TaKaRa Competent Cells BL21酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

TaKaRa Competent Cells BL21
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9126	TaKaRa Competent Cell BL21	100 μl x 10	￥347

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■ 制品内容

TaKaRa Competent Cells BL21	10 × 100 μl
pUC19 DNA (0.1 ng/μl)	10 μl
SOC Medium*	10 × 1 ml

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

E.coli BL21来源于B株，为lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型，因此表达的外源蛋白质在该体系中具有更高的稳定性。本制品有利于外源蛋白质的稳定表达。
本制品可用于pCold I-IV DNA 和pCold TF DNA的蛋白质表达，但不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为BL21宿主不表达T7 RNA聚合酶。另外，不建议使用此菌株构建或制备质粒，因为它不是recA基因缺失型菌株。
注意：本制品不可用于电击法转化。

■ 保存

-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。可使用附带的pUC19 DNA确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 质量控制

转入1 ng 的pUC19 DNA，涂于含有Amp⁺的选择培养基进行筛选。
转化效率 : ≥1×10⁶ colonies /μg pUC19 DNA

■ Genotype

E.coli BL21: F^–, ompT, hsdSB (rB^–mB^–), gal, dcm

■ 注意事项

1. 将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10 ng的高纯度质粒DNA。否则转化效率会降低。

3. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。

4. 使用TE buffer溶解纯化的质粒DNA。DNA溶液如果盐浓度高，可能会降低转化效率。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth :	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φb-broth:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	20 g
	Yeast extract	5 g
	MgSO4·7H2O	5 g
用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。

6. 稀释时，使用SOC培养基。

7. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

页面更新：2022-09-23 13:24:48

SPP System™ Set酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

SPP System^™ Set
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3366	SPP System^™ Set	1 Set	￥13,278
Takara	3367	SPP System^™ I	1 Set	￥7,050
Takara	3368	SPP System^™ II	1 Set	￥7,050
Takara	3369	SPP System^™ III	1 Set	￥7,050
Takara	3370	SPP System^™ IV	1 Set	￥7,050

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■ 制品内容

SPP System Set (Code No.: 3366)

1. SPP System Set
pCold I (SP-4) DNA、pCold II (SP-4) DNA
pCold III (SP-4) DNA、pCold IV (SP-4) DNA

各20 μg

2. pMazF DNA (20 ng/μl)

0.5 μg

3. pCold I (SP-4) envZB DNA (20 ng/μl)

0.2 μg

SPP System I～IV (Code No.: 3367～3370)

1. pCold I～IV (SP-4) DNA中一个(0.5 μg/μl)

20 μg

2. pMazF DNA (20 ng/μl)

0.5 μg

3. pCold I (SP-4) envZB DNA (20 ng/μl)

0.2 μg

■ GenBank登录

	Accession No.
pCold I (SP-4) DNA	AB248600
pCold II (SP-4) DNA	AB248601
pCold III (SP-4) DNA	AB248602
pCold IV (SP-4) DNA	AB248603

■ 链长
pCold I (SP-4) DNA	4,407 bp
pCold II (SP-4) DNA	4,392 bp
pCold III (SP-4) DNA	4,377 bp
pCold IV (SP-4) DNA	4,359 bp

■ 制品说明

根据美国新泽西州医学与牙科大学的井上正顺博士小组的研究，大肠杆菌的蛋白质MazF是一种能够识别并切断单链RNA特定序列 (ACA) 的核酸内切酶 (mRNA Interferase)。利用MazF可以抑制宿主蛋白质表达，只表达目的蛋白质。利用这一技术，开发了Single Protein Production (SPP) System。在SPP System中，在保持氨基酸序列不变的情况下用非ACA序列置换目的基因中的ACA序列，然后与MazF基因共表达。大部分宿主蛋白的mRNA因为有ACA序列而被MazF分解，表达被抑制，但是目的基因的转录mRNA中不含有ACA序列，不能被MazF切断，从而使目的蛋白得到高效表达。由于目的蛋白质的不同，也有比单纯使用冷休克表达载体进行表达时表达量低的情况。构建SPP系统，首先需要通过化学合成或点突变的方法制备无ACA序列的目的基因。设计无ACA基因的时候，在确保氨基酸序列不变的情况下将ACA序列替换，同时加入必须的酶切位点。其次，将无ACA基因克隆至含有无ACA转录区域的pCold (SP-4) 载体中。至此，用于目的片段的SPP系统表达的载体准备完毕，将其与能够表达足量的MazF的pMazF载体共转化至E.coli中，形成了目的片段的SPP。 SPP System用的冷休克表达载体与pCold冷休克表达载体一样，根据TEE序列、His tag和Factor Xa酶切位点序列有无，分成4个载体，分别是pCold I～IV (SP-4) DNA，pCold IV (SP-4)在多克隆位点的上游没有附加的序列。

■ 保存
-20℃。

■ 特长
同位素标记方便：标记的目的蛋白质最大可达到宿主胞内新生蛋白质的90%。使用宿主广泛：CspA启动子来源于大肠杆菌，所以大部分的大肠杆菌都可作为宿主使用。因为共表达用载体pMazF DNA的筛选标记是氯霉素，所以具有氯霉素抗性的大肠杆菌 (例如：Rosseta等)不能作为宿主使用。

■ 纯度
用于pCold (SP-4) DNA系列载体。 1. 用双脱氧测序法确认多克隆位点。 2. 确认多克隆位点上的限制酶Nde I, Sac I, Kpn I, Xho I, BamH I, EcoR I, Hind III, Sal I, Pst I 和Xba I只有一个酶切位点。

■ SPP System 原理图

■ SPP System冷休克表达载体图谱

	TEE序列	His tag序列	Factor Xa切断序列
pCold I (SP-4) DNA	○	○	○
pCold Ⅱ (SP-4) DNA	○	○	×
pCold Ⅲ (SP-4) DNA	○	×	×
pCold Ⅳ (SP-4) DNA	×	×	×

■ MazF表达质粒pMazF DNA载体图谱

页面更新：2019-09-25 11:39:57

Oligo d(T)18 mRNA 引物货号 #S1316SNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – RNA 试剂 – cDNA 合成

Oligo d(T)18 mRNA 引物收藏

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规格

价格(元)

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#S1316S

5.0 A260 units

1,009.00

无

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概述

Oligo d(N)_n 引物适用于 mRNA 的扩增和测序，能与 mRNA 的 3´ -poly A 尾或带尾的 cDNA 退火。

注意：#S1316 5´ 末端未磷酸化。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。

Oligo d(T)23 VN 货号 #S1327SNEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – cDNA 合成

Oligo d(T)23 VN 收藏

货号

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#S1327S

1.0 A260 unit

1,079.00

有

无

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概述

Oligo d(N)_n 引物适用于 mRNA 的扩增和测序，能与 mRNA 的 3´ -poly A 尾或带尾的 cDNA 退火。

注意：#S1316 5´ 末端未磷酸化。

参考文献

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Chaperone Plasmid Set酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

Chaperone Plasmid Set
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3340	Chaperone Plasmid Set	1 Kit	￥1,602

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■ 制品内容
Plasmid pG-KJE8 (10 ng/μl)	100 μl
Plasmid pGro7 (10 ng/μl)	100 μl
Plasmid pKJE7 (10 ng/μl)	100 μl
Plasmid pG-Tf2 (10 ng/μl)	100 μl
Plasmid pTf16 (10 ng/μl)	100 μl

【注意】本制品仅限用于科研目的，凡用于商业用途，须获得Takara公司授权许可。了解详细信息以及获取相关许可文件，请致电4006518761或邮件联络service@takarabiomed.com.cn。

■ 贮存溶液
Tris-HCl (pH 8.0)	10 mM
EDTA	1 mM

■ 制品说明

蛋白质的结构和功能分析是后基因组学领域面临的挑战之一，现已受到广泛关注。表达的大量重组蛋白质需要对其结构和功能进行测定，为了满足这一需求，便开发了多种表达系统。
大肠杆菌由于系统简单，在表达系统的选择上范围广泛，因此通常被用作蛋白质表达的宿主菌。但是，外源蛋白质在E.coli中表达时，常常出现表达的蛋白质形成包涵体或被蛋白酶降解的情况，原因大多是表达的蛋白质没能进行正确的折叠，这不利于研究蛋白质功能。
已证实，分子伴侣 (Molecular Chaperones) 或称伴侣蛋白参与蛋白质的折叠过程。为探究蛋白质的体内折叠机理，已投入了大量的研究工作。HSP Research Institute, Inc.在分子伴侣研究领域做出了显著的贡献。本Chaperone Plasmid Set含有五种类型的质粒，每一种质粒都能有效表达不同类型的伴侣蛋白组，各伴侣蛋白组协同作用、共同参与蛋白质折叠。据报道，目的蛋白质与其中一种“Chaperone team”共同表达，便可增加可溶性蛋白质的回收率，而使用通常方法，由于包涵体的形成，这些表达蛋白质常常是不可回收的 (参见图1)。

图1. 伴侣蛋白对胞内蛋白质合成体系的作用

〈可使用大肠杆菌表达体系〉
伴侣蛋白质粒含有pACYC的复制起点和氯霉素抗性基因 (Cm^r基因)，通常应用在大肠杆菌表达体系中，与ColE1型、具有氨苄抗性 (Amp^r) 筛选标记的表达载体共存。各伴侣蛋白质基因位于araB启动子或Pzt-1 (tet) 启动子下游，而目的基因处于lac或其它启动子的控制之下，目的蛋白质与伴侣蛋白可分别诱导表达。另外，质粒上也具备启动子必要的元件 (araC或tetR)。需注意的是该伴侣蛋白质粒不可以与含有氯霉素抗性基因的表达质粒共同使用。例如，常用的pET系列载体等可以使用E.coli BL21 (DE3) 作为宿主，却不可以使用E.coli BL21 (DE3) pLysS和E.coli BL21 (DE3) pLysE，因为它们分别包含了带有Cm^r基因、pACYC复制起点的pLysS或pLysE质粒。
此外，可以考虑使用的宿主还有E.coli JM109。

质粒	伴侣蛋白	启动子	诱导物	抗性标记
pG-KJE8	dnaK-dnaJ-grpE	araB	L-Arabinose	Cm
pG-KJE8	groES-groEL	Pzt-1	Tetracyclin	Cm
pGro7	groES-groEL	araB	L-Arabinose	Cm
pKJE7	dnaK-dnaJ-grpE	araB	L-Arabinose	Cm
pG-Tf2	groES-groEL-tig	Pzt-1	Tetracyclin	Cm
pTf16	tig	araB	L-Arabinose	Cm

表1：各质粒编码的伴侣蛋白质种类及诱导物

■ 保存

-20℃。

■ Chaperone Plasmid载体图谱

页面更新：2021-02-25 11:22:53

Whatman7410-004Nylon Membranes 尼龙膜 NYL 47MM 1.0um 100/PK

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

【简单介绍】

Whatman高品质的尼龙滤膜适合于水溶液和大多数有机溶剂的过滤，并且适合于很多生物制剂的制备和其它滤膜无法使用的情况。它具有亲水性，不需要在过滤水溶液时可萃取的溶剂来预湿，而且它具有柔韧、耐用、抗撕裂等性能，并能在121进行高压灭菌

【简单介绍】

【详细说明】

原装进口英国Whatman7410-004Nylon Membranes 尼龙膜 NYL 47MM 1.0um 100/PK

英国Whatman7410-004Nylon Membranes 尼龙膜 NYL 47MM 1.0um 100/PK

产品介绍：

Nylon Membranes尼龙膜
应用
组织培养基、微生物介质、缓冲溶液和溶液过滤
过滤水和有机流动相
真空泵排气
亲水性膜
蛋白吸附力高
抗溶性好

技术参数–尼龙膜
孔径	0.2um	0.45um	0.8um
厚度	150-187um	150-187um	137-200um
纤维释放	否	否	否
起泡点	40-49psi	34-42psi	>13 psi
水流速@5 psi	>50mL/min	>60mL/min	>180mL/min
可耐最高温度	135℃	135℃	135℃

订货信息–尼龙膜
尺寸（mm）	孔径（um）	货号	数量/包
13	0.2	7402-001	100
13	0.45	7404-001	100
25	02	7402-002	100
25	0.45	7404-002	100
47	0.2	7402-004	100
47	0.45	7404-004	100
47	0.8	7408-004	100
90	0.2	7402-009	50
90	0.45	7404-009	50

上海金畔生物科技有限公司

文章号19656598-19656598

随机引物混合液货号 #S1330SNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

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产品资料 – RNA 试剂 – cDNA 合成

随机引物混合液收藏

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价格(元)

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#S1330S

100 μl (60 μM)

1,249.00

有

无

有

无

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概述

Oligo d(N)_n 引物适用于 mRNA 的扩增和测序，能与 mRNA 的 3´ -poly A 尾或带尾的 cDNA 退火。

注意：#S1316 5´ 末端未磷酸化。

参考文献

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Chaperone Competent Cell BL21 Series酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

Chaperone Competent Cell BL21 Series
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	9120	Chaperone Competent Cells BL21 Set	1 Set	￥2,613
Takara	9121	Chaperone Competent Cell pG-KJE8/BL21	100 μl × 10	￥764
Takara	9122	Chaperone Competent Cell pGro7/BL21	100 μl × 10	￥535
Takara	9124	Chaperone Competent Cell pG-Tf2/BL21	100 μl × 10	￥1,106
Takara	9125	Chaperone Competent Cell pTf16/BL21	100 μl × 10	￥1,232

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■ 制品内容（Code No.: 9120：100 μl × 3 × 6 种）

● Chaperone Competent Cells BL21 Set (Code No.: 9120)
1. Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21	3 × 100 μl
2. Chaperone Competent Cells pGro7/BL21	3 × 100 μl
3. Chaperone Competent Cells pKJE7/BL21	3 × 100 μl
4. Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21	3 × 100 μl
5. Chaperone Competent Cells pTf16/BL21	3 × 100 μl
6. TaKaRa Competent Cell BL21	3 × 100 μl
7. pUC19 DNA (0.1 ng/μl)	1× 10 μl
8. SOC medium^*	18 × 1 ml

● Chaperone Competent Cells pG-KJE8/BL21 (Code No.: 9121) ● Chaperone Competent Cells pGro7/BL21 (Code No.: 9122) ● Chaperone Competent Cells pG-Tf2/BL21 (Code No.: 9124) ● Chaperone Competent Cells pTf16/BL21 (Code No.: 9125)
1. Competent Cell	10 × 100 μl
2. pUC19 DNA (0.1 ng/μl)	1× 10 μl
3. SOC medium^*	10 × 1 ml

*SOC medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Chaperone Competent Cell BL21 Series是由五种分别转化一种伴侣蛋白质粒 (Chaperone Plasmid Set (Code No.: 3340)) 的Escerichia coli BL21制成的感受态细胞。
众所周知，分子伴侣参与蛋白质折叠过程，且人们已经通过大量的实验研究来表明体内蛋白折叠机理。本制品中含有五种类型的质粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pG-Tf2、pTf16)，每一种质粒都是能有效表达一组协同作用、共同参与蛋白折叠的被称作“Chaperone team”的分子伴侣。靶蛋白与其中一种“Chaperone team”共同表达，便可增加可溶性蛋白质的回收比率，而用通常方法，由于包涵体的形成，这些表达蛋白质常常是不可回收的。
E.coli BL21来源于B株，为Lon蛋白水解酶、ompT外膜蛋白水解酶缺陷型。因此，表达的外源蛋白质在该体系中有更高的稳定性。
当进行靶蛋白与“Chaperone team”共表达实验时，通常需要三步：
1. 用伴侣蛋白质粒转化宿主E.coli； 2. 用转化体制备感受态细胞；3. 用质粒转化感受态细胞并表达靶蛋白。如果使用本产品，只需一步转化就可构建靶蛋白与“Chaperone team”的共表达体系，因为使用的E.coli BL21感受态细胞已转化有一种伴侣蛋白质粒。另外，此感受态细胞有五种质粒，不含有伴侣蛋白质粒的TaKaRa Competent BL21也可作为对照。
每种E.coli BL21感受态细胞包括一种伴侣蛋白质粒，非常适合pCold DNA系列的表达。但该产品不适合于启动子为T7的蛋白质表达体系，如pET系列，因为，宿主E.coli BL21菌株不表达T7 RNA聚合酶。
注意：本产品不可用于电击法转化。

■ DNA序列

  pG-KJE8 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pGRO7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pG-TF2 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pKJE7 DNA (Fasta形式的txt文件)
  pTf16 DNA (Fasta形式的txt文件)

■ 保存

-80℃。
注意：如果不是-80℃保存，转化效率将会降低。此时，可在使用前用附带的pUC19做转化实验，确认转化效率。不能保存在液氮中。

■ 转化效率

Chaperone competent cells：转化1 ng pUC19，涂于Cm⁺和Amp⁺平板上进行筛选。
TaKaRa competent cell BL21：转化1 ng pUC19，涂于Amp⁺平板上进行筛选。
转化效率≥1×10⁶ cfu/μg pUC19

■ Genotype

E.coli BL21 : F^–, ompT, hsdSB (rB^–mB^–), gal, dcm

■ 注意事项

1. 从-80℃中只取出实验所用的感受态细胞，然后立即放入干冰/EtOH bath。开始实验前不要取出。

2. 可使用1.5 ml microtube替代FALCON tube，但可能会降低效率。

3. 使用100 μl感受态细胞转化时，高纯度DNA使用量不要超过10 ng，否则转化效率会降低。

4. 转化体系改变 (如感受态细胞使用量发生改变) ,或换用了其它tube等，需研讨转化条件 (如使用一般的1.5 ml tube时，请于42℃保温60秒)。

5. 除SOC培养基外，L-broth及φb-broth也可使用，但转化效率会有所下降。

6. 稀释时，使用SOC培养基。

7. L-broth plate :	成份	per liter
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1N NaOH调整到pH7.5，添加agar到1.5%，高压灭菌。

8. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

9. 本制品中含有的伴侣蛋白质粒带有来源于pACYC的复制起点和氯霉素抗性基因 (Cm^r)，E.coli表达系统中可以使用常用的ColE1型、具氨苄抗性 (Amp^r)筛选标记的表达载体，但不可与含有氯霉素抗性基因的表达质粒共同使用。

页面更新：2022-08-23 16:20:56

氧钒核糖核苷复合物货号 #S1402SNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

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产品资料 – RNA 试剂 – RNase 抑制

氧钒核糖核苷复合物收藏

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#S1402S

10 ml (200 mM)

999.00

有

无

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概述

氧钒核糖核苷复合物是通过 Berger 改良方法将四种 rNTP 的等摩尔混合物与氧化钒 IV 混合而成（1）。每一批复合物都要经过氧化钒 V 成分以及 RNase 活性抑制的检测。

氧钒复合物可用在 mRNA 的纯化过程中，作为外源 RNase 的抑制剂。也可在细胞裂解和蔗糖梯度细胞质成分分离过程中，抑制 RNase 活性。

参考文献

(1) Berger, S.L. and Birkenmeier, C.S. (1979) Biochemistry 18, 5143–5149.

HRV 3C Protease酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

HRV 3C Protease
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	7360	HRV 3C Protease	500 U	￥566

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■ 制品内容
HRV 3C Protease (1 U/μl)	500 Units
Cleavage Control Fusion Protein (1μg/μl)	10 μl
10×HRV 3C Cleavage Buffer	10 ml

■ 制品说明

本制品是从E.coli 中获得的人源 Rhinovirus 14编码的重组3C Protease。本酶是高纯度的6×HN标签蛋白质，具有与天然蛋白质相同的活性，能够特异性切割氨基酸序列LeuGluValLeuPheGln↓GlyPro，可有效切断含HRV 3C Protease识别序列的融合蛋白质的标签序列。由于本制品在N－末端有6×HN标签(经修饰的His标签)，使用TALON^® Metal Affinity Resin or His60 Ni Superflow Resin，应用固定化金属亲和层析(IMAC)方法极易从蛋白酶反应液中去除。另外，本酶在4℃仍具有活性，可在低温下操作，不影响目的蛋白质的活性或稳定性。本制品中附带Cleavage Control Fusion Protein，Control Protein在N－末端含6×HN标签。使用HRV 3C Protease消化Control Protein，获得52 kDa TF蛋白质和24 kDa GST肽段，通过SDS-PAGE电泳即可判定。

■ 保存

-20℃。

■ 活性定义

以Cleavage Control Fusion Protein为底物，在1×HRV 3C Cleavage Buffer的体系下，4℃反应16小时，切割100 μg底物，切割效率大于95%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

页面更新：2020-02-27 11:35:49

标准帽 m7G(5′)ppp(5′)G 货号 #S1404LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

标准帽 m7G(5′)ppp(5′)G 收藏

货号

规格

价格(元)

北京库存

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#S1404L

5 μmol

8,119.00

有

无

#S1404S

1 μmol

2,039.00

有

无

有

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概述

体外实验的初始阶段，绝大多数真核生物 mRNA 5´ 端 m⁷G 帽结构可促进翻译。对于绝大多数

RNA，帽结构都可提高 RNA 的稳定性，降低其对核酸外切酶降解的敏感性，并促进 mRNA 起始复合体的形成。在真核生物无细胞蛋白合成系统的情况下，5´ 端帽结构甚至可使原核 mRNA 的翻译效率与真核 mRNA 一样高。另外，还发现在真核生物靶 RNA 的剪切过程同样需要帽结构。

应用

• 用 T7、SP6 和 T3 RNA 聚合酶共转录加帽

• 为体外剪接分析合成 m⁷G 加帽的 RNA

• 为转染或显微注射合成 m⁷G 加帽的 RNA

HAT-标签酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

HAT-标签
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631205	HAT Protein Expression and Purification System	1 Set	￥8,518

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Code No.	产品名称
631205	HAT^™ Protein Expression & Purification System

■ 产品介绍

HAT（组氨酸亲和标签）蛋白质表达和纯化系统为蛋白质表达和纯化提供了方便且有效的解决方案。
HAT载体编码一种新的多聚组氨酸表位标签，这种标签可以使细菌中表达的蛋白质在中性或生理pH、变性或非变性条件下进行纯化。

HAT系统

    HAT表位是天然存在的非相邻组氨酸残基序列，其总电荷比具有连续His残基标签的低。
    HAT融合蛋白质的溶解度更接近野生型蛋白质，同时对固定化金属离子仍具有很强的亲合力，使用HAT系统纯化蛋白质有两个主要优点：
    ● 蛋白质是可溶的，因此它不会形成聚集体或包涵体
    ● 蛋白质可以在温和条件（例如中性pH或低咪唑浓度）下洗脱
    使用TALON树脂纯化pHAT载体表达的蛋白质是一种很好的选择，搭配分批法、重力流法或者使用TALON superflow树脂搭配中压的FPLC纯化。TALON树脂的钴离子对HAT以及其他的多聚组氨酸标签蛋白质有很强的亲和力，对其他蛋白质的亲和性很低。TALON树脂理想的选择特异性降低了背景，洗涤的步骤较少并且为中性，因此能够非常好的保持蛋白质的完整性。

pHAT载体

HAT系统包含3种pHAT载体——pHAT10/11/12，三者结构相同，只是多克隆位点处的阅读框稍有不同。每个载体都有肠激酶（EK）切割位点，用来将纯化的蛋白质的HAT序列除去。限制性酶切位点的存在是为了可以将HAT序列切除（带或不带EK位点），以便于克隆至其他载体。
单独提供的pHAT20载体，具备pHAT10/11/12的所有优点，并且提供额外的克隆位点，使用方便，更容易将您的cDNA框与HAT序列融合。

产品特点

● 在中性pH下纯化蛋白质
● 在变性或非变性条件下使用
● 蛋白质溶解度更高
● 用TALON IMAC树脂可以得到优化的纯化产物

应用

在细菌系统中更容易表达和纯化蛋白质，并且蛋白质溶解度更高。

实验例

FPLC方法纯化HAT标签蛋白质。使用组分为50 mM sodium phosphate，0.3 M NaCl，5 mM imidazole，pH7.0的buffer破碎E. coli细胞提取蛋白质并纯化，最终以150 mM imidazole进行洗脱。

图A. 使用TALON Superflow柱对细胞裂解液进行纯化
图B. SDS-PAGE 分析
M: 分子量marker

6xHis、6xHN和HAT标签的氨基酸序列

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页面更新：2019-11-11 14:47:08

标准帽 m7G(5′)ppp(5′)A 货号 #S1405LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

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货号

规格

价格(元)

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广州库存

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#S1405L

5 μmol

8,119.00

有

无

#S1405S

1 μmol

2,039.00

有

无

有

无

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概述

体外实验的初始阶段，绝大多数真核生物 mRNA 5´ 端 m⁷G 帽结构可促进翻译。对于绝大多数

应用

• 使用 T7 RNA 聚合酶从 phi2.5 启动子共转录加帽，启动子在转录起始点包含一个 A

• 为体外剪接分析合成 m⁷G 加帽的 RNA

• 为转染或显微注射合成 m⁷G 加帽的 RNA

His-标签酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

His-标签
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Clontech	631431	pET Express & Purify Kit—His60	20 Purifications	￥14,130
Clontech	631428	pET Express & Purify Kit—His60 (In-Fusion Ready)	20 Purifications	￥14,801
Clontech	631430	pET Express & Purify Kit—HisTALON	20 Purifications	￥11,247
Clontech	631429	pET Express & Purify Kit—HisTALON (In-Fusion Ready)	20 Purifications	￥11,941

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Code No.	产品名称
631431	pET Express & Purify Kit—His60
631428	pET Express & Purify Kit—His60 (In-Fusion^® Ready)
631430	pET Express & Purify Kit—HisTALON^™
631429	pET Express & Purify Kit—HisTALON^™ (In-Fusion^® Ready)

■ 产品介绍

pET表达系统是基因过表达研究中常用的细菌系统。我们提供一个完整的方案，有N端或C端的6 xHN标签载体可供选择，同时搭配IMAC纯化树脂。

pET表达系统提供高水平的蛋白质表达

    pET系统通过使用两种不同的带有lac操纵子的启动子实现2个级别的调控，因此能够提供高水平的蛋白质表达并可以对基础表达进行非常严密的控制。
    第一级别的调控来自pET6xHN系列载体。目的基因被克隆在由T7启动子和lac操纵子组成的强大的T7 lac杂交启动子下游，由于T7 RNA聚合酶对这种杂交启动子有非常强烈的选择结合性，因此会调动细胞的大部分资源来表达目的基因。
    第二级别的调控由宿主细胞执行。将T7 RNA聚合酶基因整合至宿主基因组中，由同样包含一个lac操纵子的lac UV5启动子调控。这使得T7 RNA聚合酶的表达受宿主基因组和pET6xHN载体中表达lac阻遏物的lac I基因的控制。
    在未诱导的状态下，lac阻遏物抑制T7 RNA聚合酶和目的基因的表达，当诱导期间加入IPTG时，它会与lac阻遏物结合，进而促使阻遏物与lac操纵子分离，解除抑制作用。这时T7 RNA聚合酶得以表达，再与刚刚去阻遏的T7 lac杂交启动子结合，从而转录目的基因。目的基因在宿主细胞中就可以进行高水平的蛋白质表达。

用于pET 表达&纯化系统的载体—pET6xHN

Clontech的pET表达和纯化kit中包含的pET载体（pET6xHN系列载体）能够编码N端或C端6xHN融合标签，这些在我们进行简单的In-Fusion克隆或传统的限制酶酶切法克隆时都可灵活选择，以满足用户的实验需求。

pET Express & Purify Kit—一个完整的表达&纯化系统

pET Express & Purify kit提供了IMAC树脂和缓冲液，用于纯化组氨酸标签蛋白质，有高结合力的His60镍离子树脂和高纯度的TALON钴离子树脂可供选择。试剂盒以预装重力柱的形式提供这两种树脂其中之一，并配以蛋白质提取和纯化操作必须的所有试剂。

镍离子树脂 – His60 Ni Superflow Resin

● 60 mg/ml的结合能力
● 纯度可高达95%
● 金属离子泄漏率低
● 多种产品形式，例如大量的树脂，耐压预装柱以及重力柱

产品特点

高效

可实现目的基因更高水平的表达和更严格的调控

快速

基于E. coli BL21(DE3)的系统

多功能

载体表达的6xHN标签，可选择标记在N端或者C端

方便

可以选择快速简单的In-Fusion PCR法克隆或传统的T4 DNA ligase法克隆

配备齐全

可以使用His60镍离子树脂或TALON钴离子树脂纯化目的蛋白质

■ pET Express & Purify Kit的克隆选择

■ pET Express & Purify Kit的实验流程

■ 使用pET系统在非诱导的细菌宿主细胞中表达重组蛋白质的分子机制

■ 使用pET系统在IPTG诱导的细菌宿主细胞中表达重组蛋白质的分子机制

产品详情请点击：

页面更新：2019-11-11 14:48:50

未甲基帽 G(5′)ppp(5′)A 货号 #S1406LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

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未甲基帽 G(5′)ppp(5′)A 收藏

货号

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#S1406L

5 μmol

6,209.00

无

#S1406S

1 μmol

1,549.00

无

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概述

体外实验的初始阶段，绝大多数真核生物 mRNA 5´ 端 m⁷G 帽结构可促进翻译。对于绝大多数

应用

• 使用 T7 RNA 聚合酶从 phi2.5 启动子共转录加帽，启动子在转录起始点包含一个 A

• 合成未甲基化 G 加帽的 RNA

• 合成 A 加帽的 RNA

B. subtilis Secretory Protein Expression System酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

B. subtilis Secretory Protein Expression System
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3380	B. subtilis Secretory Protein Expression System	10 Rxns	￥5,007

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■ 制品内容 (文库制作10次量)
SP DNA mixture (0.032 pmol/μl)^＊1	45 μl
pBE-S DNA (0.5 μg/μl)^＊2	20 μg
B. subtilis RIK1285 (glycerol stock)^＊3	100 μl x 2

1：与In-Fusion^®克隆系统搭配使用，可编码来源于B. subtilis* 的173种分泌信号肽的DNA混合物。 2：溶于TE buffer(pH8.0)。 3：Marburg 168 derivative : trpC2, lys1, aprEΔ3, nprR2, nprE18

■ 制品说明

使用Bacillus subtilis 作为宿主菌有利于重组蛋白质的可溶性和分泌性表达，尤其适用于含二硫键等复杂结构的蛋白质表达。与大肠杆菌表达系统相比，B. subtilis 表达的重组蛋白质不含内毒素。
T. Eggert等人的研究表明，重组蛋白的分泌水平受信号肽种类的影响十分显著。Takara Bio公司现已开发出一种使用B. subtilis 筛选分泌蛋白有效表达的系统。该系统能够从包含173种B. subtilis 来源的分泌信号肽的文库中，鉴定出适合靶蛋白分泌表达的信号肽。但是，由于B. subtilis 的质粒拷贝数非常低，因此很难在B. subtilis 中构建质粒。本系统使用pBE-S DNA作为E. coli 和B. subtilis 之间的穿梭质粒，从而可以在E. coli 中构建和传递表达质粒。
本系统包括：
SP DNA mixture——B. subtilis 分泌信号肽的DNA文库
B. subtilis / E. coli 穿梭载体pBE-S DNA
B. subtilis strain RIK1285
SP DNA mixture 包含能够编码173种B. subtilis分泌信号肽的DNA片段(用于In-Fusion克隆)。pBE-S DNA载体含有能够在B. subtilis 中发挥作用的pUB110来源的复制起始位点(pUB ori)和一个卡那霉素抗性基因(Kan^r)，以及能在E.coli 中发挥作用的pUC来源的复制起始位点(CoIE ori)和一个氨苄青霉素抗性基因(Amp^r)。此外，在多克隆位点(MCS)和His-Tag序列的上游，还有一段B. subtilis 来源的枯草杆菌蛋白酶启动子(aprE promoter)和分泌信号肽 (aprE SP)序列。含有目的基因的pBE-S DNA载体可使用限制性内切酶Mlu I 和Eco52 I线性化，然后通过Clontech的In-Fusion^®克隆方法，就可以替换aprE SP(参见下方质粒图谱)，引入SP DNA mixture中的173种分泌信号肽的DNA文库，这样就可以为目的蛋白质筛选到合适有效的分泌信号肽。
由于pBE-S DNA载体与E.coli 冷休克表达系统的pCold 载体 (Code No.: 3360～3365 和 3371)的多克隆位点相同，因此目的基因可以很容易地在这些载体之间转移。试剂盒中提供的宿主菌B. subtilis RIK1285有两种蛋白酶缺陷，因此适用于目的蛋白质的分泌表达。

B. subtilis Secretory Protein Expression System

■ 保存

SP DNA mixture和pBE-S DNA : -20℃
B. subtilis RIK1285 (glycerol stock) : -80℃

■ 使用注意

1. 可以选择使用In-Fusion HD Cloning Kit (Cat. #639648/639649/639650)，结合使用Stellar Comptent Cells (Cat. #636763/636766)。
2. SP DNA mixture是由PCR扩增获得的DNA片段，因此，PCR扩增的副产物如引物二聚体等也可能被克隆，但几率较低。

页面更新：2020-11-03 11:09:33

未甲基帽 G(5′)ppp(5′)G 货号 #S1407LNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

未甲基帽 G(5′)ppp(5′)G 收藏

货号

规格

价格(元)

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上海库存

广州库存

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苏州库存

#S1407L

5 μmol

5,629.00

有

无

#S1407S

1 μmol

1,409.00

无

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概述

体外实验的初始阶段，绝大多数真核生物 mRNA 5´ 端 m⁷G 帽结构可促进翻译。对于绝大多数

应用

• 用 T7、SP6 和 T3 RNA 聚合酶共转录加帽

• 合成未甲基化 G 加帽的 RNA

pHEK293 Ultra Expression Vector酶试剂盒Takara

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

pHEK293 Ultra Expression Vector
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	3390	pHEK293 Ultra Expression Vector I	20 μg	￥5,007
Takara	3392	pHEK293 Ultra Expression Vector II	20 μg	￥5,007

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■ 制品内容

pHEK293 Ultra Expression Vector I（Code No. 3390）

1．pHEK293 Ultra Expression Vector I

20μg（1μg /μl）

pHEK293 Ultra Expression Vector II（Code No. 3392）

1．pHEK293 Ultra Expression Vector II

20μg（1μg /μl）

2．pHEK293 Enhancer Vector

20μg（1μg /μl）

Limited Use Label License: [M86]

请先确认产品专利信息，订购时请填写专利确认书。

■ 保存

-20℃。

■ 制品说明

pHEK293 Ultra Expression Vectors是使用人源HEK293细胞可瞬时产生大量重组蛋白质的质粒载体。本制品与以往使用巨细胞病毒来源启动子的蛋白质表达载体相比，可产生其2～10倍的重组蛋白质。 pHEK293 Ultra Expression Vector I是单一质粒，转染HEK293细胞后，可大量表达目的蛋白质。而pHEK293 Ultra Expression Vector II与试剂盒中附带的pHEK293 Enhancer Vector共转染HEK 293细胞后，通过优化转染时两种质粒载体的比例，可更有效地产生目的蛋白质。

【pHEK293 Ultra Expression Vector I】

pHEK293 Ultra Expression Vector I中包含巨细胞病毒来源启动子（CMV IE promoter）、编码Trans- Activation-Responsive region（TAR）的序列、多克隆位点（MCS）、Internal Ribosome Entry Site（IRES）、Transactivator（Tat）基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶的polyA信号（HSV TK polyA）（见图1）。在MCS位点插入目的基因，转染HEK293细胞后，可瞬时大量表达目的蛋白质。

【pHEK293 Ultra Expression Vector II】

pHEK293 Ultra Expression Vector II中包含巨细胞病毒来源启动子（CMV IE promoter）、编码TAR的序列、多克隆位点（MCS）、单纯疱疹病毒胸苷激酶的polyA信号（HSV TK polyA）（见图2）。此外，试剂盒中附带了表达Tat蛋白质的质粒载体pHEK293 Enhancer Vector（见图3）。在pHEK293 Ultra Expression Vector II 的多克隆位点（MCS）插入目的基因，与pHEK293 Enhancer Vector共转染HEK293细胞后，可瞬时大量表达目的蛋白质。转染时可根据目的蛋白质表达水平来优化pHEK293 Ultra Expression Vector II 与pHEK293 Enhancer Vector的使用比例。

注：本制品是用于HEK293细胞的高表达载体。本制品应用于人源以外的哺乳动物细胞时，可能不会充分发挥本制品的高表达效果。

■ 质粒图谱

图1

图2

图3

页面更新：2017-04-11 13:31:10

Oligo d(T)25 纤维素珠（停产，有替代）货号 #S1408SNEB酶试剂 New England Biolabs

发表于2024年1月27日由whatman中国官网

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 分离和检测

Oligo d(T)₂₅ 纤维素珠（停产，有替代）收藏

货号

规格

价格(元)

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#S1408S

250 mg

1,269.00

无

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停产通知

产品于 2020 年 3 月 31 日停产。纯化带有 poly A 的mRNA 时，建议替代产品为：Oligo d(T)25 磁珠（NEB＃S1419S）； NGS 应用时，建议替代产品为：NEBNext Poly(A) mRNA 磁性分离模块（NEB＃E7490）。

概述

该产品是能用于从 Poly A 区域中分离 mRNA 的亲和基质。这种基质包含有与纤维素珠共价交联的 Oligo (dT)₂₅。

支持介质

用分光光度计来测定每克纤维素结合的 poly rA (M.W.＞100,000) 的量。

结合容量

＞ 400 A₂₆₀ units/g。

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。

Oligo d(T)18 mRNA 引物 收藏

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概述

参考文献

Oligo d(T)23 VN 收藏

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概述

参考文献

随机引物混合液 收藏

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概述

参考文献

氧钒核糖核苷复合物 收藏

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概述

参考文献

标准帽 m7G(5′)ppp(5′)G 收藏

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概述

应用

标准帽 m7G(5′)ppp(5′)A 收藏

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概述

应用

未甲基帽 G(5′)ppp(5′)A 收藏

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概述

应用

未甲基帽 G(5′)ppp(5′)G 收藏

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概述

应用

Oligo d(T)25 纤维素珠（停产，有替代） 收藏

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停产通知

概述

支持介质

结合容量

参考文献

Oligo d(T)18 mRNA 引物收藏

随机引物混合液收藏

氧钒核糖核苷复合物收藏

Oligo d(T)₂₅ 纤维素珠（停产，有替代）收藏