电动8道移液器 Thermo Finnpipette Novus电动8道移液器 1-10µTHM#4630300-赛默飞中国代理商

产品信息
产品名称:
电动8道移液器 Thermo Finnpipette Novus电动8道移液器 1-10µ
产品型号:
THM#4630300
电动8道移液器 Thermo Finnpipette Novus电动8道移液器 1-10µTHM#4630300 产品特点
  Finnpipette Novus 提供六种预置西文语言和*中文界面的两种语言版本电动移液器。中文版移液器具有时尚流畅的线条,轻盈舒适的手感,灵活机动的操控,简洁明了的图文操作,全新的设计理念。Thermo Scientific 首次在全球范围,*将背景光液晶显示屏技术引入移液器领域,特别适合在过亮或过暗的环境中使用移液器。● 可靠的性能:实现客户端实验室的随时校准,确保实验数据准确可靠●

电动8道移液器 Thermo Finnpipette Novus电动8道移液器 1-10µTHM#4630300
产品详细信息:

Finnpipette Novus 提供六种预置西文语言和*中文界面的两种语言版本电动移液器。中文版移液器具有时尚流畅的线条,轻盈舒适的手感,灵活机动的操控,简洁明了的图文操作,全新的设计理念。Thermo Scientific 首次在全球范围,*将背景光液晶显示屏技术引入移液器领域,特别适合在过亮或过暗的环境中使用移液器。
● 可靠的性能:实现客户端实验室的随时校准,确保实验数据准确可靠
● 持久待机:长效锂电池,一小时充电满足 4000 次的移液
● 握持舒适:zui新防锈材料,轻质耐用,结构设计充分考虑到舒适性和可控性
● 使用方便:图文界面设计简单明了,短短几分钟就能操作自如
● 可调节指靠和扣触式按钮:指靠调整角度可达 120°,左右手均可轻松操作。独特扣触式按钮设计,食指自然弯曲控制移液
● 个性化设置:提供个性化姓名设置,在 Finnpipette Novus 待机时显示
● 重量轻:zui新的轻质材料有效预防上肢劳损,即使长时间操作也不易疲劳
● 轻触推杆:设计的轻触式吸头推出动力系统,具有改进人体工效学设计,左右手均可高效、舒适操作
● 编程功能强大:设置两级菜单,按钮布局合理,全部采用即时文字提示
● 全新的背景光显示:通过消除周围环境的光线影响和提高对比度,即使在光线微弱的场所也能清晰显示菜单

PFA容量瓶(容量:500ml、高:272mm)日本三博特sanplatec

PFA容量瓶(容量:500ml、高:272mm)
产品编号: WEB18157 价格: 会员价:0元;市场价:2800元 产品特点
无金属容量瓶,最适合微量分析!
产品规格
全长(mmH):272
材料

确认材料的耐药性 >> 耐药性检索

        PFA容量瓶(容量:500ml、高:272mm)PFA容量瓶(容量:500ml、高:272mm)产品特征: .无金属的量杯。适合用于微量分析。
 树脂制,冲洗时,没有破损的担心!

●特点・高品质无金属溶出的容量瓶,物美价廉,为三博特独创的PFA容量瓶。
・ PFA容量瓶对强酸、强碱、有机溶剂都有优异的耐药性。同时瓶壁溶出的不纯物极少,可用于水质检查、ICP分析的试剂调制等实验。
・PFA 容量瓶使用吹塑成型技术制成,内底部虽然有一些起伏,可以使用涡旋搅拌器进行搅拌。
・同时提供PFA测量移液管、PFA 胶头吸管,欢迎使用。

彻底的品质管理(※图1)
每个产品都会放到照射台上进行外观检查,确认是否有异常物。
手工刻上刻度(※图2・3)
每一个PFA容量瓶上,都经人手检测,用三博特开发的刻度模具割出标线。检测所使用的电子天秤精确度为0.001g。制造出的各种容量的容量瓶刻度精确度都非常高。同时,为防止污染,不加入墨水,只以标线为准。

 

Whatman3454-651Grade 54 SFC纤维素层析纸 GR 54SFC 1.5INx300FT RL

【简单介绍】

沃特曼以高质量、高可靠性和容易操作在全世界实验室中赢得广泛赞誉。沃特曼不断寻求简单理念,致力于将让科学发现更迅速、成本更节约、时间消耗更少。

【简单介绍】

沃特曼以高质量、高可靠性和容易操作在全世界实验室中赢得广泛赞誉。沃特曼不断寻求简单理念,致力于将让科学发现更迅速、成本更节约、时间消耗更少。

【详细说明】

原装进口英国Whatman3454-651 Grade 54 SFC纤维素层析纸 GR 54SFC 1.5INx300FT RL

 

 

 

 

 

 

英国Whatman3454-651Grade 54 SFC纤维素层析纸 GR 54SFC 1.5INx300FT RL

 

 

 

 

 

Whatman纤维素层析纸产品介绍:

 

Grade 1 Chr

世界标准的层析纸。表面光滑,0.18mm厚,线性流速(水)130 mm/30min。良好的分辨率,用于常规分析分离。

 

Grade 2 Chr

0.18 mm,流速115 mm/30min,慢于1 Chr,分辨率高于1 Chr。表面光滑,特别推荐用于光学或放射扫描。

 

Grade 3 Chr

中等厚度(0.36 mm),流速130 mm/30 min,适于中量/高量样品载量的应用。常用于分离无机化合物和电泳中。

 

Grade 3MM Chr

尽管常被用作杂交滤纸,但是3MM Chr还可以用于电泳和普通化学。中等厚度(0.34 mm),被广泛用于层析和电泳,流速130 mm/30 min

 

Grade 4 Chr

厚度0.21 mm,流速180 mm/30 min,薄层析纸中流速最快的。载量相对较低时,推荐用于常规的或反复的层析试验。表面光滑,非常适合要求高速,但不需要高分辨率的应用。

 

Grade 17 Chr

厚的(0.92 mm)、高吸附量的层析纸,流速190 mm/30 min。适合最高载量应用,设计为层析和电泳样品准备纸。

 

Grade 20 Chr

0.17 mm,流速85 mm/30 min,拥有最高分辨率,能够分离非常接近的化合物。表面光滑,推荐用于未知组分的样品分离,低载量但却有高分辨率。

 

Grade 31ET Chr

0.50 mm,流速225 mm/30 min,极其快,是Whatman所有层析纸中流速最快的。厚纸、表面十分柔软,主要用于大分子电泳。

 

Grade 54 SFC

(0.18 mm)而硬的纸,高流速(180 mm/30 min.),分辨率佳,推荐用于常规层析,湿强度高。

 

Grade 2668 Chr

0.9 mm流速155 mm/10 min,用于电泳分离相对较大的分子。

 

Grade 2727 Chr

1.40 mm,流速180 mm/30 min,用于大量样品的分离。

 

 

 

 

英国Whatman3454-651Grade 54 SFC纤维素层析纸 GR 54SFC 1.5INx300FT RL
英国Whatman3454-651Grade 54 SFC纤维素层析纸 GR 54SFC 1.5INx300FT RL
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英国Whatman3454-651Grade 54 SFC纤维素层析纸 GR 54SFC 1.5INx300FT RL
英国Whatman3454-651Grade 54 SFC纤维素层析纸 GR 54SFC 1.5INx300FT RL

 

 

上海金畔生物科技有限公司

文章号19321275-19321275

定量NMR用标准液DSS-d6

定量NMR用标准液DSS-d6

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

定量NMR用标准液DSS-d6定量NMR用标准液DSS-d6



  定量NMR法是以标准物质作为基准,测定对象物质(样本)的纯度或评估浓度的一种方法。FUJIFILM和光纯药株式会社出售定量NMR用标准物质和能用于内标法的定量NMR用标准液。


定量NMR用标准液DSS-d6

◆特点


● 利用定量NMR法保证其纯度

● 无需精密称量标准物质

● 具有可信赖的应用不确定度

● 可作为外标法的标准物质使用



◆产品列表


产品编号

产品名称

规格

包装

041-33641

DSS-d6 Standard Solution

(500mg/L Deuterium Oxide Solution)

DSS-d6标准溶液(500mg/L氧化氘溶液)

定量NMR 用

1mL× 5A

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

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蛋白聚集小体检测ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

ProteoStat® Aggresome detection kit

 


◆原理

 

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

        聚集小体(Aggresome)是由一群不正常堆叠在一起的蛋白质所形成的包涵体(Inclusion Bodies)。聚集小体的出现往往也表明细胞正处于某种应激状态,比如高温、病毒感染、活性氧自由基攻击等。聚集体通过隔离毒性,聚集蛋白质,还可以通过自噬促进细胞代谢。提供细胞保护功能。

  研究人员人文与人类疾病相关的某些细胞包涵体来自于聚集小体的反应,包括与阿尔茨海默氏病相关的细胞内外的聚集小体、与帕金森氏病的神经元相关的路易体、与酒精性肝病的干细胞相关的马洛里小体、与肌萎缩侧索硬化症(ALS)的星形胶质细胞相关透明包涵体。PROTEOSTAT®聚集小体检测试剂盒提供了一种快速、特异、定量的方法来识别一个真正的细胞环境相关的神经退行性疾病抑制剂。该固定的细胞检测不需要具备生理活性的蛋白突变体或基因工程的细胞株。PROTEOSTAT®染料已经在广泛的条件下验证,与小分子调节剂一起使用,适用于具有治疗价值的化学物的筛选。优化抗体共定位研究,确定聚集蛋白物质、自噬细胞和聚集小体的形成中涉及各种蛋白之间的相互作用。

试剂盒组成

  

试剂

包装

ProteoStar™ Aggresome Detection Reagent

10 μl

Hoechst 33342 Nuclear Stain

50 μl

Proteasome Inhibitor (MG-132)

120 nM

10X Assay Buffer

25 ml

 

 ◆优点特色

 

1、特点

 

● 可靠、简便、精确的检测细胞内的蛋白质聚集反应。
● 采取了细胞固定检测方法,该方法是抗体共定位研究的优选方法。
● 可用于流式细胞实验。
● 基于细胞的灵敏的药物反应分析方法。

● 不需分离目的的蛋白或稀释样品与常规缓冲液兼容
● 在荧光微孔板中即可进行简单、灵敏、均一地检测
● 可与其他检测手段联用,获得更精确的结果
● 可检测不同蛋白的聚集
● 可检测蛋白多肽聚集程度,可用于筛选蛋白
● 与传统蛋白聚集检测染料相比更灵敏,信号更明亮
● 聚集激活剂或抑制剂
● 在宽pH(4-10)和宽离子强度范围都可使用

 

2、优点

 

● 检测样品不需要具备生理活性的蛋白突变体或基因工程的细胞株。
● 能够识别在聚集小体形成时聚集的蛋白和与其相关联的蛋白的相互作用。
● 适用于具有治疗价值的化学物的筛选。
● 首次实现了聚集小体积累的简易定量分析。
● 有助于在细胞环境中检测神经退行性疾病相关的聚集抑制剂。

 

 

◆案例应用 本产品试用的样品请看相关资料!

 ● 使用例 1:流式细胞术检测聚集小体

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

大动肝

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

  用0.2% DMSO模拟培育Jurkat细胞或在37℃下用5µM的MG-132过夜培育。然后,用proteostat®染料孵育和固定细胞,不需清洗然后直接通过流式细胞仪,在FL3信道使用488nm的激光进行分析。在MG-132处理的细胞时,红色荧光信号增加了约3倍。上述的操作会影响蛋白质聚集小体的检测。

  用0.2% DMSO模拟培育Jurkat细胞或在37℃下用5µM的MG-132过夜培育。用荧光素p62 Ab (1:500稀释原液)培育细胞。清洗细胞后,通过流式细胞仪在FL1信道使用488nm的激光进行分析。在MG132处理的细胞时,荧光素p62 Ab的抗体信号增加约2.5倍。


 ● 使用例 2:ProteoStat™ 染料与荧光染料的应用

  用5μM MG-132培育带有HeLa细胞的聚集小体12小时后(右图),加入ProteoStat®聚集小体染料(红色)和用Hoechst33342复染,然后进行观察。未经培育的聚集小体(左图)。

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

  预先用5μMMG-132培育带有HeLa细胞的聚集小体12小时后,用ProteoStat®聚集小体染料来染色观察(左上图绿色部分);与AlexaFluor®647微管蛋白抗体(左下图红色部分)共定位;通过荧光显微镜观察的合成图像(右图)。

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

  预先用5μMMG-132培育带有HeLa细胞的聚集小体12小时,用ProteoStat®聚集体小染料来染色观察(左上图),与荧光素p62的抗体(右上图)共定位,通过荧光显微镜观察的合成图像(下图)。

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

 ● 使用例 3

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

        不同搅拌速率对蛋白聚集的影响使用本产品检测后,可知搅拌速度越快,蛋白聚集程度越大

  ● 使用例 4

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

        蛋氨酸被氧化后可抑制蛋白聚集蓝色曲线为对照,没有搅拌;在搅拌速度在300rpm下, 绿色曲线与红色曲线分别表示蛋氨酸被氧化后的蛋白聚集情况。使用本产品检测后,可知蛋氨酸被氧化后可抑制蛋白聚集。

  ● 使用例 5


ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

  α-syn混合物形式聚集在被内化到M17神经母细胞瘤细胞系的细胞质膜。用α-syn单体处理M17细胞,声波处理α-SIGN PFFs或α-SYN混合物(M + F)。四天后,在固定M17细胞前,将其清洗3次,用 PROTEOSTAT®聚合染料(绿色)染色和用抗α-syn(红)和β连环蛋白(灰色)免疫染色。比例尺= 20µm。作者提到“Fibril生长和播种量α-synuclein蛋白介导的细胞凋亡中发挥重要作用。”此图来自A-L Mahul-Mellier, et al.; Cell Death & Differentiation (2015). (doi:10.1038/cdd.2015.79).

  ● 使用例 6


ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

在PROTEOSTAT®聚集小体检测试剂(A)和Hoechst 33342核染色(B)的激发和发射光谱。


  ● 使用例 7

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

  由内质网应激的自噬细胞产生的聚集小体和聚集小体类的包涵体,epi-荧光显微成像图。未经处理的K562细胞(A);加入5 mM MG-132溶液培育24小时(B);加入50 mM CQ培育24小时(C);加入100 nM毒胡萝卜素(D)。在温室下,用PROTEOSTAT® 染料(1:10,000稀释)来固定染色细胞30分钟。PROTEOSTAT® 的着色显示 聚集体 和 ALIS呈红色, DAPI 呈蓝色。(Courtesy of the Flow Cytometry Core Facility, Blizard Institute, Queen Mary University of London, London, UK)


  ● 使用例 8 内质网应激相关的细胞自噬产生蛋白聚集小体进行流式细胞仪分析


ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

  分别25,50,75mmCQ,100nM的毒胡萝卜素(TG)或5mM的MG-132处理K562细胞24小时。然后在温室下用PROTEOSTAT®染料(1:10,000稀释)固定并透化培育细胞30分钟。接着在BD LSR II的蓝色610/20nm的信道分析细胞(30,000)。Courtesy of the Flow Cytometry Core Facility, Blizard Institute, Queen Mary University of London, London, UK.

  ● 使用例 9


ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

  分别使用毒胡萝卜素(Tg,0.1微米),25,50和75微米氯喹(CQ)处理K562 细胞24小时,来诱导内质网应激和不完全自噬细胞。采用阳性对照,加入蛋白酶体抑制剂,镁 132 (5 µ M)培育 24小时。固定并透化沉淀的细胞。接着根据说明书的指示,在室温下用 300 µ l PROTEOSTAT® 聚集小体检测试剂盒 (Enzo Life Sciences)培育细胞30分钟,加入1 微克/毫升 DAPI (用来测定细胞周期)。S值聚集小体小倾向的因子(APF)相对增加,G1和G2m的S值是通过每次细胞处理后检测的结果和对照组相比而得出。S期和G1相比,ER 应激诱导剂、Tg和 50 µ M CQ的聚集小体数量呈上升趋势,同时显示蛋白酶体抑制剂,MG-132和50μMCQ下降的聚集小体数量在G2M S期比对照水平更低。Courtesy of the Flow Cytometry Core Facility, Blizard Institute, Queen Mary University of London, London, UK.

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒

ProteoStat 蛋白聚集小体检测试剂盒样品实例


ProteoStat®蛋白聚集检测试剂盒 Q&A


1.Q: ProteoStat®热稳定检测试剂盒(ENZ-51027),蛋白聚集检测试剂盒(ENZ-51023) 和ProteoStat®蛋白聚集检测试剂盒(ENZ-51035)的区别?

1.A: 1)ProteoStat®染料属于分子轮子染料(molecular rotor dye)。在溶液状态不发荧光(由于在中心的碳-碳单键周围的自由转动,分离了探针的不同芳香部分)。由于分子轮子染料接触到蛋白聚集体后,会封闭进入原纤维,形成β折叠,具有高强度荧光。类似于染核酸碱基的EB 一样。

1.A: 2)ProteoStat®热稳定检测试剂盒(ENZ-51027)用于直接监测热诱导蛋白变性引起的蛋白聚集,不检测蛋白非折叠而暴露的疏水部分。该试剂盒用于检测蛋白缓冲液,其他添加成分对蛋白稳定性的影响,在特定条件下多少温度时蛋白会聚集。

1. A 3)蛋白聚集检测试剂盒(ENZ-51023)用于检测液体状蛋白或者多肽形成聚集的情况。可用于确认蛋白保存的最优形态,筛选促进或者抑制蛋白聚集的试剂,检测分子伴侣的活性。与标准品或者已知浓度样品一起使用,可定量检测蛋白聚集。

1. A 4)ProteoStat®蛋白聚集检测试剂盒(ENZ-51035)检测变性蛋白,包括活细胞内聚集体或者聚集体样包涵体。ProteoStat®蛋白聚集检测染料在聚集小体形成时,接触到聚集蛋白时会变的更明亮,可用流式或者荧光显微镜检测。


2.Q: 使用ENZ-51035 时,是否可以终止并在在40℃过夜保存,第二天继续实验?

  A: 建议可以在加染料前终止。荧光强度在液体中会成倍降低。而且染料与蛋白长时间孵育后,会影响蛋白聚集。


3.Q: 阳性对照染色不好。

  A: 染料没有避光保存。染色时候没有避光,需要染色后立即检测。聚集蛋白不是液体。延长离心会使聚集蛋白沉淀。不要离心聚集蛋白(样品或者对照)。


4.Q: 蛋白信号饱和。

  A: 蛋白样品的浓度很高。用1×Assay Buffer 稀释样品。


5.Q: 阴性对照观察到高荧光强度。

  A: 样品含有干扰物质。该试剂可以与常规使用的缓冲液(PBS,Tris,HEPES)和赋形剂(海藻糖和蔗糖)使用,不过不要使用高浓度的吐温 20(比如:0.2%)


6.Q: 蛋白与ProteoStat®检测试剂结合是否是可逆的?

  A: ProteoStat®检测试剂与聚集蛋白的相互作用是非供价结合。所以,理论上是可逆的。但是我们没有尝试将染料从样品中去除。


7.Q: 在药物应激检测中,细胞是否可以经胰酶消化后去检测细胞中的蛋白聚集?

  A: 胰酶可以与ProteoStat®聚集检测试剂盒配套使用。细胞消化后,表面活性剂加入给细胞打孔。更大的聚集体仍然是不溶的,可以通过离心沉淀。小的聚集体通过超滤分离。表面活性剂,膜和可溶蛋白可洗掉,ProteoStat®检测试剂可用于残留蛋白。


8.Q: 在研究细胞蛋白聚集时,如何设置阳性对照?

  A: MG 132 处理的细胞可作为阳性对照。


9.Q: 细胞裂解液是否可用ProteoStat®蛋白聚集检测试剂检测?

  A: 检测细胞裂解液是有挑战的,表面活性剂会引起高背景。可以过滤去除表面活性剂。更大的聚集体仍然是不可溶的,可以通过离心沉淀。小的聚集体通过超滤分离。表面活性剂,膜和可溶蛋白可洗掉,ProteoStat®检测试剂可用于残留蛋白。


10.Q: ProteoStat®染料是否可以检测~300kDa 的蛋白二聚体?

   A: ProteoStat®可以检测从单体到二聚体转变的蛋白,结合分子筛层析法。但是信号会变的更强烈,因为聚集体更大。


11.Q: 如果样品稀释到低浓度(比如0.5mg/mL)是否会改变聚集蛋白的百分比含量?

   A: 聚集蛋白的百分比(聚集蛋白占总蛋白的比例)将保持不变。聚集蛋白的浓度会降低,信号也会减弱。如果用未聚集蛋白稀释样品,聚体蛋白的百分比会变化。


12.Q: ProteoStat®试剂盒是否可用于研究原核细胞样品的蛋白聚集?

   A: 如果膜部分去除的话,是可以检测原核细胞的。如果膜没有分离,染料会聚集在膜上,引起高背景值。


13.Q: ProteoStat®是否可检测革兰氏阴性菌的蛋白聚集?

   A: 革兰氏阴性菌外层膜的脂多糖会影响。操作手册中提到的打孔缓冲液将移除大多数细菌的内层膜,破坏革兰氏阴性菌的外层膜。所以可以观察革兰氏阴性菌的聚集和包涵体。


14.Q: 当其他蛋白共染时,如何优化减少FITC 发射过滤装置的信号?

   A: 染料的激发和发射光谱见操作手册P8。光谱显示会与FITC 有些重叠。FITC 可以与该染料一起使用,用488nm激发波长和515nm 发射波长。如果FITC 有荧光的话就会起作用。否则,ProteoStat®染料会有溢出。建立设立一个不带有FITC 标记的抗体作为对照。另外,可用Cy5 或者Coumarin 标记的抗体解决这个问题。

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【2】 Amyloidogenic lysozymes accumulate in the endoplasmic reticulum accompanied by the augmentation of ER stress signals: Y. Kamada, et al.; Biochim. Biophys. Acta 1850, 1107 (2015), Application(s): Microscopy, Abstract;

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【17】 Preconditioning stimulus of proteasome inhibitor enhances aggresome formation and autophagy in differentiated SH-SY5Y cells: Y. Bang, et al.; Neurosci. Lett. 566, 263 (2014),Abstract;

【18】 Protein deubiquitination during oocyte maturation influences sperm function during fertilisation, antipolyspermy defense and embryo development: Y.J. Yi, et al.; Reprod. Fertil. Dev. (2014), Application(s): Detection of protein aggregates in oocytes, Abstract;

【19】 Protein expression pattern of PAWP in bull spermatozoa is associated with sperm quality and fertility following artificial insemination: C.E. Kennedy, et al.; Mol. Reprod. Dev. 81, 436 (2014), Abstract;

Serine/threonine kinase 16 and MAL2 regulate constitutive secretion of soluble cargo in hepatic cells: J.G. In, et al.; Biochem. J. 463, 201 (2014), Abstract;

【20】SGTA regulates the cytosolic quality control of hydrophobic substrates: L. Wunderley, et al.; J. Cell. Sci. 127, 4728 (2014), Application(s): Dual staining with ProteoStat® dye, Abstract;Full Text

【21】 T he small heat shock protein B8 (HSPB8) confers resistance to bortezomib by promoting autophagic removal of misfolded proteins in multiple myeloma cells: M. Hamouda, et al.; Oncotarget 5, 6252 (2014), Application(s): Analysis of velcade resistant multiple myeloma human cells by WB, Assay, AbstractFull Text

【22】Aldosterone and angiotensin II induce protein aggregation in renal proximal tubules: M.U. Cheema, et al.; Physiol. Rep. 1, e00064 (2013), Application(s): Labeling of kidney homogenates, labeled particles sorted by flow cytometry and identification by LC-MS/MS ,AbstractFull Text

【23】Covalent and allosteric inhibitors of the ATPase VCP/p97 induce cancer cell death: P. Magnaghi, et al.; Nat. Chem. Biol. 9, 548 (2013), Application(s): Detection of aggresomes in human colon carcinoma HCT116 cells using fluorescence microscopy, Abstract;

【24】 Environmental stresses induce misfolded protein aggregation in plant cells in a microtubule-dependent manner: Y. Nakajima, et al.; Int. J. Mol. Sci. 14, 7771 (2013),Application(s): Detection of aggresomes using fluorescence microscopy, AbstractFull Text

【25】 In vitro changes in mitochondrial potential, aggresome formation and caspase activity by a novel 17-β-estradiol analogue in breast adenocarcinoma cells: D.S. Nkandeu, et al.; Cell. Biochem. Funct. 31, 566 (2013), Abstract;

Increased generation of cyclopentenone prostaglandins after brain ischemia and their role in aggregation of ubiquitinated proteins in neurons: H. Liu, et al.; Neurotox. Res. 24, 191 (2013), Abstract;

【26】 Macrolide antibiotics block autophagy flux and sensitize to bortezomib via endoplasmic reticulum stress-mediated CHOP induction in myeloma cells: S. Moriya, et al.; Int. J. Oncol.42, 1541 (2013), Application(s): Detection of aggresomes using flow cytometry, Abstract;Full Text

【27】Mst1 inhibits autophagy by promoting the interaction between Beclin1 and Bcl-2: Y. Maejima, et al.; Nat. Med. 19, 1478 (2013), Application(s): Detection of aggresomes in mouse heart sections using fluorescence microscopy, AbstractFull Text

【28】 N-terminally truncated forms of human cathepsin F accumulate in aggresome-like inclusions: B. Jeric, et al.; Biochim. Biophys. Acta 1833, 2254 (2013), Application(s):Detection of aggresomes using fluorescence microscopy, Abstract;

【29】 The ubiquitin proteasome system regulates the stability and activity of the glucose sensor glucokinase in pancreatic beta cells: A. Hofmeister-Brix, et al.; Biochem. J. 456, 173 (2013),AbstractFull Text

【30】 VCP Phosphorylation-Dependent Interaction Partners Prevent Apoptosis in Helicobacter pylori-Infected Gastric Epithelial Cells: C.C. Yu, et al.; PLoS One 8, e55724 (2013),Application(s): Aggresome detection in AGS human gastric epithelial cells, AbstractFull Text

【31】 Zerumbone, an electrophilic sesquiterpene, induces cellular proteo-stress leading to activation of ubiquitin-proteasome system and autophagy: K. Ohnishi, et al.; BBRC 430, 616 (2013), Application(s): Aggresome detection in mouse hepatocytes, Abstract;

【32】Autophagy in idiopathic pulmonary fibrosis: A.S. Patel, et al.; PLoS One 7, e41394 (2012),Application(s): Detection of aggresomes in lung tissue sections using fluorescence microscopy, AbstractFull Text

【33】 Decreased proteasomal activity causes age-related phenotypes and promotes the development of metabolic abnormalities: U. Tomaru, et al.; Am. J. Pathol. 180, 963 (2012),Abstract;

【34】 Mutations in the area composita protein αT-catenin are associated with arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy: J. van Hengel, et al.; Eur. Heart J. 34, 201 (2012),Abstract;

【35】 Quantitative analysis of α-synuclein solubility in living cells using split GFP complementation: A. Kothawala, et al.; PLoS One 7, e43505 (2012), Application(s):Aggresome detection in HeLa cells, AbstractFull Text

【36】 Multiple aggregates and aggresomes of C-terminal truncated human αA-crystallins in mammalian cells and protection by αB-crystallin: I. Raju, et al.; PLoS One 6, e19876 (2011), Application(s): Aggresome detection in HeLa cells, AbstractFull Text

【37】 Novel Cell- and Tissue-Based Assays for Detecting Misfolded and Aggregated Protein Accumulation Within Aggresomes and Inclusion Bodies: D. Shen, et al.; Cell Biochem. Biophys. 60, 173 (2011), AbstractFull Text

【38】Inhibitors of protein aggregation and toxicity: H. Amijee, et al.; Biochem. Soc. Trans. 37, 692 (2009), AbstractFull Text

【39】Autophagy-mediated clearance of aggresomes is not a universal phenomenon: E. Wong, et al.; Hum. Mol. Genet. 17, 2570 (2008), AbstractFull Text

【40】Chemical and biological approaches synergize to ameliorate protein-folding diseases: T.W. Mu, et al. ; Cell 134, 769 (2008), AbstractFull Text

【41】Inhibitors of the proteasome suppress homologous DNA recombination in mammalian cells: Y. Murakawa, et al.; Cancer Res. 67, 8536 (2007), Abstract;

【42】 p62SQSTM1 forms protein aggregates degraded by autophagy and has a protective effect on huntingtin-induced cell death: G. Bjørkøy, et al.; J.Cell Biol. 171, 603 (2005), Full Text

【43】Therapeutic effects of cystamine in a murine model of Huntington's disease: A. Dedeoglu, et al.; J. Neurosci. 22, 8942 (2002), Full Text

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
ENZ-51035-K100 ProteoStat® Aggresome detection kit 
ProteoStat®蛋白聚集小体检测试剂盒
100tests
ENZ-51035-0025 ProteoStat® Aggresome detection kit 
ProteoStat®蛋白聚集小体检测试剂盒
25tests

FisherbrandTM方形盖玻片12-542B12-542B-赛默飞中国代理商

产品信息
产品名称:
FisherbrandTM方形盖玻片12-542B
产品型号:
12-542B
FisherbrandTM方形盖玻片12-542B12-542B 产品特点
  由高光学度硼硅酸玻璃制成,厚度尺寸均一*耐腐蚀*预清洁,不起毛,即用型*提供方形、圆形和矩形盖 玻片*所有盖玻片均由带分隔底座 的塑料盒包装,方便取用, 每盒含 1 oz. 盖玻片(FISS175211、FIS22-031145 除外)*适用于组织学、细胞学、血液学、微生物学等*1号厚度:0.13-0.17mm 1.5号厚度:0.16-0.19mm 2号厚度:0.

FisherbrandTM方形盖玻片12-542B12-542B
产品详细信息:

由高光学度硼硅酸玻璃制成,厚度尺寸均一

*耐腐蚀

*预清洁,不起毛,即用型

*提供方形、圆形和矩形盖 玻片

*所有盖玻片均由带分隔底座 的塑料盒包装,方便取用, 每盒含 1 oz. 盖玻片(FISS175211、FIS22-031145 除外)

*适用于组织学、细胞学、血液学、微生物学等

*1号厚度:0.13-0.17mm           1.5号厚度:0.16-0.19mm

 2号厚度:0.17-0.25mm

凸头接头(30系列)(简称:30- 8MC 2C)日本三博特sanplatec

凸头接头(30系列)(简称:30- 8MC 2C)
产品编号: WEB14508 价格: 会员价:0元;市场价:0元 产品特点
简称:30- 8MC 2C
产品规格
.
材料

确认材料的耐药性 >> 耐药性检索

        凸头接头(30系列)(简称:30- 8MC 2C)凸头接头(30系列)(简称:30- 8MC 2C)产品特征

A

B

C

D

E

F

W

T(mm)

适用管外径(inch)

R

产品编号

简称

33

9

18

12

4

17

14

8

5/16

1/8

14508

30- 8MC 2C

 

 

单位:mm  接头:PTFE  螺帽:ECTFE

规格里的“R”指管螺纹的规格  W指对角边的规格

特点

同时提供NPT规格,如有需要请联系我们。

mm、inch规格管均可通用。

最高使用压力请咨询。

 

FisherbrandTM托盘包装塑料果蝇管AS508AS508-赛默飞中国代理商

产品信息
产品名称:
FisherbrandTM托盘包装塑料果蝇管AS508
产品型号:
AS508
FisherbrandTM托盘包装塑料果蝇管AS508AS508 产品特点
  直壁设计,Z大限度地减少食物松脱,提供更高效的装 料、填充和堆叠 标准包装玻璃果蝇管 ● I 型,N-51A 硼硅酸盐玻璃材质 ● 纸板托盘包装,果蝇管单个分隔 散装和托盘包装果蝇管 ● 窄口或宽口可选 ● 聚丙烯、聚苯乙烯或 K 型树脂材质 ● K 型树脂和聚丙烯管柔韧性好,耐划痕,几乎不可破碎 ● K 型树脂和聚苯乙烯管具有玻璃一样的透明度,便于观察 ● 聚丙烯管可高温高压灭

FisherbrandTM托盘包装塑料果蝇管AS508AS508
产品详细信息:

直壁设计,zui大限度地减少食物松脱,提供更高效的装 料、填充和堆叠 

标准包装玻璃果蝇管 

● I 型,N-51A 硼硅酸盐玻璃材质 

● 纸板托盘包装,果蝇管单个分隔 

散装和托盘包装果蝇管 

● 窄口或宽口可选 

● 聚丙烯、聚苯乙烯或 K 型树脂材质 

● K 型树脂和聚丙烯管柔韧性好,耐划痕,几乎不可破碎 

● K 型树脂和聚苯乙烯管具有玻璃一样的透明度,便于观察 

● 聚丙烯管可高温高压灭菌,K 型树脂和聚苯乙烯管不能 

● 散装果蝇管每箱 500 个,管口朝同一方向分层排放; 托盘包装的果蝇管放置于 10×10″ (25×25 cm) 的托盘上,管之 间有分隔,外表收缩膜包裹

Fisher 三通道闹铃计时器06-662-5-赛默飞中国代理商

产品信息
产品名称:
Fisher 三通道闹铃计时器
产品型号:
06-662-5
Fisher 三通道闹铃计时器06-662-5 产品特点
  Fisher 三通道闹铃计时器 技术参数/订购信息订货号FIS06-662-5特色连续报警Traceable证书有最长使用时间100小时分辨率1秒钟记忆功能有

Fisher 三通道闹铃计时器06-662-5
产品详细信息:

Fisher Scientific Traceable三通道闹铃计时器

产品特色

● 这种最终用户友好的计时器满足实验 室计时的所有要求。它能同时显示三 种不同的时间,能够倒数计时并发出 闹铃。它还可以用作跑表和时钟。该 产品符合政府规制和 ISO 9000 认证体系的要求

● 使用这种三行显示的工具,可以同时为三种不同的测试计时。它 的通道可以分别、也可以同时启动。计时器能够同时给出孵化、 加热和冷却持续时间的信号指示。使用者可以按 1 秒钟到 99 小时 59 分 59 秒的范围对每个通道进行设置。在到达零位后,闹铃就 会响起,同时显示屏会发出表示“时间结束”的闪烁消息,然后 计时器开始顺数。

● 这种装置的闹铃音量可以调节,用户可以针对嘈杂地区而设置高 分贝的警报,而针对安静的环境则设置低分贝警报。 闹铃可以设 为一分钟后自动静音,或是设为连续发声、直到关闭闹铃为止。 设置连续发声闹铃可以确保闹铃声不会被错过。

● 只需触碰一只按钮,记忆功能便会使装置返回到先前设定时间段 的显示画面,如果在一组分别进行的测试中使用这种工具,应当 至为理想。在跑表模式下,计时器从零开始顺数。它的显示屏还 可以同时在不同的通道上进行顺数和倒数,这样更加提高了灵活 性。设置“暂停”的次数是无限制的。装置会显示日期和时钟时 间,时间显示到秒。石英晶体的精度是 0.001%。装置配有四只 橡胶支脚,使它不会接触到生物实验室的工作台。它的电池可支 持一年的连续使用。

● 为了确保精度,这款计时器由 A2LA(A2LA 与 CNAL 的校准证 书是互相承认的)认可的 ISO 17025 校准实验室颁发了单独编号 的 Traceable 证书。这份证书表明,此项产品符合美国国家标准 技术研究院(NIST)颁布的标准。产品供货时配有Traceable证书、 AAA 碱性电池和 9.5 毫米高的液晶显示数字。它的外壳采用耐受 化学品的ABS塑料。装置尺寸为 83×76×25.4毫米,重量 85克。

PTFE管(聚四氟乙烯管)(1m)(外径×内径(mm):7φ×6φ、厚度(mm):0.5)日本三博特sanplatec

PTFE管(聚四氟乙烯管)(1m)(外径×内径(mm):7φ×6φ、厚度(mm):0.5)
产品编号: WEB5415 价格: 会员价:0元;市场价:0元 产品特点
价格以1m为单位
产品规格

PTFE管(聚四氟乙烯管)(1m)(外径×内径(mm):7φ×6φ、厚度(mm):0.5)

材料

确认材料的耐药性 >> 耐药性检索

        PTFE管(聚四氟乙烯管)(1m)(外径×内径(mm):7φ×6φ、厚度(mm):0.5)PTFE管(聚四氟乙烯管)(1m)(外径×内径(mm):7φ×6φ、厚度(mm):0.5)产品特征

●特点
.拥有不粘性。 有污秽难粘贴的特性。
 在高温,高湿,高频域的情况下,电气特性的降低极少。所以适合电绝缘的用途。
.几乎任何气侯都可以使用。
.最高使用温度是260℃、不过连续使用时请在200℃以下使用。
.和PTFE管比较, PFA管是透明的。

 

TRIAM-507

TRIAM-507

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

TRIAM-507   (N,N′-Metuhlenebisacrylamide)

   

  通过和单官能性单体重合,可以得到有架桥结构的单体。可以用本产品的添加量去调节架桥度,而且本产品是拥有适

 的亲水性和亲油性的两性单体,无论应用在水   性单体还是油性单体都没问题。

 TRIAM-507

  中文名称:N,N-亚甲基二丙烯酰胺

  CAS NO.:110-26-9

  英文缩写:MBA / BIS / NAPP

  特征:与官能单体共聚合可以得到具有交联结构的聚合物,通过调节本品的添加量可以自由控制交联度,且本品是具备

  适度的亲水性和亲油性的两性单体,可应用于水   性聚合物及油性聚合物体系。


物理性质

外观

形状:结晶~结晶性粉末
     颜色:基本白色

融点

185℃(分解)

溶解性

水:3.5g/100g:30℃
     其他:甲醇8.2g/100g:30℃、乙醇5.4g/100g:30℃



相关法规·安全性

消防法

剧毒物及剧毒物取缔法

化审法

2-1020

安卫法

公开化学物质

变异源性

1) dlt-mus-ipr 225 mg/kg mmo-sat 1 mg/plate (-S9) s
     ln-dmg-orl 600 ppm trn-mus-ipr 450 mg/kg/5D-C

经口毒性(LD50)

大鼠390mg/kg 小鼠380mg/kg

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
TRIAM-507

Fisherband深型一次性细菌培养皿Fis08-757-11直径*高100*25mm-赛默飞中国代理商

产品信息
产品名称:
Fisherband深型一次性细菌培养皿Fis08-757-11
产品型号:
直径*高100*25mm
Fisherband深型一次性细菌培养皿Fis08-757-11直径*高100*25mm 产品特点
  一次性聚苯乙烯培养皿,加深型,能容纳更多培养基,以维持更长时间的培养。经射线灭菌,聚乙烯套袋包装,20个每包。透气型:盖子内侧带三条透气棱。

Fisherband深型一次性细菌培养皿Fis08-757-11直径*高100*25mm
产品详细信息:

一次性聚苯乙烯培养皿,加深型,能容纳更多培养基,以维持更长时间的培养。
经射线灭菌,聚乙烯套袋包装,20个每包。
透气型:盖子内侧带三条透气棱。

胚胎干细胞标记物

胚胎干细胞标记物
Embryonic Stem Cell Markers

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

胚胎干细胞标记物胚胎干细胞标记物

Embryonic Stem Cell Markers

◆原理

  长期以来,科研人员一直在寻找确定干细胞的可靠方法,现在已经有一些分化抗原或膜分子作为干细胞的标记物,以用于鉴定和分离干细胞,但至今尚未找到特异的干细胞标记物。研究者认为每个细胞表面被特殊的蛋白受体所覆盖,它可以选择性结合或粘附其他的“信号”分子,由于结构多样且与信号分子亲和力不同,因此存在许多不同的受体,通常细胞通过这些受体和结合的分子相互作用并在机体内发挥适当功能,这些细胞表面受体就是干细胞标记物。人们应用干细胞受体的生物学独特性来鉴定细胞,虽然这些早期标记的功能尚有待确定,但他们独特的表达方式和特点为人们鉴定和分离干细胞提供了有用的工具。

       Enzo Life Sciences提供大量抗体用于干细胞标记物的检测,包括胚胎干细胞标记物(Embryonic Stem Cell Markers)、间质干细胞标记物(Mesenchymal Stem Cell Markers)、造血干细胞标记物(Haematopoietic Stem Cell Markers)、内皮前体细胞标记物(Endothelial Progenitor Cell Markers)、神经干细胞标记物(Neural Stem Cell Markers)等。


胚胎干细胞标记物胚胎干细胞标记物

胚胎干细胞标记物


胚胎干细胞标记物


产品编号 产品名称 规格 特异性  应用
ALX-805-085-L002 Thy-1(human),mAb(BC9-G2) 2 mL FC/IP/WB/Blocking
BML-TA1278-0100 Thy-1(human),mAb(AF9) 100 μL IHC/WB
ALX-805-027-C100 CD9(human),mAb(Gi15) 100 μg IP/WB
ALX-804-202-C100 E-cadherin,mAb(ECCD-2) 100 μg 人,小鼠,狗 IHC/WB/Blocking
ALX-804-201-C100 E-cadherin,mAb(HECE-1) 100 μg 人、豚鼠 FC/ICC/WB/Blocking
ALX-804-203-C100 E-cadherin(human),mAb(SHE78-7) 100 μg FC/IHC/WB/Blocking
ALX-804-263-C100 E-cadherin(mouse),mAb(ECCD-1) 100 μg 小鼠 Blocking
BML-IG6060-0100 betal Integrin(human),mAb(DF5) 100 μL ICC/WB
BML-IG6061-0100 betal Integrin(human),mAb(DF7) 100 μL ICC/WB
ALX-805-030-C100 CD49b/CD29    complex(human),mAb(Gi14) 100 μg FC/IHC/IP
ALX-804-621-C100 CD49f(human),mAb(MAR6) 100 μg FC/IHC/IP
ALX-801-036-C125 Breast cancer    resistance protein,mAb(BXP-53) 125 μg 人、小鼠 ICC/IHC/WB
ALX-801-036-C250 250 μg
ALX-801-029-C125 Breast cancer    resistance protein(human),mAb(BXP-21) 125 μg ICC/IHC/WB
ALX-801-029-C250 250 μg
ALX-801-027-C125 Breast cancer    resistance protein(human),mAb(BXP-34) 125 μg FC/ICC/IHC
ALX-801-027-C250 250 μg
ALX-804-233-C100 Dnmt3b,mAb(52A1018) 100 μg 人、小鼠 ICC/IHC/IP/WB
BML-GA1161-0025 Galanin,pAb 25 μL 人、大鼠等 IHC
BML-GA1161-0100 100 μL

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
ALX-805-085-L002 Embryonic Stem Cell Markers
胚胎干细胞标记物
2mL等

双链特异性直接消化cDNA削减试剂盒

双链特异性直接消化cDNA削减试剂盒
DsDD cDNA Subtraction Kit Wako

  • 产品特性
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  • 参考文献

DsDD cDNA Subtraction Kit (和光新推)双链特异性直接消化cDNA削减试剂盒

双链特异性直接消化cDNA削减试剂盒


  无需断片即可削减Tester cDNA。

  DsDD(Duplex-specific Direct Digestion) cDNA Subtraction Kit Wako是从cDNA库通过削减法配制Tester和Driver cDNA。利用Tester和cDNA混合形成组织非特异性表达的基因,再通过双链特异性DNA核酸酶-Duplex-specific nuclease分解杂交cDNA。分解后,用ExonucleaseⅠ分解去除残留Driver cDNA,从而实现在Tester cDNA中高效浓缩特异性表达的cDNA。

  本品用作解析癌细胞组织特异性功能和性质时,Tester cDNA从癌细胞组织、而Driver cDNA从正常细胞中提取,可浓缩来自癌细胞组织特异性表达的基因的cDNA 。DsDD cDNA Subtraction Kit 中的cDNA库 可作为起始材料,全部工序完成仅需2天,是划时代的技术。



◆特点


● 可从cDNA库制作

● Tester和Driver的优异选择性

● 采用Duplex-specific nuclease去除法

● 操作简单,作业工序仅需2天



试剂盒原理


双链特异性直接消化cDNA削减试剂盒

准备Tester cDNA库和Driver cDNA库。在Tester cDNA库中,cDNA插入方向要与载体一致。

1.扩增Tester cDNA

扩增DNA中在5’端添加磷酸引物使用。

2. λ 核酸外切酶处理

识别双链DNA 5’端磷酸化引物并从5’到3’开始降解。Tester没有杂交,削减效率加强。

3.限制性内切酶处理

消化两端的接头保证准确的杂交结果。

4.杂交

Tester cDNA和Driver cDNA在68℃中反应16-20小时(混合比率=1:200)。过量的Driver cDNA使大部分Tester cDNA形成单链DNA。

5.双链特异性核酸酶处理

酶特异性酶切单链DNA。高反应温度(68℃)保证反应的特异性。

6.核酸外切酶 I处理

酶特异性酶切单链DNA。非特异性基因为单链,然后被降解。反应后,Tester能特异性表达基因的单链DNA能保留。

此高效cDNA削减方法完成仅需2天。

使用案例


  利用人肝癌来源的HepG2细胞和人正常肝脏来源的cDNA库,对高表达管家基因-GAPDH和HepG2细胞中特异性表达的AFP基因进行削减。

 

双链特异性直接消化cDNA削减试剂盒

  在HepG2 cDNA和正常肝脏cDNA都能检测出GAPDH的条带,但Subtraction cDNA没有检测出条带。另外,正常肝脏组织cDNA没有检测出AFP条带,但在Subtraction cDNA中能检测到与HepF2 cDNA同等亮度的AFP条带。通过本方法得到的Subtraction cDNA能高效浓缩HepG2的特异性表达基因。

Q&A


Q:  DsDD cDNA Subtraction Kit做什么的试剂盒?

A: 将需要做比较的cDNA库用PCR进行扩增制备Tester和Driver cDNA,对DNA扩增产物进行削减的试剂盒。与传统方法相比,操作更简便,实验时间也仅需2天时间。可以将现有的cDNA库或市面售卖的cDNA库直接开始进行实验,这是传统方法所不能做到的。而且最终制备出来的Subtraction cDNA是混入管家基因较少的cDNA,可以直接应用于各种用途。

Q:  DsDD cDNA Subtraction Kit有什么优点?

A:● 直接使用现有的cDNA,全部工序完成仅需2天。

A:● 全程在DNA状态下进行,无需熟练的操作技术。cDNA的制备有非常高的选择性。

A:● 可以通过市面或用户自己准备的质粒cDNA来制备。

A:● 除了质粒以外,还可以从5’和3’端带接头的cDNA制备cDNA。

A:● 操作简便

A:● 最终制备出来的Subtraction cDNA反映最初所用的Tester cDNA。因为Tester没有经过限制性内切酶处理,所以一开始的Tester cDNA可以反映最终制备的Subtraction cDNA的状态。原理上,在载体库使用全长cDNA,就能反映Subtraction cDNA的全长。

● 只要改变Tester和Driver,就能进行反向削减。

● 制备的Subtraction cDNA可以立刻应用于各种用途。

● 制备的Subtraction cDNA中,混入管家基因的量少,所以它还可以作为载体亚克隆(系统序列)和DNA芯A: 片的探针使用。

Q:  与PCR-Select法有什么不同?

: 

起始材料

接头添加

杂交次数

house-keeping基因污染

DsDD法

cDNA库或5’和3’末端带接头的cDNA

不必要

1次

已经分解去除,

污染小

PCR-Select法

RNA

必要

2次

未经分解去除,

有污染的可能性

● PCR-Select法每次都需要通过RNA制备cDNA,DsDD法则只需cDNA库就能进行实验。另外,采用PCR-Select法必须用Rsal(4碱基内切酶)酶切,将低分子化的接头分子与3’或5’端结合。而DsDD不需要。因此最终的Subtraction cDNA能反映最初的Tester cDNA的状态。

● PCR-Select法需要进行两次杂交,而DsDD法只需一次。

● PCR-Select法需要从大量cDNA样品中用Supression-PCR对SubtactedcDNA进行特异性扩增,而DsDD法则是通过对与管家基因等共同表达的基因进行杂交后,用分解去除的方式,极力减少管家基因的污染。DsDD法的原理上是形成Subtraction cDNA群,因此可以直接应用于克隆和DNA芯片的制作。

Q:  操作DsDD法时,特别需要注意的事项是什么?

1.     使用Tester,运用单向插入的cDNA库。

Tester的cDNA库,必须对载体使用单向插入的cDNA库。若不用单向cDNA库,即使是用λ核酸外切酶处理成单链,有意链和反意链的cDNA会混为一体,Tester聚集杂交,是降低Subtraction效率的主要原因。

A:2.     使用去除低分子DNA的色谱柱

DSN(Duplex-specific nuclease)是8bp以上的完全一致的双链DNA分解酶,因此其短断片残留多。在乙醇沉淀中,无法去除这些断片或引物。引物残留的非特异性杂交,是DSN的非特异性分解的原因。DSN的分解产物在最后的PCR时,变成非特异性引物,是形成低分子断片等非特异性断片增加的原因。

A:3.     用乙醇共沉淀时,务必使用配套的Ethachinmate(乙醇沉淀核酸载体)

共沉淀时使用tRNA等核酸,会与Tester cDNA发生非特异性杂交。引起DSN的非特异性分解。

而Ethachinmate(乙醇沉淀核酸载体)是聚丙烯酰胺类的共沉淀剂,DNA回收率高达100%。即使通常不可见的沉淀也可以变为可见,在操作移液器时避免误吸。

A:4.     使用适用于1μl的移液器。

1μl的移液操作时,尽可能使用合适的吸移管操作(如Gilson公司的PIPETMAN 2P)。特别是在进行杂交时,Tester ssDNA和Driver dsDNA需要注意移液操作。这一操作中,Tester:Driver=1:200这一比率的把握尤为重要,尽可能减小在移液移过程中的误差。

A:5.     酶反应时使用PCR管。
说明书记载DNA扩增反应应尽可能使用PCR管。PCR热效率较好可以进行正确的反应。

Q:  除试剂盒外还需准备什么?

1.     Tester和Driver扩增用的cDNA库

A:2.     Tester和Driver扩增用的Primer

A:3.     参照基因扩增用Primer(GAPDH、β-Actin等)

A:4.     DNA聚合酶(TOPOTAQ DNA polymerase等)

A:5.     dNTP Mixture

A:6.     低分子DNA和Primer去除用色谱柱

A:7.     限定性酶

A:8.     苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)

A:9.     70%、99.5%乙醇

A:10.   DNA分子量marker

A:11.   琼脂糖

A:12.   溴化乙锭

A:13.   1×TAE Buffer

A:14.   Loading Buffer

A:15.   灭菌蒸馏水

Q:  DsDD是什么的缩写?

: DsDD是Duplex-specific Direct Digestion(双链特异性直接消化)的缩写。通过Duplex-specific DNA Nucelase,可以特异性切断杂交形成的DNA群。

Q:  Tester和Driver是什么?

: 特异性表达的cDNA端叫“Tester”,作为基准的cDNA一般称为“Driver”。从癌特异性cDNA库制备的cDNA为“Tester”,正常细胞来源的cDNA库配制的cDNA则为“Driver”。

Q:  应选用何种凝胶过滤柱?

: 可以使用能去除100bp以下的,市面售卖的凝胶过滤柱。Code No.:195-14451 Spin Cleaner

Q:  杂交一定要经过16小时么?

: 16~20小时都是没有问题的。建议16个小时是因为考虑到从实验当天17点开始进行杂交的话,第二天上午9点就可以进行下一项操作。

Q:  按照protocol制备Driver ds cDNA,但还是不能配出200ng/μl的浓度,应该如何解决?

: 浓度比较小的时候,请用乙醇共沉淀法操作。离心管中加入Tester 1ng、Driver 200ng后,加入无菌水100μL,Ethachinmate 1μL,3mol/L的Sodium Acetate 10μL,乙醇250μL,振荡混合后进行离心。然后去除上清,加入150μL 70%的乙醇离心后,去除上清,干燥,再加入3μL的灭菌蒸馏水进行溶解。备用于杂交试验。

杂交操作中Tester:Driver=1:200的比率十分重要。乙醇沉淀导致部分DNA缺失是没有问题的。

Q:  DSN (Duplex-specific nuclease)有什么优点?

: DSN是堪察加蟹肝脏来源的新型双链特异性DNA分解酶,可在双链DNA或DNA-RNA杂交过程中特异性切断DNA。最适宜温度55~65℃,Mg2+条件下,可用EDTA抑制其活性。因为DSN能在高温环境下进行反应,所以在DsDD法中,进行严格性较高的杂交反应。

Q:  一定要使用PCR管吗?

: 说明书记载DNA扩增反应应尽可能使用PCR管。热效率较好能进行正确的反应。

Q:  Drive ds cDNA的限定性酶处理是必要的么?

: Tester和Driver的载体相同时,需要进行限定性酶处理。目的是防止因Primer结合引起非特异性杂交而导致DSN分解。用限定性酶只剪切Tester和Driver的cDNA,相辅的cDNA杂交。通过改变Tester和Driver端的Primer set,进而减少非特异性杂交。

Q:  扩增的Tester和Driver侧的Primer set可以是相同的吗?

: 同一Set也可以,但不是酶处理本身100%的反应。未处理的Driver cDNA Primer和Tester sscDNA的Primer结合,会通过DSN被分解。为了防止上述情况,建议扩增Tester和Driver端的PrimerSet还是要区分开。

Q:  限定性酶处理时如果出现Driver cDNA的内部被切断的话,会有影响吗?

: 没有影响。即使被切断了,还是能与Tester sscDNA进行杂交。

Q:  一定要进行Exonuclease I处理吗?

: 不是必要的操作。对Subtraction cDNA使用标记探针时,Exonuclease I能分解Driver的cDNA,可降低背景。

Q:  最后,扩增削减cDNA用到的Primer需要进行磷酸化吗?

: 不用,而是需要合成新的Primer。可以的话,建议使用最初的Primer内侧区域的Primer进行PCR操作。

Q: 配制Tester cDNA和Driver cDNA时使用的plasmid DNA会有影响吗?

: 没有影响的。DsDD法用的是双链特异性DNA分解酶(DSN),可分解plasmid DNA,所以不会影响。像生物素结合法、乳胶微粒oligo(dT)固相法这些传统方法,无法去除plasmid DNA,才对转换和探针的制备等产生影响。

Q:  说明书推荐的TOPOTAQ DNA polymerase有什么特点?

: 本产品是Pyrococcus DNA polymerase和Taq DNA polymerase来源的催化结构域和甲烷细菌Methanopyruskandleri来源的非特异性DNA结合域融合的新型耐热性DNA Polymarase。本酶族带有拓朴异构酶活性。通过这个特性,仅通过酶反应就能扩增GC-rich领域。这是目前其他酶都无法轻易做到的。TOPOTAQ DNA polymerase有热启动功能,能抑制非特异性的扩增。

Q:  Ethachinmate是什么?

: Ethachinmate由NipponGene生产的,在核酸(DNA或RNA)被乙醇或异丙醇沉淀时使用的高分子载体。使用本品,能从浓度低的核酸溶液中定量回收微量核酸。加入乙醇或异丙醇后,无需行-20℃或-80℃冷却,可直接离心。回收的核酸用缓冲液溶解后,可直接作为各种酶的基质使用。

Q:  去除的Subtracted cDNA有多大?

: 和光确认的大小为500~1500bp。最初用的cDNA库和DNA扩增的的延伸时间会影响Subtracted cDNA的大小。

Q:  Subtraction的效率是多少?

: Tester端用肝癌细胞HepG2来源的cDNA,Driver端用人正常肝脏组织由来cDNA的话,Real-time PCR过程中GAPDH会被抑制至1/1,000。

Q:  对削减的基因进行亚克隆化,什么方法比较好?

: 一般采用的方法是:TA克隆或限定性酶处理后,插入目的载体,进行转换。

Q:  证明cDNA削减的方法是什么?

: 配制的Subtracted cDNA经过TA克隆后,在菌落PCR确认插入断片,接合探针,通过其在市面售卖的mRNA点膜上的斑点,判断是否有组织特异性基因存在的。还可以在数据库搜索序列,或解析DNA芯片的方法。


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
294-62001 DsDD cDNA Subtraction Kit Wako 5次用

FisherbrandS120H加热型超声波清洗器FB15063S120H-赛默飞中国代理商

产品信息
产品名称:
FisherbrandS120H加热型超声波清洗器FB15063
产品型号:
S120H
FisherbrandS120H加热型超声波清洗器FB15063S120H 产品特点
  产品特色 ● LED 液晶显示加热温度和清洗时间 ● 温度达到设定值,超声清洗自动开启 ● 靠性能传感器系统 ● 仪器连续运行 12 h 后,自动休眠,利于仪器自身维护 ● 脱气模式:快速脱气,促进清洗剂混匀 ● 频扫模式:Sweep 技术令超声波声场绝对均匀分布,实现专业清洗 ● 标准模式:实现溶解,混合,分离、萃取等实验室应用 具体应用 ● 机械、电子、塑料、仪器仪表、环保

FisherbrandS120H加热型超声波清洗器FB15063S120H
产品详细信息:

产品特色 

● LED 液晶显示加热温度和清洗时间 

● 温度达到设定值,超声清洗自动开启 

● 靠性能传感器系统 

● 仪器连续运行 12 h 后,自动休眠,利于仪器自身维护 

● 脱气模式:快速脱气,促进清洗剂混匀 

● 频扫模式:Sweep 技术令超声波声场绝对均匀分布,实现专业清洗 

● 标准模式:实现溶解,混合,分离、萃取等实验室应用 具体应用 

● 机械、电子、塑料、仪器仪表、环保、医药、包装、军工、航天航工、船舶、汽车等行业的制造及维修清洗 

● 实验材料、实验器械如吸管和器皿的清洁,层析、HPLC 前的脱气处理,医疗器械、医用材料的清洁 

● 中草药、烟草有效成分萃取 

● 珠宝、首饰、手表、贵重金属、眼镜等的清洗

美国wheatonW225165色谱样品瓶W225165-赛默飞中国代理商

产品信息
产品名称:
美国wheatonW225165色谱样品瓶
产品型号:
W225165
美国wheatonW225165色谱样品瓶W225165 产品特点
  由符合ASTM TYPE Ⅰ 标准的硼硅酸盐玻璃制造,容量为1.8ml,宽瓶的设计,加样更容易。适用于绝大部分的自动进样器。瓶盖为单层PTFE膜胶垫顶开口11mm铝盖。1000个/箱。透明,带铝盖

美国wheatonW225165色谱样品瓶W225165
产品详细信息:

由符合ASTM TYPE 标准的硼硅酸盐玻璃制造,容量为1.8ml,宽瓶的设计,加样更容易。适用于绝大部分的自动进样器。瓶盖为单层PTFE膜胶垫顶开口11mm铝盖。1000/箱。透明,带铝盖

 

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Fisherbrand棉质测试手套 中号M 长20cm FIS19-013538-赛默飞中国代理商

产品信息
产品名称:
Fisherbrand棉质测试手套 中号M 长20cm FIS19-013538
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Fisherbrand棉质测试手套 中号M 长20cm FIS19-013538 产品特点
  Fisherbrand™ 棉制测试手套 中号M, 长20cm GLV LDS LSL WGHT 12PR,是常规检测测试的理想选择,也可以为手套的防水内衬,轻质,100%棉莱尔手套两只一包装 左右手通用

Fisherbrand棉质测试手套 中号M 长20cm FIS19-013538
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Fisherbrand™ 棉制测试手套 中号M, 长20cm GLV LDS LSL WGHT 12PR

是常规检测测试的理想选择,也可以为手套的防水内衬

轻质,100%棉莱尔手套

两只一包装

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Fisherbrand棉质测试手套 中号M 长20cm FIS19-013538

产品型号:FIS#19-013538 中号M 长8in.(20cm)12对/包

  • Fisherbrand棉制测试手套 FIS19-013538
  • 棉制测试手套 中号M, 长20cm
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产品型号:FIS#19-075340 特大号J 长14in.(24cm)12对/包

  • Fisherbrand棉制测试手套 FIS19-075340
  • 棉制测试手套 特大号J, 长24cm
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产品型号:FIS#19-013540 大号L 长8.5in.(22cm) 12对/包

  • Fisherbrand棉制测试手套 FIS19-013540
  • 棉制测试手套 大号L, 长22cm
  • 单位:包(12对/包)
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气动阀(规格:5352-PT3/8-TP-WO)日本三博特sanplatec

气动阀(规格:5352-PT3/8-TP-WO)
产品编号: WEB23973 价格: 会员价:0元;市场价:0元 产品特点
规格:5352-PT3/8-TP-WO
产品规格
.
材料

确认材料的耐药性 >> 耐药性检索

        气动阀(规格:5352-PT3/8-TP-WO)气动阀(规格:5352-PT3/8-TP-WO)产品特征

产品编号

规格

主体形状

T管外径

管用螺丝

操作型式

孔径

A

B

C

D

E

F

G

H

I

23973

5352-PT3/8-TP-WO

直筒

Rc3/8

双控型

Ø8

60

30

15

42

84

40

50

※单位:mm

●特点

接液部全都使用氟树脂,因此几乎可用于所有的气体和药液。

外部组成零件也是氟树脂制,即使在酸性环境等恶劣环境下也可使用。

液体的使用压强为真空到最高0.4 MPa。

有直线型和角型2种形状。

密封是采用隔膜密封,不会泄漏。另外,不会因磨损而产生灰尘。可用于半导体工业的超纯水生产线上。

紧凑设计,组装简单。

规格

最高使用压力

0.4MPa

Cv值

孔径Ø8mm

1.4

孔径Ø12mm

3.1

最高使用温度

100℃

驱动压

0.15~0.4MPa

空气驱动连接

Rc1/8

材质

机身、隔膜

PTFE

阀杆头

PFA

轴、作动器盒(Actuator case)、底板

PVDF

O形圈(作动器内)

氟橡胶

弹簧、装配用螺栓

涂料

接头螺丝

PCTFE