH条件下纯化
· 选择性更广泛(IgY, IgM, IgE, scAb)
· 高线性流速
· 结合能力强(15-20 mg抗体/ml树脂)
· 可重复使用
· 纯化产物稳定性更高
 
■ 应用
抗体纯化,包括IgG, IgM和鸡的IgY。
 
■ Thiophilic-Superflow Resin的性质
性质 Thiophilic-Superflow Resin
批量法/重力流   适用
FPLC   适用
纯化规模   分析,制备
制备生产能力(mg IgG/ml树脂)   25
基质   交联的6%琼脂糖
最大线性流速 (cm/min)   5.0
最大体积流量 (ml/min)(5 x 1 cm 内径)   4.0
pH稳定性   2-10
保存   4℃,不可冷冻
 
■ 实验例
 
抗体纯化树脂-嗜硫树脂
使用Thiophilic Resin纯化单链抗体。上图为以下组分的SDS-PAGE结果:表达scFv215的细菌裂解液 (Lane 2),周质馏分 (Lane 3),Ni-NTA树脂的洗脱峰部分 (Lane 4),Thiophilic树脂的洗脱峰部分 (Lane 5). (Schulze, R. A. et al. (1994) Anal. Biochem. 220(1):212–214. Permission to reprint obtained.)。
 
 
产品详情请点击:抗体纯化树脂-嗜硫树脂
 
 

页面更新:2019-11-12 10:31:36

Poly(U) 聚合酶 货 号 #M0337SNEB酶试剂 New England Biolabs

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Poly(U) 聚合酶                              收藏

Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S Poly(U) 聚合酶               货   号                  #M0337S

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相关产品

小鼠 RNase 抑制剂
rNTP 套装

特性

 用 UTP 标记 RNA
 为 RNA 添加 poly(U) 尾,用于克隆
 研究 RNA 转染至真核细胞的稳定性和翻译效率
 2´ O-甲基的 3´ 修饰末端添加 poly(A) 尾 

概述

Poly(U) 聚合酶催化 UTP 或 ATP 转化的 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端,该反应不依赖模板的存在。 

来源

重组 E. coli ,携带有 Schizosaccharomyces pombe Cid1 的 Poly(U) 聚合酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2
[50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],加入 1 mM UTP(不随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,10 分钟催化 1 nmol 的 UMP 掺入 RNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

浓度

2,000 units/ml。

注意事项

在 NEBuffer 2 中 Poly(U) 聚合酶将催化 UTP 或 ATP 转化成 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端。Poly(U) 加尾长度随 UTP 和引物浓度而变化。低引物浓度下(< 100 pmol) Poly(U) 聚合酶的掺入率十分高。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。 

XRN-1 货 号 #M0338LNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 连接酶和修饰酶

XRN-1                              收藏

XRN-1               货   号                  #M0338L XRN-1               货   号                  #M0338L XRN-1               货   号                  #M0338L

货 号
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20 units
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特性

 从 RNA 混合物中去除含有 5´ 单磷酸的 RNA 

概述

XRN-1 单磷酸存在时,是一种 方向的高效核糖核酸外切酶。该酶也可以作用于ssDNA 单磷酸,但效率较低。
 

来源

重组 E. coli 菌株携带有表达酵母 XRN-1 基因质粒。 

反应条件

1X NEBuffer 3 [100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃ ) ],37℃ 温育。
热失活:70℃ 10 分钟。 

单位定义

1 单位指 37℃ 条件下,1 小时消化 1 μg 磷酸化酵母 RNA 所需要的酶量。 

浓度

1,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。 

protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术酶试剂盒Takara


protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem 膜技术
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635725 Capturem Protein G Miniprep 10 Columns ¥2,545
¥2,036
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635726 Capturem Protein G 96-Well Plate 1 × 96-well plate ¥5,499 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635727 Capturem Protein G Maxiprep 6 Columns ¥3,803 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635732 Capturem Protein G 24-Well Plate 1 × 24-well plate ¥5,777
¥4,622
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635745 Capturem Protein G 24-Well Plate – HC 1 × 24-well plate ¥7,788 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
Clontech 635744 Capturem Protein G 24-Well Plate – HC 4 × 24-well plate ¥26,358 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术 protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术

*红字为促销价格,促销时间: 2022年9月1日-2022年10月31日

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■ 产品简介
Capturem Protein G 系列产品是基于Protein G* 原理,结合新型膜技术的一次性抗体纯化柱,特别适用于单克隆抗体和多克隆抗体的小量快速纯化和筛选。室温下操作即可,小量纯化仅需5 min,因此无须担心抗体的降解或失活。Capturem 系列产品以高性能的尼龙膜为介质并对其进行改造,增加了膜孔表面积,对抗体的结合能力≥75 mg/cm3。产品最突出的特点是柱床体积小,可在室温下操作,纯化简单快速,可实现抗体的高浓度、高纯度纯化。产品有小量(miniprep)、中量(maxiprep)以及高通量(24 well、96 well)四种规格可供选择。
*Protein G是来源于Staphylococcus aureus的细胞壁蛋白质,与许多物种(人、大小鼠等)的单克隆或多克隆IgG型抗体分子的Fc段有高亲和性。本制品使用的是重组protein G,去掉了白蛋白结合结构域、细胞壁和细胞膜结合结构域,从而提高了与抗体Fc片段的结合特异性。
 
■ 产品特点
· 快速方便:从上样到洗脱,室温下操作小量纯化仅需5 min,无需上样后孵育
· 结合力强:膜与抗体的结合能力≥75 mg/cm3
· 高质量:样品停留时间短,从而有效地防止了抗体降解及失活,保障了下游应用的成功率
· 高纯度、高浓度:柱床体积小,带入污染少,可实现大体积洗涤,小体积洗脱
· 高灵活性:可从广泛来源的样品中纯化多种类型的抗体,如动物血清、腹水、细胞培养基等
· 一次性使用:有效减少样品间的交叉污染,单孔的纯化产量因样品类型、物种以及抗体同种型的不同而有所差别。
注:Capturem Protein G 24-Well Plate-HC(Code No. 635745/635744)经过优化,与旧版本产品(Code No. 635732)相比,收量更高
 
■ Capturem 膜原理
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 操作流程
protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
■ 产品主要参数
 
  Capturem Protein G Miniprep Capturem Protein G Maxiprep CapturemProtein G 24-Well Plate-HC CapturemProtein G 96-Well Plate
包装量 10次 6次 24 well 96 well
样品上样量*1 100~800 μl 2~20 ml 0.5~4.3 ml/well 200~1,000 μl/well
操作时长 5 min 15 min 15 min 15 min
收量*2 60 μg
protein/column
1.2 mg
protein/column
600 μg*3
protein/well
60 μg
protein/well
洗脱液使用量 100-300 μl 0.5-1.5 ml 1.8 ml 100-300 μl
 
*1. 样品与binding buffer的稀释比例为1:2~1:15。建议杂交瘤样品1:2~1:4稀释,血清样品1:15稀释。
*2. 收量多少取决于样品的类型、物种以及抗体同种型(isotype)。
*3. 这是在HEK293细胞上清液中添加1 mg小鼠IgG1时获得的收量。
 
■ Protein A和Protein G对于不同来源和亚型抗体的亲和性
Species

Antibody subtype

Protein A Protein G Protein A/G
Human Total lgG +++ +++ +++
lgG1 +++ +++ +++
lgG2 +++ +++ +++
lgG3 + +++ +++
lgG4 +++ +++ +++
lgM + +
lgD
lgA1 + +
lgA2 + +
Fab + + +
scFv + +
Mouse Total lgG +++ +++ +++
lgM
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++ +++
lgG2b +++ +++ +++
lgG3 +++ +++ +++
Rat Total lgG + ++ ++
lgG1 + ++ ++
lgG2a +++ +++
lgG2b + +
lgG2c +++ +++ +++
Rabbit Total lgG +++ +++ +++
+++ strong binding
++ medium binding
+ weak binding
– no binding
 
■ 各试剂盒组成
 
Capturem Protein G Miniprep(635725)
Miniprep Column      10个
 
Capturem Protein G Maxiprep(635727)
Maxiprep Column      6个
 
Capturem Protein G 96-Well Plate(635726)
96 well plate          1块
 
Capturem Protein G 24-Well Plate(635732)
24 well plate          1块
 
Capturem Protein G 24-Well Plate-HC(635745)
24 well plate          1块
 
Capturem Protein G 24-Well Plate-HC(635744)
24 well plate          4块
 
【注】由于Capturem Protein G系列产品不包含buffer和收集管,请按以下建议配制buffer和准备材料。
1. 纯化buffer
本制品可搭配使用磷酸盐、柠檬酸盐缓冲液等抗体纯化常用试剂。标准的buffer配方请参考说明书中内容,需要注意的是,buffer的盐浓度和pH值对纯化抗体的收量和纯度的影响会因抗体的同种型不同而不同。
2. 收集tube/plate
使用Miniprep产品进行1次纯化,需要额外准备4个2 ml tube
使用Maxiprep产品进行1次纯化,需要额外准备4个50 ml tube
使用96 well产品进行1次纯化,需要额外准备4个96 well collection plate
使用24 well产品进行1次纯化,需要额外准备4个24 well collection plate
 
 
更多产品信息请点击protein G原理的抗体快速纯化柱—Capturem™ 膜技术
 
 
 
 

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T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q 货 号 #M0351LNEB酶试剂 New England Biolabs

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T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q                              收藏

T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q               货   号                  #M0351L T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q               货   号                  #M0351L T4 RNA 连接酶 2,截短型 K227Q               货   号                  #M0351L

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相关产品

通用 miRNA 克隆接头

 
 

特性

 将预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
 将腺苷化单链引物连接至小 RNA 上,用于 cDNA 文库构建
 将腺苷化单链引物连接至 RNA 上,用于链特异性 cDNA 文库构建 

概述

 
 

T4 RNA 连接酶 2,截短型 KQT4 Rnl2tr KQ能特异性将 末端预腺苷化的 DNA RNA 连接到RNA 3´ OH 末端。反应无需 ATP,但需预腺苷化接头。

T4 Rnl2tr KQ T4 RNA 连接酶 2,截短型(NEB#M0242)的双点突变体。 K227 的突变降低了赖氨酰腺苷化。由于降低了 T4 Rnl2tr 从接头将腺苷基团转移到 RNA 5´ 磷酸基的活性, K227Q 可以减少 T4 Rnl2tr 非特异性的连接(串联体和环)。T4 Rnl2tr K227Q 中进一步突变 R55K,提高了酶的连接活性,使其与野生型 T4 Rnl2tr 连接活性水平一致。

因为不再使用 ATP,而改用预腺苷化接头,同时降低赖氨酰腺苷化酶的活性,所以连接反应的背景可以降至最低。该酶已用于二代测序 Small RNA的文库构建中,优化了接头的连接过程。

 

来源

重组 E. coli 菌株,携带有 MBP 融合表达的质粒,该质粒克隆有含编码 T4 RNA 连接酶 2 的前249 个氨基酸序列。 T4 Rnl2tr K227Q 是将 227 位的赖氨酸突变为谷氨酸。 T4 Rnl2tr KQ 分别在 55 位置进行了突变,精氨酸突变为赖氨酸、赖氨酸突变为谷氨酰胺。
 
 

反应条件

1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,1 mM DTT],25℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

随酶提供的试剂

10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000 

质保声明

无单链和双链 DNA 核酸内切酶、外切酶、 RNase 以及磷酸酶的污染。
 

单位定义

200 单位指 20 μl 反应体系中, 25℃ 条件下, 1 小时能将 80% 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端 [miRNA 通用克隆接头(NEB#S1315] 所需的酶量。单位活性检测条件请登www.neb-china.com www.neb.com
 

浓度

200,000 units/ml。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。