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New England Biolabs（NEB）

Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 货 号 E8211S NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 糖生物学与蛋白质工具 – 噬菌体展示

Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒 v2                              收藏

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#E8211S
10 panning experiments
7,859.00
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说明

 本产品可直接替代 NEB # E8100S，Ph.D.™-7 噬菌体展示肽库试剂盒

特性

 Ph.D.-7™ 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 包含 Ph.D.-7 噬菌体展示肽库、淘选实验中用作对照的DYKDDDDK 小鼠单克隆抗体、Protein G 磁珠，以及足够 >50 个测序反应的 -96 gIII 测序引物。Ph.D.-7 噬菌体展示肽库是一种随机 7 肽组合库，随机多肽与 M13 噬菌体的次要外壳蛋白（pIII）的 N 端融合表达。该肽库由约 109 种电转化（即独特的）的序列组成。

 
·即用型噬菌体肽库完整试剂盒（约 109 个克隆）
·新增用于对照淘选实验的单克隆抗体和 Protein G 磁珠
·相比之前的靶蛋白（链霉亲和素），对 DYKDDDDK 小鼠单克隆抗体能淘选出更可靠的表位结果
·不需要辅助噬菌体进行扩增
·利用表型和基因型之间的固有关联，在单个微量滴定孔或 EP 管中对数十亿个克隆进行筛选
 

概述

噬菌体展示是一种体外筛选技术。它可以将一系列多肽或蛋白质库展示在噬菌体颗粒的外部，而编码这些蛋白的 DNA 则位于病毒颗粒内部 (1-3)。利用展示蛋白与其编码 DNA 之间的关联，我们可以通过一种称为“生物淘选”的体外筛选方法 (4)，快速筛选出与给定靶分子（抗体、酶、细胞表面受体等）亲和结合的噬菌体展示肽。最简单的淘选方法是（见图 1）：将展示不同多肽的噬菌体库与固定在平板或小珠上的靶分子孵育，先洗去未结合的噬菌体，而后洗脱特异性结合的噬菌体，扩增洗脱下的噬菌体。重复上述结合/扩增过程，使与靶分子结合的多肽序列的噬菌体得到富集。经过 3-4轮筛选后，每个克隆通过 DNA 测序或 ELISA 鉴定克隆。
 
Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 的主要原理是将随机七肽库融合表达于 M13 噬菌体次要外壳蛋白 (pIII) 的 N 端（5-9）。随机七肽和野生型 pIII 序列之间，是一个短间隔序列（Gly-Gly-Gly）。该肽库由约 109 种电转化的序列扩增一次后获得，在 10 μl 提供的噬菌体肽库中，每种序列大约100 个拷贝。
 
展示肽的连接形式：X7-GGG-野生型 M13 pIII
 
图 1：对展示于五价 pIII 蛋白上的多肽库进行淘选。
 
Ph.D.-7 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 货 号 E8211S
 
特点：
·对照淘选实验不需要封闭步骤，避免了噬菌体与塑料板发生非特异性结合；
·使用 Protein G 磁珠进行对照淘选实验，减少了繁琐的板/孔洗涤步骤；
·即用型噬菌体肽库完整试剂盒，提供了理论上所有可能出现的七肽序列（207 = 1.28 x 109）；利用表型和基因型之间的固有关联，能在单个微量滴定孔或 EP 管中对数十亿个克隆进行筛选；
·不需要辅助噬菌体进行扩增；
·利用简单的分子生物学和无菌培养技术，在不到一周的时间内筛选到特异性结合的多肽；
·提供 -96 gIII 测序引物 (500 pmol)，支持 >50 次测序反应。
 
注意事项
·对于 >30 天的长期储存，建议在 -80°C 条件下储存大肠杆菌 K12 ER2738。
·Protein G 磁珠应储存在 4°C，以防止因冷冻而损坏。
·原始版本 (NEB #E8100) 和新版本 (v2) 试剂盒 (NEB #E8211) 所提供的 Ph.D.-7 噬菌体展示肽库 (NEB #E8102) 完全一样。
·M13 与大多数缓冲液兼容； 然而，洗脱缓冲液可能会受到扩增所需的大肠杆菌培养条件的限制。如果使用二代测序，可以省略用于富集噬菌体库的扩增步骤。参阅最新文献以获取操作说明。
·提供的 -96 gIII 测序引物 (500 pmol) 支持 >50 次测序反应。
 
参考文献
1. Sidhu, S.S. (2000). Curr. Opin. Biotechnol.. 11, 610-616.
2. Rodi, D.J. and Makowski, L. (1999). Curr. Opin. Biotechnol. . 10, 87-93.
3. Wilson, D.R. and Finlay, B.B. (1998). Can. J. Microbiol.. 44, 313-229.
4. Parmley, S.F. and Smith, G.P. (1998). Gene. 73, 305-313.
5. Scott, J.K. and Smith, G.P. (1990). Science. 249, 386-390.
6. Whaley, S.R. et al. (2000). Nature. 405, 665-668.
7. Noren, K.A. and Noren, C.J. (2001). Methods. 23, 169-178.
8. Rozinov, M.N. and Nolan, G.P (1998). Chem. Biol.. 5, 713-728.
9. Rodi, D.J. et al. (1999). J. Mol. Biol.. 285, 197-203.
 

 

Ph.D.-12 噬菌体展示肽库试剂盒 v2 货 号 E8210S NEB酶试剂 New England Biolabs

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#E8210S
10 panning experiments
7,989.00
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说明

 本产品可直接替代 NEB #E8110S，Ph.D.™-12 噬菌体展示肽库试剂盒

NEBuffer 1.1（10X） 货 号 B7201S NEB酶试剂 New England Biolabs

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#B7201S
5.0 ml
339.00
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停产通知

该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r1.1（NEB #B6001）

概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

 -20℃。

NEBuffer 成分

NEBuffer 1.1（黄）：
10 mM Bis Tris Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.0 @ 25℃）。
NEBuffer 2.1（蓝）：
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer 3.1（红）：
100 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
CutSmart 缓冲液（绿）：
50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer EcoRI：

50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。

注意：使用前，反应缓冲液（NEBuffer）应彻底融化并混匀。

NEBuffer 2.1（10X） 货 号 B7202S NEB酶试剂 New England Biolabs

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#B7202S
5.0 ml
339.00
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停产通知

该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r2.1（NEB #B6002）

概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

-20℃。

NEBuffer 3.1（10X） 货 号 B7203S NEB酶试剂 New England Biolabs

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NEBuffer 3.1（10X）                              收藏

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#B7203S
5.0 ml
339.00
无
无
无
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停产通知

 该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 NEBuffer™ r3.1（NEB #B6003）

概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

-20℃。

NEBuffer 成分

NEBuffer 1.1（黄）：
10 mM Bis Tris Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.0 @ 25℃）。
NEBuffer 2.1（蓝）：
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer 3.1（红）：
100 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
CutSmart 缓冲液（绿）：
50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。

NEBuffer EcoRI：

50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。

注意：使用前，反应缓冲液（NEBuffer）应彻底融化并混匀。

CutSmart 缓冲液（10X） 货 号 B7204S NEB酶试剂 New England Biolabs

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CutSmart 缓冲液（10X）                              收藏

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#B7204S
5.0 ml
339.00
无
无
无
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停产通知

  该产品于 2021 年 12 月 15 日停产，替代产品为 rCutSmart™ 缓冲液（NEB #B6004）

概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

 -20℃。

NEBuffer 成分

NEBuffer 1.1（黄）：
10 mM Bis Tris Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.0 @ 25℃）。
NEBuffer 2.1（蓝）：
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer 3.1（红）：
100 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
CutSmart 缓冲液（绿）：
50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
 
NEBuffer EcoRI：

50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。

注意：使用前，反应缓冲液（NEBuffer）应彻底融化并混匀。

NEBuffer EcoRI 货 号 B0101S NEB酶试剂 New England Biolabs

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NEBuffer EcoRI                              收藏

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#B0101S
6.0 ml
249.00
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概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

BSA [20 mM Tris-HCl, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 50% 甘油（pH 8.0 @ 25℃）]。
NEBuffer、BSA 和 SAM 均贮存于 -20℃。

NEBuffer 成分

NEBuffer 1.1（黄）：
10 mM Bis Tris Propane-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.0 @ 25℃）。
NEBuffer 2.1（蓝）：
50 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer 3.1（红）：
100 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
CutSmart 缓冲液（绿）：
50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml
BSA（pH 7.9 @ 25℃）。
NEBuffer EcoRI：
50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition
® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。

 NEBuffer EcoRI：

50 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.025% Trition® X-100 (pH 7.5 @ 25℃)。

注意：使用前，反应缓冲液（NEBuffer）应彻底融化并混匀。

S-adenosylmethionine 货 号 B9003S NEB酶试剂 New England Biolabs

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#B9003S
0.5 ml
549.00
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概述

NEB 的所有 DNA 甲基化酶以及某些限制性内切酶中单独提供有 S-腺苷甲硫氨酸（SAM），SAM 制备于 0.005 M 的 H2SO4 和 10％ 的 ETOH 的溶液中并经过滤。
储存温度：
-20℃

无核酸酶水 货 号 B1500L NEB酶试剂 New England Biolabs

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无核酸酶水                              收藏

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#B1500L
100 ml
869.00
有
有
有
无
无

#B1500S
25 ml
359.00
有
无
有
无
有

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概述

无核酸酶水是配制试剂和酶学反应使用的理想用水。生产过程中未使用DEPC等有毒溶剂，因此不会对酶学反应有任何抑制作用。

优势和特性

储存温度：

25℃

NEBuffer r1.1（10X） 货 号 B6001V NEB酶试剂 New England Biolabs

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#B6001V
2X1.25 ml
189.00
有
无
无
无
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产品描述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB 公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

 -20℃。

NEBuffer 成分

1X NEBuffer r1.1（黄）组分：

10 mM Bis-Tris-Propane-HCl
10 mM MgCl2
100 μg/ml 重组白蛋白
pH 7.0@25°C

NEBuffer r2.1（10X） 货 号 B6002S NEB酶试剂 New England Biolabs

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货 号
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#B6002S
4X1.25 ml
359.00
无
无
无
无
无

#B6002V
2X1.25 ml
189.00
有
无
无
无
有

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产品描述

 为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB 公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

-20℃。

NEBuffer 成分

1X NEBuffer r2.1（蓝）组分：

50 mM NaCl
10 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
100 μg/ml 重组白蛋白
pH 7.9@25°C

NEBuffer r3.1（10X） 货 号 B6003S NEB酶试剂 New England Biolabs

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上海库存
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#B6003S
4X1.25 ml
359.00
有
无
无
无
无

#B6003V
2X1.25 ml
189.00
有
无
无
无
有

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产品描述

 为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB 公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

贮存条件

-20℃。

NEBuffer 成分

1X NEBuffer r3.1（红）组分：
 
100 mM NaCl
50 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
100 µg/ml 重组白蛋白
pH 7.9@25°C

rCutSmart™缓冲液 货 号 B6004S NEB酶试剂 New England Biolabs

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rCutSmart™缓冲液                              收藏

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规 格
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#B6004S
4 x 1.25 ml
359.00
有
无
无
无
无

#B6004V
2X1.25 ml
189.00
有
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无
有
有

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产品特点

 含有重组白蛋白

·   超过 215 种的酶在单一缓冲液（rCutSmart 缓冲液）中具有 100% 活性，极大简化了双酶切反应体系的建立

·   rCutSmart 缓冲液成分中含有重组白蛋白

产品描述

 NEB 提供的缓冲液浓度均为 10 X，酶及其相应的缓冲液均采用同样颜色的标签标记，以确保酶发挥 100% 活性。通常随酶提供提供的缓冲液为四种标准缓冲液中的一种，缓冲液成分中含有重组白蛋白（NEB #B9200）。

超过 215 种的酶在单一缓冲液（rCutSmart 缓冲液）中具有 100% 活性，极大简化了双酶切反应体系的建立。由于 rCutSmart 缓冲液成分中已包含重组白蛋白，从而减少了加样管、加样步骤及可能带来的问题。此外，许多 DNA 修饰酶在 rCutSmart 缓冲液中也具有 100% 活性，因此避免了后期的纯化步骤。

NEBuffer 成分

1X rCutSmart 缓冲液（绿）组分：

50 mM KAc
20 mM Tris-Ac
10 mM Mg(Ac)2
100 μg/ml 重组白蛋白
pH 7.9@25°C

NEBuffer组合（EcoRI，DpnII） 货 号 B7006S NEB酶试剂 New England Biolabs

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NEBuffer组合（EcoRI，DpnII）                              收藏

货 号
规 格
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#B7006S
4 vials
359.00
有
无
无
无
无

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概述

为确保内切酶发挥 100% 的酶切活性，NEB公司随酶免费提供 10X 反应缓冲液（NEBuffer）。绝大多数内切酶配有四种标准反应缓冲液中的一种，但有些内切酶配有特殊的反应缓冲液。四种标准反应缓冲液具有不同颜色标记，以便实验者使用方便。

无核酸酶水适用于试剂制备和酶促反应。NEB 在生产无核酸酶水的过程中不添加任何有毒试剂，比如 DEPC，以避免酶促反应中的抑制作用
 

贮存温度

-20°C

蓝色凝胶上样染料 6X 货 号 B7021S NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳，可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS，可使条带清晰，避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料（NEB#B7025）。凝胶上样染料中的 EDTA，可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+，从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中，除了一些最小的片段，橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。

凝胶上样染料组成成分

1X 凝胶上样染料，蓝色：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0），0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。
1X 凝胶上样染料，橙色：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0），0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。
1X 凝胶上样染料，紫色：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），0.08% SDS ，0.02% 染料 1 和
0.0008% 染料 2。
1X 凝胶上样染料，紫色，无 SDS：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2。

注意：25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料，或 50 μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。

橙色凝胶上样染料 6X 货 号 B7022S NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳，可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS，可使条带清晰，避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料（NEB#B7025）。凝胶上样染料中的 EDTA，可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+，从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中，除了一些最小的片段，橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。

凝胶上样染料组成成分

1X 凝胶上样染料，蓝色：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0），0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。
1X 凝胶上样染料，橙色：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0），0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。
1X 凝胶上样染料，紫色：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），0.08% SDS ，0.02% 染料 1 和
0.0008% 染料 2。
1X 凝胶上样染料，紫色，无 SDS：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0 @ 25℃），0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2。

注意：25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料，或 50 μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。

紫色凝胶上样染料 6X 货 号 B7024S NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

在 NEB 所有非预染的 DNA Ladder 中都包含紫色凝胶上样染料（含或不含 SDS），与其它染料相比，条带更加锐利并且消除了紫外的阴影。该预混的上样缓冲液包含两种染料，染料一（粉红/红色）和染料二（蓝色）。红色染料可以在琼脂糖电泳和非变性丙烯酰胺电泳中做为指示染料。两种染料在琼脂糖凝胶电泳过程中分离，红色染料作为指示染料与溴酚蓝迁移率一致。更具体的说，该染料不会在紫外成像时留下阴影。混合液中同时含有 EDTA 用来螯合酶反应过程中的镁（最多到 10 mM），从而使反应终止。染料中同时含有聚蔗糖，相比甘油混合的染料可以得到更亮更紧实的条带。紫色的 6X 凝胶上样染料含有 SDS，条带更清晰锐利，避免由于有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。

紫色凝胶上样染料 6X 货 号 B7024S

紫色凝胶上样染料 6X,无 SDS 货 号 B7025S NEB酶试剂 New England Biolabs

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相关产品

橙色凝胶上样染料 6X
紫色凝胶上样染料 6X 

概述

预混上样染料溶液用于琼脂糖和非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳，可进行不同的示踪染色。溶液中含有 SDS，可使条带清晰，避免有些内切酶切割后结合在 DNA 上引起的条带拖尾。由于高浓度的 SDS 能干扰 SYBR 和 GelRed 核酸荧光染料显色。因此使用这两种核酸染料时,建议使用无 SDS 的紫色凝胶上样染料（NEB#B7025）。凝胶上样染料中的 EDTA，可螯合反应缓冲液中10 mM 的 Mg2+，从而使反应终止。溴酚蓝是电泳的标准示踪染料。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 300 bp 的片段相同。橙黄
G 不会显示在凝胶电泳照片中，除了一些最小的片段，橙黄 G 跑在凝胶的最前面。在标准的 1% TBE 琼脂糖凝胶中，它的迁移率大约与 50 bp 的片段相同。NEB 也提供与溴酚蓝迁移率相似的紫色染料。该染料在紫外灯下无阴影。

凝胶上样染料组成成分：

  蓝色凝胶上样染料 1X：

2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH8.0），0.017% SDS 和 0.015% 溴酚蓝。
橙色凝胶上样染料 1X：
2.5% Ficoll-400，11 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH8.0），0.017% SDS 和 0.15% 橙黄 G。
紫色凝胶上样染料 1X：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0@ 25℃)0.08% SDS, 0.02% 染料1和 0.0008% 染料2。
紫色凝胶上样染料 1X，无 SDS：
2.5% Ficoll-400，10 mM EDTA，3.3 mM Tris-HCl（pH 8.0@ 25℃），0.02% 染料 1 和 0.0008% 染料 2

注意：25 μl 反应体系中添加 5 μl 凝胶上样染料；50μl 反应体系中加 10 μl 凝胶上样染料。上样前混匀。室温保存。

NEBuffer™ 套装 (r1.1, r2.1, r3.1 and rCutSmart™) 货 号 B7030S NEB酶试剂 New England Biolabs

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NEBuffer™ 套装 (r1.1, r2.1, r3.1 and rCutSmart™)                              收藏

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#B7030S
4 x 1.25 ml
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产品特点

·NEB 随内切酶提供10 X 缓冲液，以确保酶发挥 100% 活性。通常所提供的缓冲液为四种标准缓冲液中的一种，缓冲液成分中含有重组白蛋白。

·NEBuffer™ 套装中每种缓冲液 1.25 ml 

产品描述

 NEB 提供的缓冲液浓度均为 10 X，酶及其相应的缓冲液均采用同样颜色的标签标记，以确保酶发挥 100% 活性。通常随酶提供提供的缓冲液为四种标准缓冲液中的一种。也有些酶对缓冲液有特殊要求，因此随酶提供相应的独特缓冲液（并非四种标准缓冲液中的一种），缓冲液成分中含有重组白蛋白（NEB #B9200）。

稀释液 A 货 号 B8001S NEB酶试剂 New England Biolabs

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#B8001S
5 ml
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概述

如果在使用过程中需要稀释内切酶，建议稀释后浓度不要低于 1,000 units/ml。

贮存条件

-20℃。

稀释液成分

稀释液 A：
50 mM KCl，10 mM Tris-HCl，0.1 mM EDTA，1 mM dithiothreitol，200 μg/ml BSA，50% 甘油（pH 7.4 @25℃) 

注意：以上稀释液不能用于稀释嗜热聚合酶。