注:各基因的信息 (GenBank Accession、Entrez Gene、Symbol) 、Perfect Real Time Support System 的Primer Set ID及扩增片段大小信息,详见说明书中的“管家基因相关信息表”。
■ 制品说明
使用Real Time RT-PCR方法进行基因相对表达量分析时,经常使用管家基因进行mRNA的校正。为了得到正确的定量结果,选择实验体系中稳定表达的管家基因非常重要。 本制品是为使用嵌合法进行Real Time RT-PCR解析实验时,提供一系列管家基因检出用的Primer Set。可以根据需要,选择适合各实验体系的参照基因。
* EASY Dilution (for Real Time PCR) (Code No.: 9160) 可以单独购买。
■ 制品说明
在基因表达分析中,内参基因常常被用来校正目的基因的表达量。目的基因表达水平由内参基因来校正的方法即相对定量。管家基因常被作为内参基因来使用,但在某些实验中也很难确定稳定表达的基因。这种情况下,添加外源的标准RNA到反应液中作为参照,对于相对定量的准确性比较有效。 本试剂盒提供了Real Time RT-PCR实验用的外部参照,包含了对照RNA (λpolyA+ RNA-A)、稀释液 (EASY Dilution) 和用于检测的引物 (Real Time Primer for λpolyA)。对照RNA是以λ DNA片段作为模板体外转录获得约1.0 kb的polyA+ RNA,此RNA用于Real Time RT-PCR实验中研究真核生物基因表达的外部参照。 另外,由于λpolyA+ RNA-A在3’末端有polyA序列,也可以使用Oligo dT引物进行反转录反应。
■ 保存
Real Time Primer for λpolyA和EASY Dilution (for Real Time PCR):-20℃。 λpolyA+ RNA-A:-80℃。
注:各基因的信息 (GenBank Accession、Entrez Gene、Symbol) 、Perfect Real Time Support System 的Primer Set ID及扩增片段大小信息,详见说明书中的“管家基因相关信息表”。
■ 制品说明
使用Real Time RT-PCR方法进行基因相对表达量分析时,经常使用管家基因进行mRNA的校正。为了得到正确的定量结果,选择实验体系中稳定表达的管家基因非常重要。 本制品是为使用嵌合法进行Real Time RT-PCR解析实验时,提供一系列管家基因检出用的Primer Set。可以根据需要,选择适合各实验体系的参照基因。
注:各基因的信息 (GenBank Accession、Entrez Gene、Symbol) 、Perfect Real Time Support System 的Primer Set ID及扩增片段大小信息,详见说明书中的“管家基因相关信息表”。
■ 制品说明
使用Real Time RT-PCR方法进行基因相对表达量分析时,经常使用管家基因进行mRNA的校正。为了得到正确的定量结果,选择实验体系中稳定表达的管家基因非常重要。 本制品是为使用嵌合法进行Real Time RT-PCR解析实验时,提供一系列管家基因检出用的Primer Set。可以根据需要,选择适合各实验体系的参照基因。
TB Green Fast qPCR Mix (2X) (3735A/S)*4 或Probe qPCR Mix (2X) (3736A/S)*4
625 μl×10
-
-
-
625 μl×2
-
ROX Reference Dye (50X)*4
250 μl
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50 μl
-
ROX Reference Dye II (50X)*4
250 μl
-
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-
50 μl
-
*1 Cell Lysis用试剂
3735A/3736A/3737A/3738A 100 次量
3735S/3736S/3737S 20 次量
*2 RT(反转录)试剂
3735A/3736A/3737A/3738A 100 次量
3735S/3736S/3737S 20 次量
*1 和*2 使用不够时,可另行购买: · CellAmp Direct Lysis and RT set(Code No. 3737S/A):*1 和*2 的试剂 · CellAmp Direct Lysis set(Code No. 3738A):*1 的试剂 · CellAmp Direct RT Enzyme set(Code No. 3739A): *2 的试剂
*3 包含Oligo dT Primer和Random 6 mers
*4 qPCR试剂
3735A/3736A 500 次量
3735S/3736S 100 次量
Limited Use Label License 3735:[M82]
■ 制品说明
CellAmp Direct RT-qPCR Kit是无需对96孔板或者其他板上培养的各种动物细胞进行RNA提取(cell line化的贴壁细胞和悬浮细胞、原代培养细胞、各种干细胞、iPS细胞等),只需简单的操作就可以进行两步法Real Time RT-PCR的试剂盒。使用该试剂盒,从培养细胞起始,最短仅需1.5小时便可以完成从模板制备到反转录反应及基因表达分析等操作。此外,该试剂盒能够有效去除基因组DNA,对于有基因组DNA混入而出现问题的解析(难于设计包含exon junction的引物,分析基因表达量低的样品等)可以很好的发挥作用。TB Green检测及probe检测用两步法Real Time RT-PCR试剂也包含在此试剂盒中,因此无需另行准备,即可轻松地进行基因表达分析。
*试剂盒中的qPCR试剂与以下产品相同,使用不够时请另行购买 使用3735A/B时: TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 使用3736A/B时: Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B)
■ 保存
-20℃。
CellAmp Washing Buffer 和 CellAmp Lysis Buffer II
融解后置于4℃保存,注意防止污染。
3735S/A:TB Green Fast qPCR Mix(2X)
4℃可稳定保存6个月。避光保存,避免污染。
长期保存时请于-20℃保存。TB Green Fast qPCR Mix(2X)融解后可4℃保存,于6个月内使用完。
CellAmp™ Direct Prep Kit for RT-PCR (Real Time) & Protein Analysis
品牌
Code No.
产品名称
包装量
价格(元)
说明书
数量
Takara
3733Q
CellAmp™ Direct Prep Kit for RT-PCR (Real Time) & Protein Analysis
25 Rxns
¥197
Takara
3733
CellAmp™ Direct Prep Kit for RT-PCR (Real Time) & Protein Analysis
200 Rxns
¥1,091
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无标题文档
■ 制品内容 (Code No.: 3733: 200次量)*
CellAmp Washing Buffer
12.5 ml × 2支
CellAmp Processing Buffer
10 ml
DNase I for Direct RNA Prep
200 μl
5X Loading Buffer
1 ml × 2支
1 M DTT (Dithiothreitol)
100 μl × 2支
* 使用96孔板时,200孔培养细胞的反应次数。
■ 制品说明
本制品是从96孔板或其他各种培养板培养的动物细胞中制备细胞裂解液的试剂盒。制备的细胞裂解液可直接使用One Step或Two Step Real Time RT-PCR法对mRNA表达量进行解析,或使用Western Blot方法对蛋白质表达量进行解析。使用本试剂盒快捷方便,操作简单,可在10分钟内完成从培养细胞中制备样品,不需要进行核酸精制和蛋白质提取,可以直接作为Real Time RT-PCR反应的模板或者作为Western Blot实验用的样品。另外,试剂盒中添加的SDS-PAGE用Loading Buffer中不含2-ME,可以在不含2-ME条件下进行蛋白质印迹分析。 使用本试剂盒制备的细胞裂解液可与One Step TB GreenPrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time)等One Step Real Time RT-PCR试剂组合使用,2小时内便可完成基因检测分析。如果与反转录试剂PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time) 等组合使用,可在30分钟内完成cDNA合成。本试剂盒可与大多数Takara的Real Time RT-PCR制品组合使用。
One Step Real Time RT-PCR: One Step TB Green PrimeScript™ RT-PCR Kit II (Perfect Real Time)(Code No. RR086A/B) One Step TB Green PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time)(Code No. RR066A/B) One Step PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR064A/B) One Step TB Green PrimeScript™ PLUS RT-PCR Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR096A/B) Two Step Real Time RT-PCR: PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time) (Code No. RR037A/B) PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036A/B) TB Green Premix DimerEraser™ (Perfect Real Time) (Code No. RR091A/B) TB GreenPremix Ex Taq™ II (Perfect Real Time) (Code No. RR820A/B) TB GreenPremix Ex Taq™ (Perfect Real Time) (Code No. RR420A/B) Premix Ex Taq™ (Probe qPCR) (Code No. RR390A/B)
本制品是从少数细胞直接反转录合成cDNA,然后对反转录的cDNA进行扩增的试剂盒。扩增的cDNA可以作为Real Time PCR的模板使用。通常情况下,进行微量核酸提取时,纯化过程中核酸会有所损失,使用本制品不需要对细胞RNA和反转录的cDNA进行纯化,即可对反转录的cDNA高效扩增。 使用本试剂盒首先溶解细胞,然后使用dT Adaptor Primer(RT dT Primer 2)进行反转录反应,由mRNA合成cDNA,通过TdT酶对合成的cDNA进行dA加尾反应后,以此作为模板进行PCR反应扩增cDNA。 本制品除了能从少数细胞直接进行cDNA扩增外,也可以对微量的RNA进行cDNA扩增。 本试剂盒还添加了Exonuclease I 的处理步骤,能够抑制引物的非特异性扩增,并且提高低表达水平基因的扩增产量。
PrimeSTAR Max DNA Polymerase不仅具有PrimeSTAR HS DNA Polymerase的高扩增效率、高灵敏度和高特异性功能,还具有延伸速度快、保真性能高的PCR用DNA聚合酶。制品本身具有的高退火效率和特别开发的延伸因子使引物的退火时间和延伸时间大幅缩短,实现了PCR反应的高速化。同时,针对由于核酸含量较高而难以扩增的反应体系,也只需正常设定延伸时间即可进行扩增,大大简化了操作过程。本制品是添加了在常温下能够抑制DNA Polymerase活性和3’→5’exonuclease活性的抗体的Hot Start型DNA聚合酶。同时反应各组分已经配制成预混型的2X Premix,在常温下可以快速配置反应液。
MightyAmp DNA Polymerase是Takara公司新开发的一种具有高反应性能,特别适合2 kb左右片段扩增的DNA聚合酶。由于本酶具有很强的扩增性能,对于使用普通PCR酶难以扩增 (含有PCR阻害物) 的粗提样品显示很好的扩增能力。 MightyAmp DNA Polymerase Ver.2是对MightyAmp DNA Polymerase中的Buffer进行改良,可以将血液、动植物组织等生体直接加入到反应液中进行Direct PCR。与以前MightyAmp DNA Polymerase相同,对于含有PCR阻害物的粗提样品以及GC Rich、AT Rich的模板均可在宽广的模板范围内进行有效扩增;对低浓度起始的模板也能进行很好的扩增。 本酶是使用单克隆抗体的Hot Start型PCR扩增用DNA聚合酶,98℃高温加热前,抗体与酶结合,有效抑制聚合酶活性。
Tth DNA polymerase是把Thermus thermophilus HB-8 DNA Polymerase的基因经过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离提取而得到的,它与天然Tth DNA 聚合酶具有相同的功能。 本酶具备一般的耐热性DNA聚合酶特性,无3’—5’DNA外切酶活性,且在Mn2+离子存在的条件下,其即便在高温条件下也可以显示反转录活性,利用该特性,可用同一酶在同一管中进行反转录反应与PCR反应(1-STEP RT-PCR)。
■ 保存
-20℃。
■ 起源
Escherichia coli carrying a plasmid that encodes the Tth DNA Polymerase gene.