常见问题
◆关于Mebiol Gel的物理性能问题
Q: 当温度高于37℃(或甚至更高高达60℃),凝胶会发生什么情况?
A: 随着温度升高,凝胶会变得更硬(更凝聚)。
Q: 凝胶在2℃〜37℃是什么状态?凝胶变为溶液状态的精确温度是多少?
A: 溶胶 – 凝胶转变温度为ca.20℃
Q: 二氧化碳气体和营养物是如何提供给细胞?他们能在凝胶状态溶入细胞吗?
A: 培养基中的营养和二氧化碳可由凝胶扩散进入细胞。
Q: 当Mebiol Gel®在凝胶状态下,细胞被水凝胶包围。是否有足够的空间供细胞生长?
A: Mebiol Gel的交联点是可逆的,即使在凝胶状态(即37°C)下也一样。周边凝胶可以根据细胞的生长改变
形状而没有任何间隙/空间。
Q: 收获细胞时(溶液状态),细胞是否会发生损伤?
A: 不会
Q: 当细胞生长接触到水凝胶边缘时,是否会产生阻力?
A: 不会
Q: 可以用Mebiol Gel®来培养人肺上皮细胞吗?是否有相关研究数据?
A: 我们暂时没有相关研究数据。
Q: 在适当温度下Mebiol Gel® 从溶液转化为凝胶需要多长时间?
A: 3 msec(毫秒)
Q: 当温度在15-25℃ 时,Mebiol Gel® 是怎样一种状态?
A: 当处于转变温度时,溶液和凝胶两种状态同时存在(中间状态)。
Q: 凝胶在细胞培养条件下(37℃)的空隙有多大?
A: 非常抱歉,我们没有凝胶的孔隙率的数据,但是下面文章的讨论部分“不同的材料凝胶扩散速度”有相关
信息。
Takao et al., Novel drug delivery system using thermoreversible gelation polymer for malignant
glioma Journal of Neuro-Oncology (2005)
通常当凝胶浓度低,凝胶在材料中的“扩散速度”较高。这意味着当凝胶浓度低时,凝胶的孔隙率也较高。
然而,当凝胶浓度过低比如5%时,凝胶无法形成。
Q: 0°C-60°C是什么状态?凝胶相可逆的温度范围是?
A: 0°C-15°C: Sol溶液
15°C-20°C: 溶液和凝胶的中间状态
20°C: 溶胶-凝胶转变温度
高于 20°C: Gel凝胶
高于 37°C: 随温度升高,凝胶会变得更硬。
Q: 凝胶在37°C时的结构强度是多少??
A: 请参考以下文献。
Yoshioka H et al, A Synthetic Hydrogel with Thermoreversible Galation and Rheological Properties,
Journal of Macromolecular Science, Part A: Pure and Applied Chemistry Volume 31, Issue 1, 1994
Q: 水凝胶有孔吗?
A: 水凝胶中没有间隙和孔。
Q: 凝胶能透过CO2, N2 和 O2吗?
A: 能。
Q: 溶胶-凝胶状态可以重复转换多少次?
A: 溶胶-凝胶状态转换可以重复直到Mebiol凝胶化学分解。溶胶-凝胶重复转换的极限取决于稀释后的温度
或氧浓度。通常情况下,在冰箱能稳定存储1-2个月,长期储存,多孔板中分装的液体保持在-20°C至-80°C。
Q: 营养物分子量多少可以进入凝胶中?扩散距离与分子量的相关性是?
A: 可以在37℃通过凝胶并扩散的最大粒径分子量大约10,000-90,000(确切大小未知)。分子量的粒径数上千
如1,000-9,000,不存在通过凝胶扩散的问题,但大于此数值,则存在问题。 如果分子大小较小,扩散距离
将更长。
◆关于Mebiol Gel细胞兼容问题
Q: 当细胞在37℃生长时,我们可以更换培养基吗?
A: 37℃时,凝胶不会在水中大量溶解。因此,你可以使培养基和凝胶分层,然后更换分层后的培养基。
Q: 当Mebiol Gel®在凝胶状态下,细胞被水凝胶包围。是否有足够的空间供细胞生长?
A: Mebiol Gel的交联点是可逆的,即使在凝胶状态(即37°C)下也一样。周边凝胶可以根据细胞的生长改变
形状而没有任何间隙/空间。
Q: 凝胶适合T细胞或MSC细胞的培养吗?
A: 我们没有Mebiol gel培养T细胞的数据;关于MSC细胞,请参考以下文章:
Yuguo Lei et al., PNAS PLUS E5039–E5048 doi: 10.1073/pnas.1309408110
Q: 收获细胞时(溶液状态),细胞是否会发生损伤?
A: 不会
Q: 当细胞生长接触到水凝胶边缘时,是否会产生阻力?
A: 不会
Q: Mebiol Gel® 已成功培养的细胞有哪些?
A: 信息请见产品相关参考文献
Q: Mebiol Gel® 可用于培养肠细胞吗?有没有数据?
A: 我们暂时没有相关研究数据。
Q: Mebiol Gel® 可以用于FACS (流式细胞仪)吗?凝胶必须在哪种状态?
A: 在溶液状态下(低温),Mebiol Gel® 可以用于FACS。
Q: Mebiol Gel®可在体内使用吗?它在小鼠体内可以保留多久?
A: 可用于体内(不可用于人)。Mebiol Gel® 以凝胶形式在大鼠脑内保留超过28天。您可以参考以下文章,了解
更多信息。
T. Ozeki, K. Hashizawa, D. Kaneko, Y. Imai, H. Okada, “Treatment of rat brain tumors using
sustained-release of camptothecin from poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres in a
thermoreversible hydrogel”, Chem. Pharm. Bull. 58 (9), 1142-1147 (2010)
Q: 可以用Mebiol Gel®来培养人肺上皮细胞吗?是否有相关研究数据?
A: 我们暂时没有相关研究数据。
Q: Mebiol Gel®会对某些细胞有毒性吗?如果有,是哪些细胞?
A: Mebiol Gel® 对细胞无毒性。
Q: 是否有Mebiol Gel® 用于甲状腺细胞(正常或肿瘤)的数据?
A: 有,请参考以下:
Production of hepatitis C viruses (HCV) by 3-D culture of human hepatocyte cell line・“Production
of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the
genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b“ Virology, 351 (2), 381-392 (2006)"
◆其他问题
Q: Mebiol Gel® 的有效期是多久?
A: 生产后约2年有效。
Q: 开封使用后,剩余的凝胶可保存多久?
A: 大约可保存1个月,如较长储存,需-20℃或-80℃冷冻。
Q: 我对Mebiol Gel®很感兴趣,请问能否提供样品试用?
A: 抱歉,我们无法提供Mebiol Gel®样品试用。
Q: Mebiol Gel® 如何消毒?在凝胶内可能存在生物活体吗?
A: 通过EOG杀菌。在凝胶中不会有任何生物体。
Q: 10ml 和 50ml的Mebiol Gel® 产品需要使用何种规格的培养瓶?
A: 分别用T-25 和 T-75 培养瓶
Q: 我可以用20%凝胶浓度代替10%储存吗?我需要将它用于不同类型的培养基。
A: 可以用20%凝胶浓度代替10%储存。但是,请注意,20%的高浓度下,即使是低温,凝胶粘性也非常高,并
具有低流动性。
Q: Mebiol Gel® (MBG-PMW20-1001) 可溶于10ml 培养基,它可以溶于更大体积的培养基吗?
A: 我们建议您将10 ml规格的Mebiol Gel® 溶于10 ml培养基中。(同样,使用50 ml规格的Mebiol Gel® 需溶
于50 ml培养基)如果您Mebiol Gel® 溶液浓度太低,可能无法形成凝胶状态。比如,如果将10 ml规格
Mebiol Gel® 溶于20 ml培养基,则无法形成胶凝。
Q: 每只Mebiol Gel® 含有多少g产品?
A: 10ml规格, 含 1.0g Mebiol Gel;50ml 规格,含5.0g Mebiol Gel。
Q: 对于5g(50ml)/瓶的包装,我想将它分成更小的规格,需要如何操作?我不希望用任何的培养基溶解后再
分装,只想分装PNIPAAm-PEG本身。然后用不同的培养基溶解分装后的试剂。
A: 理想的情况是将Mebiol Gel®在液态下等分,并保存于冰箱中(-80℃)。用普通溶剂(如PBS)溶解
Mebiol Gel® #MBG-PMW20-5005 (5g),然后进行分装。并保存在冰箱中。请准备5x浓度的培养基其他
成分,按照4:1比例添加到分装的Mebiol Gel中。
Q: Mebiol Gel粉末能在室温中保存吗?
A: 能。Mebiol Gel粉末可在室温中保存。
Q: 粉色片剂是什么?
A: 氧气检测剂。与Mebiol Gel®一同能提供氧气和水分吸收。它们不是产品的一部分。