动物实验用研究试剂

◆实验研究用麻醉作用试剂

　　异氟醚以及七氟烷是对中枢神经起到麻痹作用的化合物。请用于实验研究。

　　注意！本产品是研究用试剂，不是医药品。请勿用作人以及动物的医疗用途。

※1: Liang, G. et al.:Anesthesiology.,112,1325(2010).

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相关产品

◆动物病理模型制备试剂

　　各种病理模型制备试剂。适用于动物实验。

抗环丁基嘧啶二聚体（CPDs）[克隆：TDM2]

用于DNA损伤和修复研究的DNA损伤抗体

　　细胞暴露于紫外线（UV）辐射而产生的DNA损伤，在细胞周期停滞、激活DNA修复，细胞杀伤，突变和肿瘤转化中起着重要作用。由UVB（280-315nm，阳光的组分）和UVC（200-280nm）诱导的DNA损伤的主要类型是cyclobutane pyrimidine dimers环丁烷嘧啶二聚体（CPDs）和（6-4）photoproducts光产物（6-4PP），两者是由同一条DNA链上相邻嘧啶核苷酸之间形成的。大约70-80%的UV诱导的DNA损伤是CPDs，剩余的是6-4PPs和6-4PPs的杜瓦异构体引起的。这些螺旋扭曲的DNA损伤在正常人细胞中通过核苷酸切除修复（NER）系统修复。 Mori等人制备了针对CPD或6-4PPs的特异性单克隆抗体。

　　这些抗体的研制，使我们能够运用ELISA法定量检测从培养细胞或皮肤表皮中纯化的DNA中的光产物，并使用间接免疫荧光（IIF）显示和测量培养的细胞或皮肤中的DNA所包含光产物。这项技术将有助于在许多研究领域中了解对UV和DNA损伤的细胞应答的分子机制，包括癌症研究，光生物学，皮肤病学，眼科，免疫学和美容学。

◆特征

●　与受损DNA特异性反应。

●　研究应用，包括ELISA和IC。

●　用于研究DNA损伤修复机制。

●　显示DNA损伤修复过程。

●　适用于广泛的研究领域：光生物学，光学医学，癌症等。

◆来源

　　杂交瘤是由小鼠骨髓瘤细胞与经过UVC照射的小牛胸腺DNA缀合甲基化BSA免疫的Balb/c小鼠脾细胞融合而成。 收集该杂交瘤（克隆TDM-2）培养物上清液，并用冰冷的硫酸铵进行沉淀。 离心后，将溶解在少量双蒸水中的沉淀用PBS透析。 然后将透析液冻干。

◆反应性

●　抗体结合单链DNA中的CPD。
●　抗体结合在每个双嘧啶序列（TT，TC，CT和CC）中形成的CPD。
●　抗体稳定地结合在由超过8个碱基组成的寡核苷酸中形成的CPD。

交叉反应性

抗体可以与细菌、人等所有生物的变性DNA中的CPD结合。

◆应用

免疫细胞化学; 1：1500 PROTOCOLS< Immunofluorescence microscopy >

ELISA; 1:1000  PROTOCOLS<ELISA>

免疫印迹; 未测试

免疫沉淀; 未测试

免疫组化; 未测试

流式细胞术; 未测试

通过ELISA测量正常人细胞中UV诱导的DNA损伤的诱导和修复

免疫荧光显示UV诱导的DNA损伤

相关资料

CPDs抗体

◆相关产品

　　Cosmo Bio新的Cyclobutane嘧啶二聚体（CPD）ELISA试剂盒使用高灵敏度和特异性的单克隆抗CPD抗体克隆TDM-2 ，该试剂盒由Mori等人建立。 TDM-2在文献中被广泛引用，并且被认为是用于CPD检测和定量的金标准抗体。Cosmo Bio的CPD ELISA试剂盒是使用TDM-2的第一个也是唯一的可商购的ELISA试剂盒。所有试剂盒组件均经过优化，可用于在培养细胞或皮肤表皮中高灵敏度CPD检测。

抗肿瘤性抗生物质

◆放线菌D（Actinomycin D）

◆丝菌霉素C（Mitomycin C）

◆盐酸柔红霉素（Daunorubicin   Hydrochloride）

◆盐酸阿霉素（Doxorubicin Hydrochloride）

◆盐酸表柔比星（Epirubicin   Hydrochloride）

相关资料详情请查看：http://www.boppard.cn/pdf/show/80.html

miRNA研究专题

　　Wako提供miRNA从分离、克隆到靶基因功能研究的一系列试剂盒。

　　列表中的产品仅仅用于实验室研究，不能作为药物、食物或人的使用。

◆简便高效的microRNA分离试剂盒——microRNA Isolation Kit

  产品编号：291-70201

　　microRNA Isolation Kit可同时分离出miRNA和及其靶基因mRNA，操作简单。分离得到的Ago IP RNA fraction，可用于miRNA和靶基因mRNA的克隆、定量和表达谱分析。

◆高效的miRNA克隆——microRNA Cloning Kit Wako

   产品编号：290-66501

●　高效率克隆microRNA

●　可克隆具有二级结构的microRNA

●　重复性好。

◆miRNA靶基因mRNA的克隆—— Target mRNA Cloning Kit Wako

  产品编号：298-68001

　　miRbase中miRNA的数目已经达到10883，但是miRNA已知的靶序列mRNA却很少， 而miRNA的靶序列研究也是其功能研究一个重要部分，由于miRNA与其靶mRNA存在不完全配对，对计算机预测造成困难。

　　miRNA、靶mRNA和Ago蛋白会以复合物RISC形式存在，本试剂盒通过从细胞中分离得到的RISC复合物中，直接有效的克隆特定miRNA的靶序列mRNA，可作为miRNA靶序列的新发现与筛选的有力工具。

特点

●　用于扩增微量 mRNA

●　可直接从Ago IP RNA片段中克隆mRNA，用于microRNA 靶基因的研究

靶序列mRNA的cDNA克隆实验路线图：

◆PCR反应的纯化试剂盒——PCR  Purification Kit Wako

  产品编号：298-67901

　　不需要使用凝胶试剂盒回收纯化，可通过PCR  Purification Kit Wako直接去除PCR扩增后DNA反应液中含有的引物、引物二聚体、dNTP、酶类如DNA聚合酶和限制内切酶等物质，操作简单，纯化后DNA溶液可用于限制酶处理、Southern杂交、标记，克隆，测序，体外转录等实验。

miRNA试剂盒（Wako）的应用：（miR-122 targeted mRNA的研究）

实验总路线图：

①　扩增到cDNA电泳检测

　　结果显示：可以从Ago IP RNA片段中成功的扩增到cDNA.

②　扩增后的cDNA的克隆

　　miR-122的潜在靶序列的cDNA克隆 ，然后通过在线软件如TargetScan 4.2对获得序列是否是靶序列进行评分。

　　※ 1. CSP：Context Score Percentile

　　靶序列mRNA的合理参数值

　　※ 2.对照细胞

　　转染了GL3（荧光素酶）siRNA的HepG2细胞

③　靶序列 mRNA 的鉴定（ qRT-PCR）

　　mRNA的定量（CSP※1 of Clone ≧ 80）

　　其中ALDOA mRNA已经证实是miR-122的靶基因，此外，通过此方法发现了很多新的miR-122潜在的靶序列。

参考文献：

Hayashida, Y., et al . A useful approach to total analysis of RISC-associated RNA., BMC Research Notes , 2, 169（2009）

Stemgent^® mRNA 重编程试剂盒

Stemgent^® mRNA Reprogramming Kit

◆产品概况

Stemgent^® mRNA 重编程试剂盒与microRNA Booster 试剂盒(00-0073)配套使用可以最快，最安全，最有效制备人iPS细胞。该方法不发生整合，不含病毒，与临床研究相关。与慢病毒，仙台病毒和其他方法相比，16天内制备iPS细胞，3周内细胞可进行传代培养。慢病毒，仙台病毒和其他方法还需要花20周时间确认没有病毒残留。该系统完全免除了病毒相关的生物污染问题的顾虑。

 Stemgent^® mRNA重编程试剂盒包括5种重编程因子，监测转染效率的细胞核GFP标记蛋白，Stemgent Pluriton™ 重编程培养基， B18R 蛋白。试剂盒和操作方法都经过充分的检测和验证。该试剂盒已经能够将人BJ成纤维细胞进行重编程，该细胞可作为对照。Stemgent^® mRNA重编程试剂盒可以使研究正更容易调控蛋白表达水平的时间，量化控制重编程因子。

◆优势

●　非整合-无需进行基因组整合

●　快速重编程，最快12天制备克隆

●　量化控制各种重编程因子

●　不需要进行多次传代和细胞克隆筛选

●　在正常细胞和疾病细胞上进行验证

●　提供培训课程（收费）和在线支持

◆相关产品

视频

Kit Contents

●    2 vials – Stemgent Oct4 mRNA, Human (Cat. No. 05-0014), 20µg

●    1 vial – Stemgent Klf4 mRNA, Human (Cat. No. 05-0015), 20µg

●    1 vial – Stemgent Sox2, Human(Cat. No. 05-0016), 20µg

●    1 vial – Stemgent Lin28 mRNA, Human(Cat. No. 05-0017), 20µg

●    1 vial – Stemgent c-Myc mRNA, Human(Cat. No. 05-0018), 20µg

●    1 vial – Stemgent nGFP mRNA (Cat. No. 05-0019), 20µg

●    B18R Recombinant Protein, Carrier-Free (Cat. No. 03-0017), 50µg

●    0.2 ml of Pluriton™ Supplement 2500X (Cat. No. 01-0016)

●    500 ml of Pluriton™ Medium (Cat. No. 01-0015)

Storage and Stability

1.      Store the box (Part 1 of 2) containing the 7 vials of mRNA, the 1 vial of B18R, and the 1 vial of Pluriton Supplement at or below -70°C. 

2.      Store the bottle (Part 2 of 2) of Pluriton Medium at -20°C.

3.    All kit components are stable for a minimum of 3 months from date of receipt, when stored as directed.

Quality Control

The Stemgent mRNA Reprogramming Kit is functionally tested for successful mRNA-based reprogramming of BJ human fibroblasts. Complete reprogramming of iPS cell colonies is confirmed by continued expression of pluripotency markers and expansion of primary iPS colonies into stable lines. All components are sterile and have tested negative for mycoplasma.

Recommended Usage

Refer to the Stemgent Protocol “Reprogramming Human Fibroblasts using the Stemgent mRNA Reprogramming Kit” for detailed instructions on material handling and productive use of the Stemgent mRNA Reprogramming Kit.

Documents

Limited Use License MIT

Limited Use License iPS Academia Japan

Related Products

●   Stemgent Oct4 mRNA, Human (Cat. No. 05-0014)

●   Stemgent Klf4 mRNA, Human (Cat. No. 05-0015)

●   Stemgent Sox2 mRNA, Human(Cat. No. 05-0016)

●   Stemgent Lin-28 mRNA, Human(Cat. No. 05-0017)

●   Stemgent c-Myc mRNA, Human(Cat. No. 05-0018)

●   Stemgent nGFP mRNA (Cat. No. 05-0019)

●   Stemedia™ NutriStem™ XF/FF Culture Medium (Cat. No. 01-0005)

●   Stemolecule™ Y27632 (Cat. No. 04-0012)

●   Stemfactor™ Fibroblast Growth Factor-basic (Human Recombinant) (Cat. No. 03-0002)

●   microRNA Booster Kit (00-0073)

      ●   RNA Transfection Kit (00-0069)

      ●   mRNA Reprogramming Factors Set: hOKSML (00-0067)

      ●   NuFF-RQ™ IRR (GSC3002G)

●   FGF-basic, Human Recombinant (03-0002)

●   XF/FF Culture Medium (01-0005)

      ●   TRA-1-60 Antibody (DyLight™ 488), Mouse anti-Human (09-0068)

      ●   TRA-1-81 Antibody (DyLight™ 488), Mouse anti-Human (09-0069)

      ●   TRA-1-81 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0011)

      ●   TRA-1-60 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0010)

●   Nanog Antibody (Affinity Purified), Rabbit anti-Mouse/Human (09-0020)

●   Oct4 Antibody (Affinity Purified), Rabbit anti-Mouse/Human (09-0023)

●   SSEA-4 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0006)

●   StemRNA™-SR Reprogramming Kit (00-0075)

Specification Sheets

●    00-0071 Product Specification Sheet

Safety Data Sheets

●   03-0017 Safety Data Sheet

●   00-0071 Safety Data Sheet

●   01-0015 Safety Data Sheet

●   05-XXXX mRNA Safety Data Sheet

●   01-0016 Safety Data Sheet

Manuals

●   User Manual: Stemgent mRNA Reprogramming System (updated January 2012)

Application Notes

●   Generation of Safe, Integration-free Human Induced Pluripotent Stem (iPS) Cells using the mRNA Reprogramming System

Brochures

●   Brochure: Stemgent mRNA Reprogramming System

Other Documents

●   Scientific Poster: mRNA Reprogramming SLAS 2011

●   FAQs: mRNA Reprogramming

●   Limited Use License MIT

●   Limited Use License iPS Academia Japan

Product Sheets

●   mRNA Reprogramming System: The fastest and safest non-integrating reprogramming technology

  [1]    Pankaj K Mandal and Derrick J Rossi. (2013) Reprogramming human fibroblasts to pluripotency 

       using modified mRNA. Nature Protocols, 8: 568 – 582.

  [2]     Angel, M., and Yanik, M.F. (2010) Innate immune suppression enables frequent transfection with 

       RNA encoding reprogramming proteins. PLoS One 5: e11756.

  [3]     Warren, L., Manos, P.D., Ahfeldt, T., Loh, Y.H., Li, H., Lau, F., Ebina, W., Mandal, P.K., Smith, Z.D.,

        Meissner, A., Daley, D.Q., Brack, A.S., Collins, J.J., Cowan, C., Schlaeger, T.M., and Rossi, D.J. (2010)

       Highly efficient reprogramming to pluripotency and directed differentiation of human cells with 

       synthetic modified mRNA. Cell Stem Cell 7: 618-630.

  [4]     Yakubov, E., Rechavi, G., Rozenblatt, S., and Givol, D. (2010) Reprogramming of human fibroblasts

       to pluripotent stem cells using mRNA of four transcription factors. Biochem Biophys Res Commun.

      394: 189-193.

Additional Publications

●     Paull D; Sevilla A; Zhou H; Hahn AK; Kim H; Napolitano C; Tsankov A; Shang L; Krumholz K; 

 Jagaseesan P; Woodard CM; Sun B; Vilboux T; Zimmer M; Forero E; Moroziewicz DN; 

Martinez H; Malicdan MCV; Weiss KA; Vensand LB; Dusenberry CR; Polus H; Sy KTL; 

Kahler DJ; Gahl WA; Solomon SL; Chang S; Meissner A; Eggan K; Noggle SA. "Automated,

 high-throughput derivation, characterization and differentiation of induced pluripotent 

stem cells." Naure Methods 12:885 (2015)

●        Briggs SF; Dominguez AA; Chavez SL; Reijo Pera RA. "XIST in human preimplantation 

embryos and iPSCs." Stem Cells 33:1771 (2015)

 ●     Josowitz R, Lu J, Falce C, D’Souza SL, Wu M, Cohen N, Dubois NC; Zhao Y; Sobie EA; Fishman

 GI; Gelb BD. Identification and purification of human induced pluripotent stem cell-derived

 atrial-like cardiomyocytes based on sarcolipin expression. PLoS ONE 9(7): e101316 (2014)